Info Bioqui 3 Caracterizacion de Carbohidratos
Info Bioqui 3 Caracterizacion de Carbohidratos
Info Bioqui 3 Caracterizacion de Carbohidratos
Ayudante:
Nombre:
Cristina Guevara
Curso:
Quinto U Bioqumica
Prctica: N.3
Fecha de entrega: 7-05- 2013
3. MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de ensayo
Vasos de precipitacin
Gradilla
Varilla de vidrio
Sistema de calentamiento
Microscopio
Termmetro
Esptula
Medidor de pH
Pipeta graduada/automtica
Papel filtro
Monosacridos:
glucosa,
fructosa,
y
arabinosa (soluciones al 1%)
Disacridos: lactosa, maltosa y sacarosa
(soluciones al 1%)
Almidn (en polvo y en solucin al 1%)
cido clorhdrico
Hidrxido de sodio
Citrato de sodio
Carbonato de sodio
Sulfato de cobre
Acetato de cobre
cido sulfrico concentrado
cido actico glacial
Amonaco
Resorcinol
-naftol
Hidrxido de potasio al 25%
Yodo metlico
Yoduro de potasio
4. PROCEDIMIENTO:
REACCIONES DE
XIDO
REDUCCIN.
Reaccin de Fehling:
El in Cu2+2+ reacciono en
medio alcalino con los
glcidos reductores
pasando a xido
cuproso que precipit
dando un polvo de color
rojo ladrillo
Se tom 3 ml de la
muestra que se quieri
analizar. Se aadio 1 ml
del reactivo de Fehling
A y 1 ml de Fehling B.
REACCIONES DE
XIDO
REDUCCIN.
Reaccin de Benedict:
Se emple para
reconocer azcares
reductores.
Se bas en la reduccin
2+ (color azul)
del in Cu2+
a Cu++ (color rojo) en
medio bsico.
Se agreg 2 ml de la
solucin estudiada. Se
calent el tubo por 5 min
en un bao de agua a
ebullicin.
Se coloc en un tubo de
ensayo 5 ml del reactivo
de Benedict
REACCIONES DE
XIDO
REDUCCIN.
Reaccin de Barfoed:
Se coloc en un
tubo de ensayo 2
ml de la solucin
de mono,
disacridos y la
solucin problema
y 3 ml del reactivo
de Barfoed.
Si se dej hervir
por mucho tiempo
se hidroliz los
disacridos y di
resultados
positivos falsos.
Los monosacridos
dieron un
precipitado color
rojo ms
rpidamente que
los disacridos
reductores.
El precipitado de
xido cuproso fue
menos denso que con
el reactivo de
Benedict por lo que
se debe dejar los
tubos en reposo hasta
que el precipitado
sedimente.
Reaccin de
Molisch:
No se agit
Se observ
cualquier cambio
de color en la
interfase de los dos
lquidos
Reaccin de Seliwanoff:
Se bas en la formacin de
compuestos coloreados .
Con el furfural, el
compuesto formado fue
de color verde mientras
que con el HMF del
resorcinol produj un
compuesto de color rojo.
Se coloc en un tubo de
ensayo 2 ml del reactivo de
Seliwanoff y 1 ml de la
solucin que se dese analizar.
Se calent por 1 min en un
bao de agua hirviendo.
Prueba de Wohlk
La reaccion de
Wohlk identific
especficamente a la
lactosa.
Se coloc en tubos
de ensayo 1 ml de
glucosa al 1% y de
lactosa al 1%.
La reaccin produjo
una coloraacion
rojo.
A cada tubo se
agred lentamente
1 ml de hidroxido
de amonio y 4 gotas
de KOH al 25%.
Se coloco en un bai
mara por 10 min.
La aparicin de un
color o precipitado
rojo fue indicativo de
la presencia de
cetosas.
La lactosa se mezcl
con NH3 concentrado e
hidroxido de potasio al
25% a tempoeratura
moderadamente alta.
Sol A
Sol. B
Reaccin
Benedict
+
Reaccin
Sol.
Fehling
++
Reaccin
Barfoed
Reaccin
Molisch
Reaccin
Seliwanoff
Reaccin
Wohlk
++
++
+++
+
++
Fructuosa
+
++
Galactosa
++
+
Arabinosa
++
+
Glucosa
+
+
Sacarosa
Maltosa
++
+
Lactosa
++
+
Fuente: Laboratorio de Bioqumica I
++
+++
+
+
+
+
+
+
+
++
+
+
+
Elaborado por: Cristina Guevara
Reaccin Benedict
Sol. B Sol. A
Reaccin Fehling
Sol. A Fructuosa Arabinosa Glucosa Sacarosa
Maltosa Lactosa
Sol. B Galactosa
+
+
+
+
++
++
Reaccin Barfoed
Sacarosa Fructuosa Sol. A
Sol. B
Reaccin Molish
Maltosa Galactosa Glucosa Sol. B
Sol. A
Arabinosa
Sacarosa
Lactosa Fructuosa
Reaccin Seliwanoff
Glucosa
Sol. B
Sol A
Arabinosa
Sacarosa Maltosa
Fructuosa
Galactosa
Lactosa
Fuente:
Laboratorio
de
Bioqumica
Reaccin Wohlk
Arabinosa Fructosa Sacarosa Galactosa Lactosa
Maltosa
Glucosa Sol. B
Sol A
Azul de metilo
5. CLCULOS Y RESULTADOS:
6. DISCUSIN:
En la prctica se realiz diferentes reacciones de caracterizacin de carbohidratos. Cada
una de estas reacciones tuvo cierta accin al reaccionar con un determinado
carbohidrato. As se observ coloraciones diferentes para cada mtodo. E identificando
si la sustancia fue positiva o negativa.
Se obtuvo las siguientes conclusiones:
En la reaccin de Fehling se observ el glcido reductor. As cuando reacciono el
catin cprico (Cu++) del reactivo de Fehling con la muestra ( Fructuosa) paso a xido
cuproso y se observ un precipitado de color rojo ladrillo.
En la Reaccin de Benedict se identific azcares que posean grupo reductores libres
(C=O). Los monosacridos como la glucosa y la galactosa dieron positivo a esta
reaccin debido a que poseen un grupo reductor libre. Al igual que los disacridos
maltosa y lactosa, pero la sacarosa no se coloreo de anaranjado como los anteriores
debido a que no posee radicales libres.
La reaccin de Brfoed ayudo a identificar monosacridos reductores de disacridos
reductores, as se bas en la velocidad de reaccin; en los monosacridos la formacin
el xido cuproso proveniente de la solucin acida de Cu 2+ fue ms rpida como en
galactosa, glucosa y la fructosa, mientras que en disacridos como la lactosa y la
maltosa no se not el cambio de coloracin debido a que fue ms dbil la velocidad.
En la Reaccin de Molisch se identific la presencia de carbohidratos la cual se bas
en una accin hidrolizante y deshidratante del cido sulfrico sobre los hidratos de
carbono. En esta reaccin el cido sulfrico cataliz la hidrlisis de los enlaces
glucosdicos de la muestra. Estos furfurales se condensaron con el alfa naftol del
reactivo de Molisch dando un producto coloreado. Todas las muestras tuvieron
coloracin. Aunque a simple vista muchos no se lograron visualizar, al exponerlos a la
luz se observ una muy baja coloracin azul.
En la Reaccin de Seliwanoff Se identific la presencia de cetonas. Aquellos
carbohidratos que posean un grupo cetona como la sacarosa (un disacrido formado
por glucosa y fructosa) la fructuosa, las soluciones A Y B dieron positiva la reaccin.
En la reaccin Wohlk se identific aquellas muestras que posean lactosa. La mayora
de sustancias se coloreo, excepto La sacarosa y la Solu A.
En la hidrolisis de la sacarosa se identific que la sacarosa es un disacrido que no
posee carbonos anomricos libres por lo que careci de poder reductor y la reaccin con
el licor de Fehling fue negativa, as se demostr en el experimento 1. Sin embargo, en
presencia de HCl y calor, la sacarosa se hidroliz, es decir, incorporo una molcula de
agua y se descompuso en los monosacridos que la forman, glucosa y fructosa, que s
son reductores.
Para verificar la hidrlisis se realiz una prueba con el licor de Fehling, el resultado no
fue positivo porque no se obtuvo un precipitado rojo sino una coloracin azul por lo que
la hidrlisis no se ha realizado correctamente es decir ocurrido una hidrlisis parcial de
la sacarosa.
7. CONCLUSIONES:
8. CUESTIONARIO:
(BEYER,1987)
peroxidasa
quinonimin a (roja)
Reaccin 3.2
9. BIBLIOGRAFA:
Libros
GUARNIZO, Anderson ( 1974). Experimentos de Qumica. Primera edicin.
Editorial Elizcom, Colombia. Pp 136
Beyer, Hans.(1987). Manual de qumica orgnica. 19 a edicin. Editorial
REVERTE S.A. Barcelona. Pp 456-457
FAO. ( 1997). Los Carbohidratos en la nutricin humana. 1 edicin.
Oragizaciones de la Naciones Unidas para la agricultura. Roma Italia. Pp 72.
Alfonso R. (DRT) Gennaro(2003). Remington Farmacia .20th Edicin.
Medica Panamericana S.A Buenos Aires. Pp 848
Internet
WIKI.(2003).Disponible
en:
http://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar
(25/10/2013)