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Selenito Caldo

Este documento presenta las instrucciones para preparar dos medios de cultivo: (1) Caldo selenito, un medio selectivo para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de muestras clínicas como heces, y (2) Agua peptonada, un medio no selectivo para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos. Incluye la fórmula, instrucciones, incubación, resultados esperados y almacenamiento para ambos medios.

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Carlos Enrique Ortiz Coloma
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Selenito Caldo

Este documento presenta las instrucciones para preparar dos medios de cultivo: (1) Caldo selenito, un medio selectivo para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de muestras clínicas como heces, y (2) Agua peptonada, un medio no selectivo para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos. Incluye la fórmula, instrucciones, incubación, resultados esperados y almacenamiento para ambos medios.

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Selenito Caldo

Medio de enriquecimiento para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de materiales clnicos, especialmente heces.

Fundamento
Este caldo selectivo favorece el crecimiento de Salmonella spp.
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el
hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe la flora Gram positiva y la mayora de la flora entrica excepto
Salmonella spp. durante las primeras 8-12 horas de incubacin.

Frmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Peptona

5.0

Lactosa

4.0

Fosfato de sodio

10.0

Selenito de sodio

4.0

Suspender 23 g del polvo en un litro de agua


destilada. Mezclar bien y calentar ligeramente hasta
su disolucin completa. Evite el calentamiento
excesivo.
No esterilizar en autoclave.
Distribuir en tubos estriles un volumen no menor a
5 ml. Se recomienda guardar en heladera si no se
usa de inmediato.

pH final: 7.0 0.2

Siembra

-Materia fecal: a un tubo con 10-15 ml de caldo selenito, agregar 1-2 ml de una suspensin de materia fecal.
-Tejido infectado: macerar 1-2 g de tejido en 10-15 ml de caldo selenito, usando una varilla estril.
-Orina: a un tubo con unos 5 ml de caldo selenito doble concentracin, agregar igual volumen de orina.

Incubacin
A 35-37 C, durante 16-24 horas, en aerobiosis.
Luego, subcultivar en medios selectivos: Salmonella Shigella Agar (B02-138-05/06), Hektoen Entrico Agar (B02-11005/06), Verde Brillante Agar (B02-124-05/06), Mac Conkey Agar (B02-114-05/06).

Resultados

Microorganismos

Crecimiento

Salmonella enteritidis ATCC 13076

Bueno

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Bueno

Escherichia coli ATCC 25922

Regular-Escaso

Proteus mirabilis ATCC 43071

Regular-Escaso

Limitaciones
-Se aconseja usar el medio el mismo da de la preparacin.
-No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, debido a que el efecto inhibitorio del selenito disminuye
luego de las primeras 6-12 horas de incubacin, y adems porque no es favorable para la mayora de las cepas de
Salmonella, que pueden no recuperarse.
-La nica ventaja de incubar durante 48 horas es el incremento de la recuperacin de Salmonella pullorum.

Caractersticas del medio

Medio preparado: mbar claro, traslcido.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin

x 100g :Cdigo: B02-120-05

x 500g :Cdigo: B02-120-06

Agua Peptonada.
Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir de alimentos y otros materiales de inters sanitario.

Fundamento
Medio de enriquecimiento no selectivo, recomendado para ser utilizado en lugar de solucin fisiolgica para recuperar clulas
de enterobacterias daadas por procesos fisicoqumicos, a los que ha sido sometido el alimento. Si es utilizado como medio
base para la fermentacin de hidratos de carbono, se debe adicionar el indicador de Andrade y el hidrato de carbono en
cuestin.

Frmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Peptona de carne

10.0

Cloruro de sodio

5.0

Suspender 15 g de polvo en 1 litro de agua


destilada. Mezclar bien y distribuir. Esterilizar en
autoclave a 121C durante 15 minutos.

pH final: 7.2 0.2

Siembra
Por inoculacin directa del material en estudio.
Como diluyente: realizar las diluciones 1:10 y 1:100, dependiendo del uso que se le quiera dar.

Incubacin
Aerbica, a 35-37 C durante 18-24 horas.

Resultados

Microorganismos

Crecimiento

Escherichia coli ATCC 25922

Bueno

Staphylococcus aureus ATCC 25923

Bueno

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Bueno

Control Negativo

Resultado

Medio sin inocular

Sin cambio

Caractersticas del medio:


Medio preparado: mbar claro.

Almacenamiento:

Medio deshidratado: a 10-35 C.


Medio preparado: a 2-8 C.

Presentacin

x 100g :Cdigo: B02-152-05

x 500g :Cdigo: B02-152-06

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