Trabajo Monográfico
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I
ABSTRACT
II
PRESENTACIN
En el captulo III, se describe el tipo de trabajo monogrfico, los alcances del trabajo
y la tcnica de la recoleccin de informacin.
III
CAPITULO I: INTRODUCCIN
1.1 Descripcin del tema
Las propiedades fsicas y qumicas de los suelos influyen en gran manera sobre
la aireacin, la disponibilidad de nutrientes y la retencin de agua y, por lo tanto,
en la actividad biolgica. Las propiedades ms importantes de las que engloban
1
estos grupos son el tamao de partcula, la porosidad, la humedad, estado de
aireacin, composicin qumica, fraccin de arcilla, capacidad de intercambio de
cationes y fraccin orgnica. El tamao de partcula afecta a la qumica de la
superficie de los suelos y al tamao de los poros. La cantidad de poros depende
de la textura, estructura y contenido de materia orgnica del suelo.
3
tratamientos fsicos y qumicos. La biorremediacin es un tratamiento
tecnolgico de descontaminacin que usa sistemas biolgicos para catalizar la
destruccin o transformacin de componentes peligrosos en el ambiente. El
empleo de plantas para la eliminacin de contaminantes del suelo, se denomina
comnmente como fitorremediacin mientras que el trmino biorremediacin se
ha limitado al empleo de microorganismos o sus enzimas.
Existe un gran nmero de trabajos de investigacin en laboratorio y en campo,
orientados a la degradacin de plaguicidas empleando bacterias. Este amplio uso
se debe a que son fcilmente cultivables y manipulables genticamente, crecen
rpidamente, y son capaces de usar los plaguicidas como fuente de nutrientes,
aunque requieren de una previa adaptacin al medio y a los contaminantes que
van a degradar (5).
A partir de la dcada de los 80, se ha incrementado el inters acerca de la
posibilidad de usar en biorremediacin hongos perteneciente a la clase
Basidiomicetes y son conocidos por degradar la lignina de la madera. Uno de los
primeros trabajos sobre el tema indica que estos hongos, pueden degradar una
amplia variedad de contaminantes ambientales (6). Por las justificaciones antes
mencionados, en el siguiente tem se propone los objetivos del presente
documento.
1.2 Objetivos
Describir los trabajos los trabajos de biorremediacin de suelos contaminados
con plaguicidas, referencindolos en la literatura cientfica.
Describir el avance de la investigacin cientfica en el Per, concerniente a la
contaminacin de suelos y su biorremediacin usando hongos.
4
CAPITULO II: MARCO TERICO
2.1 Antecedentes del tema
Durante los ltimos veinte aos muchos investigadores orientaron la atencin en
los hongos con el afn de encontrar alternativas de solucin en la
biorremediacin de los suelos contaminados por plaguicidas; tal es as que:
Quintero, J (2009). En su trabajo de investigacin Degradacin de Plaguicidas
Mediante Hongos de la Pudricin Blanca de la Madera encontr que los hongos
de la pudricin blanca, han demostrado el gran potencial que poseen para la
biodegradacin de un amplio espectro de xenobiticos como los insecticidas
qumicos, as mismo, estos hongos exhiben tres principales sistemas enzimticos
empleados para la degradacin de contaminantes ambientales. Siendo el
mecanismo ligninoltico el ms recomendado en biorremediacin, pues han
demostrado que este sistema de degradacin de la lignina, interviene en la
oxidacin de un nmero importante de xenobiticos como hidrocarburos
aromticos policclicos, tintes sintticos y naturales y algunos plaguicidas como
el pentaclorofenol; sin embargo, su capacidad oxidativa se limita a compuestos
cuyos potenciales de oxidacin (PI) sean inferiores a 8,0 eV. Por el contrario,
muchos plaguicidas presentan valores significativamente superiores de PI,
indicando que el mecanismo ligninoltico no es viable para degradar estos
compuestos.
Por su parte Lopera M. (2005) en su trabajo de investigacin Evaluacin de la
degradacin del plaguicida clorpirifos en muestras de suelo utilizando el hongo
Phanerochaete chrysosporium lleg a las siguientes conclusiones:
El hongo puede crecer en agar Sabureau y agua, en concentraciones de clorpi-
rifos que varan entre 0,1 y 480 mg/L. En los resultados del anlisis univariado,
tambien existe diferencia significativa entre sus datos obtenidos en los controles
y las reacciones, lo cual evidencia el efecto que causa la adicin del hongo, sobre
la disminucin en la concentracin de clorpirifos presente en las muestras; as
mismo en sus datos del anlisis multivariado prob estadsticamente, que existe
diferencia significativa entre las medias de los porcentajes de extraccin de los
5
tratamientos en sus ensayos, lo cual muestra que el cambio en la concentracin
inicial de clorpirifos en cada ensayo afecta la diferencia en el porcentaje de
extraccin entre los controles y las reacciones, encontrando mayor degradacin
del plaguicida.
As mismo, durante 21 das de investigacin logr altos porcentajes de
degradacin para los tres ensayos, teniendo en promedio, valores de 96,31%
para el ensayo uno, de 82,38% para el dos y 69,17% para el tres; finalmente,
existi una tendencia ascendente en las curvas de degradacin de las muestras
con hongo, acercndose claramente al 100% de degradacin, lo cual muestra
que las condiciones utilizadas en la investigacin, fueron favorables para la
degradacin del plaguicida por parte del hongo.
Por su parte Betancur B. (2013) en su trabajo de investigacin Biorremediacin
de suelo contaminado con el pesticida 1,1,1-tricloro-2,2bis(p-lorofenil) etano
(DDT) mediante protocolos de bioestimulacin y adicin de surfactante lleg a
las siguientes conclusiones:
Los principales cambios en la caracterizacin fisicoqumica del suelo antes y
despus de la aplicacin de los protocolos de remediacin fueron observados en
las propiedades de pH, textura y nutrientes del suelo, adems del contenido de
agua del mismo dada la aplicacin semanal de soluciones acuosas para controlar
la humedad durante las ocho semanas de tratamiento. Adems, el tratamiento
por bioestmulo redujo la concentracin de DDT en un 94.3% mientras que en el
control por atenuacin natural solo se obtuvo una remocin de 4.28%. Esto
permite concluir que el tratamiento por bioestmulo es efectivo para mejorar la
remocin de DDT. tambin determin que el efecto de la adicin de surfactante
fue inhibitorio, al comparar con la remocin obtenida el tratamiento por
bioestmulo.
La identificacin bioqumica y molecular durante la biorremediacin permiti
determinar mediante anlisis de la secuencia 16S ADNr que en el tratamiento por
bioestmulo predominaron las bacterias identificadas como Bacillus thuringiensis,
Flavobacterium sp., Phenylobacterium sp. y Bosea sp. durante las ocho semanas
6
de tratamiento aplicadas. Previamente ha demostrado la habilidad de algunas de
estas bacterias de degradar pesticidas, compuestos aromticos, herbicidas y
compuestos organoclorados.
Menciona adems que los anlisis bioqumicos deben ser verificados por los
mtodos de identificacin moleculares, por tanto, un estudio ms profunda.
As mismo, elmtodo CG-ECD permiti determinar con precisin la
concentracin de cantidades traza de compuestos halogenados como DDT y
metabolitos. Se comprob que la degradacin de DDT sigui la ruta de
decloracin reductiva a DDE y DDD. Factores abiticos como volatilizacin
mostraron poca significancia en cuanto a la eliminacin de DDT en el suelo.
El DDT fue biotransformado en un alto porcentaje por la aplicacin de
tratamientos de bioestmulo y bioestmulo con adicin de surfactante, siendo ms
efectivo el tratamiento por bioestmulo. De igual manera, los metabolitos
presentes inicialmente en el suelo fueron degradados. Se encontr que el
tratamiento por adicin de nutrientes de nitrgeno y fsforo fue ms efectivo en
la reduccin de DDT y metabolitos bajo condiciones aerobias. Tambin aplic
pruebas de toxicidad como mecanismo de evaluacin del proceso de
biorremediacin evaluando la prdida de bioluminiscencia producida por el
microorganismo Vibrio fischeri. Observ una disminucin de la toxicidad del
suelo, explicado por un aumento en la relacin concentracin/efecto CE50 de
suspensiones acuosas del suelo. La aplicacin de las pruebas de toxicidad
permiti evaluar que los productos de la biotransformacin de DDT obtenidos en
este estudio son menos txicos que los presentes en el suelo al inicio del
tratamiento, adems el efecto de los tratamientos en la reduccin de la toxicidad
del suelo. La evaluacin de la toxicidad del suelo luego de la remediacin es muy
importante para determinar la eliminacin de residuos txicos del suelo, muchos
de ellos productos de degradacin formados durante la biorremediacin.
Concerniente a estudio a nivel nacional, Barranzuela, A. (2016) En su estudio
denominado Crecimiento de Trichoderma sp. utilizando como sustrato
7
metamidofos en condiciones de laboratorio en la Universidad Nacional de
Trujillo, llego a las siguientes conclusiones:
El Trichoderma sp. En medio slido tiene un crecimiento lineal; en la
concentracin de 1200 ppm fue de 48%, mientras que en la concentracin 1800
ppm y 2400 ppm presentaron un crecimiento de 45 % y 42 % respectivamente;
esto muestra que el crecimiento de Trichoderma sp. fue inversamente
proporcional proporcional a la concentracin presente del insecticida-acaricida.
Con respecto al peso seco evaluado en las tres concentraciones encontr que en
las concentraciones de 1200 ppm presenta un crecimiento de 11% en las
concentraciones de 1800ppm y 2400 ppm observ un crecimiento en porcentaje
de 8% y 4% respectivamente con una significancia de 0.001.
Por su parte, Gutirrez M. (2015) en su trabajo de investigacin denominado
Crecimiento de Trichoderma harzianum utilizando como sustrato a la
alfacipermetrina en condiciones de laboratorio Trujillo. Universidad Nacional de
Trujillo, menciona que el crecimiento lineal de T. harzianum en la concentracin
de 75 ppm se present en un 30.54% respecto al control, mientras que en la
concentracin 100 ppm y 150 ppm presentaron un crecimiento de 41.62% y
52.40% respectivamente; esto muestra que el crecimiento de T. harzianum fue
directamente proporcional a la concentracin presente del plaguicida.
Concerniente, al peso seco evaluado en las tres concentraciones, observ que en
las concentraciones de 75 y 100 ppm existi un crecimiento en porcentaje de
37.26% y 44.34% respectivamente; y el peso obtenido en la concentracin de
150 ppm logr alcanzar un 52% de crecimiento respecto al control; y en la
prueba analtica no observ presencia de la alfacipermetrina en ninguna de las
concentraciones evaluadas.
Altamirano L. (2016). En su trabajo de investigacin Crecimiento de
Trichoderma harzianum utilizando como sustrato el Oxamyl en condiciones de
laboratorio (15) lleg a las siguientes conclusiones:
Utilizando una suspensin de 107 esporas las cuales fueron inoculadas en
frascos de vidrio conteniendo el caldo mnimo de sales ms el nematicida con las
8
concentraciones anteriormente mencionadas, incubadas a T ambiente (25 C
aproximadamente) y conectados a un sistema aireado por 6 das, para la
produccin de biomasa micelial. El micelio formado se filtr, se sec a 80C C
durante 14 h y luego se pes, se determin el porcentaje de crecimiento lineal
as como el peso seco, obtenindose un mayor porcentaje de crecimiento lineal
de 73% en la concentracin de 120 ppm de Oxamyl y un 17% de peso seco en
la concentracin de 160 ppm.
2.2.2 Plaguicidas
Los plaguicidas son sustancias destinadas a prevenir, destruir o controlar plagas,
lo cual incluye los vectores de enfermedad humana o animal, las especies no
deseadas de plantas o animales que ocasionan un dao duradero u otras que
interfieran con la produccin, procesamiento, almacenamiento, transporte y
comercializacin de alimentos. De acuerdo con su estructura qumica, los
plaguicidas se clasifican en diversas familias: organoclorados, organofosforados,
carbamatos, tiocarbamatos y piretroides, entre otros (Ramrez, J., et al. 2001).
Los plaguicidas organofosforados (opp) son el grupo ms extendido, pues
9
representan ms del 36 % del mercado mundial y son utilizados ampliamente
desde hace ms de sesenta aos (Briceo et al. 2012; Cyco et al. 2013).
Los compuestos organofosforados son steres, amidas o tioles derivados de los
cidos fosfrico, fosfnico y fosfortoico. Se clasifican en funcin de algunas de
sus caractersticas principales como la toxicidad aguda, la vida media, la
estructura qumica y su uso (Ramrez, J., et al. 2001). A temperatura ambiente,
los organofosforados son liposolubles y tienen una elevada tensin de vapor, lo
cual permite su penetracin rpida por las vas digestiva, cutnea y respiratoria,
caracterstica que genera fcilmente intoxicaciones en humanos (Ferrer, A.
2003). Por otra parte, los organofosforados inhiben la actividad normal de la
acetilcolina esterasa mediante la unin covalente con esta enzima, de manera
que modifican su estructura y funcin. Como la regeneracin de la
acetilcolinesterasa fosforilada es muy lenta (dura horas o das), se pueden
presentar convulsiones, parlisis y finalmente la muerte de insectos y mamferos
(Fernndez et al. 2010).
Los plaguicidas en el suelo y el agua pueden ser degradados por va bitica y
abitica, sin embargo, la biorremediacin por microorganismos es el principal
mecanismo de degradacin de plaguicidas
y de desintoxicacin en suelos (Ortiz, M. 2010). Los principales organofosforados
degradados por microorganismos reportados en la literatura cientfica son
clorpirifs, malatin, fenamifos, diazinn, diclorvos, paratin, metil paratin,
etoprofos, dimetoato, fosfato de tributilo, fenitrotin, profenofos, forato, meta-
midofos, triazofos, cadusafos y tetraclorvinfos Imran y Kim 2003; Zhang et al.
2006; Anwar et al. 2009.
2.2.3 Biorremediacin
La biorremediacin es un proceso que consisten principalmente en el uso de
diferentes organismos (plantas, levaduras, hongos, bacterias, etc.) del medio
para neutralizar sustancias toxicas, bien transformndolas en sustancias de
carcter menos txico o bien convirtindolas en inocuas para el medio ambiente
10
y la salud humana. Una de las medidas biocorrectoras ms empleada es la
utilizacin de microorganismos para la descontaminacin de suelos. Estos
sistemas de descontaminacin se basan en la absorcin de las sustancias
orgnicas por parte de dichos microorganismos, los cuales las utilizan como la
fuente de carbono necesaria para su crecimiento y de energa para sus funciones
metablicas.
11
Aunque las bacterias son las ms empleadas en el proceso de biorremediacin,
tambin se han empleado
otros microorganismos como hongos, algas, cianobacterias y actinomicetes para
la degradacin de compuestos txicos en el suelo.
IN SITU:
EX SITU:
12
2.3.4 Bioaumentacin
Introduccin en el rea contaminada de organismos seleccionados, adaptados o
genticamente modificados para degradar contaminantes especficos (Gmez,
2009).
Ventaja: Proceso inmediato de degradacin cuando se agrega la poblacin
microbiana al rea afectada (Garca, 2011).
Desventaja: - Altas concentraciones de contaminantes = toxicidad para
organismos poco efectiva para contaminantes inorgnicos (Gmez, 2009).
2.3.5 Fitorremediacin
Proceso que usa plantas para eliminar, transferir, estabilizar y destruir
contaminantes tanto orgnicos como inorgnicos.
13
CAPITULO III: ASPECTOS METODOLGICOS
3.1 Tipo del trabajo monogrfico
La metodologa que se utiliz durante el desarrollo del presente trabajo fue el
mtodo inductivo, al respecto, Portocarrero E. (2011), menciona que el mtodo
inductivo, parte de datos particulares, para llegar a conclusiones generales. El
tipo de trabajo monogrfico es el de compilacin, donde se elige un tema a partir
del cual se analiza y redacta una presentacin crtica de la bibliografa que hay
al respecto. Se presentarn los diferentes puntos de vista de manera exhaustiva,
para luego poder realizar la opinin personal.
14
CAPITULO IV: CONCLUSIONES Y/O RESULTADOS
4.1.1 La biorremediacin de suelos contaminados por plaguicidas puede clasificarse
de acuerdo al organismo que efectu la degradacin del compuesto
xenobitico, que puede ser: fitorremediacin, biorremediacin animas o
biorremediacin microbiana.
4.1.2 El inters por la biorremediacin de suelos contaminados por plaguicidas en
el Per nace en el ao 2001, cuando el Per junto con 127 pases firman el
convenio de Estocolmo sobre contaminantes orgnicos persistentes.
4.1.3 Actualmente, existen tecnologas de biorremediacin de suelos contaminado
con plaguicidas, usando material fngico, sin embargo existen estudios donde
mencionan que mediante tratamientos de bioestimulo han demostrado la
habilidad de algunas bacterias del genero Bacilllus, Flavobacterium,
Phenylobacterium, que son capaces de degradar pesticidas, compuestos
aromticos, herbicidas, y compuestos organoclorados, desestimando la tesis
de que solo los hongos pueden realizar la biorremediacin de plaguicidas.
4.2 Resultados
15
BIBLIOGRAFA
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18
ANEXOS
19
GLOSARIO
Actinomicetos: Grupo de bacterias de aspecto bacilar o filamentoso que segn el
medio de desarrollo forman bacilos aislados o largos filamentos con aspecto de
micelios fngicos, por lo que han sido considerados mucho tiempo como hongos.
20
Termfilo: Se aplica a organismos vivos que pueden soportar condiciones
extremas de temperatura relativamente altas, por encima de los 45C, o
relativamente bajas,
21