DTM

INSTRUCCIONES DE USO
MEDIOS EN PLACA LISTOS

PARA USAR
PA-25442.03 Rev.: Junio de 2003
BD Dermatophyte Agar
USO PREVISTO
BD Dermatophyte Agar (agar BD para dermatofitos) es un medio selectivo para el aislamiento
de hongos patgenos a partir de muestras cutneas tales como la piel, el cabello y las uas.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO

Mtodo microbiolgico.
En 1969, Taplin et al desarrollaron este medio para el aislamiento de dermatofitos a partir de
lesiones cutneas, tales como tia, y del cabello, las uas y la piel1. Este medio se recomienda
para el aislamiento de dermatofitos y es til especialmente para el aislamiento de los gneros
Microsporum, Trichophyton y Epidermophyton2-4. Adems, Candida albicans crece en este
medio.
En el BD Dermatophyte Agar, las peptonas suministran nitrgeno y son el origen de productos
alcalinos, producidos por los dermatofitos. Cuando las peptonas se metabolizan en productos
alcalinos, se observar un cambio del indicador rojo fenol de amarillo a rojo3. Se aade glucosa
como nutriente y para permitir la acidificacin por parte de los hongos capaces de utilizar
glucosa de manera primaria. La mayora de los hongos diferentes de los dermatofitos, incluidos
levaduras y mohos (si pueden crecer en el medio) utilizarn glucosa. As se forma cido y no se
observa cambio de color en el rojo fenol, que representa el indicador de pH. La cicloheximida
inhibe los mohos y las levaduras no patgenas. La gentamicina y la tetraciclina son inhibidores
antibacterianos. Algunos organismos, incluidos los saprofitos, las levaduras y las bacterias,
pueden crecer en el medio y cambiar el color de rojo a amarillo, pero se reconocen fcilmnte por
su morfologa de colonias caracterstica.
REACTIVOS
Frmula* por litro de agua purificada
Digerido papaico de harina de soja 10,0 g
Glucosa 10,0
Rojo fenol 0,2
Cicloheximida 0,5
Gentamicina 0,1
Hidrocloruro de tetraciclina 0,1
Agar 20,0
pH 5,5 0,2
*Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
PRECAUCIONES
. Solamente para uso profesional.
No utilizar las placas si muestran evidencia de contaminacin microbiana, decoloracin,
deshidratacin, rajaduras o cualquier otro signo de deterioro.
Consultar los procedimientos de manipulacin asptica, riesgos bilogicos y desecho del
producto usado en el documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO.
ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL

Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura de 2 8 C, en su
envase original hasta momentos antes de su utilizacin. Evitar la congelacin y el
sobrecalentamiento. Las placas pueden inocularse hasta la fecha de caducidad (vase la
etiqueta del paquete) e incubarse durante los perodos de incubacin recomendados.
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Las placas de pilas abiertas de 10 unidades pueden utilizarse durante una semana cuando se
almacenan en un rea limpia a una temperatura de 2 8 C.
CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO

Inocular muestras representativas con las cepas siguientes (para obtener los detalles, vase el
documento INSTRUCCIONES GENERALES DE USO). Incubar las placas en atmsfera
aerobia a 25 30 C durante los perodos indicados en la tabla a continuacin.
Cepas Resultados del crecimiento

***Trichophyton mentagrophytes Colonias blancas esponjosas, zonas rojas en el medio
ATCC 9533 alrededor de las colonias
*Trichophyton equinum Colonias blancas esponjosas, zonas rojas en el medio
ATCC 22443 alrededor de las colonias
*** Candida albicans Colonias de pequeas a medianas, color de blanco a
ATCC 10231 crema; zonas de amarillo medio o rojo en el medio
alrededor de las colonias
**Aspergillus niger ATCC 16404 Inhibicin de parcial a completa
***Saccharomyces cerevisiae Inhibicin completa.
NCPF 1211
***Escherichia coli ATCC 25922 Inhibicin completa.
***Pseudomonas aeruginosa, Inhibicin completa.
ATCC 10145
***Staphylococcus aureus Inhibicin completa.
ATCC 25923
Sin inocular De amarillo, transparente a ligeramente opaco
Incubacin: * 5 a 7 das; ** 4 a 5 das; *** 42 48 h
PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados:
BD Dermatophyte Agar (placas Stacker de 90 mm). Controladas microbiolgicamente.
Material no suministrado:
Medios de cultivo auxiliar, reactivos y el equipo de laboratorio que se requiera.
Tipos de muestras
Se trata de un medio de diferenciacin selectivo para el aislamiento de dermatofitos a partir de
muestras clnicas tales como uas, cabellos y pedacitos de piel (vase tambin
CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). Las
torundas de zonas infectadas no son las muestras adecuadas para recoger dermatofitos. Para
obtener una descripcin completa de la recogida y los tipos de muestras, consultar las
referencias3-5.
PROCEDIMIENTO DE ANALISIS
Las muestras tales como uas, cabellos, etc. deben colocarse en el centro de la superficie del
medio. Si es posible, las partculas ms grandes deben presionarse levemente sobre la
superficie mediante pinzas estriles para proporcionar contacto con el medio.
Siempre incluir una placa de BD Sabouraud Glucose Agar, BD Sabouraud Agar with
Chloramphenicol, BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol o BD
Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin para proporcionar una indicacin de todos
los patgenos fngicos presentes en la muestra.
Cerrar las placas con cinta adhesiva o colocar en un frasco para reducir la evaporacin del
medio e incubar durante 3 6 das a 25 30 C. Si no se detecta crecimiento, continuar la
incubacin durante una semana ms o un plazo ms prolongado si es necesario. Se debe
tener en cuenta que algunos hongos pueden requerir una incubacin de ms de 3 semanas.
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Resultados
Examinar las placas despus de 3 6 das para determinar si presentan un cambio en el indicador
de amarillo a rojo o rosa y si se observan colonias caractersticas de dermatofitos. La especie
Candida al principio tambin puede producir un cambio de color a rojo. La interpretacin de las
pruebas es dudosa en este medio despus de 2 semanas de incubacin. Para lograr un diagnstico
completo y, en especial si no se obtiene crecimiento en BD Dermatophyte Test Medium Agar,
deben considerarse los resultados en los medios con base de agar Sabouraud mencionados
anteriormente.
Dado el gran nmero de dermatofitos, no se dan detalles acerca de su aspecto en este
documento. Consultar las referencias2-5.
CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

BD Dermatophyte Agar es un medio adecuado para el aislamiento de dermatofitos (por
ejemplo, las especies Trichophyton, Epidermophyton y Microsporum) y debe utilizarse
exclusivamente para la recuperacin de hongos de infecciones superficiales (piel, cabello y
uas)2-5. Adems, Candida albicans crece en este medio dado que es resistente a la
cicloheximida.
BD Dermatophyte Agar no es un medio de aislamiento universal para los hongos. En cambio,
debe utilizarse uno de los medios con base de agar Sabouraud que se mencionan a
continuacin.
Determinados hongos patgenos, incluidas ciertas cepas de Microsporum, son inhibidas por la
cicloheximida De vez en cuando, los mohos y levaduras inhibidas en este medio pueden
producir infecciones cutneas. Por tanto, todas las muestras tambin deben inocularse en uno
de los medios siguientes: BD Sabouraud Glucose Agar, BD Sabouraud Agar with
Chloramphenicol, BD Sabouraud Agar with Gentamicin and Chloramphenicol o BD
Sabouraud Agar with Penicillin and Streptomycin.
Se deben realizar pruebas de confirmacin adecuadas para obtener una identificacin final de
los patgenos aislados en estos medios2-5.
BD Dermatophyte Agar o los medios basados en agar Sabouraud mencionados anteriormente

no son adecuados para el aislamiento de bacterias que tambin pueden producir infecciones
cutneas. Por tanto, si no puede excluirse una infeccin bacteriana, se deben inocular con la
muestra medios no selectivos apropiados, tales como BD Columbia Agar with 5% Sheep
Blood.
Despus de 2 semanas de incubacin, ciertos hongos saprofitos pueden producir reacciones
positivas falsas en BD Dermatophyte Agar2.
REFERENCIAS
1. Taplin, D., et al. 1969. Isolation and recognition of dermatophytes on a new medium (DTM).
Arch. Dermatol. 99: 203.
2. MacFaddin, J. D. 1985. Media for isolation-cultivation-identification- maintenance of medical
bacteria, vol. 1, p. 275-284. Williams & Wilkins, Baltimore, MD.
3. Sutton, D.A. 2003. Specimen collection, transport, and processing: mycology. In: Murray, P.
R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical
microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
4. Summerbell, R.C. 2003. Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton, and agents of
superficial mycoses. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H.
Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
5. Larone, D.H. 1995: Medically important fungi - a guide to identification. 3rd edition. ASM
Press, Washington.
ENVASE/DISPONIBILIDAD
N de cat. 254429 Medios en placa listos para usar, 20 placas
PA-25442.03 -3-
INFORMACIN ADICIONAL
Para obtener ms informacin dirjase a su representante local de BD.
BD Diagnostic Systems
Tullastrasse 8 12
D-69126 Heidelberg/Germany
Phone: +49-62 21-30 50 Fax: +49-62 21-30 52 16
[email protected]
BD Diagnostic Systems Europe

Becton Dickinson France SA
11 rue Aristide Bergs
38800 Le Pont de Claix/France
Tel: +33-476 68 3636 Fax: +33-476 68 3292 http://www.bd.com
BD, BD logo and Stacker are trademarks of Becton, Dickinson and Company.
ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection
2003 Becton, Dickinson and Company
PA-25442.03 -4-

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