3.8. Problemas resueltos.

Problema Nro. 31. Se determin el contenido de ClNa de una muestra de orina, utilizando un electrodo
selectivo de iones, obtenindose los siguientes valores:

102 mM, 97 mM, 99 mM, 98 mM, 101 mM, 106 mM

=1005 mM;
s = 327 mM;
n 1 = s; Nivel de confianza = 95 %; t = 257
3.27
=1005 257 = (1005 34) mM
6

Calcular los lmites de confianza al 95 y 99 %, para la concentracin de iones de sodio:

3.27
= 1005 403 = (1005 5.4) mM
6

Los lmites de confianza se pueden utilizar como una prueba para detectar errores sistemticos como se
muestra en el siguiente problema Nro. 32:

Problema Nro. 32. Se comprueba la escala de absorbancia de un espectrofotmetro a una concreta,

usando un patrn que da una absorbancia de 0,47. Los valores determinados fueron 10, de
los que se obtuvieron unos valores de: = 0461 y s = 003. Calcular el intervalo de
confianza del 95 % de la absorbancia media y decir se existe un error sistemtico.
0.003
=0461 226 = 0.461 0.002 Rango de trabajo: 0.463 y 0.459. Por lo que el valor 0.47 esta
10

fuera del rango, por lo que podemos afirmar que existe un error sistemtico en el problema
planteado.
3.8.1. Rechazo de Resultados. Con frecuencia al efectuar una serie de replicas de anlisis, uno de los
resultados obtenidos ser muy distinto de los otros. A este valor se le conoce como valor
anmalo. Se han sugerido diversas pruebas estadsticas para determinar si una observacin
debe rechazarse. Una de las ms correctas desde el punto de vista estadstico es la prueba
de la Qumica de Pixon. Para su clculo, se ordenan los datos en orden decreciente de su
valor, y en la relacin que se calcula como el cociente entre la diferencia entre el valor
sospechoso y el ms prximo a l dividido por el Ecubito, es decir, la diferencia entre el
mayor y menor valor: Pgina 31

| |
Q= | |

La relacin Q experimental calculada se compara con los valores tabulados de Q para un nivel de confianza
determinado. Si la relacin calculada resulta mayor o igual que el valor tabulado, se puede
rechazar la observacin sospechosa.

Tabla Nro. 29. Valores de Qcrtico AL 90 % 95% y 99% de confianza

Nro de 90% confianza 95 confianza 99% confianza

o
b
 s
er
v
a
ci
o
n
e
s
3 0.41 0.970 0.994
4 0.765 0.829 0.926
5 0.642 0.710 0.821
6 0.560 0.625 0.741
7 0.507 0.568 0.680
8 0.468 0.526 0.634
9 0.437 0.493 0.598
10 0.412 0.466 0.568

Problema Nro. 33. Determinar la concentracin de nitrato (NO 2-) en una muestra de agua, teniendo en
cuenta los siguientes resultados:
Anlaisis 1 2 3 4
[2 ] g/L 0.403 0.410 0.401 0.320

Determinar si el valor de 038 es rechazable segn el nivel de confianza del 95 %:

1.) 0401; 0403; 0401; 0320

|0.3800.401|
2.) Q= |0.4100.320|
= 070

3.) 0.70 < 0.831 valor no rechazable

La prueba Q es bastante estricta, no es aplicable en el caso de series pequeas de datos.

En el problema anterior se aaden: 0.400, 0.413, 0.411; Se debera mantener el valor de 0.380?
|0.3800.400|
Q= |0.4130.380|
= 0.606

Para n = 7 y 95% de confianza, obtenemos una Q teorica de 0.568 < s tendramos que
rechazar el valor de 0.380.

Es importante tener en cuenta, que para un nivel de confianza del 95 %, existe un 50 % de riesgo de
rechazar incorrectamente un valor sospechoso. Cuando las medidas se repitan unas
cuantas veces, lo que es normal en el anlisis qumico, el rechazo de un valor origina una
gran variacin sobre la media y la desviacin estndar. Adems, debe evitarse el hecho de
tomar tres medidas y rechazar la que ms difiere de las otras dos. En general, se puede
 demostrar que se obtiene una estimacin ms confiable de la media utilizando el valor que
esta en medio de los otros tres, en lugar de utilizar la media de los dos que no fueron
rechazados. Pueden presentarse tambin valores sospechosos que pueden ser los dos
prximos, o uno a cada extremo del intervalo de valores.

Esto origina una reduccin en el valor calculado de Q, ya que en el primer caso se produce una reduccin
del numerador, y en segundo un aumento del denominador. En este caso es necesario
emplear una prueba para un par de valores anmalos.

| |
Otro criterio de rechazo (Test Tn): Tn = Rechazo s Tncalculada > Tn teorico. (3.6.)

Problema Nro. 34. El anlisis de una muestra de calcita dio unos porcentajes de CaO de:
[CaO] 55.95 56.00 56.04 56.23

El ltimo valor parece anmalo, se puede rechazar?

Solucin:
| |
Q= | |
56.2356.04
Qexperimental = = 0.68; Q Terica = 0.710 para un nivel de confianza del 95%
56.2355.95

Como Qexperimental < Q terica no se rechaza

Ejercicio complementario. Aplicar Test Tn a estos datos:
=5606
s= 0107 para n= 6
5623 5606
|56.2356.06|
Tn= = 159
0.107

0107 Para un 95 % de confianza, la Tn terica = 167

Como Tn terico es > Tn calculado no se rechaza
3.8.2. Presentacin de los resultados. Como ya hemos sealado, los resultados experimentales carecen
de importancia si no van acompaados de una estimacin de los errores que han tenido
lugar durante la medida. Es casual citar la media como la estimacin de la cantidad medida,
y la desviacin estndar como la estimacin de la precisin.

Menos frecuente es dar el resultado en la forma de los lmites de confianza al 95 % de la media.

= [ ] (Pgina 31)

3.6. Propagacin de errores. Una determinacin analtica requiere de ordinario la realizacin de varias
operaciones (pesar, pipetear, etc...) cada una de las cuales puede suponer la introduccin
en el anlisis de un error sistemtico, y cada una est sujeta a errores aleatorios. Se puede
calcular el error que afectar al resultado final, a partir de los errores que afectan a cada uno
de los datos experimentales de partida.
La naturaleza de los clculos para tener en cuenta los errores aleatorios y sistemticos es diferente, ya que
no se propagan de igual manera. Esto se debe a que algunos errores aleatorios se
compensan entre s, mientras que cada error sistemtico ocurre en un sentido definido y
conocido.

Problema Nro. 35. Si el resultado final de un experimento Y viene dado por la suma A y B. Si A y B tienen
un error sistemtico de +1, es evidente que el error sistemtico ser +2. Sin embargo, si A y
B tienen un error aleatorio de 1, el error aleatorio de Y no es 2. Esto se debe a que en
ocasiones el error aleatorio de A ser positivo, y el de B negativo o viceversa, siendo de
esperar que ambos errores se neutralicen en cierta extensin.

3.8.3. Propagacin de Errores Aleatorios. Si se conoce la precisin de cada observacin se pueden usar
reglas matemticas sencillas para estimar la precisin del resultado final.
Regla: A.1. Combinaciones lineales. En este caso el valor final de Y se calcula a partir de una
combinacin lineal de medidas a, b, c,

Y = x + k aa + k bb + k c c +... (Mdulo I)
La varianza tiene la propiedad de que la varianza de una suma o diferencia de cantidades independientes
es igual a la suma de sus varianzas, es decir:
Var Y = Sy2 = (kaSa)2 + (kbSb)2 + (kcSc) 2 + .... (Mdulo I)

Sy = [(ka Sa)2 + (kb Sb)2 + (kc Sc)2 +....]05 (Mdulo I)

Ejemplo: En una valoracin la lectura final de la bureta es 3,51 ml y la inicial es 15,67 ml. Ambas con una
desviacin estndar de 002 ml. Cul es el volumen de agente utilizado y su desviacin
estndar?
Vol. (utilizado) = 1567 351 = 1216 ml

s = [(002)2 + (002)2]05 = 0028 ml

Como puede observarse la s del resultado es mayor que la de las lecturas individuales de la bureta. Incluso
el volumen utilizado se calcula a partir de una diferencia, pero es menor que la suma de las
desviaciones estndar.

Regla: A.2. Expresiones multiplicatvas. Si Y se calcula a partir de una expresin del tipo:

Y = (Mdulo I)

Donde a, b, c, d son cantidades medidas independientemente y k es una constante, existiendo una relacin
entre los cuadrados de las desviaciones estndar relativas:

2 2 2 2 0.5
= [( ) + ( ) + ( ) + ( ) ] (Mdulo I)

El rendimiento cuntico de la fluorescencia , se calcula a partir de la expresin:

If= Intensidad de luz fluorescente (s = 2 %)

Io = Intensidad de la luz incidente (S = 05 %)

= (63)

k = Cte. del instrumento

Io= Intensidad de la luz incidente.
= Abructividad o Absortividad molar (S = 1 %)
c = Concentracin (S = 02 %)
l = Paso ptico (S = 02)

Donde los parmetros se definen como una estimacin de las desviaciones estndar relativas.

d.e.r = (22 + 022 + 022 + 052 + 12)05 = 2.3 %

Puede observarse que la d.e.r. del resultado final no es mucho mayor que la mayor de todas las d.e.r.,
usadas para calcularla. Esto es fundamentalmente una consecuencia de elevar al cuadrado
las d.e.r., y explica una cuestin general, cualquier esfuerzo por mejorar la precisin de un
experimento, debe dirigirse a mejorar la precisin de los valores menos precisos. Cuando
una cantidad se eleva a una potencia (b3), el error no se calcula como para una
multiplicacin (bbb), debido a que las cantidades implicadas no son independientes.

Entonces, si Y = bA , = | ( )| (64)

Regla: A.3. Otras funciones. Si Y es una funcin general de X entonces [Y =(x)] la S de X e Y, estn
relacionadas de la siguiente forma:

= | ( )| (65)

Problema Nro. 36. La absorvancia de una muestra est dada por A = log (T), siendo T la transmitancia. Si
el valor medio de T = 0501 con S = 0001, calcular A y su desviacin estndar.
A= log 0501= 0.300

0.434 0.434
= = = = 0.866
0.501
0.434
= | ( )| = |(0.001 )| = 0.0008
0.501

Es importante observar que para este mtodo experimental se pueden encontrar las condiciones para que
sea mnima la d.e.r.

100 100
d.e.r. de A = = (66)

La ecuacin de Nerst aplicada a un anlisis potenciomtrico es la siguiente:

E = Eo + [ ] [] (67)

E = Potencial del electrodo

E = potencial estndar del ion que se determina
T = T absoluta
n = n de e- que participan en la semiclula
c = [ ] del ion
R = Constante de los gases
F = Faraday

Problema Nro. 37. Obtener una expresin para la d.e.r. (desviacin estndar relativa) de la [ ] suponiendo
que T = 298 K y que no tiene error. Calcular la d.e.r. s n = 1 y la s (E) = 0001 voltio.

c = e [40 n (E E)]
= 40n.e [40 n (E E)]

Solucin. Derivando tenemos:

)]
= 40 [40( = 40n.c.
40(%)
La d.e.r. De [c] ser = 100. =100. = 100.40n (%) = 100.40.0.001= 4%

3.8.4. Propagacin de Errores Sistemticos. Se distinguen grupos en funcin de cmo se calcula el

resultado final. El error sistemtico y la desviacin estndar de un resultado se calcula
mediante ciertas reglas sencillas:

Regla: B.1. Combinaciones. Si Y se calcula a partir de cantidades mediadas usando la expresin y = k + k

a

a + k b +..., y los errores sistemticos de a, b, c,... se calculan como incrementos (a,

b

b,...) podemos decir que:

y = k a + k b + k c +... (68)
a b c

El error sistemtico total puede ser a veces cero (s se usa una balanza con un error de 001 gr para
pesadas utilizadas en la preparacin de una disolucin estndar). Puesto que el peso del
soluto se calcula por diferencia entre dos pesadas, se eliminan los errores sistemticos.

Regla: B.2. Expresiones multiplicativas. Si Y se calcula de la forma: y = k.


El error sistemtico relativo ser: = + + +

Si se trata de potencias: Y = bn

El error sistemtico relativo ser: = (Mdulo I. Parte experimental)

Regla: B.2. Otras funciones: Para y = f(x) el error sistemtico ser.

= .

Problema Nro. 38. Determine la incertidumbre absoluta y la la incertidumbre relativa porcentual para cada
clculo. Exprese los resultados con una cantidad razonable de cifras significativas.

a) 9,23 ( 0,03) + 4,21 ( 0,02) - 3,26 ( 0,06) = ?

b) 91,3 ( 0,1) x 40,3 ( 0,2) / 21,1 ( 0,2) =?

c) [4,97 ( 0,05) - 1,86 ( 0,01)] / 21,1 ( 0,2) =?

d) 2,0164 ( 0,0008) + 1,233 ( 0,002) + 4,61 ( 0,01) =?

3 2 1
e) 2,0164 ( 0,0008) x 10 + 1,233 ( 0,002) x 10 + 4,61 ( 0,01) x 10 =?

Respuesta: 10,18 ( 0,07) , 10,18 ( 0,7 %) ; 174 ( 2) , 174 ( 1 %) ; 0,147 ( 0,003) , 0,147 ( 2 %) ; 7,86 ( 0,01) , 7,86 ( 0,1 %) ; 2185,8 (
0,8) , 2185,8 ( 0,04 %).
Solucin.
a. 9.23 ( 0.03) + 4.21 (0.02) 3.26 ( 0.06) =?
i.a. = (0.03)2 + (0.02)2 + (0.06)2 = 0.07 : i.a. = 10.18 ( 0.07)
0.07 100
i.r.% = : i.r. = 10.18 ( 0.7% )
10.8
40.3 ( 0.02)
b. 91.3 ( 0.1) x =?
21,1 (0.2)
0.1100
i.r.%1 = = 0.109529
91.3

0.2 100
i.r.%2 = = 0.4962779
40.3
0.2 100
i.r.%3 = = 0.9478673
21.1
0,05100
Luego i.r.%1 = = 1,607717
3,11

1.0755188 174.37867
i.a. = = 1.8754754 Luego la respuesta es:
100

i.a. = 174 ( 2)
i.r.% = 174 ( 1%)

[4,97(0,05) 1,86(0,01)]
c. =?
21,1(0,2

i.a.numerador = (0.05)2 + (0.01)2 = 0,0509901

3,11(0,05 0,05100
Entonces: i.r.%1 = = 1,6077170
21,1(0,2 3,11
0,02100
i.r.%2 = = 0,9478673
21,11

Promedio: i.r.%resultado = (i. r. %1)2 + ( i. r. %2 )2 = 1,866335

1.866335 0,1473933
i.a. = = 0,002750854
100

Finalmente: 0,147(0,003)
0,147(2%)
3 2 1
e. 2,0164 ( 0,0008) x 10 + 1,233 ( 0,002) x 10 + 4,61 ( 0,01) x 10 =?

2016,4 ( 0,8) + 123,3 ( 0,2) + 46,1 ( 0,1) = 2185,8

i.a. = (0.8)2 + (0.2)2 + (0.1)2 = 0.8306623

0,8306623100
i.r.% = = 0,0380026%
2185,8

Finalmente: 2185,8(0,8)
2185,8(0,04%)
3.9. Calibraciones de los mtodos instrumentales. Segn la ISO (International Stndar Office), la
calibracin se define como el conjunto de operaciones que permiten establecer en
determinadas condiciones experimentales, la relacin existente entre los valores indicados
por el aparato, con los valores obtenidos en la medida de un valor conocido. El
procedimiento operatorio en anlisis instrumental para la calibracin es.
i. Grficas de calibracin:
a. Curva o grfica analtica
 b. Mtodo de adicin estandar o adicin de patrn.
c. Mtodo del estandar interno.
ii. Lmites de deteccin y de cuantificacin.
iii. Relacin seal-ruido

a. Se preparan una serie de disoluciones patrn de forma que cubran un intervalo de concentraciones [ ]
adecuado y que tengan una composicin en matriz parecida a la de la muestra. Tambin se
prepara un blanco, este tiene igual composicin que los dems estndares pero sin el
analito. Su seal debera ser cero pero a veces por efecto del ruido de fondo no es as.
Se representan las respuestas en una grfica frente a las concentraciones de los estndares que las han
proporcionado. Generalmente hay una relacin lineal entre la seal analtica (y) y la
concentracin [x] y por ello los datos se ajustan a una recta por el mtodo de mnimos
cuadrados segn y=ax+b, siendo y la seal instrumental, a la pendiente, b la ordenada en el
origen y x las concentraciones de los estndares.
Una vez obtenida la grfica, se interpola la seal de la muestra y se obtiene la concentracin de analito en
la muestra.

b. El procedimiento anterior generalmente presenta varias preguntas estadsticas:

1. Es lineal la grfica de calibracin?, y si es curva qu grfica tiene?
2. Teniendo en cuenta que cada uno de los puntos de la grfica est sujeto a errores, cul es la mejor
recta que pasa por esos puntos?
3. Suponiendo que la calibracin es lineal, cules son los errores estimados y los limites de confianza para
la pendiente y la ordenada en el origen?
4. Cundo la grfica se usa para el anlisis de una muestra problema, cules son los errores y los limites
de confianza para una [ ] determinada?
5. Cul es l limite de deteccin del mtodo, es decir, la menor [ ] de analito que se puede detectar con un
nivel de confianza predeterminado?

3.9.1. Antes de abordar estas cuestiones debemos considerar aspectos sobre el trazado de las
grficas de calibracin.

a. Es esencial que los patrones de calibracin cubran el intervalo completo de [ ] requerido en los
anlisis en los que se encontraron las muestras problema.
b. La [ ] de las muestras problema se calcula por interpolacin, a excepcin del mtodo de la adicin
estndar, que se hace por extrapolacin.
c. Es importante incluir una muestra en blanco en la curva de calibracin. Esta muestra no contiene
ningn analito, pero si contiene la misma composicin que las otras muestras estndar de
referencia, y est sujeta a la misma secuencia del proceso analtico. Su respuesta en la
medida podra ser cero, pero por impurezas de reactivos u otras causas puede no ser as.
d.) La curva de calibracin se representa siempre con la respuesta del instrumento en el eje de
ordenadas y la [ ] de los patrones en el eje de abscisas. Tres de las tcnicas de
calibracin mas comnmente usadas son la curva o grfica analtica, el mtodo de las
adiciones estndar y el mtodo de estndar interno.
3.9.2. Curva o grfica analtica. En esta tcnica se prepara una serie de soluciones estndar que
contienen [ ] conocidas del analito teniendo en cuenta los puntos antes sealados. Dichas
soluciones deben cubrir el intervalo de [ ] de inters, as como tener una composicin
matricial tan parecida como se pueda a la de las soluciones de las muestras problema.
Tambin se analiza una solucin en blanco de fondo.
Las respuestas netas de cada solucin estndar menos la de fondo se representan frente a las [ ] de las
soluciones estndar a fin de obtener la grfica de calibracin. Generalmente hay una
relacin lineal entre la seal analtica Y, y la [ ] X. Por ello, los datos se ajustan a una
recta por el mtodo de mnimos cuadrados, es decir, minimizando la suma de los
cuadrados de los residuos Y.

Una vez establecida la grfica de calibracin se puede obtener la [ ] de analito en cualquier muestra
problema por interpolacin del valor en dicha recta.

3.9.3. Coeficiente de Correlacin momento-producto. Aqu se analiza el primer problema planteado en la

pregunta anterior a*.
Supongamos que la representacin de una lnea recta toma la expresin y = b x + a, los puntos individuales
sobre la recta los denotaremos como (x , y ), (x , y ), etc., siendo l primer punto el del
1 1 2 2

blanco (x , y ).
1 1

La media de los valores de x la denotaremos y la de y ser , as que el punto ( , ) se conoce como

centro de gravedad de todos los puntos.
Para estimar si los puntos experimentales se ajustan a una recta, calculamos el coeficiente de correlacin
que viene dado por r y tiene la siguiente expresin:

{( )( )}
r= -1< < +1 ((Mdulo I)
{( ) ( )2 }

En qumica analtica, normalmente r es > 099, siendo relativamente poco comunes los valores de r < 09.
Es importante no despreciar cifras decimales durante los clculos, como se muestra, aunque dos puntos de
desven de la mejor recta, el valor de r es muy prximo a 1, sin embargo, se obtendr un
valor de r que en algunos cosos ser prximo a 1, an cuando la representacin no sea
lineal, por tanto siempre es necesario representar la curva de calibracin.

Por otro lado, un r = 0 no significa que x e y no estn relacionadas, sino que no estn linealmente
relacionadas, los valores de r obtenidos en el anlisis instrumental son generalmente muy
altos, de manera que un valor calculado junto con la propia grfica de calibracin suele ser
suficiente para asegurar al analista que ha obtenido una relacin lineal til.
En ocasiones se obtienen valores de r ms bajos, siendo necesario utilizar una prueba estadstica para
establecer si r es realmente significativo. El mtodo ms simple es calcular un valor de t
usando la ecuacin:

(2)0.5
t= /r/. (1 2 )0.5 (69)

Este valor est tabulado y se compara usando una prueba t de dos colas y n 2 grados de libertad.

Si t (calculado) es mayor que t (terico), se puede asegurar que existe una correlacin significativa.
Tambin se pueden calcular los limites de confianza de la pendiente y la ordenada en el
origen, y comparar que estos parmetros si estn incluidos dentro de estos limites.
Problema Nro. 39. Se ha examinado una serie de soluciones estndar de fluorescena en un fluormetro, y
condujo a las siguientes intensidades de fluorescencia.
Intensidad de fluorescencia 2.73 6.5 11.7 16.38 22.49 27.3 32.11
Concentracin [c] pg/mL 0 2 4 6 8 10 12

Determine el coeficiente de correlacin r.

Solucin.
( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
0 2.73 -6 -14.3 36 204.49 85.8
2 6.5 -4 -10.53 16 110.8809 42.12
4 11.7 -2 -5.33 4 28.4089 10.66
6 16.38 0 -0.65 0 0.4225 0
8 22.49 2 5.46 4 29.8116 10.92
10 27.3 4 10.27 16 105.4729 41.08
12 32.11 6 15.08 36 227.4064 90.48
42 119.21 0 0 112 706.8932 281.06
6 17.03

42 119.21 281.2 281.06

= =7 = = 17.03 = (112+706.8932)0.5
= = 0.998879
7 7 281.3752626

3.9.4. Clculo de la Recta de Regresin de y sobre x (y/x). Supone obtener la mejor recta a travs de los
puntos de la grfica de calibracin. Hablamos de regresin entre estas dos variables, ya que
aceptamos que las desviaciones o errores se producen en una de ellas, en este caso la Y, y
que en la otra variable posee un valor fijo y no sometido a error. En el caso en que ambas
variables estn sometidas a error, hablaramos de correlacin entre ellas.

Aceptando que las desviaciones solo se producen en las ies, la recta buscada ser aquella que minimice las
desviaciones o residuos (diferencia entre el valor real y el calculado) de la variable Y, entre
los puntos experimentales y la lnea calculada.
Como los residuos de Y algunas veces sern negativos y otros positivos, se intenta minimizar la suma de
los cuadrados de los residuos. Esto explica el uso del trmino de mnimos cuadrados para
 este procedimiento. La recta buscada pasa por el centro de gravedad, y su pendiente y
ordenada en el origen sern:
[( )( )]
= ( )2
((Mdulo I) a = ((Mdulo I)

La recta calculada se conoce como recta de regresin de y sobre x. y = bx + a

Calcule la pendiente y ordenada en el origen de la recta de regresin para los datos del problema Nro. 08.
Solucin.
( )( ) = 281.06 = 6 = 17.03 ( )2 = 112 Usando (3.21 y 3.22.)

281.06
b= = 2.5095 a = 17.03 2.5095*6 = 1.973
112

La ecuacin de la recta ser: y = 2.5095x +1.973

3.9.5. Errores en la pendiente y ordenada en el origen de la recta de regresin. La recta de regresin

calculada se utiliza para estimar la concentracin de las muestras problema por
interpolacin, y quiz tambin para estimar el limite de deteccin del mtodo. Por ello son
importantes los errores aleatorios en el clculo de la pendiente y la ordenada en el origen.
La desviacin estndar de la pendiente y ordenada en el origen, tiene las siguientes
expresiones:

. .
/ )
(
= . = / [ )
] / = { } (Mdulo I)
) }
{( (

Los valores de sb y sa se pueden utilizar de la manera usual para estimar lmites de confianza para la
pendiente y la ordenada en el origen. Asi los lmites de confianza para la pendiente estn
dados por: b tsb donde el valor de t se obtiene para un nivel de confianza deseado y (n-2)
grados de libertad. De manera similar, los lmites de confianza para la ordenada en el origen
estn dados por:
a tsa
Problema Nro. 40. Calcule la desviacin estndar y los lmites de confianza para la pendiente y la ordenada
en el origen de la recta de regresin calculada. Solucin:

( )2 ( ) ( )2
0 0 2.73 1.973 0.757 0.573049
2 4 6.5 6.992 -0.492 0.242064
4 16 11.7 12.011 -0.311 0.096721
6 36 16.38 17.03 -0.65 0.4225
8 64 22.49 22.049 0.441 0.194481
10 100 27.3 27.068 0.232 0.053824
12 144 32.11 32.087 0.023 0.000529
364 119.21 1.583168
 1.583168
A partir de esta tabla y la ecuacin (Mdulo I) se obtiene: / = = 0.3166336
5

De la solucin del problema Nro 08 sabemos que ( )2 = 112, y la ecuacin puede utilizarse para
0.3166336
mostrar que: = = 0.029919
112

El valor de t para (n-1) = 5 y el nivel de confianza del 95% para b es:

b= 2.5095 2.57 0.029919 = 2.5095 0.07689
La ecuacin (3.24.) requiere conocer 2 = 364 para calcular la desviacin estndar para la ordenada en
el origen de la recta de regresin. Por lo que:

364
= 0.3166336 = 0.14701
7 112

De manera que los lmites de confianza son: a = 1.973 2.57*0.14701 = 1.973 0.378.

Ecuacin de la recta de confianza: y = (2,5095 0,07689) x + (1,9760,378)

3.9.6. Calculo de la concentracin. Una vez determinada la pendiente y la ordenada en el origen de la

recta de regresin, es fcil calcular un valor de x correspondiente a cualquier valor de y. Pero surge un
problema ms complejo cuando necesitamos estimar el error en una concentracin calculada utilizando la
recta de regresin.
El clculo de un valor de x para un valor de y dado, conlleva al uso de la pendiente (b) y la ordenada
en el origen (a) y como hemos visto ambos valores estn sujetos a error, como resultado la
determinacin del error en el valor de x es extremadamente compleja, si deseamos mejorar (reducir
los lmites de confianza) podemos proceder de dos maneras:
i. Realizando m medidas para el valor de yo , y utilizando el valor medio de esas m medidas en el calculo de
yo.
0.5
/ 1 1 ( )2
= [ + + ] (Mdulo I) yo = valor experimental de y a partir del cual se determina el
2 ( )2

valor de la concentracin [x o ].
= Desviacin estndar de xo
m = Nmero de lecturas para obtener el valor de yo
n = Nmero de puntos medidos para el calibrado
Si m = 1
0.5
/ 1 ( )2
= [1 + + ] (Mdulo I)
2 ( )2

Los lmites de confianza pueden calcularse como: x o t con (n-1) grados de libertad. El rpido
crecimiento de la quimiometria (la aplicacin de mtodos matemticos a la solucin de problemas qumicos
de todos tipos) se debe a la facilidad con que pueden manejarse grandes cantidades de datos, y realizar
clculos complejos con calculadoras y computadoras.

Problema Nro. 41. Usando los datos del problema Nro. 08 determine los valores de xo y y los lmites de
confianza de xo para soluciones con intensidades de fluorescencia de: 3.77, 17.55 y 29.9 unidades.
Solucin:
Los valores de xo se calculan fcilmente utilizando la ecuacin de regresin formulada en la seccin 3.7.4. y
= 2.5095x +1.973
yo 3.77 17.55 29.9
xo pg/mL 0.7161 6.2072 11.1285

Para obtener los valores de correspondientes a los valores de xo utilizamos la ecuacin (Mdulo I)
/ 1 ( )2 0.5
= [1 + + ] Recordando de las secciones precedentes con: n= 7 b= 2.5095
( )2
2

/ = 0.3166336 = 17.03 ( )2 = 112

0.5
/ 1 ( )2 0.3166336 1 (3.7717.03)2
= [1 + + 2 ]
2 = 1 + + = 0.148871
( ) 2.5095 7 2.50952 112

/ 1 ( )2 0.5 0.3166336 1 (17.5517.03)2

= [1 + + ] = 1 + + = 0.134908
( )2
2 2.5095 7 2.50952 112

/ 1 ( )2 0.5 0.3166336 1 (29.917.03)2

= [1 + + ] = 1 + + = 0.148096
( )2
2 2.5095 7 2.50952 112

Los lmites de confianza calculamos al 95% segn: xo 95% (2.57), para soluciones con intensidades
de fluorescencia de: 3.77, 17.55 y 29.9 unidades son.

Valores calculados 0.148871 0.134908 0.148096

xo 95% (2.57) 0.7161 0.3826 6.2072 0.3467 11.1285 0.3998

3.9.7. Mtodo de adicin de estndar. Se utiliza cuando es imposible suprimir interferencias fsicas o
qumicas en la matriz de la muestra. Supongamos que un analista desea determinar cido Acetilsaliclico en
una aspirina comercial. Si utilizamos este mtodo, podra realizar una calibracin con disoluciones acuosas
de acetilsaliclico, y utilizar la grfica de calibracin resultante para la determinacin de la [ ] del analito en la
muestra problema.
Sin embargo, utilizar soluciones puras para establecer la grfica de calibracin, solo es vlido cuando no
existen efectos matriz, es decir, no se produce aumento o disminucin en la seal correspondiente del
analito debido a la presencia de otros componentes en la muestra.

Una primera solucin a este problema podra ser realizar la calibracin aadiendo cantidades conocidas de
analito a una disolucin de composicin semejante a la muestra problema, pero exenta de analito. Sin
embargo, esta disolucin en la mayora de los casos no se puede conseguir.

Otra solucin consiste en realizar todas las medidas sobre la muestra problema, esto se consigue usando
el mtodo de la adicin estndar. Este mtodo consiste en tomar volmenes iguales de problema, aadir
a cada uno por separado cantidades distintas de analito, excepto a una de las muestras, y finalmente diluir
todas las muestras al mismo volumen final. Seguidamente se determinan las seales instrumentales para
cada disolucin y se representan los resultados. La escala de concentracin (x) se define con las [ ] de
analito agregadas a las soluciones muestra. Por tanto, la [ ] desconocida est dada por el punto en el
cual la lnea extrapolada corta al eje x, es decir, el valor de x para y = 0. Este valor es igual a la razn
de la ordenada en el origen y la pendiente de la recta de regresin establecida por mnimos cuadrados.

a y b estn sujetos a error, as el valor calculado para la [ ], tambin lo estar. Pero en este caso el
resultado no se obtiene a partir de medidas de una sola muestra, por lo que, la desviacin estndar del valor
extrapolado se calcula de la siguiente forma:

/ 1 ()2
= + 2 ( )2 (Mdulo I)

Puede observarse que al aumentar n mejora la precisin de la cantidad estimada, siendo necesarios al
menos 6 puntos en un experimento de este tipo. Adems se mejora la precisin maximizando esta
cantidad, por lo que, el intervalo de [ ] a cubrir por las disoluciones de calibracin debe ser lo ms amplio
posible. Los lmites de confianza para la [ ] vendrn dados por el: Intervalo del lmite de confianza de la
concentracin extrapolada: xE

Problema Nro. 41. La [ ] de Ag en una muestra de derechos fotogrficos se determin por absorcin
atmica por el mtodo de desviaciones estndar, obtenindose:

[Ag adicionada] mg / ml 0 5 10 15 20 25 30
Abs. (0.42) 032 071 052 060 070 077 089

Obtener la [ ] de Ag, los limites de confianza al 95 % de esta [ ].

Solucin.

1. Para determinar la recta de regresin empleamos las frmulas:

[( )( )]
= ( )2
(Mdulo I).

a = (Mdulo I).

r=
2 2

y = bx + a

( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
0 0.32 -15 -0.2814 225 0.0791859 3.771
5 0.41 -10 -0.01914 100 0.0003663 0.1914
10 0.52 -5 -0.0814 25 0.0066259 0.407
15 0.60 0 -0.0014 0 0.0000019 0
20 0.70 5 0.0986 25 0.0097219 0.493
25 0.77 10 0.1686 100 0.0284259 1.686
30 0.89 15 0.2886 225 0.0832899 4.329
105 4.21 0 0.17246 700 0.2076177 10.8774 ( )
15 0.6014

 [( )( )] 10.8774
= ( )2
= = 0.0155 a =0.6014 0.0155*15 = 0.2325
700

y = 0.0155x + 0.2325 Luego la concentracin se calcula con la relacin:

0.2325
[]= = = 15 mg/mL
0.0155

2. Luego calculamos el lmite de confianza empleando: y = 0.0155x + 0.2325

= Con n-2 = 5 grados de libertad (95%) t= 2.57
xy ( )2 2 ( -- ) ( )2 ( ) ( )2
0 0.32 0 0 0.1024 -15 225 -0.2814 0.079186
5 0.41 2.05 25 0.1681 -10 100 -0.1914 0.036634
10 0.52 5.2 100 0.2704 -5 25 -0.0814 0.006626
15 0.60 9 225 0.36 0 0 -0.0014 0.000002
20 0.70 14 400 0.49 5 25 0.0986 0.009722
25 0.77 19.25 625 0.5929 10 100 0.1686 0.028426
30 0.89 26.7 900 0.7921 15 225 0.2886 0.083289
105 4.21 76.20 2275 2.7759 0 700 0.0002 0.243885
15 0.6014

.
)
( .
/ = { } = = 0.002379

= 0.6014
( )2 = 700

/ 1 ()2 (0.6014)2
= + 2 ( )2 =0.002379
0.0185
1
+
7 700(0.0185)2
= 0.2125

76.20 76.20
r= = = = 0.9589
2 2 22752.7759 79.4681

Para la lectura de las unidades de absorbancia 0.42 calculamos la [x E ], reemplazamos este valor en la
ecuacin de regresin para obtener el intervalo del lmite de confianza.

y = 0.0155x + 0.2325. Luego 0.0155xE = 0.42 - 0.2325 siendo xE = 12.0968

xE = 12.0968 2.57*0.2125 = (12.0968 0.5461) mg/mL

3.9.7. Mtodo de estndar interno. Una cantidad fija de una sustancia pura (estndar interno), se aade
tanto a las soluciones muestra como a las soluciones estndar. El estndar interno debe ser una sustancia
similar al analito con una seal fcilmente medible y que no interfiere con la respuesta del analito.
Despus se determinan las respuestas del analito y del estndar interno, y se calcula el cociente de las dos
respuestas. De esta manera, si s varia algn parmetro que afecte a las respuestas medidas, dichas
respuestas del analito y del estndar interno, deben ser afectadas por igual. Por tanto, el cociente de
respuestas depende solamente de la concentracin de analito.
Una representacin de la relacin o cociente de respuestas analito a estndar interno como funcin de la [ ]
del analito, da una grfica de calibracin cuyo ajuste se hace por mnimos cuadrados.

Problema Nro. 42. Determine la ecuacin de regresin, desviacin estndar del valor extrapolado x E, y r por
el mtodo de estndar interno con los siguientes datos:
 Patrn ppm Analito x rea de pico y
0 0 0
1 5 107
2 10 223
XE tsE 90% 247
3 15 288
4 20 433
5 25 532
6 30 594

Solucin: Aqu evaluamos sin adicin del P.I.

( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
0 0 -15 -311 225 96721 4665
5 107 -10 -204 100 41616 2040
10 223 -5 -88 25 7744 440
15 288 0 -23 0 529 0
20 433 5 122 25 14884 610
25 532 10 221 100 48841 2210
30 594 15 283 225 80089 4245
105 2177 0 0 700 290424 14210 ( )
15 311

[( )( )] 14210
= ( )2
= = 20.3 a = a =311 20.3*15 = 6.5
700

y = 20.3x + 6.5
xy ( )2 2 ( ) ( )2
0 0 0 0 0 -311 96721

5 107 535 25 11449 -204 41616

10 223 2230 100 49729 -88 7744

15 288 4320 225 82944 -23 529

20 433 8660 400 187489 122 14884

25 532 13300 625 283024 221 48841

30 594 17520 900 352836 283 80089

105 2177 46565 2275 967471 290424

15 311

46565 46565
r= = = = 0. 9925
2 2 2275967471 46914.7794

y = 20.3x + 6.5 Para un rea de pico de la muestra xE 247, calculamos la [xE ], reemplazamos este valor
en la ecuacin de regresin.

247 = 20.3xE + 6.5 siendo xE = 11.8473

xE = 11.8473 mg/mL

.
)
(
/ = { } = = 241.

 = 311

( )2 = 700

/ 1 ()2 241 1 (311)2

= + 2 ( )2 =20.3 +
7 700(20.3)2
= 5.6758

xE = 11.8473 5.6758

rea pico

700

600
y = 20,3x + 6,5
500 R = 0,9932

400

300

200

100

0
0 5 10 15 20 25 30 35

ppm analito

Ahora veamos la calibracin con adicin de patrn.

Figura. Nro. 199. Patrones analticos. Categorias: Primarios y Secundarios
Fuente: www.ual.es/Universidad/Depar/Hidquan/0809/26002101-3.pp
 + 10 ppm P.I.

Se divide el rea de pico del analito

cancelndose mutuamente las fluc
rea pico Analito / rea P.I. nuevo ndice libre de ellas
La precisin de la calibracin mejo
7.00
Se procede igual para muestras (a
de P.I.), ahora la seal de interpola
6.00 y = 0.1998x - 0.0060 rea analito muestra/ rea P.I.
R = 0.9992
5.00

4.00

3.00

2.00

1.00

0.00
0 5 10 15 20 25 30 35

ppm
analito
Respuesta: y = 0.1998x -0.0060 (el estudiante con los ejemplos dados demostrar este resultado).

Fuente: Prof. J.C. Vilchez Martn. Departtamento de Qumica y CCMM Universidad de Huelva. CSIC

3.10. Parmetros caractersticos.

3.10.1. Lmite de deteccin y cuantificacin. En trminos generales el lmite de deteccin (LDD) se puede
definir como la cantidad o concentracin mnima de sustancia que puede ser detectada con fiabilidad por un
mtodo analtico determinado (R. Boqu), tambin otros autores definen como; l limite de deteccin de un
analito, como aquella [ ] que proporciona una seal instrumental significativamente diferente de la seal de
una muestra en blanco, o la seal de fondo.

Significativamente diferente, da al analista un buen margen de libertad para establecer la definicin exacta
del limite de deteccin. De hecho, en la prctica existe poco acuerdo entre los Organismos Oficiales sobre
este acuerdo.
 Comparacin de lmites de
deteccin

Antigua definicin 3s y
de IUPAC: LOD
A

Nueva definicin de 3.28s y / x 1

IUPAC: LOD
A 3 M
Una definicin aceptable de lmite de deteccin, que ha sido sugerida recientemente por organismos de
EEUU, es que el lmite de deteccin es la cantidad de analito que proporciona una seal y e igual a la del
blanco ms tres veces la desviacin estndar del blanco:
yLD = yB + 3 SB (Mdulo I)

El lmite de cuantificacin o determinacin considerado como el lmite de [ ] ms bajo para mediciones

cuantitativamente precisas, se define como la cantidad de analito que proporciona una seal y e igual a la
del blanco ms diez veces la desviacin estndar del blanco:
yLQ = yB + 10 SB (Mdulo I)

En la prctica, cuando se trabaja con una recta de regresin convencional, se puede usar la desviacin
estndar de residuos Sx/y en lugar de SB, y se puede emplear el valor de A = (0,0) como una estimacin de
la seal correspondiente al blanco.

Una vez obtenido el valor de y obtendremos la [ ] correspondiente al limite de deteccin o cuantificacin, a

partir de la recta de calibrado.
L LC = 1.64s0
O
Q

1
0
s
0

A
A
nn
aa
ll
ii
tt
oo

cn
uo
a
nc
tu
ia
Figura. Nro. 200. Limites de decisin, deteccin y cuantificacin.
Fuente: analisisindustrial.wikispaces.com/.../Calibracion+univariada+y+AFO... (mayo 2012)

Problema Nro. 42. A partir de lecturas de blanco y un estndar diluido con los datos obtenidos en V en
una cromatografa de gases para pesticidas en un efluente de aguas residuales. Estimar el limite de
deteccin y el de cuantificacin (LDD y LDC) a partir de la repetitividad de la seal del blanco (o matriz de
la muestra) comparado con una seal producida por un estndar de concentracin muy diluida, donde la
seal sea ms de 3 veces la del ruido.
Con [Cstd] = 4 ppm.
Datos:
Nro. Y Estndar Y Blanco
1 191.44 5.218
2 207.77 9.228
3 207.08 5.07
4 175.5 4.222
5 187.82 6.044
6 187.89 7.229
7 179.42 5.744
8 179.06 5.355
9 200 7.099
10 208.13 5.972
YPromedio 192.411 6.1181
SY 12.6104678 1.41894871

Solucin:
6.1181+3.2911.41894871
LDD = [4] = 0.2243
192.411
6.1181+101.41894871
LDC = [4] = 0.4222
192.411

Problema Nro. 43. Determine el lmite de deteccin y cuantificacin de la curva de calibracin por adicin
de estndar con los siguientes datos que se proporcionan.
Estndar] ppm 0 10 20 30 40
Y (V) 379.7 934.9 1520.2 2057.4 2655.1
SY 28.1 252.4 157.6 385.4 267.9

Parmetro Pendiente Intercepto Coeficiente Variacin Sbo SBlanco

b1 bo R2 Residual
S2y/x
Valor 56.76 380 0.9999 10.119 1.46 0.25

Previamente se tiene calcular = 5.981

+3.29 5.981+3.291.46
LDD = 1
=
56.76
= 0.19
+ 10 5.981+101.46
LDC = = = 0.3626
1 56.76
3.10.2. Rango lineal. Se considera que el rango lineal comprende desde la menor concentracin que puede
medirse (el LOQ) hasta la prdida de la linealidad. (Mdulo I).

Figura Nro.202. Intervalo til de un mtodo analtico LOC (Limite de cuantificacin) y LOL. (Lmite de
linealidad).Fuente:analisisindustrial.wikispaces.com/.../Calibracion+univariada+y+AFOMs.ppt

Una manera conveniente de medir el cumplimiento de la linealidad es a travs de la relacin que existe
entre la variancia de la regresin, medida por (Sy/x)2 [ecuacin (3.25)], y la del ruido instrumental, medida por
(ss)2 [ecuacin (3.34)]. Si la primera es significativamente mayor que la segunda, se supone que hay causas
de desvo de la ley lineal que son estadsticamente superiores al ruido en la respuesta.
. .
/ )
(
= . = / [ )
] / = { } (Mdulo I)
) }
{( (

= (3.34) = precisin, b= pendiente, Ss desviacin estndar de las seales

Para emplear esta prueba es esencial que se cumpla el supuesto bajo el cual se realiza el ajuste lineal, esto
es, que los errores en concentracin de calibrado sean menores que en respuesta. De lo contrario, se
acumularan en (sy/x)2 incertidumbres derivadas de la imprecisin en las concentraciones de los patrones,
que nada tienen que ver con el ruido instrumental o las prdidas de la linealidad.
La prueba estadstica que se utiliza para determinar si los datos se ajustan el rango lineal o la ley lineal es
la F: en primer lugar se calcula un valor "experimental" de F, dado por:
2
(/ )
= ( )2
(Mdulo I)

Luego se compara este valor con el crtico que se encuentra en tablas de F (de una cola) para n 2 y n p
grados de libertad, y un determinado nivel de confianza, por ejemplo 95%. Si Fexp < F, se acepta que los
datos se comportan linealmente. Alternativamente, se calcula la probabilidad pF asociada a este valor de
Fexp, y se considera que la prueba de linealidad es aceptada si pF > 0,05. Esta prueba se describe en
detalle en el trabajo de Danzer y Currie.1
3.10.3. Sensibilidad. La sensibilidad de un instrumento o mtodo se define como, su capacidad para
discriminar entre pequeas diferencias en la [ ] de un analito. La sensibilidad viene limitada por la pendiente
de la curva de calibracin y la reproducibilidad o precisin del sistema de medida, de manera que para dos
mtodos que tengan igual precisin, el que presente mayor pendiente en la curva de calibracin ser el ms
sensible, y viceversa.

La IUPAC, define la sensibilidad como la pendiente de la curva de calibracin a la [ ] de inters. Como la

mayora de las curvas de calibracin son lineales, en ellas la sensibilidad de calibracin es independiente de
la [ ], e igual a la pendiente de la recta de calibrado.

Mandel y Stichler, definen la sensibilidad analtica a una determinada [ ], teniendo en cuenta la precisin,

como: = (3.34) b= pendiente, Ss desviacin estndar de las seales.

3.10.4. Selectividad. La selectividad de un mtodo analtico durante el grado de ausencia de interferencias,

debidas a otras especies contenidas en la matriz de la muestra.
Desafortunadamente, ningn mtodo analtico est totalmente libre de interferencias, y con frecuencia
deben realizarse distintas operaciones para eliminarlas.

Consideremos una muestra que contiene un analito A, as como dos especies potencialmente interferentes
(B y C), encontrndose en [ ] CA, CB, CC, con sensibilidad de calibracin: ma, mb, mc. La seal medida en
el instrumento vendr dada por:
S = ma CA + mb CB + mc CC + Sbl (Blanco) (Mdulo I)
Se define el coeficiente de selectividad de B con respecto de A, como:

= = (Mdulo I)

El coeficiente de selectividad nos da la respuesta relativa del mtodo para la especie B cuando se compara
con A. Reemplazando en (3.36) tenemos:
S = mA (CA + KAB.CB + KCA. CC ) + Sbl (Mdulo I)

Los coeficientes de selectividad pueden variar desde 0 en ausencia de interferencias hasta 1 ms. Un
coeficiente ser negativo si la interferencia causa una reduccin en la intensidad de la seal del analito y a
la inversa. Los coeficientes de selectividad son parmetros de calidad tiles para describir la selectividad de
los mtodos analticos, pero son poco usados.

Problema Nro. 44. Anlisis por mininos cuadrados de datos de calibracin para la determinacin de Plomo,
basada en el espectro de emisin de llama, condujo a la ecuacin:
y = 1,456 CPb + 0,4056. Obtenindose:

[Pb]ppm Nro. de rplicas S

10-0 10 15.106 0.195
1-0 10 1.456 0.325
0-00 24 0.03848 0.01066

Calcular: a. Sensibilidad de la calibracin, b. Sensibilidad analtica en 1 y 10 ppm de Pb; c. Lmite de

deteccin. Solucin.
a. Sensibilidad = pendiente = b = 1.456
b. Para la sensibilidad analtica de 1 ppm y 10 ppm de Pb. Empleamos la ecuacin (3.34)
 1.456
= = = 7.4667
0.195
1.456
= = = 4.48
0.325

c. Lmite de deteccin: Se calcula con [Pb] ppm 0-00 (3.31.) = + 3

yLD = 0.03848 + 3*0.01066 = 0.07046
0.070460.03848
y = bx +a, luego x= = = 0.02196
1.456

La [Pb] en el lmite de deteccin es [x] = 0.02196

3.10.5. Relacin seal - ruido. La seal analtica puede dividirse en dos partes: una causada por l / los
analitos y la otra, por los componentes de la matriz de la muestra y por la instrumentacin usada en la
medicin. En este ltimo, parte de la seal se conoce como ruido, y constituye informacin no deseada, ya
que degrada la exactitud y precisin del anlisis, a la vez que aumenta el lmite de deteccin. El efecto del
ruido sobre la seal consistente en una parte del registro grfico de una pequea seal de corriente
contina.

En la mayora de las medidas, el valor promedio de la seal correspondiente al ruido se mantiene cte., y es
independiente de la magnitud de la seal total. As pues, el efecto del ruido sobre el error relativo de una
medida, aumenta a medida que baja el valor de la cantidad medida. Por esta razn, para describir la calidad
de un mtodo analtico o el funcionamiento de un instrumento, la relacin seal ruido es un parmetro de
calidad mucho mejor que el ruido solo.
Para una seal cualquiera, la magnitud del ruido se define como la desviacin estndar del valor de la seal
medida, mientras que la seal viene dada por la media de la medida.

= = (Mdulo I)

3.11. Mtodos espectroscpicos de anlisis. Los mtodos espectroscopios de anlisis se basan en la

medida de la radiacin electromagntica emitida o absorbida por la materia. Los mtodos de emisin utilizan
la radiacin emitida cuando un soluto es excitado por energa trmica, elctrica, o energa radiante. Los
mtodos de absorcin, por el contrario, estn basados en la disminucin de la potencia (o atenuacin) de la
radiacin electromagntica como consecuencia de la absorcin que se produce en su interaccin con el
soluto.

Los mtodos espectroscpicos se consideran como una de las mejores y ms utilizadas tcnicas
instrumentales a disposicin del cientfico, para la adquisicin de informacin tanto cuantitativa como
cualitativa.

Los mtodos espectroscpicos se clasifican segn la regin del espectro electromagntico que est
implicada; siendo las ms importantes las regiones de rayos X, ultravioleta, visible, infrarroja, microondas y
radiofrecuencia

Cuadro Nro. 07. Tcnicas espectroscpicas.

TCNICAS PROPIEDAD MEDIDA

ESPECTROSCPICAS
 Mtodos pticos 1. Emisin de radiacin
2. Absorcin de radiacin
3. Dispersin de radiacin
4. Refraccin y difraccin de
radiacin
5. Rotacin de radiacin
Mtodos electro analticos 6. Potencial elctrico
7. Carga elctrica
8. Corriente elctrica
9. Resistencia elctrica
Espectrometra de masas 10. Razn masa carga
Mtodos cinticos 11. Velocidad de reaccin
Mtodos trmica 12. Propiedad trmica
Mtodos radioqumicas 13.Radiactividad

Los mtodos espectroscopios de anlisis se basan en la medida de la radiacin electromagntica emitida o

absorbida por la materia. Los mtodos de emisin utilizan la radiacin emitida cuando un soluto es excitado
por energa trmica, elctrica, o energa radiante. Los mtodos de absorcin, por el contrario, estn
basados en la disminucin de la potencia (o atenuacin) de la radiacin electromagntica como
consecuencia de la absorcin que se produce en su interaccin con el soluto.

Los mtodos espectroscpicos se consideran como una de las mejores y ms utilizadas tcnicas
instrumentales a disposicin del cientfico, para la adquisicin de informacin tanto cuantitativa como
cualitativa.

Los mtodos espectroscpicos se clasifican segn la regin del espectro electromagntico que est
implicada; siendo las ms importantes las regiones de rayos X, ultravioleta, visible, infrarroja, microondas y
radiofrecuencia. Por lo que para la determinacin de un analito que nos permita realizar anlisis con una
elevada selectividad y sensibilidad en base al desarrollo de los mdulos I y II podemos ofrecer al estudiante
una visin de las tcnicas espectroscpicas de anlisis basados en los antecedentes, la instrumentacin,
espectroscopia atmica, molecular y las leyes cuantitativas. A partir de ahora solo vamos a hablar de
mtodos instrumentales que requieren ser manejados con mucha rigurosidad, es necesaria una calibracin
previa del equipo. Esta calibracin previa se hace en base de los mtodos qumicos, por lo cual la exactitud
del mtodo instrumental depende de la exactitud del mtodo empleado.

1. Antecedentes de la espectroscopia analstica.

2. Instrumentacin general en espectrofotometra visible-ultravioleta
3. Espectroscopia atmica en llama: absorcin y emisin
4. Espectroscopia de absorcin atmica sin llama
5. Espectroscopia de emisin atmica en plasma
6. Espectroscopia de fluorescencia de rayos X
7. Espectroscopia de absorcin molecular visible ultravioleta. Fluorescencia
8. Espectroscopia de absorcin infrarroja y espectroscopia Raman.
9. Leyes cuantitativas.

3.11.1. Antecedentes de la espectroscopia analstica. Nmeros cunticos para tomos con varios
electrones (acoplamiento LS). Electrn = partcula puntual con 4 nmeros cunticos (3 para describir su
localizacin tridimensional en el espacio, la 4 para describir la orientacin del spin en el espacio.

Momento angular total. Interaccin spin-orbita, acoplamiento entre L y S (la orientacin de cada uno
depende de la orientacin del otro)
 J j ( j 1) , j l s l 12 para l 0
J z m j , m j ml ms
m j j, j 1,,0,, j 1, j

Figura Nro. 203. Momento angular total. Fuente:

rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

a. L y S preceden alrededor de la suma, J, en lugar de hacerlo alrededor del eje z.

b. Sus componentes Lz y Sz no tienen valores fijos, aunque si en la direccin de J

c. J precede alrededor de z (Jz fija)

d. J, Jz buenos nmeros cunticos. (Designan los estados estacionarios)

e. J2 y Jz obedecen las reglas de cuantificacin.

3.11.2. Estados o trminos de energa en el in libre. Hasta ahora nos ha bastado con describir los
tomos y las molculas mediante sus configuraciones electrnicas. Sin embargo, una configuracin es
una descripcin incompleta de la disposicin de los electrones en los tomos. Por ejemplo, en la
configuracin 2p2 los dos electrones podran ocupar orbitales con orientaciones diferentes de sus
momentos angulares de orbital (o sea, con valores diferentes de m l para las posibilidades +1, 0, y 1 que
hay cuando l es 1). De forma semejante, la designacin 2p 2 no nos dice nada acerca de las orientaciones
de spin de los dos electrones (m s = +1/2 1/2). De hecho, el tomo puede tener varios estados diferentes
del momento angular de orbital total, correspondiendo cada uno de ellos a una ocupacin de los orbitales
con valores diferentes de m l y m s. Las diferentes formas en las que los electrones pueden ocupar los
orbitales especificados por la configuracin se denominan microestados de la configuracin. Por ejemplo,
un microestado de la configuracin 2p2 es (1+, 1), notacin que significa que los dos electrones ocupan un
orbital 2p con m l = +1 pero con los spines opuestos (el superndice + indica m s = +1/2 y el indica que m s
= 1/2). Otro microestado de la misma configuracin es (1+, 0+). El problema que se plantea puede
dividirse en varias partes:

1. Cmo prever el nmero de microestados diferentes que se presentarn?

2. Por qu tales estados tienen distintas energas?
3. Cul es el estado fundamental?
4. Cul es el orden de los estados excitados?

Cuando hablamos de una configuracin d2 quiere decirse que en los 5 orbitales d acomodamos 2 e-


ml +2 +1 0 1 2
Los e-, como partculas con carga () que son, sufren una repulsin interelectrnica, que es la causante de
que estos electrones se coloquen de todas las forma posibles en esos orbitales. Cada electrn tiene
asociado:

Momento angular orbital:

l |l| = l (l + 1) h/2 ml = (+l).(l)
Momento angular de spin:

s |s| = s (s + 1) h/2 ms =

El e- (1) crea un campo magntico donde est el e- (2) y ste crea otro campo magntico donde est e- (1),
este es el origen del acoplamiento de los momentos angulares de ambos, creados por los momentos
magnticos. Los momentos angulares de orbital de los e- individuales se van a acoplar para dar un
momento orbital resultante total (del tomo):

L |L | = L (L + 1) h/2

Anlogamente hay un acoplamiento de momento angular de spin:

S |S | = S (S + 1) h/2

Al igual que ocurre para el electrn, para el tomo, estos vectores adoptan diferentes orientaciones:

vector L 2L + 1 orientaciones ML = (+L)..(L)

vector S 2S + 1 orientaciones MS = (+S).(S)1

Cuando se componen tenemos:

L = l1 + l2 + l3 + l4 + -------

S = s1 + s2 + s3 + s4 + -------
Figura Nro. 204. Explicacin vectorial del acoplamiento LS. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

En las componentes es suma algebraica lo que era suma algebraica geomtrica

1La diferencia es que en el e- ms solo puede tomar valores +1/2 1/2, y en los tomos los valores de Ms
van desde +S a S
Como vemos da igual hacer una suma que la otra, pero interesa trabajar con las componentes (es ms fcil)
Ml = ml
Ms = ms
Cada momento resultante tiene una energa E, por eso hay distintos estados de energa especificados por
un trmino de RussellSanders Trmino de energa, cada trmino engloba distintos estados todos de
igual energa. Cada trmino est especificado por:
2S + 1
L
L = 0, 1, 2, 3, 4,.......
S PD FG
2S +1 = multiplicidad de spin del trmino; 2S +1 = 1 singulete; = 2 doblete; = 3 triplete...
Figura Nro. 205. Microestados atomo de carbono. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

3.11.3. Deduccin de trminos. Lo primero que hay que hacer es clasificar en trminos todos los
microestados de una configuracin determinada. El paso siguiente es identificar las transiciones entre estos
trminos en el espectro del tomo.
Las diferencias de energa de las transiciones nos darn entonces las energas de repulsin interelectrnica
en el interior del tomo, que es la informacin que se necesita para dar una explicacin de los espectros de
los complejos.

Figura Nro. 206. Configuracin vectorial para el tomo de carbono. Fuente:

rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

En la configuracin d2: 45 microestados, 45 estados distintos, muchos de ellos tienen la misma energa,
jugando con los nmeros qunticos ML y MS hay 45 posibilidades de ir colocando esos 2 e- en los 5
orbitales d que tenemos, todas ellas son posibilidades distintas pero pueden tener la misma energa, entre
grupos. El principio de Pauli restringe el nmero de microestados posibles para una configuracin, ya que
no puede haber dos electrones con el mismo spin y valor de ml.
De los 45 microestados vamos agrupando los que tienen la misma energa.
Trmino: grupo de microestados con la misma energa (degenerados), el nmero de microestados que van
en un trmino es la degeneracin. Los microestados de un trmino respecto de otro trmino, se van a
diferenciar en la Energa.

La propiedad ms importante de un microestado que sirve para determinar la energa de un trmino es la

orientacin relativa de los spines de los electrones. Le sigue en importancia la orientacin relativa de los
momentos angulares de orbital de los electrones. Se pueden as identificar los trminos de los tomos ms
ligeros y ordenarlos segn su energa observando primero su spin total (determinado por la orientacin
relativa de los spines individuales) y, a continuacin, su momento angular de orbital total (tambin
determinado por la orientacin relativa de los momentos angulares de orbital de los electrones individuales).
Degeneracin de un trmino: producto de la degeneracin de L y de S.
Cuando decimos L = 2, lleva consigo los valores de ML, es decir, todos los valores que ML puede tomar, +2,
+1, 0, 1, 2.
Degeneracin orbital = 2L + 1
Degeneracin spin = 2S + 1
Degeneracin = (2L + 1) (2S + 1) nmero de microestados que van en el trmino.
El mximo valor de ML queda confundido o es igual al valor de L, es decir L = 4, arrastra consigo todos los
valores de ML, +4, +3,.........3, 4, pero es que el mximo valor de ML = 4 coincide con el propio valor de L,
es decir 4.

El mximo valor de MS queda confundido con el propio valor de S.

Se hace coincidir el mximo valor de ML y MS.
Mximo valor de ML = +4 L = 4 1G degeneracin = 9 singulete G

Mximo valor de MS = 0 S = 0 Tachamos de la tabla un microestado para cada valor de ML (+4, +3,....-3, -4)
de la columna de MS = 0, as se quitan de la tabla todos microestados que van en el singulete con
degeneracin: (2L + 1)(2S + 1) ( se tachan para no contarlos dos veces).
Un mismo microestado puede estar contribuyendo a un trmino y a otro distinto, aunque tambin puede que
contribuya a uno solo, aunque nosotros podemos decir que cada microestado pertenece a uno u otro. Para
detallar la deduccin de trminos ir a la pgina webs.um.es/dsl/Tema8.pdf y similares.
Reglas de Hund. Se utilizan para localizar cual es el trmino fundamental, que es el de menor energa:

1- El trmino que tenga la mxima multiplicidad de spin es el de menor energa.

2- Si dos trminos tienen la misma multiplicidad de spin, el de mnima energa es el que tenga la mxima
multiplicidad de orbital.
3- Entre los distintos estados J el de menor energa es el de menor valor de J, si corresponde a una
configuracin de semiocupados, y viceversa, si es ms de semiocupados. Recordemos los estados
singletes y tripletes exitados que tratamos en el mdulo II. Nos ocuparemos con algn detenimiento en los
temas de fluorescencia y fosforescencia.
Figura Nro. 207. Estados singlete exitados y estado triplete exitado. Fuente:
www.uclm.es/profesorado/pablofernandez/fluorescencia.PPT

Figura Nro. 208. Estados fundamentales y exitados regla de Hund.

Fuente: rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

3.11.4. Espectros atmicos: Cada tomo es capaz de emitir o absorber radiacin electromagntica,
aunque solamente en algunas frecuencias que son caractersticas propias de cada uno de los diferentes
elementos qumicos.

Si, mediante suministro de energa calorfica, se estimula un determinado elemento en su fase gaseosa, sus
tomos emiten radiacin en ciertas frecuencias del visible, que constituyen su espectro de emisin.

Si el mismo elemento, tambin en estado de gas, recibe radiacin electromagntica, absorbe en ciertas
frecuencias del visible, precisamente las mismas en las que emite cuando se estimula mediante calor. Este
ser su espectro de absorcin.

Figura Nro. 209. Transiciones de energa, electron cae desde el nivel 3 al 2 emite luz roja, electron cae
desde el nivel 4 al 2 emite luz azul Fuente: www.astro.ugto.mx/cursos/IA/IA07mod1d.pps(mayo 2012)

Se cumple, as, la llamada Ley de Kirchoff, que nos indica que todo elemento absorbe radiacin en las
mismas longitudes de onda en las que la emite. Los espectros de absorcin y de emisin resultan ser, pues,
el negativo uno del otro.

Puesto que el espectro, tanto de emisin como de absorcin, es caracterstico de cada elemento, sirve para
identificar cada uno de los elementos de la tabla peridica, por simple visualizacin y anlisis de la posicin
de las lneas de absorcin o emisin en su espectro.

Estas caractersticas se manifiestan ya se trate de un elemento puro o bien combinado con otros elementos,
por lo que se obtiene un procedimiento bastante fiable de identificacin.
Figura Nro. 210. Espectro del hidrgeno, Litio y sodio.Fuente. casanchi.com

3.11.5. Obtencin de un espectro de absorcin. El espectro de absorcin es una representacin grfica

que indica cantidad de luz absorbida () a diferentes valores de .

A partir de una solucin diluida de un compuesto, cuya absorbancia mxima entra dentro del rango de
medida del espectrofotmetro, se ver el valor de absorbancia a diferentes longitudes de onda frente a un
blanco que contenga el disolvente de la solucin de la muestra a caracterizar. A partir del espectro de
absorcin se obtendr el valor de al que el compuesto presenta la mayor absorbancia ( ). Dicho se
max

utilizar a la hora de hacer determinaciones cualitativas y cuantitativas del compuesto.

El espectro de absorcin de un cromforo depende, fundamentalmente, de la estructura qumica de la

molcula.
Figura Nro. 211. Transiciones electrnicas exteriores e interiores del tomo. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

El proceso de emisin de radiacin como consecuencia de la desactivacin de una molcula se denomina

genricamente luminiscencia, mientras que el trmino fotoluminiscencia se refiere al caso particular en el
que la excitacin tenga lugar por absorcin de fotones.

Cuando la energa de excitacin es de otro tipo, se originan otras modalidades de luminiscencia: as, la
quimio-luminiscencia es un fenmeno anlogo a la fluorescencia, excepto en el hecho de que la energa
de excitacin proviene de una reaccin qumica. Cuando la quimio-luminiscencia tiene lugar en un ser vivo,
como por ejemplo, en la lucirnaga, recibe el nombre de bioluminiscencia. Por otra parte, la tribo-
luminiscencia (del Griegro, tribo = frotar) se produce al liberarse la energa almacenada en ciertas
sustancias cristalinas, como azcar, y como consecuencia de su rotura.

La fotoluminiscencia puede clasificarse, en principio, en fluorescencia y fosforescencia, segn el

mecanismo mediante el cual la sustancia vuelve al estado fundamental, si bien, una distincin desde el
punto de vista prctico se basa en el tiempo transcurrido entre la absorcin y la emisin.
Figura Nro. 212. Diagrama de Grotrian para el sodio. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

3.11.6. Parmetros de medicin. El anlisis de trazas y ultratrazas cobra cada vez ms importancia por lo
que la disminucin de los lmites de deteccin de las tcnicas de anlisis (medioambiente, alimentacin,
bio-clnico, semiconductores, materiales)

Los anlisis se efectan cada vez ms en un entorno regulado. Legislaciones nacionales, europeas,
internacionales. Uso de sistemas de calidad, patrones primarios, CRMs. Exactitud y robustez en el
sistema de medida.

El anlisis se incorpora dentro de la cadena productiva y por lo tanto cada vez es ms importante el control
de los costes y la productividad de los laboratorios. Automatizacin, velocidad, capacidad multielemento,
sencillez de manejo.
Figura Nro. 213. Camino vial de trabajo en tcnicas espoectroscpicas. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.
Figura Nro. 214. Seleccin de una tcnica espectroscpica. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

3.12. Instrumentacin para la medicin de absorbancias de la luz visible y ultravioleta:

espectrofotmetro UV-visible

La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos aparatos llamados
espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en especial con la incorporacin de ordenadores para
el anlisis de datos, todos los espectrofotmetros constan, segn se indica en la figura, de:
 COMPONENTES BASICOS DE UN ESPECTROMET

a) b)

1 2 3

1 FUENTE DE RADIACIN o LMPARA

2 SISTEMA PTICO
a) Sistema para dirigir la radiacin
b) Sistema de aislamiento de la longitud de onda
3 RECIPIENTE PARA LA MUESTRA (GENERALMENTE

4 SISTEMA DE DETECCIN (TRANSDUCTOR DE LA RAD

Figura Nro 215. Componentes bsicos de un espectrofotmetro.
Fuente: www.unioviedo.es/QFAnalitica/trans/.../Tema%206.ppt

3.12.1. Caractersticas de la luz como onda. Debido a muchos experimentos realizados por cientficos
como Newton, Huygens y Einstein, por nombrar algunos, se ha podido comprobar que la luz es una onda
electromagntica, esto significa que es producida a nivel atmico cuando los electrones que se encuentran
en orbitas alrededor del ncleo saltan de una rbita de mayor energa a una de menor energa, liberando
este exceso de energa en formas de un fotn. La luz se emite en forma incandescente, fluorescente,
fosforescente y bioluminiscente.
Figura Nro 216. Caractersticas de la luz como onda Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

3.12.2. Una fuente de energa radiante: Dependiendo de la zona del espectro electromagntico tenemos
por ejemplo las lmparas de deuterio y tungsteno.

Fuentes luminosas Lmparas de H2 y D2

Filamento de W
Lmpara de Nerst
Alambre de Nicrom

Fuente de radiacin: Caractersticas que 1. Debe tener potencia suficiente.

deben de reunir son. 2. Debe ser estable.
3. Debe tener un estabilizador para corregir
las variaciones de la radiacin, o en el
sistema de doble haz, uno de ellos no pasa
por la muestra y corrige las fluctuaciones.
 Siendo los requisitos de una buena fuente 1. Intensidad de radiacin elevada.
de radiacin. 3. Emitir en un amplio rango de (emisin
continua).
3. Intensidad constante con el tiempo.

Figura Nro 217. Fuentes continas de suministro de energa. Fuente:

rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.
Figura Nro 218. Fuentes continas de suministro de energa. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de luz y longitud de onda a la que
se va a realizar la medida. Hay espectrofotmetros de un solo haz (con una sola celdilla para alojar la
cubeta con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas); en nuestro caso se trabajar
con los de un solo haz.
Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna el valor de cero
mediante el ajuste del mando, de forma que la intensidad incidente y transmitida sean iguales (I = I ), y por
o t
tanto la absorbancia es cero. A continuacin se pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la
absorbancia de sta.

Figura Nro 219. Regin del espectro, fuentes contnuas y de lneas. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

Cuadro Nro. 09. Zonas del espectro elctromagntico para un tipo de anlisis.
 Zona Visible: Lmpara de Wolframio Se basa en la incandescencia, emite luz en
(Lmpara de incandescencia). el visible e IR cercano desde 350-2500 nm
regida por las leyes de emisin del cuerpo
negro. La radiacin emitida depende de la
temperatura.

Zona Visible y ultravioleta: Lmpara de Se basa en la descarga entre dos

Arco de Xenn. (Lmpara de descarga). electrodos en un bulbo de cuarzo con Xe a
alta presin, la excitacin de Xe produce la
emisin de luz continua entre 250 y 600 nm.
La emisin es muy intensa por lo que se
utiliza en Fluorimetra molecular.

Zona Ultravioleta: lmpara de deuterio. Dos electrodos inmersos en una atmsfera

Intervalo de utilidad 160-390 nm. de Deuterio. La descarga crea un arco
Basada en la descarga de un gas a baja elctrico. El gas se excita por el bombardeo
presin. con los electrones, las molculas D2 se
disocian con emisin continua de fotones de
desde 160-500 nm.

3.12.3. Sistema ptico. En Espectrofotometra VIS-UV es esencial disponer de una radiacin constituida
por un grupo limitado y contnuo de s (Banda) ya que:
La ley de Beer se aplica a radiacin monocromtica.
Los anchos de banda estrechos aumentan la SENSIBILIDAD al disminuir la seal del
blanco pero no de la muestra.
Mejoran, tambin, la SELECTIVIDAD, con menos s menor probabilidad de que sustancias
distintas del analito absorban.

Monocromador de prisma ptico: cuerpo transparente limitado por dos superficies planas no paralelas. El
ngulo formado por las dos caras se denomina ngulo del prisma. ()

= .

1 2
Rojo, 1
Azul, 2

Figura. Nro. 220. Monocromador de prisma ptico, angulos formados en las dos caras. Fuente.
www.unioviedo.es/QFAnalitica/trans/.../Tema%206.ppt
De la teora de la refraccin se deduce que si una radiacin policromtica incide en un dielctrico de caras
no paralelas e ndice de refraccin n, cambia la direccin del haz y como la velocidad es distinta a la del
vaco y distinta para cada cada componente del haz se desviar diferentemente. Desvindose ms las
cortas que las largas.

El ngulo que forma el rayo refractado con la direccin inicial incidente se denomina DESVIACION ( ).

La variacin de la desviacin con la , se denomina DISPERSION ANGULAR. La dispersin es alta en el

UV pero decrece considerablemente en el VIS e IR cercano.

Figura Nro 221. Selectores de longitud de onda en las regiones del espectro electromagntico, continas y
discontinua. Fuente: rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.
Figura Nro 222. Refraccin en el interior de un prisma. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

Monocromador de prisma (dispersin El elemento dispersante es un prisma ptico

angular) dispersan la luz por refraccin que debido al fenmeno de la refraccin y
en particular a su dependencia con l
(Dispersin refractiva) separa las distintas l
con distintos ngulos.

Monocromador de red (dispersin lineal) El elemento dispersante es una red de

transmisin o reflexin que debido al
fenmeno de la difraccin separa las
distintas l con distintos ngulos.

Monocromador de red. La DISPERSIN ANGULAR DE UNA RED, dr/d= n/d se obtiene diferenciando la
ecuacin general de la red con respecto a .
Haz de radiacin monocromtica que incide con un ngulo i
La mxima interferencia constructiva entre los rayos 1 y 2 ocurre para un ngulo reflejado
La camino ptico debe ser un mltiplo entero de la .
Figura Nro 223. RRedes de difraccin, de surcos y hologrficos. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

Camino ptico = m, Camino ptico =

= d seni

=-d sen
Camino ptico = d seni (-d sen)
m = d seni +d sen, (70) d = espaciado de la red ,m = orden de difraccin
Lo ms ampliamente usado como monocromador es el slit, un prisma o rejilla de difraccin para
dispersar luz y un slit de salida para seleccionar el ancho de banda.
El slit de entrada es generalmente fijado y diseado para limitar la luz de colimacin permitida que
incide en el prisma y la rejilla. La luz reflejada es por tanto reducida an mnimo.
Cuando la luz incide en un prisma es dispersada y forma un espectro. Esto ocurre porque el ngulo
de refraccin y la interferencia (como la que hay entre el aire y el vidrio del prisma), vara con la
longitud de onda. De este modo el violeta es refractado ms que el rojo y el espectro es formado. El
ndice de refraccin determina la propagacin del espectro y el ancho de la banda de color relativo.
El vidrio es el material de mejor opcin para la luz visible, UV que son absorbidas por este.
El cuarzo y la fusin de slica son preferibles para la luz UV, pero cuando ellos son usados cerca
del infrarrojo y en la regin del infrarrojo, la banda de color producida es muy estrecha para el uso
prctico.

3.12.4. Seleccionador de longitud de onda. Se debe modular eligiendo a una longitud de onda mxima de
absorcin del espectro.
banda C banda B
Figura Nro 224. Seleccin de onda de trabajo mxima. Fuente: www.unioviedo.es/.../trans/...2.../metodos-
espectrofotometricos.pp

Cuadro Nro. 10. Tipo de monocromadores, filtros y fuentes.

Monocromadores Filtros Fuente

Prisma Vidrio Lmparas de H2 y D2

Rejilla de Wratten Filamento de W

difraccin (gelatina)
Interferencia Interferencia Lmpara de Nerst

Figura Nro 225. Dispersin cruzada, espectro bidimensional. Fuente:

rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.

El espectro es distorsionado y proyectado en un ngulo al dorso de la pared del monocromador. En

el final del color rojo del espectro est la menor distorsin, y al final del azul del espectro hay una
mayor distorsin.

Los espectrofotmetros de alta calidad han usado prismas de cuarzo o vidrio en sus
monocromadores. Con ellos se produce un espectro muy limpio y el mecanismo puede ser muy
preciso.

En estos momentos se fabrican redes de difraccin de alta calidad muy econmicas por lo que la
mayora de los espectrofotmetros de buena calidad incorporan la red de difraccin.

Cuando la luz blanca choca con la rejilla, esta es difractada en forma de varios espectros.

3.12.5. Cubetas. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o tubos) que
contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico transparente. Para medir en UV se deben usar
las de cuarzo o slice fundido, porque el vidrio no transmite la radiacin UV.
 Material Radiaci

Cuarzo UV-Vis

Vidrio Vis

Plstico Vis

CUBETAS

CARAS NORMALES A LA DIRECCIN

DEL HAZ

VIS-UV
ABSORCIN MNIMA A LA LONGITUD
DE ONDA DE TRABAJO
1. Vidrio ordinario o slice
2. Slice
(VIS).fundida o cuarzo (UV).
3. NaCl, NaI, etc (IR).
.
Fig. Nro. 226. Cubetas: Vidrio ordinario o slice (VIS), Slice fundido o cuarzo (UV), NaCl, NaI (IR). Fuente.
www.uniovi.es/QFAnalitica/.../metodos-espectrofotometricos.

3.12.6. Detectores. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales luminosas en seales
elctricas.

Fotnicos: Detectores de fotones. 1.Fotoemisin o Fotoconduccin

2.Trmicos (detectores de calor):
3.Aumento de temperatura se convierte en seal
elctrica

Un sistema detector consiste en los dispositivos 1. La radiacin despus de pasar por la muestra, en las
que permiten " ver o detectar u observar " medidas de absorcin, u originada por la muestra en el
caso de medidas de emisin de radiacin.
2. Dependiendo de la zona del espectro utilizada en el
espectrofotmetro, los detectores deben poseer
caractersticas que le permitan detectar ese tipo de
radiacin.

Transductores Es el proceso por el cual se convierten la radiacin

electromagntica o radiacin lumnica en una corriente
o voltaje que se observa despus de amplificar en el
circuito de lectura.

Detectores de fotones. 1. Fototubos

2. Tubos fotomultiplicadores
3. Clulas fotovoltaicas
4. Detector de fotoconductividad
5. Fotodiodos

Las caractersticas ms importantes de los detectores son:

Eficiencia cuntica (QE) =

Intervalo espectral cubierto

Linealidad
Detectores lineales: Tubo fotomultiplicador, etc.
Detectores no lineales: placas fotogrficas
Tiempo de respuesta
Ruido
Resolucin espacial
Capacidad de integracin de la seal
 Figura Nro. 227. Tuvo fotomultiplicador

Para el ultravioleta, el visible y el cercano infrarrojo se encuentran los fototubos de vaco, de un solo paso,
que contienen un ctodo sensible a la radiacin y su nodo, se caracterizan por:
Consiste de una lmina de material fotosensible curveado que sirve como ctodo (emisor) y por
tanto cargado positivamente, sirviendo el tubo como nodo (colector)
El ctodo del fototubo se recubre con un material fotosensible ejemplo el celcio-antimonio y
multialcali (Sb/K/Na/Cs) los cuales emiten electrones cuando son iluminados.
El nmero de electrones emitidos es directamente proporcional a la intensidad luminosa sobre el
ctodo.
El nodo recoge los electrones producidos por el ctodo, ambos ctodo y nodo son sellados al
vaco en una envoltura de vidrio.

El fotoctodo opera segn el principio de emisin de electrones desde algunos materiales dependiendo
de la frecuencia de los fotones que inciden en su superficie, es decir hacen uso del efecto fotoelctrico.

Figura Nro 228. Fototubo de vacio, efecto fotoelctrico, energa necesaria para expulsar al electrn. Fuente:
rua.ua.es/.../1/mtodos%20espectrocpicos%20de%20anlisis.pdf.(agost. 2011)

Los fotomultiplicadores son una combinacin de un ctodo fotoemisivo y una cadena interna de dnodos
multiplicadores de electrones.
La radiacin incidente expulsa electrones del ctodo.
Estos electrones son enfocados por un campo electrosttico y acelerados hacia un electrodo curvo, que
corresponde al primer dnodo, el cual est cubierto con un compuesto que expulsa varios electrones como
resultado del impacto de un electrn de alta energa. Repitiendo este proceso varias veces se produce la
amplificacin de la corriente interna para finalmente llegar al nodo.
Los fotodiodos operan segn un principio completamente diferente al de los detectores anteriores. Este
consiste de una unin semiconductora p-n, la cual posee una polarizacin inversa, de modo que no existe
un flujo de corriente. Cuando un fotn interacta con el diodo, los electrones llegan hasta la banda de
conduccin en donde pueden actuar como portadores de carga. De esta manera, la corriente generada es
proporcional a la potencia radiante incidente.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

3.12.7. Aspectos a considerar. Las fluctuaciones producidas en la corriente elctrica, la inestabilidad de

algunas fuentes de radiacin o la respuesta no lineal del detector pueden originar el funcionamiento
incorrecto de un determinado equipo, por lo que se recomienda tener en cuenta los siguientes criterios.

Luz parsita
Tiempo de calentamiento
Fatiga
Repetibilidad de la lectura
Longitud de onda
Deterioro de la rejilla
Baja energa
Cubetas defectuosas rayadas

3.13. Leyes cuantitativas: Se basa en la medida de la radiacin absorbida en la regin visible, ultravioleta
e infrarroja, La fuente es necesaria para alimentar la lmpara de excitacin. La lmpara de excitacin, foco,
provee una luz que contiene colores en diferentes longitudes de ondas, luz policromtica (representada por
la flecha gruesa) esta luz pasa a travs de un prisma u otro dispositivo, descompone la luz en sus colores,
esto permite que seleccionemos un color monocromtico, la que hace incedir en la muestra, contenida en la
cubeta porta muestras, esta luz es llamada luz incidente. Parte de esta luz incidente es transmitida a
travs de la muestra y es llamada luz transmitida. La que queda de la energa luminosa es absorbida por
las molculas de la muestra, esta energa representa la energa de absorcin que va al detector y sistema
de lectura donde obtendremos la respuesta de la concentracin de los patrones y el analito como se puede
apreciar en la segunda figura.

Figura. Nro. 229: Proceso de absorcin de radiacin electromagntica en una celda que contiene una o ms
especies absorbente. Fuente. Prof. Dr. Luis Salazar.Depto. De Ciencias Bsicas UFRO-2004.
Figura Nro 230. Modelo de proceso de absorcin con sistema de lectura. Fuente:
www.upct.es/~minaeees/analisis_aguas.ppt

El color se determina mediante un espectrofotmetro, cuyo esquema de funcionamiento se recoge en la

figura Nro. 197, a tres longitudes de onda distribuidas por el conjunto del espectro visible: 1 = 436 nm Azul;
2 = 525 nm Verde y 3 = 620 nm Anaranjado.

Figura Nro 231. Transmitancia y Absorbancia Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt

(Mayo 2012)

a. La Transmitancia (T). Es la relacin entre la intensidad de radiacin transmitida por una muestra (I) y la
intensidad de radiacin que incide sobre la muestra (I0), medidos ambos en la misma posicin del espectro y
con la misma rendija. Fraccin de radiacin que una sustancia deja pasar cuando la REM atraviesa la
muestra.
T puede valer desde 0 hasta 1.
%T puede valer desde 0 hasta 100 %

T = I / I0 (71)
Se supone que el haz es de radiacin paralela y que incide sobre las superficies planas y paralelas de la
muestra, formando ngulos rectos.
b. La Absorbancia (A). [D.O= Densidad ptica] Es la atenuacin de la intensidad de la radiacin cuando
esta incide sobre una muestra. Es la cantidad de energa que la sustancia toma para pasar a un estado ms
excitado.
A aumenta a medida que aumenta la atenuacin de la radiacin.
Cuando no hay absorcin de radiacin Po= PT y entonces A=0, mientras que si se absorbe el 99% de la
radiacin, solo se transmite el 1%, la A=2
Est definido por la ecuacin logaritmica en base diez del recproco de la transmitancia (T), en el que el
disolvente puro es el material de referencia; esto es:
A = log10 1/T = - log10 T (72)

Figura Nro 232. Luz visible, luz monocromtica antes de la absorcin Io, I luz monocromtica despus de la
absorcin Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

c. Ley de lambert beer. Muestra cmo la absorbancia es directamente proporcional a la longitud b de la

trayectoria a travs de la solucin y a la concentracin [C] del analito o
especie absorbente. La ley de Lambert y Beers da origen a una serie de expresiones usadas
rutinariamente en espectrofotometra.

A = a b [C] (73)

b = longitud del camino recorrido por la radiacin a travs del medio absorbente
[C] = concentracin expresada en g/L (mg/L,...) Cuando en la ecuacin la concentracin viene expresada en
mol/L, la cte de proporcionalidad se denomina absortividad molar y se representa por o aM (unidades
Lcm-1mol-1.)

S las condiciones son mantenidas constantes tales como la absortividad molar (aM) y el camino
de la luz permanece constante, entonces solamente permanece variable en la expresin la
concentracin [C] y la absorbancia. A
S la absorbancia de un patrn y una desconocida que contiene la misma sustancia, son medidas,
las dos pueden ser plasmadas por la siguiente expresin:

[]
= [] (74)

[]
= = , luego podemos calcular la: [C]Desconocida =

a: absortividad, constante de proporcionalidad, aM = absortividad molar = (moles/L.)

Figura Nro 233. Ejemplo: Espectro de Transmitancia y Absorbancia en funcin de la longitud de

onda.Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

d. Coeficiente de absortividad molar. El trmino es llamado coeficiente de absortividad molar aM cuando

la concentracin de la solucin de lectura se expresa es moles/L. Si la concentracin de la especie
absorbente se expresa en: ppm, mg/L, g/L, g/ml., o cualesquier otro sistema de unidades de concentracin,
al coeficiente se le llama coeficiente de absortividad especfica y se representa por la letra a, en cuyo
caso A=a b [C]

Por lo tanto, la concentracin de la solucin no necesariamente debe estar expresada en moles/L Para que
la Ley de Lambert-Beer sea vlida, y puede utilizarse cualesquier otro sistema de unidades pero siempre
debern especificarse las unidades del coeficiente de absortividad.

-log T = A = Absorbancia = Densidad ptica.

A = aM bC (75)

El valor de (aM o a, segn sea el caso), es caracterstico del ion o molcula en un solvente especfico a
una determinada longitud de onda. Este valor es independiente de la concentracin [C] de la solucin y del
espesor de la celda (b).
Figura Nro.234. Ley de Lambert Beer. Fuente: www.unioviedo.es/.../trans/...2.../metodos-
espectrofotometricos.ppt.(set 2011)

Figura Nro 235. Ejemplo: Medida experimental de Transmitancia y Absorbancia

Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

3.13.1. Para ms de una especie absorbente en el medio: Las absorbancias son aditivas:
La absortividad pasa a denominarse absortividad molar aM y se expresa con el smbolo , cuando la
concentracin [C] est en (moles/litro) y b en (cm). La ley de Lambert-Beer permite la determinacin de
concentraciones de disoluciones, a partir de una recta de calibrado obtenida midiendo las
absorbancias de disoluciones patrn de concentraciones conocidas. La recta de calibrado se
construye representando absorbancias en ordenadas frente a concentraciones en abscisas; interpolando el
valor de absorbancia de la sustancia problema, obtenemos su concentracin, figura No. 200
Figura. Nro. 236. Ley de Lambert-Beer. Recta de calibrado con estndares Absorbancia (y) versus
Concentracin (x).
a. Curva de calibrado. Se tiene la curva de calibrado midiendo la absorbancia de una serie de soluciones
de concentraciones conocidas de una misma sustancia tratadas con un mismo mtodo y medidas a igual
longitud de onda en el mismo instrumento. Para medir la concentracin de una sustancia se elige por lo
general, la regin de mxima absorcin del espectro denominada longitud de onda analtica.
El resultado se expresa en una grfica de la absorbancia (A) en funcin de la concentracin [C]. S i el
sistema sigue la ley de Lambert-Beer se obtiene una lnea recta que pasa cerca del origen; de cuya
pendiente se puede obtener el coeficiente de extincin, o absortividad especfica () si la concentracin se
expresa en g/100mL o coeficiente de absorcin(o extincin) molar a M si las unidades de concentracin son
molesL-1 o milimoles L-1 (Ecuacin 76).
Es posible determinar grficamente la concentracin de una muestra desconocida [C x] midiendo la
absorbancia de la muestra (Ax ) e interpolando en la curva de calibrado.
A = a.l. [C] + Ao (76)
Cuando se conoce por bibliografa el coeficiente de extincin especfica de un compuesto () o este es
estimado experimentalmente, midiendo la (Ax) de una muestra del compuesto de concentracin
desconocida [Cx] se puede calcular su concentracin (Ecuacin 77)

Cx = (77)

En esta forma se obtiene la concentracin [Cf] de la muestra problema en la cubeta, para obtener la
concentracin inicial [Ci] se debe considerar las diluciones correspondientes al ensayo usando la ley
volumtrica de diluciones.
Vi Ci = Vf Cf (78)

b. Formula estndar. La concentracin desconocida puede determinarse sobre la base de un solo

estndar, de acuerdo a la siguiente ecuacin:

Astd [Cmp] [ ] = Amp [Cstd][ ] (79)

Astd y Amp son las absorbancias del estndar y la muestra problema respectivamente
Vi corresponde al volumen de la solucin estndar o de la muestra problema ocupado en el ensayo para
cuantificar.
Vf corresponde al volumen final del ensayo ocupado para cuantificar.
[Cstd] y [Cmp] corresponden a las concentraciones de las soluciones estndar y muestra problema
respectivamente. Ambas concentraciones se refieren a las originales sin la dilucin propia del ensayo
ocupado para cuantificar.

Asimismo, la ley de Lambert-Beer se puede aplicar a disoluciones que contengan varias especies
absorbentes. La absorbancia total A, a una determinada longitud de onda, para un sistema de varios
compuestos, viene dada por:

A1 = A11 + A21 + ... + An1 = a11.b.c1 + a21.b.c2 + ... + an1.b.cn (80)

Para poder aplicar con xito la ley de Lambert-Beer a la determinacin de concentraciones de mezclas, es
necesario que cada compuesto presente un mximo de absorbancia en el espectro ultravioleta-visible a
longitudes de onda diferentes. Supongamos que tenemos dos compuestos X e Y que presentan mximos
de absorbancia a 1 y 2 respectivamente. En una mezcla de ambos compuestos, mediramos la
absorbancia a las dos longitudes de onda

A1 = AX1 + AY1 = aX1.b.[CX ] + aY1.b.[CY] (81)

A2 = AX2 + AY2 = aX2.b.[CX ] + aY2.b.[CY]

Las absortividades de cada compuesto a cada longitud de onda se conocen midiendo las absorbancias de
disoluciones de concentraciones conocidas de cada compuesto aislado. Una vez conocidas las
absortividades y nulificada el valor de b por ser la misma celda, tenemos un sistema de dos
ecuaciones con dos incgnitas: las concentraciones de cada compuesto en la mezcla.

AT1 = ax1 [CX ]+ ay1[CY ] Todo en 1 (82)

AT2 = ax2 [CX] + ay2 [CY ] Todo en 2

Este procedimiento puede aplicarse a mezclas de tres componentes, en tal caso, se necesitan tres
ecuaciones para lograr su resolucin. Debe hacerse notar que al aumentar el nmero de componentes que
absorben, la exactitud y la precisin del mtodo disminuye.
A total = a1bc1 + a2bc2 +....... + anbcn (83)

Figura. Nro. 237. Graficas T, A, versus Concentracin: Fuente: Prof. Dr. Luis Salazar.Depto. de Ciencias Bsicas UFRO-2004.
3.13.2. Desviacin de la ley de Lambert Beer. Se debe al exceso de concentracin (Banda B) o al uso
de radiaciones poli cromticas (Banda B)

Figura. Nro. 238. Presencia de radiaciones parsitas o dispersas. Fuente: Prof. Dr. Luis Salazar.Depto.
De Ciencias Bsicas UFRO-2004.

3.13.3. Limitaciones de la ley de Lambert-Beer. Esta ley permite establecer una relacin lineal entre
absorbancia y concentraciones de una especie absorbente a una temperatura dada. La representacin de
absorbancia frente a concentracin es una recta que pasa por el origen. Sin embargo, se encuentran
frecuentes desviaciones con relacin a la proporcionalidad directa entre absorbancias y concentraciones
que limitan la aplicacin de la ley. Las principales causas son:
Limitaciones reales de la ley. Disoluciones de concentracin elevada (c > 0.01 M) dan malos resultados.
Limitaciones Qumicas. Se produce cuando el analito se disocia, asocia o reacciona con el disolvente para
dar productos que presentan propiedades de absorcin diferentes de las del analito.
Limitaciones Instrumentales. El cumplimiento estricto de la Ley de Beer slo se observa para radiaciones
monocromticas (radiacin formada por una sola longitud de onda) y stas en la prctica no se consiguen,
ya que con los dispositivos disponibles (filtros, monocromadores) se obtienen una banda de longitudes de
onda ms o menos simtrica entorno a la deseada.
 Desviaciones a la ley de Beer

La mayor parte de las especies cumplen con la ley en un

determinado
intervalo de concentraciones. Fuera de l,
experimentan desviaciones
absorbancia
positivas o negativas. Esto se observa bien en el re
calibrado: a
o
respuesta del blanco, at
interferencias o escasa
sensibilidad concentracin

Es preciso asegurar
que se est trabajando
en el intervalo lineal!!

Figura Nro 239. Desviacin de la ley de beer, fuera del rango lineal. Fuente:
www.unioviedo.es/.../trans/...2.../metodos-espectrofotometricos.ppt

a) La concentracin. Slo es aplicable a disoluciones diluidas (<10-2 M); en disoluciones concentradas la

distancia entre partculas absorbentes es tan pequea que se produce una modificacin en la distribucin
de cargas de las mismas, lo que se traduce en una alteracin en la capacidad de absorcin a una longitud
de onda determinada. Este efecto se puede eliminar mediante dilucin.
b) La interaccin entre el soluto y la radiacin. Debida a mecanismos diferentes a la absorcin pero que
producen alteraciones en la intensidad de la luz, tales como la dispersin, reflexin, la fluorescencia, etc.

c) Utilizacin de radiacin no monocromtica. Puesto que la ley est definida para radiaciones con una
sola longitud de onda. Sin embargo, si la calidad del equipo no es buena, se obtienen bandas de
radiaciones con un estrecho intervalo de longitudes de onda.
d) Falta de uniformidad de la muestra o especie absorbente, o presencia de impurezas.
e) Desviaciones qumicas, debidas a reacciones del absorbente con el disolvente, como en el caso del
dicromato en disoluciones no amortiguadas.
Cr2O72- + H2O 2H+ + 2CrO42-
Para cualquier longitud de onda la absortividad molar del ion dicromato y del cromato son diferentes.

3.13.4. Especies absorbentes. Presenta la posibilidad de que sus electrones ms exteriores o lectrones de
enlace sean elevados a niveles de energa ms altos al incidir sobre ella radiacin electromagntica.Grupo
cromforo: Grupo atmico que presenta en una molcula que determina o lleva asociada una banda de
absorcin electrnica. Ejemplo. C=O, C=C, N=N, Grupo auxocromo: Grupos que no producen por s
mismos bandas de absorcin, pero que intensifican las de los grupos cromforos. Ejemplo: C-Br, C-
OH,Las especies absorbentes se clasifican en:

a. Absorcin por compuestos orgnicos. Dos tipos de e- son responsables de que las molculas
absorban radiacin UV-Vis:

1. e- compartidos que participan directamente en la formacin de enlaces y que estn asociados a ms de

un tomo.
2. e- externos no compartidos, localizados preferentemente entorno a tomos como O, S, N y halgenos. (e
situados en orbitales no enlazantes n) A la que absorbe una molcula depende de la fuerza con que
retiene a su distinto electrn (e-).

Enlaces sencillos C-C o C-H: de la regin del UV de vaco (<180 nm)

Enlaces dobles o triples: de la regin del UV
Compuestos orgnicos que contienen S, Br y I: absorben en la regin UV

Figura Nro 240. Ejemplo: Absorcin por compuestos orgnicos con grupos cromforos
Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

b. Absorcin por compuestos inorgnicos. Los espectros presentan mximos de absorcin anchos y
poca estructura fina.
Excepcin: iones de la serie de los lantnidos y actnidos. Los e- (4f y 5f) responsables de la absorcin
estn apantallados de influencias externas por e- situados en orbitales de n cunticos elevados.
Consecuencia: bandas de absorcin estrechas y estn relativamente poco afectadas por la naturaleza de
las especies asociadas a ese in y por el disolvente.
Iones y complejos de las 2 primeras series de transicin: son coloreados al menos en alguno de sus
estados de oxidacin. La absorcin de radiacin Vis se debe a transiciones de e - entre orbitales d llenos y
vacos que difieren en energa a causa de los ligandos unidos a los iones metlicos. La diferencia de
energa entre orbitales d depende del estado de oxidacin del elemento, su posicin en la Tabla peridica y
la clase de ligando unido a ese in.

Figura Nro 241. Efecto de los ligandos sobre los mximos de absorcin asociados a transiciones dd. Orden creciente en el
desdoblamiento.
Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

c. Absorcin de transferencia de carga

i. Complejo de transferencia de carga: consta de un grupo dador de e- unido a un aceptor de e-.
ii. Cuando uno de estos compuestos absorbe radiacin, se transfiere un e- del dador a un orbital localizado
preferente en el aceptor.
iii. El estado excitado es un producto de un proceso de oxidacin /reduccin.
iv. Complejos inorgnicos y orgnicos.
v. Se caracteriza por tener absortividades molares mayores de las habituales (Max > 1000), circunstancia
que conduce a una gran sensibilidad.
3.13.5. Aplicaciones.
- Amplia aplicabilidad.
- Elevada sensibilidad: los lmites deteccin 10-4 a 10-5 M.
- Selectividad de moderada a alta.
- Buena exactitud: errores de concentracin 1-5% o incluso menores.
- Facilidad y comodidad en las medidas espectrofotomtricas.
 - Se prestan a una fcil automatizacin.
- Especies absorbentes: compuestos orgnicos que contengan grupos cromforos y especies
inorgnicas como son los metales de transicin.
- Especies no absorbentes: los analitos reaccionan con un reactivo para producir un compuesto
absorbente.
Cuadro Nro. 11. Aplicaciones medioambientales: Ejemplos seleccionados de la aplicacin de la
absorcin molecular UV/Vis. En el anlisis de agua y aguas residuales.
Analito Mtodo (nm)
Oligometales
Aluminio La reaccin con colorante cianuro de eriocromo R a pH 6 produce un complejo de 535
color rojo a rosado
Arsnico Reducido a AsH3 con Zn y hacerlo reaccionar con dietilditiocarbamato para producir 535
un complejo rojo
Cadmio Ectraccin en CHCl3 con ditizona procedente de la muestra alcalinizada con NaOH, 518
complejo rojo a rosado
Cromo Oxidar a Cr(VI) y hacer reaccionar con diffenilcarbazina en disolucin cida, para 540
obtener un complejo rojo violeta
Cobre MMezclar con neocuprita en solucin neutra a ligeramente cida, extraer con 510
CHCl3/CH3OH para obtener una disolucin amarilla
Hierro Reaccin con o-difenilcarbazina en disolucin cida para obtener un complejo rojo 457
anaranjado
plomo Extraccin en CHCl3 con ditizona de muestra alcalina con tampn amoniacal, 510
complejo rojo cereza
Manganeso Oxidar a MnO4- con persulfato 525
Mercurio Extraccin con CHCl3 con ditizona de una muestra cida, complejo anaranjado 492
Cinc Reacciona con zicon a pH 9 para formar un complejo azul 520
Compuestos orgnicos no metlicos
Amoniaco La reaccin con amoniaco, hipoclorito y fenol produce indofenol azul, catalizado por 530
una sal de manganeso
Cianuro Convertir en CNCl mediante reaccin con cloramina T, seguida de reaccin con un 578
cido piridinabarbitrico para formar un colorante rojo-azul
Fluoruro La reaccin con laca Zr-SPADNS rojo produce ZrF62- y reduce la concentracin en 510
la laca
Cloro(residual) Oxidacin de leuco crital violeta para formar un producto de color azulado 592
Nitrato Reduccin a NO2- por Cd, se forma un colorante azo por reaccin con sulfanilamina 543
y N-(1-naftil)-etilendiamina
Fosfato Reaccin con molibdato amnico seguida de reduccin con cloruro de estao para 690
formar azul de molibdeno
Compuestos orgnicos
Fenol Reaccin con 4-aminoantipirina y K3Fe(CN)6 para formar colorante de antipirina 460
Surfactantes Formacin de par inico azul entre el surfaciante anionco y el colorante cationico 652
azul de metileno, que se extrae con CHCl3

Fuente:juanaflores.wikispaces.com/file/view/TEMA+8+ppt.ppt (Mayo 2012)

3.14. Resolucin de problemas.

Problema Nro. 45. Cuantificacin simultanea de dos cromforos que presentan solapamiento en sus
bandas de absorciones analticas
Los componentes (x) i (y) estn presentes en lla muestra y ambos contienen a la absorbancia a la longitud
de onda i por lo tanto, se puede escribir la ecuacin aditiva de la absorbancia.
AT1 = AX + AY Todo en 1
Dado que la ley de Lambert Beer establece que [A= abC] y que el valor de (b) puede ser nulificado si se
usa la misma celda en todas las mediciones, entonces la ecuacin anterior podemos expresar de la
siguiente forma:
AT1 = ax1 CX + ay1 CY Todo en 1
De igual modo podemos formular una ecuacin similar para la absorbancia total en lambda 2
AT2 = ax2 CX + ay2 CY Todo en 2
Los valores numricos de ax1 y ax2 pueden ser determinados respectivamente por mediciones de
estndares del componente (x) en 1 y
2. De manera similar se puede determinar los valores de ay1 y ay2. Las longitudes de onda debern
seleccionarse de tal forma que a 1 el componente (x) absorba ms que el (y); y a 2 el proceso de
contribucin de las absorbancias sea inverso.

Al medir la absorbancia de una muestra que contiene dos componentes, a dos longitudes de onda,
obtenemos dos ecuaciones con dos incognitas, la resolucin por ecuaciones simultaneas conduce a la
determinacin de la concnetracion de los componentes en la mezcla. Otra forma de resolver es:

[CX] = [(ay2)(AT1) (ay1)(AT2)]/[(ax1)(ay2) (ay1)(ax2)]

[Cy] = [(ax1)(AT2) (ax2)(AT1)]/[(ax1)(ay2) (ay1)(ax2)]

Ejemplo.

Absortividad molar del componente (x) a lambda 1 a x1 = 80

Absortividad molar del componente (x) a lambda 2 a x2 = 15
Absortividad molar del componente (y) a lambda 1 ay1 = 10
Absortividad molar del componente (y) a lambda 2 ay1 = 50

Absorbancia de la muestra con los componentes (x,y) a 1 AT1= 0.550

Absorbancia de la muestra con los componentes (x,y) a 2 AT2= 0.825

[CX] = [(50)(0.550) (10)(0.825)]/[(80)(50) (10)(15)] = 0.005M

[CY] = [(80)(0.825) (15)(0.550)]/[(80)(50) (10)(15)] = 0.015M

Problema Nro. 46. En una celda de un cierto espesor y a una presin de 100 torr el vapor de acetona
transmite el 25.1 % de luz incidente de una longitud de onda de 265 nm. Calcular la presin de vapor de
acetona que absorber el 98% de la misma radiacin, en tal celda y a idntica temperatura.
Solucion.
1ra condicin
e =?
 P1= 100 torr
= 265 nm
P2 =? Io = 100 %
I =25.1%
T1 =T2

Absorb. Sol: Iabs = 100-25.1 = 74.9%

Transmitancia = 0.251

Paso 1: Primera condicin: log T = - 1 b [C1] y P1 = [C1] RT1

log 0.251 = - 1 b [C1] y 100/760 = [C1] RT1
[C1] = 0.131578947/ RT1
() log 0.251 = - 1 b [0.131578947/ RT1]

2da condicin

Io = 100%
I = 2%

Absor. Sol. Iabs = 100-98 = 2%

Transmitancia = 0.02

Paso 2: Primera condicin: log T = - 1 b [C2] y [C2] = P2 /RT2

log 0.02 = - 2 b [C2 ]
() log 0.02 = - 2 b [P2 / RT2]

Paso 3: () / () : 1 b = 2 b, T1 = T2

log 0.251 / log 0.02 = {- 1 b [0.131578947/ RT1] }/ {- 2 b [P2 / RT2] }

P2 = 0.37237866 Atm = 283 torr.

Problema Nro. 47. Se pasa por una solucin acuosa 1.0 x 10-3M de una sustancia dada en una celda de
10 cm de espesor, una luz de longitud de onda definida, absorbindose una fraccin de 0.20 de la luz
incidente. Calcular la concentracin de una solucin acuosa de la misma sustancia que, cuando se coloca
en aquella celda y se le pasa idntica luz, da un porcentaje de transmitancia de 10%.
Solucion.
1ra condicin
[C1] = 1.0 x 10-3M
e = 10 cm.

1.00
Paso 1. Primera condicin: 1.00 0.20 = 0.80
log T1 = - 1 b [C1]
log 0.8 = - 1(10 cm ) [1.0 x 10-3M]

1 = - 0.096910013/ - 10-2 = 9.6910013

2da condicin
[C2] = ?
%T = 10%
100%
T = 0. 10 10%

Paso 2. Segunda condicin:

log T2 = - 2 b [C2]

log 0.10 = - 9.6910013(10 cm) [C2]

[C2] = 1.03 x 10-2M

Problema Nro. 48. Se obtuvieron los siguientes datos de transmitancia para disoluciones acuosas de
oxihemoglobina (66,500 g/mol) de pH= 7, en =575 nm. Utilizando una cubeta de 1.00 cm.
[C] g/100mL 0.030 0.050 0.071 0.102
%T 53.5 35.1 22.5 12.3

1. Determine la recta por mnimos cuadrados.

2. Cual es el valor de la absortividad molar?
3. Determine la transmitancia de una disolucin cuya concentracin es 0.15 g/L
Solucin.
1. Calculo de los valores de absorbancia. A = -log T
[C] g/100mL 0.030 0.050 0.071 0.102
A 0.271 0.455 0.648 0.910
[( )( )]
2. Para determinar la recta de regresin empleamos las frmulas: = ( )2

a = , r= y = bx + a (Modulo I)
2 2

( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
0.030 0.271 -0.03325 -0.3 0.001106 0.09 0.009975
0.050 0.455 -0.01325 -0.116 0.000176 0.013456 0.001537
 0.071 0.648 0.00775 0.077 0.000060 0.005929 0.000597
0.102 0.910 0.03875 0.339 0.001502 0.114921 0.013136
0.253 2.284 0.002844 0.224306 0.025245
0.06325 0.571

[( )( )] 0.025245
= ( )2
= = 8.8766 a =0.571 8.8766*0.06325 = 0.0096
0.002844

y = 8.8766x + 0.0096

Figura Nro 242. Recta de regresin. Fuente: www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html -

En cach - Similares

8.8766 / 1 66500
2.1. La absortibidad molar con: = = = = 8,8766 dL/g.cm* =
1 10 1

59029.39 L/mol.cm
3. Determine la transmitancia de una disolucin cuya concentracin es 0.15 g/L
1
Con: A = aM bC A = 8.8766 1. 0.15 = 0.1331
. 10

Luego: T = 10-A = 10-0.1331= 0.736037 y el % T = 73.6037 %

Problema Nro. 49. El Al3+ puede determinarse mediante espectrometra de llama por su emisin a 396 nm.
Se prepararon seis disoluciones, cada una de 25 mL, a partir de otra de concentracin desconocida, a la
que se le aadieron cantidades especficas de este catin, midiendo a continuacin la intensidad emitida los
resultados son:
Al 3+(aadido)/mg 0 10 20 30 40 50
Intensidad/unidades 25 30 36 42 48 54

Determinar la concentracin de Al3+ en la muestra original.

Solucin:
( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
0 25 -25 -14.1667 625 200.6954 354.1675
10 30 -15 - 9.1667 225 84.02839 137.5005
20 36 - 5 - 3.1667 25 10.02799 15.8335
 30 42 5 2.8333 25 8.027589 14.1665
40 48 15 8.8333 225 78.02719 132.4995
50 54 25 14.8333 625 220.0268 370.8325
150 235 0.00020 1750 600.8334 1025.0000
25 39.1667

[( )( )] 1025
= ( )2
= = 0.5857 a =39.1667 0.5857*25 = -24.5238
1750

y = 0.5857x 24.5238

Figura Nro 243. Recta de regresin. Fuente: www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html -

En cach - Similares
24.5238
Con y = 0 tenemos que: x = = 41.87 mg.
0.5857

Problema Nro. 50. La furosemida, M = 330.7 g/mol, es un deuretico, derivado del cido antranlico, que se
administra en casos de hipertensin, enfermedades renales, cirrosis heptica, etc. En disolucin alcalina
presenta un espectro de absorcin con uno de los mximos centrados en 271 nm. Se analiz la cantidad de
furosemida de una tableta disolviendo su contenido en disolucin de NaOH 0.1 mol/L y enrasando a un
volumen total de 100 mL. Una parte de 1.00mL de esta disolucin se transfiri a un matraz de 50.0 mL,
enrasndose con el mismo disolvente. Esta disolucin dio un valor de absorbancia de 0.475 a 271 nm,
utilizando una cubeta de 1.00 cm de paso ptico.

Figura Nro.244. Espectro de absorcin de furosemida en disolucin acuosa.

Fuente: www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html - En cach - Similares
Aesta longitud de ondauna serie de disoluciones patrn de este frmaco dieron las siguientes medidasde
absorbancia, en cubeta de 1.00 cm:
105[C]molL-1 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00
A (= 271 nm) 0.197 0.395 0.590 0.790 0.985

Determinar la absortividad de este frmaco en estas condiciones.

Solucin. a = (3.22.).
( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
1.00 0.197 -2 -0.3944 4 0.155551 0.7888
2.00 0.395 -1 -0.1964 1 0.038573 0.1964
3.00 0.590 0 -0.0014 0 0.000002 0
4.00 0.790 1 0.1986 1 0.039442 0.1986
5.00 0.985 2 0.3936 4 0.154921 0.7872
15.00 2.957 0 10 0.388489 1.9710
3 0.5914

[( )( )] 1.9710
= ( )2
= = 0.1971 a =0.5914 0.1971*3 = 0.0001
10

y = 0.1971x + 0.0001

Figura Nro.245. Representacin grafica para furosemida en disolucin acuosa.

Fuente: www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html - En cach - Similares
Luego podemos calcular la absortividad de este frmaco en estas condiciones: Pendiente = m =
0.1971 1
0.1971Lmol-1, aM = = = 1.971x104Lmol-1.cm-1
1.00 1.00

Luego determinamos la cantidad de frmaco presente en la tableta expresada en mg, teniendo en cuenta el
factor de dilucin Fd= 50mL/1.00mL.
0.475
[1 ]= = = 2.409105 1
1.971104 1
50
[ ] = 2.409105 1 = 1.21103 1
1.00
330.7 1000
w = 1.21x10-3 . 100 = 40.0147= 40.0 mg.
1000 1 1

Problema Nro. 51. La riboflavina (C17H20N4O6,M= 376,4 g/mol) en disolucin acuosa puede determinarse
mediante la medida de la intensidad de fluorescencia, IF, a 520 nm previa excitacin con radiacin de 445
nm. Para disoluciones de este compuesto de distintas concentraciones se obtuvieron los siguientes
resultados:
[C]/1 2.0 6.0 10.0
IF/unidades 3.82 11.4 19.0

Una muestra comercial se analiz para la determinacin de su contenido en riboflavina. Una parte de
10.0mL se trat convenientemente enrasndose despus hasta un volumen total de 25.0 mL. La medida de
la fluorescencia dio un valor de IF = 17 unidades, realizada en las mismas condiciones que con los datos de
la tabla. Determinar el contenido de riboflavina en la muestra, expresndolo en mg/L.

[( )( )]
Solucin. = ( )2
a = y = bx + a

( ) ( ) ( )2 ( )2 ( )( )
2.00 3.82 -4 -7.5867 16 57.558017 30.3468
6.00 11.4 0 -0.0067 0 0.0000449 0
10.00 19.0 4 7.5933 16 57.658205 30.3732
18.00 34.22
6 11.4067 -0.0001 32 115.216267 60.720

60.72
= = 1.8975, a =11.4067 1.8975*6 = 0.0217
32

y = 1.8975x + 0.0217

Figura Nro.246. Intensidad de fluorescencia de las disoluciones de riboflavina frente a la concentracin.

Fuente: www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html .

1. De la recta de calibrada figura Nro.xxx se tiene que la intensidadde fluorescencia es linealmente

aceptable frente a la concentracin en el margen analizado. Donde IF = K[C] siendo la constante de

proporcionalidad: K = 1.8975
1

2. La muestra comercial, de concentracin desconocida, [ ] se diluyo hasta la concentracin [C1] cuya

fluorescencia es de IF =17 unidades, es decir:
17 10
[C1]= = 8.9592 = [Co]*fd = [Co] x ,
1.8975 25
1

1 376 1000
[Co]= 22.25 x = 8.366 mg/L, respuesta de la concentracin de la muestra original.
106 1 1

Problema Nro. 52.

a. Indique el valor de absorbancia correspondiente a un valor de T = 45.0%.
b. Si una disolucin de concentracin 0.0100 M tiene una T= 45.0% a una longitud de onda dada. Cul
ser el valor de transmitancia que corresponde a una disolucin0.0200M de la misma sustancia?
Solucin. Formulas: T = I/Io, A= -log T, A= aM b [C]
1. A = = -log T = -log 0.45 =0.346787
1 2
2. Datos. [C1] = 0.0100M, T1 = 45.0%, T2 =? , [C2] = 0.0200M; = aM b=
[C1] [C2]
1 2 0.0200
= , A2 = 0.346787x = 0.693574
[C1] [C2] 0.0100

T = 10-A = 10-0.693574 = 0.2025 Luego: T = 20.25%

Problema Nro. 53. Se toman 15 mg de un compuesto cuya masa molar es 384.63 g.mol-1. Para formar 5
mL de disolucin. Posteriormente, se toma una alcuota de 1.00 mL. De dicha disolucin para diluirla en un
matraz aforado de 10 mL. Hasta el enrase.
a. Halle la concentracin de la muestra en el matraz de 5 mL.
b. Determine la concentracin de la sustancia en el matraz de 10 mL.
c. La muestra de 10 mL. Se coloca en una celda de b= 0.5000 cm obtenindose una absorbancia de 0.634 a
495 nm. Determine el valor de la absortividad molar de la sustancia a dicha longitud de onda.
#
Solucin: Formulas: T = I/Io, A= -log T, A= aM b [C], M= =

15103
a. M= = = 7.799704x10-3M
384.63 1 5103

b. moles iniciales = moles finales, MiVi = MfVf, MI = 7.799704, VI = 1Ml, Vf = 10 mL.

7.799704103 1
M2 = = 7.7997x10-4M
10
0.634
c. aM = = = 1625.70M-1cm-1
[] 0.50007.7997104

Problema Nro. 54. El amonaco puede ser determinado espectrofotomtricamente mediante su reaccin
con fenol en presencia de hipoclorito, dando lugar a una sustancia de color azul que tiene su absorcin
mxima a 625 nm. Una muestra de 4.37 mg de protena se digiere qumicamente para convertir en
amonaco todo el nitrgeno presente, y al final del tratamiento el volumen de la muestra es de 100.00
mL. Una alcuota de 10.00 mL de esta disolucin se trata con 5.00 mL de fenol y 2 mL de hipoclorito de
sodio, y la muestra se diluye a 50 mL, midindose su absorbancia a 625 nm en una celda de 1.00 cm de
espesor despus de 30 minutos. Se prepara tambin una disolucin de referencia patrn con 1.00 x 10
-2
g de cloruro de amonio disueltos en un litro de agua; una alcuota de 10 mL de esta disolucin patrn
se trata de la misma manera que la disolucin problema. El blanco se prepara usando agua destilada en
lugar del problema.
-1
PM (NH4Cl) = 53.50 g.mol
-1
PA (N) = 14.006 g.mol

Muestra A625nm
Blanco 0.140
Referencia 0.308
Problema 0.582
a. Calcule la absortibidad molar del producto azul.
b. Calcule el porcentaje en masa de nitrgeno en la protena.
Solucin.
1. Concentracin de la solucin patrn NH4Cl:
1.00102
M NH4Cl = = 1.869159x10-4M y el volumen es: V NH4Cl= 1000 mL.
53.50 1 1

Se toma una alcuota de 10 mL y se afora a 50 mL igual que la muestra por lo que tenemos que saber cual
es la concentracin M2 NH4Cl de esta solucin de reaccin de color:
V1 NH4Cl= 10 Ml, M1 NH4Cl = 1.869159x10-4M, V2 NH4Cl= 50 mL, M2 NH4Cl = ?
101.869159104
M2 NH4Cl = = 3.738318x10-5M
50

2. Luego (a) la absortividad molar del producto azul es:

ACorregida = AReferencia ABlanco = aM b. [C]
0.3080.140
aM = = = 4493.9997M-1cm-1
.[] 1.003.738318105

3. Ahora calculamos la concentracin del problema en 50 mL.

0.5820.140
[C]problema en 50mL = = = 9.835337x10-5 M
1.004493.9997 1 1

4. Seguimos con el clculo de la concentracin de 10 mL.

9.835337105 50
[C]problema en 10mL = = 4.9176685x10-4M
10

5. En un mol de NH3 existe 1 mol de N por lo tanto los moles y peso de nitrgeno son:
nN = 4.9176685x10-4 M*0.100L = 4.9176685x10-5 moles de N.
wN = 4.9176685x10-5 molesx14.006 gmol-1 = 6.887686 x 10-4 g
6.887686104 100
%N = = 15.76% de nitrgeno en la protena.
4.37103

Problema Nro. 55. El in cobre (I) forma un complejo coloreado con la neocuprena el cual presenta un
mximo de absorbancia a 454 nm. Dicho complejo puede extraerse con alcohol isoamlico, el cual no es
soluble en agua. Suponga que aplica el siguiente procedimiento: 1) una roca que contiene cobre se
pulveriza y los metales se extraen con un cido fuerte. La disolucin cida se neutraliza con una
base, y la disolucin resultante se lleva a 250 mL. 2) una alcuota de 10 mL de la misma se trata con
10 mL de agente reductor para pasar todo el cobre a in cuproso, agregndose 10 mL de buffer para
mantener el pH en un valor adecuado para la formacin del complejo. 3) Se toman 15 mL de esta
disolucin, se agregan 10 mL de neocuprena y 20 mL de alcohol isoamlico. Luego de agitar
fuertemente, las dos fases se separan y el complejo de cobre est en su totalidad en la fase
orgnica. Se mide la absorbancia de la fase orgnica a 454 nm en una celda de 1.00 cm. El blanco
preparado presenta una absorbancia de 0.056.
a. Si la muestra de roca tiene un miligramo de cobre, cul es la concentracin del mismo presente
en la fase orgnica?

3 -1 -1
b. Si = 7.90 x 10 M .cm para el complejo, cul ser el valor de absorbancia medido?

c. Si se analiza una roca diferente y se obtiene una absorbancia no corregida de 0.874 Cuntos
miligramos de cobre hay en la roca?
 -1
PA (Cu) = 63.546 g.mol
= aM
Solucin. Frmula A= aM b [C],
1. (a). Procedimiento: 1 mg de Cu en 250 mL de disolucin (1) M 1 V1 =M2 V2
2. De (1) se toman 10 mL y se llevan a 30 mL, disolucin (2)
3. De (2) se toman 15 mL y el complejo se extrae totalmente en los 20 mL, de fase orgnica.
250mL ------- 1 mg
10 mL ------- x = 0.04 mg
30 mL -------- 0.04 mg
15 mL -------- y = 0.02 mg.
4. Estos 0.02 mg de cobre se encuentran disueltos en los 20mL, de la fase orgsnica, por lo tanto la [Cu]
calculamos de la manera siguiente:
2105
= = 1.57663 x 10-5M. [Cu] en la fase orgnica.
63.546 1 20103

5. (b). Ablanco = 0.056 Luego:

3 -1 -1
Acorregida = aM.b. [Cu] = 7.90 x 10 M .cm x 1.00 cm x1.57663 x 10-5M = 0.1246
Amedida = Ablanco + Acorregida = 0.056 + 0.124 = 0.180

6. (c) calculo de mg de cobre en la roca: Acorregida = Amedida Ablanco = 0.874 0.056 = 0.818
7. Concentracin de Cu en la fase orgnica:
0.818
[CCu fase orgnica] = = = 1.035443x10-4M
. 7.90103 1 1 1.00

m Cu en la fase orgnica = 1.035443x10-4 20103 63.546 1 = 1.315965x10-4g

8. Esta masa de cobre disuelta en la fase orgnica provino de la extraccin realizada a partir de los 15 ml de
la disolucin (2).
15 mL ------- 1.315965 x 10-4g
30 mL ------- z = 2.631930 x 10-4g
9. Esta masa de cobre provino de la alcuota de 10 mL de la disolucin (1):
10 mL ------- 2.631930 x 10-4g
250 mL ------ w = 6.579825 x 10-3g = (6.58 mg)

Problema Nro. 56. El in nitrito se emplea como conservador para el tocino y otros alimentos, generndose
una controversia con relacin a su potencial efecto carcinognico. En una determinacin
espectrofotomtrica de nitrito, se llevan a cabo una serie de reacciones que concluyen con la formacin
de un producto coloreado con absorbancia mxima a 520 nm. El procedimiento seguido para desarrollar
color puede abreviarse de la siguiente manera:
1) a 50.00 mL de la disolucin problema que contiene nitrito, se le agrega 1.00 mL de disolucin de cido
sulfamlico (reaccin 1:1).
2) luego de 10 minutos, se agregan 2.00 mL de disolucin de 1- aminonaftaleno (reaccin 1:1) y 1.00 mL de
disolucin buffer.
3) 15 minutos ms tarde, se lee la absorbancia a 520 nm en una celda de b = 5.00 cm.
Con esta tcnica se analizan 3 soluciones:

Dilucin Volumen y caractersticas A520

A 50mL de extracto de alimento con cantidad 0.153
despreciable de nitritos
B 50 mL de extracto de alimentos del que se 0.622
sospecha tiene nitritos
C Idem que B, con el agregado de 10L de disolucin 0.967
de NaNO2 7.50X10-3M

a. Calcule la absortividad molar del producto coloreado.

b. Cuntos microgramos de nitrito estn presentes en los 50.0 mL del extracto de alimento B?
- -1
PM (NO2 ) = 46.004 g.mol
Solucin. Frmula A= aM b [C],
1. La disolucin A puede considerarse como la disolucin blanco a los efectos de corregir los valores de
absorbancia medidos:

Disolucin B: AB corregida = 0,622 0,153 = 0,469

Disolucin C: AC corregida = 0,967 0,153 = 0,814

Las absorbancias son aditivas, por lo tanto:

AC = AB + ANaNO2 patrn
2. Calculamos el coeficiente de absortividad molar del producto coloreado.
0.814 = 0.469 + xbx [CNaNO2 patrn]
2
0.814 = 0.469 + xbx [ ]

0.345 .(++++.)
= = = 49689.2 M-1cm-1
2 .

3. Luego calculamos la cantidad de nitrito presente en los 50 mL de extracto del alimento B. Empleemos

las ecuaciones: A = xbx [CNaNO2 extracto] = xbx [ ], despejamos n (moles)

0.469(50+1+2+1)103
Moles de nitrito en B: (2 )1 = = 1.019376x10-7 moles
49689.2 1 1 5

2 = 1.019376107 46.004 1 = 4.689537x10-6 g (4.69)

Problema Nro. 57. El anlisis espectrofotomtrico de fosfatos puede realizarse mediante el siguiente
procedimiento:

1. Se coloca la muestra en un matraz aforado de 5 mL y se agregan 0.500 mL de disolucin de molibdato

de sodio y cido sulfrico y 0.200 mL de disolucin de sulfato de hidrazina, y se diluye casi hasta el enrase
con agua destilada.

2. La disolucin diluida se calienta 10 minutos a 100 C, formndose un compuesto azul (cido 1,2
molibdofosfrico).
3. Se enfra el matraz, se enrasa con agua destilada y se mide la absorbancia de la disolucin resultante a
830 nm empleando una celda de 1.00 cm.

-1
a. Al analizar 0.140 mL de disolucin patrn de fosfato KH2PO4 (PM 136.09 g.mol ) preparada por
disolucin de 81.37 mg del mismo en 500.00 mL de agua, se obtiene una absorbancia de 0.829. Un blanco
preparado en forma idntica tiene absorbancia 0.017. Halle la absortividad molar del producto
coloreado.

b. 0.300 mL de disolucin de ferritina (protena almacenadora de hierro que contiene fosfato) obtenidos por
digestin de 1.35 mg de protena en 1.00 mL de solvente se analiza con este procedimiento, obtenindose
una absorbancia de 0.836. El blanco da una absorbancia de 0.038. Halle el porcentaje en masa de
fosfato en la ferritina.

3- -1
PM (PO4 ) = 94.972 g.mol
Solucin. Formula: ACorregida = AReferencia ABlanco = aM b. [C]

1. (a) Clculo de la absortividad molar del producto coloreado. M1 V1 =Mf Vf

81.37103
[KH2PO4 ] 1 = = 1.19582629x10-3 M
136.09 1 0.500

M1 V1 1.19582629103 .
[KH2PO4 ] f = = = 3.3483136x10-5M

ACorregida = AMedida ABlanco = 0.829 0.017 = 0.812

0.812
aM = = = = 24250.99M-1cm-1
[KH2 PO4 ] f 1.003.348316105

2. (b) A este nivel calculamos la concentracin:

ACorregida = AMedida ABlanco = 0.836 0.038 = 0.798

0.798
[43 ]En ferritina en 5mL = = = 3.290587x10-5M
1.0024250.99 1 1

43 = 3.290587x10-5Mx5 x10-3Lx 94.973gmol-1 = 1.562585x10-5g

1.35 mg de ferritina ------- 100%
0.01562585 mg de 43 ------- x= 1.1575 = 1.16% en masa de fosfato en ferritina.
Problema Nro. 58. La absorbancia de nitrato de cobalto [Co (NO3)2] y nitrato de cromo [Cr(NO3)3] son
aditivas sobre el espectro visible. Se decide analizar una disolucin que contiene ambos compuestos. Para
ello se escoge dos longitudes de onda: 400 y 505 nm y se emplea una celda de 1 cm para el ensayo. Los
resultados son los siguientes:
A 400 = 1.167
A 505 = 0.674
 2+ 3+
400 0.530 15.2
505
5.070 5.60

Calcule las concentraciones de cromo y cobalto en la mezcla problema.

Solucin. Frmula A= aM b [C]
Planteamos las ecuaciones y luego reemplazando valores:
400 = (2+400) + ( 3+400)

505 = (2+505) + ( 3+505)

400 = 2+ 400 x 1x [2+ ] + 2+400 x1x[ 2+ ]

505 = 2+ 505 x 1x [2+ ] + 2+505 x1x[ 2+ ]
1.1670.530[2+ ]
( ) 1.167 = 0.530x1x [2+ ] + 15.2x1x [ 2+ ], Despejando: [ 2+ ] =
15.2

( ) 0.674 = 5.07x1x [2+ ] + 5.60x1x [ 2+ ]

1.1670.530[2+ ]
( ) En ( ) 0.674 = 5.07x1x [2+ ] + 5.60x1x ( )
15.2

[2+ ] = 5.01x10-2M
[ 2+ ] = 7.50X10-2M

Problema Nro. 59. Se desea analizar una muestra que contiene los analitos A y B. En el laboratorio se
dispone de disoluciones patrn de ambos analitos de concentraciones exactamente conocidas. Luego de un
proceso de preparacin para el anlisis en que la muestra es diluida al dcimo, 1 mL de la misma se
mide a 425 nm y a 580 nm en una cubeta de 1.00 cm de camino ptico, obtenindose los datos de la tabla
I. Los estndares de laboratorio se someten al mismo procedimiento. Los resultados obtenidos aparecen en
la tabla II. Determine la concentracin de A y B en la muestra.
Tabla I
Longitud de onda Absorbancia
425nm 0.095
580nm 0.301

Tabla II
Analito Molaridad(M) Longitud de onda Absorbancia
A 0.0992 425nm 0.545
B 0.1023 425nm 0.227
580nm 0.823

Solucin: Frmula: A= aM b [C],

1. En primer lugar, a partir de los datos de la Tabla II, se deben calcular los valores de las absortibidades
molares de A y de B a 425 y 580 nm.
 A425nmA 0.545
425nmA = = =5.493952M-1cm-1
b[CA ] 1.00cmx0.0992M
A425nmB 0.227
425nmB = = =2.218964M-1cm-1
b[CB ] 1.00cmx0.1023M
A580nmA 0.125
580nmA = = =1.260081M-1cm-1
b[CA ] 1.00cmx0.0992M
A580nmB 0.823
580nmB = = =8.044966M-1cm-1
b[CB ] 1.00cmx0.1023M

425 = 425 + 425

580 = 580 + 580

425 = 425 x 1x [ ] + 425 x1x[ ]

580 = 580 x 1x [ ] + 580 x1x[ ]
1.1670.530[ ]
() 0.095 = 5.493952 x1x [ ] + 2.218964x1x [ ], Despejando: [ ] =
15.2

() 0.301 = 1.260081x1x [ ] + 8.044966x1x [ ]

1.1670.530[ ]
( ) En ( ) 0.301 = 1.260081x1x [ ] + 8.044966x1x ( )
15.2

[ ] = 2.327478x10-3M
[ ] = 3.705015x10-3M
2. Finalmente calculamos las concentraciones en la muestra original ya que estas concentraciones que se
han encontrado estn al decimo molar:
1
[ ] = 2.327478x10-3Mx = 2.327478 x 10-2M
0.10
1
[ ] = 3.705015x10-3Mx = 3.705015x 10-2M
0.10
-1 -1
Problema Nro. 60. La transferrina (PM 81000 g.mol ) y la desferrioxamina B (PM 650 g.mol ) son
3+
compuestos incoloros capaces de unirse al Fe formando complejos coloreados en relacin 1:2 y 1:1 con
longitudes de onda mximas de absorcin a 470 nm y 428 nm respectivamente. La absortividad molar de
estos dos compuestos formando complejos con hierro viene dada a dos longitudes de onda diferentes:

[M-1cm-1]
() Transferrina-2 Fe(III) Desferrioxamina-Fe(III)
428 3540 2730
470 4170 2290

a. Una disolucin de transferrina presenta absorbancia de 0.463 a 470 nm en una celda de 1.00 cm. Calcule
-1 -1
la concentracin de transferrina en mg.mL y la de hierro en g.mL .

b. Poco tiempo despus de agregar desferrioxamina (la cual diluye la muestra) la absorbancia a 470 nm es
de 0.424 y a 428 nm es de 0.401. Calcule el porcentaje de hierro que se halla complejado con transferrina y
desferrioxiamina.
-
PA (Fe) = 55.847 g.mol 1
Solucin:
Frmula: A= aM b [C]
0.463
1. (a). [C]complejo = = = 1.110312x10-4 M.
41701 1 1.00
1 mol de complejo contiene 1 mol de trasferrina, por lo tanto: 1.110312x10 -4moles de transferrina por L de
disolucin.
[C] = 1.110312X10-4molesx81000g.mol-1= 8.993525 g/L = 8.993525 mg.mL-1
1 mol complejo contiene 2 moles de hierro, por lo que se duplica:
[C] = 2(1.110312X10-4moles) x55.847g.mol-1= 1.240152x10-2 g/L = 12.40152 g.mL-1
2. (b) transferrina y desferrioxiamina
470 = 470 + 470
428 = 428 + 428
470 = 470 x1x[ ]+ 470 x1x[ ]
428 = 428 x1x[ ]+ 428 x1x[ ]

() 0.424 = 4170x1x [ ]+ 2290x1x [ ]

() 0.401 = 3540x1x [ ]+ 2730x1x [ ]
0.4244170[ ]
[ ] =
2290
0.4244170[ ]
() en () ) 0.401 = 3540[ ]+ 2730( )
2290

[ ] = 7.299171x10-5M
[ ] = 5.223780x10-5M

3. 1 mol del complejo transferrina-hierro contiene 2 moles de hierro, por lo tanto:

1 mol del complejo transferrina-hierro contiene 2 moles de hierro, por lo tanto:
n1 = 2(7.299171x10-5) = 1.4598342x10-4 moles por L de disolucin.
1 mol del complejo desferrioxiamina-hierro contiene 1 mol de hierro, por lo tanto:
n2 = 5.223780x10-5 moles de hierro por L de disolucin
moles nt de hierro totales en 1 litro (L) de disolucin:
nt =( n1 + n2) = 2(7.299171x10-5) moles +5.223780x10-5 moles = 1.982212x10-4 moles totales.

1.982212x10-4 moles------ 100%

1.4598342x10-4 moles---- x = 73.65%dr hierro transferrina.

1.982212x10-4 moles------ 100%

5.223780x10-5 moles------ y = 26.35 de hierro complejado con desferrioxamina.

-
Problema Nro. 61. Los espectros mostrados en la figura Nro. 247 corresponden a disoluciones de MnO4
-4 2- -4
1.00 x 10 M, Cr2O7 1.00 x 10 M y una mezcla de ambos de composicin desconocida.
 Figura Nro.247. Espectros de diluciones del permanganato y dicromato. Fuente:www.scribd.com/.../Ejercicios-
de-quimica-analitica-con-resolucion

En la tabla se muestran las absorbancias obtenidas a diferentes longitudes de onda, halle la concentracin
de cada especie en la mezcla.

(nm) MnO4- patrn Cr2O7= patrn Mezcla

266 0.042 0.410 0.766

288 0.082 0.283 0.571
320 0.168 0.158 0.422
350 0.125 0.318 0.672
360 0.056 0.181 0.366

Solucin. Frmula: A= aM b [C].

Los espectros de la figura presentan una superposicin importante. Este hecho modifica el anlisis que
debe llevarse a cabo para calcular la concentracin de ambos iones en la mezcla.

1. A cualquier longitud de onda: () = MnO4 x bx [4 ] + 27= xbx[27= ]

2. En este caso particular, se debe partir de dos disoluciones patrn de ambos iones.
MnO
MnO4 = MnO4 x b x [1.00x104 ], despejando: MnO4 = 4
1.00x104

=
27= = 2 7= x b x [1.00x104 ], despejando: b27= = 2 7
1.00x104

MnO =
Sustituyendo en (): = 4
[4 ] + 2 7
[27= ] ()
1.00x104 1.00x104

3. Dividiendo entre: MnO4 ()

[ = ] = [ ]
2 7 2 7 4
= + [y = mx ]
MnO 1.00x104 MnO 1.00x104
4 4

y = m x + b
4. Se debe medir a diferentes longitudes de onda los valores de absorbancia de la ecuacin anterior. A
partir de la pendiente (m), se obtiene la concentracin de dicromato en la mezcla desconocida. A partir de
la ordenada en el origen (b), se obtiene la concentracin de permanganato.

(nm) MnO4- patrn Cr2O7= Mezcla

patrn
266 0.042 0.410 0.766
288 0.082 0.283 0.571
320 0.168 0.158 0.422
350 0.125 0.318 0.672
360 0.056 0.181 0.366

27= 2
= =
MnO4 MnO4

18.2381 9.7619 95.2947 178.0385

6.9634 3.4512 11.9108 24.0321
2.5119 0.9405 0.8845 2.3624
5.3760 2.5440 6.4719 13.6765
6.5357 3.2321 10.4465 21.1240
39.6251 19.9297 125.0084 239.2335

5. A partir del mtodo de los mnimos cuadrados con los datos tabulados, se obtiene:

D = (2 ) [ ]2 = (125.0084) x5 [19.9297]2 = 227.849

[ ] [ ] 239.2335519.929739.6251 406.4511
m= = = = 1.783862
227.849 227.849

[ = ]
2 7
m = 1.783862 = ; [2 7= ] = 1.783862 x 10-4 M
1.00x104

[( 2 )( ) ( )( )] [125.008439.6251239.233519.9297]
b= = = 0.814656
227.849

[ ]
0.814656 = 4
; [4 ] = 8.14656 x 105 M.
1.00x104

Problema Nro. 62. Los espectros infrarrojos (IR) suelen registrarse en trminos de porcentaje de
transmitancia de forma que tanto las bandas dbiles como las fuertes caigan dentro de escala. En la
-1
siguiente figura se muestra el espectro IR de los compuestos A y B en una regin prxima a los 2000 cm .
Note que la absorcin corresponde a un pico hacia abajo en este caso. Los espectros fueron tomados
usando celdas de 0.00500 cm de espesor y una disolucin 0.0100 M de cada compuesto. Una mezcla de A
-1 -1
y B de composicin desconocida produce una transmitancia de 34 % a 2022 cm y de 38.3 % a 1993 cm
empleando la misma celda. Encuentre las concentraciones de A y B.

Figura Nro.248. Espectros de sustancias Ay B. Fuente:www.scribd.com/.../Ejercicios-de-quimica-analitica-

con-resolucion -

Compuestos 2022 = (nm) 1993 = (nm)

A pura 31.0 %T 79.7%T
B pura 97.4%T 20.0%T

Solucin. Frmula: A= aM b [C], A = -log T

1. En este caso los espectros de las dos sustancias estn bien definidos por lo que anlisis de sus
concentraciones en la mezcla se encuentra aplicando las frmulas: dadas.

Compuesto Nmero de onda Nmero de onda A = -log T A = -log T

2022 (cm-1) 1993 (cm-1) A2022 A1993

A pura 31.0 %T 79.7%T 0.508638 0.098542
B pura 97.4%T 20.0%T 0.011441 0.698970
Mezcla 34.0%T 38.3%T 0.468521 0.416801

2. A partir de los datos de la Tabla, se deben calcular los valores de las absortibidades molares de A y de B
a 2022 y 580 nm.
20221 0.509
a 20221 = = = 10180M-1cm-1
[ ] 0.005000.0100
19931 0.099
a 19931 = = = 1980M-1cm-1
[ ] 0.005000.0100
20221 0.011
a 20221 = = = 220M-1cm-1
[ ] 0.005000.0100
 20221 0.699
a 20221 = = = 13980M-1cm-1
[ ] 0.005000.0100

3. Clculo de las absorbancias de las mezclas:

20221 = 20221 + 20221
19931 = 19931 + 19931
20221 = 20221 x 0.00500 x [CA ] + 20221 x 0.00500 x [CB ]
19931 = 19931 x 0.00500 x [CA ] + 19931 x 0.00500 x [CB ]
0.46950.9[ ]
( ) 0.469 = 10180x0.00500x[CA ] + 220x0.00500[CB ], [CB ] =
1.1

() 0.417 = 1980x0.00500x[CA ] + 13980x0.00500[CB ]

( ) en ():
0.46950.9[ ]
0.417 = 9.9 [CA ] + 69.9[ ]
1.1

[CA ] = 9.113115x103 M
[B] = 4.674969x103 M

3.15. Manejo del spectronic 63. Son instrumentos que se han empleado con el propsito de realizar:

1. Anlisis cualitativo, la identificacin de compuestos, orgnicos e inorgnicos

2. Analisis cuantitativo, medida de concentraciones, orgnica e inorgnica

Figura Nro. 249. Diagrama objetivo de un espectrofotmetro. Fuente.

www.uam.es/personal_pas/patricio/.../instrumentacion2.pdf

Secuencia a seguir en el laboratorio.

Completar: Segn la visualizacin indicada del spectronic 20.
Spectronic 20.

Paso 1

Paso 2
Paso 3

Paso 4
 4

Paso 5.
 5

3.16. Mdulos experimentales de laboratorio.

Figura Nro. 250. Representacin del espectro visible como parte del espectro electromagntico. Fuente.
www.uam.es/personal_pas/patricio/.../instrumentacion2.pdf

Prctica N 1.Trabajar con blanco

Fundamentacin
Objetivos
Reactivos, materiales y equipos
Mtodo operatorio.

Para medir la absorbancia de una sustancia en particular en una mezcla, es necesario "calibrar a cien" el
espectrofotmetro de tal forma que solo la absorbancia de la sustancia de inters sea leda, es decir que
solamente sea tomada en cuenta por el detector la absorbancia correspondiente al (los) metabolito (s)
presente en la celda o cubeta. Esto se consigue con un Blanco de reactivo(s), una cubeta que contiene
todos los reactivos excepto la sustancia de inters. Algunas tcnicas requieren que el proceso de
calibracin a "100" se realice con blanco de agua (agua destilada) o con aire (sin celda).

Spectronic 21D Digital (UV-

Paso Spectronic 20 Analgico Vis
Vis)
1. Encender el Spec 20/21D y
permitir calentamiento por 5 - 10
minutos. Fijar la longitud de
Onda con la perilla en panel.

Panel Trasero

2. Seleccionar la longitud de
onda en que se habr de
realizar la determinacin UV-
Vis-IR.

4. Preparar un BLANCO Un BLANCO es usado para calibrar el Spec 20/21D para que la
adicionando los reactivos, absorbancia atribuible a los reactivos no sea tomada en cuenta.
EXCEPTO la sustancia a ser Ajustando a 100 el Spec con el blanco, mediremos solo
medida. la absorbancia debida a la(s) sustancia(s) de interes.

5. Sin tubo en el compartimento

de celdas, o con un cuerpo
obscuro (didimo) ajusta la
absorbancia a (= 0%
transmitancia) usando la perilla
de ajuste correspondiente. En
este paso se cierra el paso de
luz a travs del compartimento
de insercin de la celda.

6. Usando un pauelo
adecuado, limpia las paredes
externas del tubo BLANCO para
remover huellas de grasa u
otros contaminantes.
Inserta el tubo dentro del
compartimiento y cierra la tapa.

7. Usando la perilla
correspondiente, ajuste la
escala en 0.0 (= 100 %
transmitancia). Este paso se
denomina ajustar "Escala
Completa" o ajustar a 100.
El Espectrofotmetro est ahora calibrado con el BLANCO. Si tu
experimento involucra mltiples tubos de reaccin, cada uno
necesitar su propio BLANCO, y el Spec 20 debe ser calibrado a "0".
8. Retira el BLANCO e inserte la
celda conteniendo la muestra
(puede ser el estndard). Cerrar
la tapa y leer en la escala
analgica o digital la
absorbancia.

9. Repetir lectura para el resto

de las muestras usando el
mismo blanco o cambiandolo si
se efectuar lectura de otro
experimento o serie de tubos.
NOTA: En ocasiones es necesario recalibrar si se trabaja con mltiples
lecturas a la misma longitud de onda, es OBLIGATORIO calibrar cada vez
que se desea efectuar mediciones a diferentes longitudes de onda.

Preparacin de soluciones y aplicacin de la ley de Lambert-Beer.

1. CuSO4.5H2O

a. Cada grupo prepara una solucin de 100 mL de una solucin madre de CuSO4.5H2O (sulfato cprico
pentahidratado) de concentracin 20% m/v.
b. A partir de la solucin madre cada grupo prepara 4 soluciones ms diluidas que la anterior de acuerdo
con los clculos realizados en la primera clase de introduccin a los mtodos instrumentales preparacin de
soluciones para obtener soluciones 0,5ppm, 1,0ppm, 1,5ppm y 2,0ppm.

c. Se realiza un barrido espectral con la solucin 2,0ppm para medir la absorbancia entre 350 nm y 850 nm,
con un incremento de 50 nm. Para cada longitud de onda se calibra el cero de absorbancia con agua
destilada. Una vez obtenido el valor de la longitud de onda a la cual la absorbancia es mxima disminuir el
incremento desde 50 a 10 en el entorno del valor anterior.
d. Graficar absorbancia vs longitud de onda y determinar la a la cual la absorbancia es mxima.
e. Con la obtenida del grfico se realiza una curva de calibracin con las soluciones preparadas en el
punto b).
f. Graficar Absorbancia vs Concentracin. Interpolando, determinar la concentracin de una solucin
incgnita que les ser entregada por los tutores.
g. Realizar un anlisis de errores de las mediciones hechas por todos los grupos y expresar cada medida en
funcin de los ensayos estadsticos y anlisis de errores, correctamente del mdulo I.

2. K2Cr2O7

a. A partir de una solucin de dicromato de potasio (K2Cr2O7) de 0,17 M, cada grupo prepara cuatro
soluciones mas diluidas de concentraciones 1,7 x 10-4 M; 1,275 x 10-4 M, 8,5 x 10-5 M y 4,25 x 10-5 M.
b. Se realiza un barrido espectral con la solucin 1,7 x 10-4 M para medir la absorbancia entre 350 nm y 850
nm, con un incremento de 50 nm. Para cada longitud de onda se calibra el cero de absorbancia con
agua destilada. Una vez obtenido el valor de la longitud de onda a la cual la absorbancia es mxima
disminuir el incremento desde 50 a 10 en el entorno del valor anterior.
c. Graficar absorbancia vs longitud de onda y determinar la a la cual la absorbancia es mxima.
d. Con la obtenida del grfico se realiza una curva de calibracin con las soluciones preparadas en el
punto a.
e. Graficar Absorbancia vs Concentracin. Interpolando, determinar la concentracin de una solucin
incgnita que les ser entregada por los tutores.
f. Realizar un anlisis de errores en funcin de los ensayos estadsticos correctamente
de las mediciones hechas por todos los grupos y expresar cada medida correctamente como el caso
anterior.

Clculos y resultados

Prctica N 2. Determinacin espectrofluorimtrica de quinina en agua tnica.

Fundamentacin
Objetivos
Reactivos, materiales y equipos

- Espectrofluormetro
- Matraces de 25 ml.
- Pipetas graduadas.
- Vaso precipitado.
- Agitador magntico con ncleo.

Productos

- Agua tnica
- H2SO4
- Bisulfato de quinina

Mtodo operatorio.

1. Preparar disoluciones de 100, 200, 300, 400 y 500 ppb a partir de una disolucin de sulfato de quinina de
2.5 ppm y enrasar a 25 ml con H2SO4 0.1 N.
2. Registrar los espectros de excitacin y emisin de una de las muestras y medir la intensidad de
fluorescencia a 350 nm de excitacin y 450 nm de emisin de todas ellas para construir la recta de
calibrado.
3. Pasar el contenido de un agua tnica a un vaso de precipitado y agitar vigorosamente a temperatura
ambiente durante 10 minutos.
4. Tomar 1.0 ml y aadir la cantidad necesaria de H2SO4 concentrado (36 N) para que en un volumen final
de 250 ml sea 0.1 N.
5. Registrar los espectros de excitacin y emisin, comprobando que en estas condiciones la fluorescencia
del agua tnica es debida nicamente a la quinina.
6. Medir la fluorescencia a 350 nm de excitacin y 450 nm de emisin calculando la concentracin de
quinina en el agua tnica a partir de la recta de calibrado.

Clculos.

Practica Nro. 2. Determinacin de las concentraciones de una mezcla de permanganato y bicromato

en una solucin. (Espectrofotometra Ultravioleta Visible)

Fundamentacin
Objetivos
Ilustrar sobre los principios de la fotometra, las formas de operacin prctica de los equipos, las
caractersticas de absorcin de la luz por soluciones y sus aplicaciones cuantitativas.

Reactivos, materiales y equipos

Solucin de bicromato de potasio 0.1M

Solucin de permanganato de potasio 3.0 x 10-3M

Solucin de cido sulfrico al 15% v/v.

Mtodo operatorio.
1. Operacin del espectrofotmetro
Encienda el espectrofotmetro, automticamente el equipo realizar una serie de controles o chequeos de
inicializacin. Luego, de acuerdo al equipo que usted utilice, el docente a cargo le explicar el modo de
operacin del mismo.
2. Determinacin de espectros de absorcin
Seleccione el modo ABSORBANCIA y luego una longitud de onda inicial de 340 nm (GO TO WL). Coloque
la cubeta con agua destilada o solucin blanco en el sitio de lectura, cierre la tapa del compartimento de
muestra y presione la tecla de auto cero (usar siempre la misma cubeta y en la misma posicin). El equipo
mostrar en la pantalla una lectura de 0 de absorbancia.
Coloque la solucin de K2Cr2O7 6.0x10-4M en la cubeta hasta aproximadamente 4/5 partes de su volumen.
Registre la absorbancia indicada en el visor una vez que la lectura se ha estabilizado.
Seleccione las siguientes longitudes de onda y determine los valores de Absorbancia.
Para cada nuevo valor de longitud de onda se debe ajustar el 0 de Absorbancia segn lo indicado
anteriormente.

340 350 370 380 390 400 410 420 425 430 435 440 445 450 455 460 465
470 475 480 490 500 510 520 525 530 535 540 545 550 555 560 570 580
590 600 610 620 630 nm.
Repita el mismo procedimiento para una solucin de KMnO4 1.8x10-4M

Represente en un mismo grfico, absorbancia vs. Longitud de onda para las soluciones de KMnO 4 y
K2Cr2O7.

Los equipos actuales pueden realizar los espectros de absorcin en forma automtica. Se debe indicar tipo
de lectura (A o %T), rango de longitudes de onda donde se desea el equipo realice el barrido y solicitar una
correccin de base con la solucin blanco en el compartimento de la muestra.
En caso de utilizar un equipo de doble haz, la correccin de la lnea de base se realiza conjuntamente con
las lecturas de absorbancia de las muestras.

Seleccin de las longitudes de onda de trabajo

Observe ambos espectros de absorcin y seleccione dos longitudes de onda con valores de absorbancia
elevados para el permanganato o para el bicromato y con mnimas interferencias del otro compuesto.

3. Determinacin de las concentraciones de Cromato y Permanganato en una mezcla.

Es posible determinar las concentraciones de dos componentes en una mezcla en forma simultnea
realizando mediciones espectrofotomtricas a dos longitudes de onda.

A partir de las soluciones estndar de MnO4- y Cr2O72- realizar las siguientes diluciones:
a) Cr2O72-. Tomar respectivamente 3, 4 y 6 ml de solucin de bicromato de potasio 0.1M y llevar a
50.0 ml con cido sulfrico al 15 % en un matraz aforado.
b) MnO4-. Tomar respectivamente 2, 3 y 4 ml de solucin de permanganato de potasio, 3 x 10 -3 M y
llevar a 50,0 ml con cido sulfrico al 15 % en un matraz aforado.

Calcule en ambos casos las concentraciones finales de permanganato y dicromato para todas las
diluciones, pues le resultarn imprescindibles para la construccin de las representaciones de la ley
Lambert - Beer.

Para cada una de las longitudes de onda anteriormente seleccionadas, obtenga las representaciones de
Lambert - Beer para ambas series de soluciones:

a) Seleccione la primera longitud de onda elegida.

b) Ajuste el 0 de absorbancia utilizando la solucin de H2SO4 15% como blanco.
c) Mida la Absorbancia de las soluciones correspondientes, comenzando por la de menor
concentracin (incluya el blanco en la serie de soluciones a medir).
d) Repita el procedimiento para la otra longitud de onda seleccionada.

Finalmente usted obtendr cuatro series de datos para la realizacin de los 4 grficos de Lambert Beer.

Tratamiento de los resultados

Con los valores de absorbancia obtenidos, represente absorbancia (en ordenadas) en funcin de
concentracin. Estime la mejor recta de acuerdo a los valores medidos.
Observe el rango lineal de trabajo. De ser necesario, descarte aquellos puntos que se alejen de la linealidad
ocasionando desviaciones a la ley de Lambert Beer.

Trace rectas horizontales a 0.1 y 0.8 de Absorbancia (valores inferiores a 0.1 y superiores a 0.8 unidades de
absorbancia introducen errores demasiado grandes al estimar concentraciones).

Del grfico de A vs concentracin, calcule los valores de absortividad molar (a M) de cada una de las
especies a ambas longitudes de onda.

Determine la concentracin de cada componente en la solucin incgnita segn la siguiente ecuacin:

A 1= aM xbxC + aM xbxC
Cr2O72-1 Cr2O72 MnO4- 1 MnO4-

A 2= aM xbxC + aM x b xC
Cr2O72-2 Cr2O72 - MnO4- 2 MnO4-
Redaccin del informe

1. Busque en el manual del equipo utilizado las caractersticas tcnicas del mismo como Tipo de lmpara,
rango til de longitudes de onda, tipo de selector de longitudes de onda, ancho de banda, detector, etc.
2. En un solo grfico represente los espectros de ambos compuestos. Seale las longitudes de onda
elegidas.
3. Realice las 4 representaciones de Lambert - Beer e indique los coeficientes de extincin para cada
compuesto a cada longitud de onda. Indique si descart alguna lectura.
4. Indique las concentraciones de cada compuesto en su muestra.

Practica Nro. 03. Determinacin colorimtrica de Fsforo en alimentos segn una modificacin del mtodo
de Gomori.

Fundamento

El fosforo reacciona con el molibdato en medio sulfrico para generar un cido complejo como el
heteropolifosfomolibdico, de color amarillo. En presencia de un reductor adecuado y en condiciones
adecuadas solo se reduce el molibdeno combinado con el fsforo, generndose azul de
heteropolimolibdeno que es un producto intensamente coloreado de composicin muy poco definida pero
cuya intensidad de color puede resultar directamente proporcional a la concentracin inicial de fsforo en la
muestra.

Objetivo.

Determinar el contenido de fsforo en materia prima y productos

Reactivos, materiales y equipos

Reactivo sulfomolbdico. Mezclar 2 partes de solucin de molibdato de sodio al 5 % (Na 2MoO4.2H2O) con 1
parte de H2SO4 10 N y una parte de agua.
Solucin reductora. Disolver 1 g de metil para amino fenolsulfato (eln) en 100 ml de solucin de bisulfito de
sodio al 3%
Solucin patrn de fsforo de 1000 ppm. Disolver cuantitativamente 11,0 g de KH 2PO4 en agua destilada,
agregar 1 ml de H2SO4 (c) y completar hasta 2,5 L con agua destilada.
Solucin de Trabajo de fsforo. A partir del patrn de fsforo de 1000 ppm, realizar cuantitativamente 2
diluciones sucesivas 1/10 hasta llegar a una concentracin de 10 ppm.
Tcnica

1. Construccin de la curva patrn

a. En matraces aforados de 25 ml colocar respectivamente 0.00, 2.00, 3.00, 4.00, 5.00, 6.00, 7.00 y
8.00 ml de la solucin patrn de fsforo de 10 ppm.

b. Agregue a cada matraz 2.5 ml de solucin sulfomolbdica y 1 ml de solucin reductora. Finalmente

complete los volmenes con agua destilada y homogeinice.

c. Lea las absorbancias a 670 nm, luego de 45 minutos de completado el enrase y antes de 90.
Comience por el blanco y contine en orden creciente de concentraciones de los estndares.

d. Represente A vs C. Construya la mejor recta. Descarte aquellos puntos que se apartan

notablemente de la linealidad. Calcule el del complejo coloreado.

2. Determinacin de la concentracin de Fsforo en leche en polvo.

En un matraz de 25.00 mL coloque una alcuota de la muestra, previamente mineralizada. Dicha
alcuota debe estimarse teniendo en cuenta los resultados esperados, de forma tal que la concentracin
de P de las muestras se encuentre en el intervalo de concentraciones de la curva patrn.
Agregue luego 2.5 mL se solucin sulfomolibdica, 1 mL de ln y enrase con H 2O (d). Mida la
absorbancia a 670 nm y calcule la concentracin por comparacin de sus datos con aquellos obtenidos
con los estandares.
A = . b . C

Recomendacin
El fsforo que contienen los detergentes caseros puede ser motivo de resultados elevados, por lo tanto se
recomienda abstenerse de su uso durante la limpieza del material. Puede ser reemplazado por la mezcla
sulfocrmica o detergentes no inicos.
Redaccin del informe
Indique la concentracin de P en su muestra. Incluya los datos utilizados como masa de muestra, volumen
final de la muestra, diluciones, lecturas y los clculos detallados. Agregue un grfico de la curva de
calibracin.

Practica Nro. 04: Manejo refractmetro.

Fundamento
Objetivo
Reactivos, materiales y equipos.
Mtodo operatorio.

1. Se colocan unas gotas del lquido a medir encima del cristal de la porta muestras.

2. Se cierra la porta muestras con la rueda de la izquierda (rueda A).

3. Se ajusta con la rueda inferior derecha (rueda B) hasta que se observe
una zona clara y otra oscura en el visor circular del objetivo (imagen a, b y c)

4. Se ajusta con la rueda superior derecha (rueda C) hasta que la lnea de

separacin claro/oscuro se aprecie ntidamente (imagen b).
5. Se ajusta de nuevo con la rueda B hasta que la lnea clara/oscura se site
en el centro del visor circular (imagen c). Una vez centrado, se lee en la
Escala verde inferior al valor de ndice de refraccin.
6. Una vez efectuada la medida se elimina el lquido de la crista porta muestras con un algodn.
7. Lectura: observar la reproduccin de los pasos a, b. c y d. en el refractmetro, finalmente

a b
B

d
c

3.10. Cuestionario.

1. Defina la Ley de Lambert - Beer. Desviaciones instrumentales, reales y qumicas.

2. Convertir los siguientes valores de absorbancia en tanto por ciento de transmitancia
a. 0.375 b. 1.325 c. 0.012
3. Convertir los siguientes valores de tanto por ciento de transmitancia en valores de absorbancias.
a. 33.6 b. 92.1 c. 1.75
4. Una solucin de Q 4,14x10-3M tiene una transmitancia de 0.126 si se mide en una cubeta de 2 cm. Si se
utilizara una cubeta de 1 cm Qu concentracin de Q hara falta para que la T aumentara 3 veces?
5. En que intervalo de absorbancias se minimiza el error de concentracin para un ensayo
espectrofotomtrico?
6. Dibuje un diagrama de los componentes necesarios en los instrumentos para realizar mediciones de
absorcin molecular en el UV - Visible.
Defina:
a. ancho de banda espectral
b. radiacin monocromtica
7. Cul es la geometra ms adecuada y el material mas recomendado para la construccin de cubetas
de lectura en el UV - Visible?
8. Calcular las longitudes de onda de las luces del semforo ( verde 5.76 x 10 14 Hz, Amarillo 5.15 x 1014
Hz, Rojo 4.27 x 1014 Hz )
9. Calcular la longitud de onda para una estacin de radio que transmite a 92.1 (1MHz = 10 6 Hz)
10. Una solucin de una especie absorbente presenta el siguiente espectro de absorcin molecular. De las
sealadas en el espectro indique cul seleccionara para la cuantificacin espectrofotomtrica de la
misma y cuales no utilizara. Justifique ordenando los puntos sealados en orden creciente, segn la
sensibilidad.

A 1 2 3 4 5
6

360 380 420 450 500 540 600 nm

Longitud de onda

11. Indique los pasos a seguir para determinar experimentalmente la concentracin de una mezcla de dos
sustancias absorbentes.
12. Cul ser el efecto sobre la concentracin aparente (indique si aumenta, disminuye o no se modifica)
si:
a. Se detecta una huella digital sobre la celda mientras se lee la Absorbancia del estandar, y se limpia
antes de tomar las lecturas para las muestras en la misma celda.
b. No se ajusta el cero del instrumento con disolvente antes de tomar las mediciones de absorbancia
para el estandar (A= 0.751) y para una muestra a la misma concentracin?
13. Indique como procedera experimentalmente para determinar el Lmite de deteccin, Lmite de
cuantificacin y el rango de trabajo en una determinacin espectrofotomtrica

14. En la determinacin de P, el alumno calcula errneamente el volumen de muestra a utilizar en la

reaccin colorimtrica y obtiene una absorbancia superior a la del patrn de mayor concentracin.
Cmo subsanara su error?

15. Se realiza una determinacin de Gomori segn la tcnica del TP. Las absorbancias obtenidas son las
siguientes:

Estandar Concentracin Absorbancia

(ppm)
0 0.006
0.800 0.099
1.200 0.143
1.600 0.189
 2.000 0.240
Muestras
Masa (g)
Dulce de leche 1 2.306 0.2280
1.8932 0.1853

Dulce de leche 2 1.4192 0.1672

1.3883 0.1336

Calcule la concentracin de P en las muestras de dulce de leche si luego de la mineralizacin las cenizas
se solubilizaron y se colocaron en matraces de 10.00 mL. Luego se realiz una dilucin 1 en 25 y se
tomaron 5.00 mL para la reaccin de color que se desarroll en matraces de 50.00 Ml

3.11. Problemas.

Problema Nro. 63. Se mide la transmitancia de la solucin resultante del siguiente tratamiento. Se disuelve
la muestra que contiene el compuesto X, se desarrolla un complejo coloreado y se diluye a 250 ml.
Porciones de 1 g de 4 patrones y una muestra dan los siguientes resultados:

1 2 3 4 M
%T 64.5 47.4 37.6 25.0 30.2
%X 0.200 0.400 0.600 1.00 ?

a) Construya una curva de trabajo y hallar el % X en la muestra desconocida.

b) Usando slo el dato del patrn 4 y el de la incgnita, calcule el % X de la muestra, suponiendo que se
cumple la Ley de Beer.
c) Idem b) pero usando el patrn 3.
d) Explique los resultados obtenidos en base de un anlisis de la curva de calibracin.
2. Una solucin de una muestra coloreada que responde a la ley de Beer, muestra una transmitancia de
80.0% cuando se mide en una celda de 1,00 cm de longitud.
a) Calcule el % T para una solucin de doble concentracin en la misma celda.
b) Cul debe ser la longitud de la celda para obtener la misma transmitancia (80%) en el caso de una
solucin cuya concentracin es dos veces la original?
c) Si la concentracin original era 0,005% (p/v), cul es el valor de la absortividad a?
Rta.: a) 64% T b) 0.5 cm c) a = 1.938 L / g.cm

3. El calciferol (vitamina D2) medido a 264 nm en alcohol como solvente, cumple la ley de Beer sobre un
rango amplio de concentraciones con una absortividad molar de 18200.
a) Si el peso molecular es 396, cul es el valor de a?
b) Qu rango de concentraciones, expresado en %, puede ser usado para el anlisis si se desea
mantener la absorbancia dentro de los lmites 0,4-0,9?. Suponga b = 1cm
Rta.: a) a = 45.96 L / g.cm b) 8.7 10-4 a 1.96 10-3 g%
4. En etanol, la acetona a 366 nm tiene una absortividad molar de 2,75x10-3 L/cmmol. Qu intervalo de
concentracin de acetona podra determinarse si los tantos por ciento de transmitancia de las
soluciones deben limitarse al intervalo del 10 % al 90% y se usan cubetas de 1.25 cm?
Rta: 2.91 10-4 M a 1.33 10-5M
5. El sistema Fe (II)-o-fenantrolina obedece a la Ley de Beer en el mbito de 0 a 8 ppm de Fe(II). Una
solucin que contiene 0,100 ppm de Fe (II) y un exceso de o-fenantrolina da una absorbancia de 0,200
en una celda de 1,00 cm. Una solucin desconocida da una absorbancia de 0,470 en las mismas
condiciones.
a) Calcule la concentracin de Fe(II) en ppm y mol/l.
b) Calcule la absortividad del complejo.
Rta.: a) 0.235ppm y 4.2 10-6M b) 1.17 105 L / M.cm
6. Una alcuota de una sustancia S coloreada se diluye con un volumen igual de agua y se mide su
absorbancia, siendo sta de 0.325. Otra alcuota se diluye con un volumen igual de una solucin patrn
que contiene 3.00x104M de S y la absorbancia es de 0.657. Calcule la Concentracin de S en la
solucin original.
Rta.: 2.94 10-4M
7. La absortividad molar de una sustancia X es de 3500 a una longitud de onda determinada. Una solucin
que contiene una concentracin desconocida de X y otra sustancia Y que tambin absorbe, tiene una
transmitancia de 37.0 % a la longitud de onda determinada en una celda de 1.00cm. Una solucin
patrn de 2.00 x10-4M en X y la misma concentracin en Y que la muestra, tiene una transmitancia de
18.5 %. Cul es la concentracin de X en la muestra?
Rta.: 1.14 10-4M
8. Una solucin de una muestra que contiene MnO4- y Cr2O7= da una absorbancia de 0.688 a 500 nm en
cierta celda. Luego de decolorar el MnO4- con KNO2, la absorbancia baj a 0.306. Una solucin patrn
de MnO4- (10.0 g/ ml de MnO4-) tiene una A: 0.310, mientras que una solucin patrn de Cr2O7=(200 g
de Cr / ml) tiene una A: 0.492. Calcule las concentraciones de Mn y Cr en la muestra.
Rta.: 124.4 g Cr / mL y 5.8 g Mn / mL

9. Una determinacin simultnea de cobalto y nquel se puede basar en la absorcin simultnea de sus
respectivos complejos de 8- hidroxiquinolinol. Las absortividades molares correspondientes a sus
mximos de absorcin son:
Absortividad molar,
365 nm 700nm
Co 3529 428.9
Ni 3228 10.2

Calcular la concentracin molar de Ni y Co en cada una de las siguientes disoluciones basndose en los
datos siguientes:
Absorbancia , A (cubetas de 1 cm)
365 nm 700nm
 solucin I 0.598 0.039
solucin II 0.902 0.072

Rta.: Solucin I. Co 8.9 10-5 M y Ni 8.8 10-5M

Solucin II.Co 1.7 10-4 M y Ni 9.8 10-5M

10. Porciones de un milimol de un cido dbil AH y su sal NaA se disuelven en volmenes de un litro de
diversos buffers. Las absorbancias de las soluciones resultantes a 650 nm y en una celda de 2.00 cm
son:

absorbancia 0.950 0.950 0.677 0.000 0.000

pH 12.00 10.00 7.00 2.00 1.00

Calcule las absortividades molares de HA y A- y la constante de disociacin del cido HA.

Rta.: Kd 2.48 10-7
11. Se ha demostrado que la cafena (pf: 212.1) tiene una A: 0.510 para la concentracin de 1 mg/ 100 ml a
272 nm. Una mezcla de 2.5 g de una muestra de caf soluble se mezcl con agua hasta un volumen de
500 ml y se transfiri una alcuota de 25,00 ml a un matraz que contena 25 ml de H2SO4 0.1 N. Esto fue
sometido a un tratamiento de clarificacin y se afor a 500 ml. Una parte de esta solucin tratada
mostr una absorbancia de 0.415 a 272 nm.
a. Calcular la absortividad molar.
b. Calcular el nmero de gramos de cafena por gramo de caf.
Dato: b: 1.00cm
Rta.: 3.25 10-2 g de cafena por g de caf

12. Se disuelven separadamente con HNO3 una muestra de 1.0 g de acero que contiene 0.41 % de Mn y
otra muestra de una acero anlogo que pesa 1.1 g y cuyo % en Mn se desconoce. Se oxida el Mn de
ambas muestras a MnO4- con IO4-, se diluyen ambas al mismo volumen y se comparan en un
colormetro de espesor variable. Se comprueba que las intensidades de color se igualan cuando el
espesor de la solucin patrn es un 10% menor que el de la otra solucin. Calcular el porcentaje de Mn
en la muestra problema.
Rta.: 0.369 g% de Mn
13. El quelato CuA22- presenta un mximo de absorcin a 480 nm. Cuando el reactivo complejante est
presente en un exceso de al menos 10 veces, la absorbancia depende slo de la concentracin
analtica del Cu (II) y cumple la ley de Beer en un largo intervalo. Una solucin en la que la
concentracin analtica de Cu(II) es de 2.30 10-4 M y que cuando A2- es 8.60 10-3 M tiene una
absorbancia de 0.690 cuando se mide en una cubeta de 1 cm a 480 nm. Una solucin en la que la
concentracin analtica de Cu(II) es 2.30 10-4 M y la de A2- es 5.00 10-4 M tiene una absorbancia de
0.540 cuando se mide en las mismas condiciones. Utilizando esta informacin calcular la constante de
formacin de la reaccin: Cu2+ + 2 A2- CuA22-
Rta.: Kf 1.8 108
Elaboracin de Prcticas de laboratorio.

Se procede a titular con HCl valorado, hasta que el color rosa vira a incoloro; con esto, se titula la mitad del
CO32.

Seguidamente se agregan unas gotas de indicador de azul bromofenol, apareciendo una coloracin
azul y se contina titulando con HCl hasta la aparicin de una coloracin verde. Con esto, se titulan los
bicarbonatos (HCO3) y la mitad restante de los carbonatos (CO32).

Si las muestras tienen un pH menor que 8.3 la titulacin se lleva a cabo en una sola etapa. Se
agregan unas gotas de indicador de azul de bromofenol, apareciendo una coloracin azul y se procede a
titular con solucin de HCl hasta la aparicin de un color verde; con eso se titulan los HCO3.

Fuente: www.uclm.es/profesorado/jmlemus/T-07.ppt
Reactivos

Agua destilada Debe cumplir la especificacin ASTM D 1193 tipo I, adems, deber estar libre de CO 2 y
tener un pH a 25C entre 6.2 y 7.2

Fenolftalena (0.25%) Disolver 0.25 g de fenolftalena en 100 mL de etanol al 50%

Azul de bromofenol (0.04%) Disolver 0.04 g de azul de bromofenol en 15 mL NaOH 0.01N y aforar a 100
mL con agua destilada.

Solucin de HCl 0.01N. Diluir 0.83 mL de HCl al 37 % en agua destilada y aforar a 1000 mL con agua
destilada.

Solucin de Na2C03 0.01 N. Na2CO3 secado a 110C durante dos horas. Disolver 0.530 g de Na2CO3 en
agua destilada y aforar a 1000 mL
Valoracin de la solucin de HCl. Colocar 15.0 mL de la solucin de Na2CO3 0.01N en un matraz
erlenmeyer de 125 mL y agregar 3 gotas de azul de bromofenol. La muestra adquiere un color azul.
Titular con solucin de HCl hasta que aparezca un color verde.

Calcular la normalidad: Na2CO3 HCl

V1 x N1 = V 2 x N2

Donde

V1 es el volumen de la solucin de Na2CO3

N1 es la normalidad de la solucin de Na2CO3
V2 es el volumen de la solucin de HCl gastado en la titulacin
N2 es la normalidad de la solucin de HCl

Procedimiento. Colocar 5 mL de muestra de agua en un matraz erlenmeyer de 125 mL. Agregar 3 gotas de
indicador fenolftalena al 0.25%.

Si aparece un color rosa, titular con HCl 0.01N hasta un vire incoloro, si no aparece el color rosa, indicar que
la concentracin de carbonatos es igual a cero.

Calcular CO32
Agregar 3 gotas de azul de bromofenol 0.04% al mismo matraz apareciendo un color azul. Continuar
titulando con HCl 0.01N hasta la aparicin de un color verde

Calcular HCO3: Clculos

2V x N x 1000
meq/L de CO32 = ------------------------
mL de muestra

Donde

V son los mL de HCl gastados

N es la normalidad del HCl usado

(T - 2V) x N x 1000
meq/L de HCO3 = ---------------------------
mL. de muestra

Donde

T son los mL de HCl gastado en las 2 titulaciones

V son los mL gastados en la primera titulacin
N es la normalidad del HCl

DETERMINACION DE CIANUROS. El mtodo ms utilizado es el fotomtrico aunque tambin puede

determinarse por potenciomtria.

El mtodo fotomtrico se basa en la formacin de cloruro de ciangeno, reaccin con piridina para dar
dialdehdo glutacnico y posterior condensacin con cido 1,3-dimetilbarbitrico para formar un colorante
violeta de polimetino con un mximo de absorcin a 585 nm.

Los metales txicos en agua son: As, Cd, Hg, Pb y Cr

DETERMINACION DE ARSENICO

METODO FOTOMETRICO. Mtodo con dietilditiocarbamato de plata: Los compuestos inorgnicos de As,
se reducen con H2 en medio cido a AsH3 , que con dietilditiocarbamato de Ag da un complejo de color rojo.
El mtodo permite detectar 0.03 ppm de As.

DETERMINACION DE CADMIO, MERCURIO Y PLOMO

METODO EXTRACTOFOTOMETRICO. Mtodo con ditizona : Cd , Hg y Pb forman complejos rojos con

ditizona (518 nm, el de Cd y 510 nm los de Pb y Hg ) que se extraen en cloroformo. Es necesario eliminar
las interferencias cada uno de ellos en la determinacin del otro. Los mtodos difieren en lo que se refiere a
los reactivos empleados en la eliminacin de las interferencias.

DETERMINACION DE CROMO. El Cr se encuentra disuelto en agua como Cr3+ y como Cr6+ (muy txico).

METODO FOTOMETRICO. Mtodo fotomtrico con difenilcarbacida : Se basa en la reaccin en medio

fuertemente cido de Cr6+ con difenilcarbacida para dar un complejo de color rojo violeta (540 nm). El Cr
total se determina transformando previamente el Cr3+ en Cr6+, con permanganato.

BIBLIOGRAFIA
1. CLIFTON E.Meloan. Problemas y experimentos en Anlisis Instrumental, Mxico: REVERTE 1973. Cap.
1,14, y 15.
2. HEIN, Morris. Qumica, Mexico: IBEROAMERICA, 1992, p. 341-344.
3. JOSEPH, N.P. Anlisis ptico. Mexico: ANUI; 1975, p 15-80.
4. M.D. LUQUE DE CASTRO. Problemas de Analisis Instrumental. Curso 2010-2011. Boletin Nro. 1.
Campus Universitario de Rabanales, E-14071 Crdoba-Espaa. 2010.

Bibliografia electrnica

www.uclm.es/profesorado/jmlemus/T-07.ppt
www.uam.es/personal_pas/patricio/.../instrumentacion2.pdf
www.scribd.com/.../Ejercicios-de-quimica-analitica-con-resolucion -
www.definicionesmedicas.com/oxihemoglobina-y.../7.html .
www.unioviedo.es/.../trans/...2.../metodos-espectrofotometricos.ppt
Prof. Dr. Luis Salazar.Depto. De Ciencias Bsicas UFRO-2004.