Guía Fisiología I Revisando - UCSUR 2016-II
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PROGRAMACIN
BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
SEGURIDAD EN EL LABORATORIO:
HIGIENE PERSONAL:
CONCEPTOS:
Los eritrocitos tambin conocido como glbulos rojos, clulas rojas y hemates, pueden ser
evaluados de diferentes maneras como por ejemplo, de acuerdo al nmero de clulas rojas por
milmetro cbico, por el porcentaje de clulas en relacin con el plasma lo cual se denomina
HEMATOCRITO, tambin por la cantidad (en gramos) de Hemoglobina por decilitro de sangre,
entre otros mtodos.
La relacin de estos mtodos ha servido para obtener ndices bsicos y tener parmetros
de normalidad. Estos ndices son conocidos como las Constantes Corpusculares. Estos ndices si
bien no nos dan la cantidad total de los elementos, nos son de suma utilidad en la interpretacin de
los fenmenos sanguneos, adems son mtodos accesibles y fciles de calcular.
MATERIALES:
PROCEDIMIENTO:
Determinacin De La Hemoglobina
1. Calibracin del Espectrofmetro con Agua destilada.
2. Obtener una muestra de 5ml. de sangre venosa con jeringa heparinizada y colocarla en un
frasco de vidrio.
3. Medir 20l (0.02ml) de sangre en una pipeta de Salhi (pipeta volumtrica).
4. Vaciar el conteniendo de la pipeta en un tubo conteniendo 10 ml. de agua destilada.
5. Echar una gota de amoniaco para precipitar las protenas provenientes del estroma del glbulo
rojos que enturbian la solucin.
6. Homogenizar las muestra y verter el contenido en las cubetas del espectrofotmetro.
7. Leer la densidad ptica en un espectrofotmetro, a una longitud de onda de 540 nm
(ABSORBANCIA DESCONOCIDA).
8. Con el dato obtenido y valindose de la curva de calibracin factor de calibracin obtenidos a
partir de soluciones conocidas de hemoglobina (Patrn = 18 g/dL), se hace el clculo de
concentracin de hemoglobina
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. Eritropoyetina.
2. Trombopoyetina.
3. Factores Estimulantes de Colonias: GM-CSF, G-CSF, M-CSF.
4. Interleukinas:Todas IL-1, a la IL20
5. Formacion de los globulos rojos
6. Formacion de los globulos blancos
.
DESARROLLO
Durante la presente prctica el alumno deber revisar los Mecanismos de Produccin, Metabolismo
y Principales acciones de estos Factores Hematopoyticos. Estableciendo adems aquellos
factores que Incrementan o Disminuyen su Produccin.
PRACTICA N03
PRUEBAS DE HEMOSTASIA
COMPETENCIA
HEMOSTASIA
Valores Normales
Tiempo de sangra (Duke): Evala la integridad de las primeras etapas de la formacin del
tapn hemosttico, es decir el espasmo vascular y la formacin del tapn plaquetario (cantidad
y calidad de plaquetas). Mide el tiempo necesario para que se detenga la hemorragia, en
respuesta a la incisin de vasos subcutneos pequeos. Su valor normal oscila entre 2-6
minutos (1-4 min).
Tiempo de coagulacin (Lee-White): el tiempo de coagulacin representa una medida del
funcionamiento de la va intrnseca de la coagulacin de la sangre entera. Su valor normal es
de 5-15min.
Tiempo de recalcificacin del plasma: (Tiempo de Howell): Determina el tiempo que tarda
en coagular el plasma descalcificado luego de agregarle un exceso de Ca ++. Su valor normal
oscila entre 100 240 (90 150). Evala va intrnseca.
El citrato de sodio se usa tambin como un anticoagulante en los tubos usados para tomar
sangre en ciertos exmenes de laboratorio que miden el tiempo de coagulacin sangunea, entre
ellas el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activado y el tiempo de protrombina. La concentracin
de citrato de sodio utilizada como anticoagulante es una variable preanaltica importante porque
puede variar el tiempo de coagulacin del plasma sanguneo ya que la cantidad de citrato presente
afecta la concentracin de calcio utilizada en estas pruebas. A mayor concentracin de citrato
menor concentracin de calcio disponible para promover la formacin del cogulo y por lo tanto se
obtienen tiempos de coagulacin ms largos.
MATERIALES:
a. 04 Lancetas por mesa.
b. 01 paquete de Algodn.
c. 01 litro de Alcohol.
d. 02 unid. De Papel filtro circular por mesa.
e. 01 Jeringa hipodrmica de 10 cc por mesa.
f. 04 tubos de ensayo de 10cc por mesa.
g. 01 Gradilla por mesa.
h. 02 pares de guantes quirrgicos por mesa.
i. 01 Incubadora a 37 C.
j. 01 cronmetro por mesa.
k. Solucin de Cloruro de calcio.
l. Solucin de citrato de sodio.
PROCEDIMIENTO:
TIEMPO DE RECALCIFICACION
1. Obtenga 4ml. de sangre venosa.
2. Inmediatamente mzclelo con 0.4 ml de solucin de citrato de sodio (3,8%) (PREPARACION:
950mg en 25mL de agua destilada) en un tubo de ensayo.
3. Centrifugue la muestra por 5 minutos a 2000 r.p.m. Al terminar la muestra debe tener dos fases
4. Luego tome 0.3 ml de plasma y llvelo a bao mara a 37C por 3 minutos.
5. Agregue a la muestra con una pipeta, 0.2ml de una solucin de cloruro de calcio (0,025M)
(PREPARACION: 45 mg en 16 mL de agua destilada). En este momento prenda el cronmetro,
se mezcla y lleva a bao mara.
6. Observe el tiempo en que tarda en aparecer una pelcula de fibrina, observe la muestra cada
30 segundos.
7. Anote el valor.
RESULTADOS
Tiempo de sangra..........................................
Tiempo de Coagulacin................................
Tiempo de Recalcificacin.............................
CUESTIONARIO
1. Mencione las pruebas que exploran la fase vascular, as como las pruebas que exploran la fase
plaquetaria de la hemostasia.
2. Mencione las pruebas que exploran la Va intrnseca y las pruebas que exploran la va
extrnseca de la coagulacin sangunea.
3. Explique la importancia del calcio en el proceso de la coagulacin sangunea.
4. Cuales son los anticoagulantes ms usados. Explique el mecanismo de accin de cada uno de
ellos.
PRACTICA N 04
SEMINARIO: ANEMIA
COMPETENCIAS:
Al finalizar el seminario el estudiante podr definir Anemia, conocer los las principales
cambios fisiolgicos que suceden durante la anemia, adems de las principales causas para su
presentacin; as como las consecuencias de las deficiencias de hierro, Vitamina B12 y cido
Flico.
TEMAS:
DESARROLLO
Durante la Presente Prctica el alumno establecer los Mecanismos Moleculares del Metabolismo
del Hierro, Vitamina B12 y cido Flico, as como las diferentes acciones que tienen en el
organismo y que cambios se producen en el organismo durante su Deficiencia.
PRACTICA N 05
GRUPO SANGUINEO REACCIONES DE INCOMPATIBILIDAD
OBJETIVO
CONCEPTO
Los eritrocitos contienen en la membrana celular una gran cantidad de antgenos que estn
genticamente determinados en cada persona. Estos antgenos estn agrupados por sistemas
grupos, los ms conocidos son estn agrupados en los llamados sistema ABO y el sistema Rh.
Cuando se transfunde sangre a una persona de un grupo sanguneo no compatible, estas
pueden desencadenar una serie de reacciones, entre ellas la Hemlisis pudiendo en su grado ms
severo llevar a la muerte de la persona. Estas reacciones son denominadas REACCIONES DE
INCOMPATIBILIDAD. Cuando existe una incompatibilidad sangunea se produce una reaccin
iniciada por la unin antgeno-anticuerpo. Los anticuerpos son naturales y principalmente son del
tipo Inmunoglobulina M. Estas reacciones se pueden presentar tanto in vivo como in vitro.
DONANTE RECEPTOR
0 (-) UNIVERSAL A (+), A(-), B(+), B(-), AB(+), AB(-), 0(+), 0(-)
0 (+) A (+), B(+), AB(+), 0(+)
A (-) A (+), A(-), AB(+), AB(-)
A (+) A (+), AB(+)
B (-) B(+), B(-), AB(+), AB(-)
B (+) B (+), AB (+)
AB (-) AB (+), AB (-)
AB (+) AB (+)
RECEPTOR DONANTE
AB (+) UNIVERSAL A (+), A(-), B(+), B(-), AB(+), AB(-), 0(+), 0(-)
AB (-) AB (-), B(-), A(-), 0(-)
B (+) B (+), B(-), 0 (+), 0 (-)
B (-) B (-), 0 (-)
A (+) A (+), A (-), 0 (+), 0 (-)
A (-) A (-), 0 (-)
0 (+) 0 (+), 0 (-)
0 (-) 0 (-)
MATERIALES:
PROCEDIMIENTO:
REACCIONES DE INCOMPATIBILIDAD
1. Escoja dos personas de grupo incompatible y obtenga de cada una de ellas 6ml de sangre en
una jeringa heparinizada y coloque en un tubo de ensayo.
2. Centrifugue las muestras a 2000 r.p.m. por 5 minutos.
3. De ambas muestras retire el plasma con una pipeta Pasteur (lo mximo posible) y colquelo en
otro tubo de ensayo (Rotular Plasma 1 y plasma 2).
4. De ambas muestras y del fondo del tubo, extraiga una muestra del empaquetado globular (1
c.c.) y colquela en tubos de ensayo independientes, luego adale 2cc de suero fisiolgico,
de esta manera obtendremos una solucin de glbulos rojos (Rotular Sangre 1 y Sangre 2).
5. Coloque 0,5 cc de la solucin de glbulos rojos de un sujeto con 0,5 cc de plasma del otro
sujeto en otro tubo de ensayo (Rotular P1-S2 y P2-S1).
6. Coloque 0,5 cc de la solucin de glbulos rojos de un sujeto con 0,5 cc de plasma del mismo
sujeto, en otro tubo de ensayo, este ser el tubo control (Rotular P1-S1 y P2-S2).
7. Centrifugue los 4 tubos a 1500 rpm durante 3 minutos.
8. Luego retire con una jeringa el contenido sanguneo del fondo del tubo y extindalo en laminas
portaobjeto diferentes. Observar los resultados.
REACCION GRADO
No grumos -
Grumos pequeos, plasma turbio +
Grumos pequeos, plasma limpio ++
Grumos grandes, plasma turbio +++
Grumos grandes, plasma limpio +++
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. Que es inmunidad. Defina y explique las caractersticas de las diferentes clases de Inmunidad.
2. Que son los anticuerpos y que clases existen.
3. Que son los antgenos y Superantgenos
4. Qu son los grupos sanguneos. Cuantos grupos sanguneos existen
PRACTICA N 06
Enfermedades de la sangre
COMPETENCIAS:
TEMAS:
1. Leucemias
2. Linfomas.
3. Coagulacin intravascular diseminada
4. Lupus eritematoso sistmico.
5. Aplasia medular
DESARROLLO
Durante la Presente Prctica el alumno establecer los Mecanismos Moleculares del de las
interacciones celulares, as como las diferentes acciones que tienen en el organismo y que
cambios se producen en el organismo