CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA
Practica N 6
CROMATOGRAFA DE PAPEL Y PLACA
INTEGRANTES:
- Ramos Flores, Elmer Jhoel 16100018
- Aroni Huamaccto, Yaquelin Pamela 16100001
- Merino Loayza, Aarom Sebastian 16100075
- Cuadra Carrasco, Jess 17100013
PROFESOR:
Mg. Bryan Huayhuas
HORARIO: Martes de 18 a 22 hrs.
FECHA DE ENTREGA: 24 de octubre del 2017
Lima Per
2017
RESUMEN
La presente experiencia se realiz con el fin de realizar las distintas pruebes de
vegetales puestos a prueba fueron los flavonoides los cuales se ubican en los ptalos de
Las pruebas cromatograficas realizadas fueron las de papel y placa. Ambas pruebas
guardan en si los mismos principios de poseer una fase esttica y una fase mvil. Para la
realizaron solo dos pruebas las cuales fueron con los reactivos que dieron mejores
Finalmente los resultados obtenidos mostraron que segn el tipo de pigmento este
recorrer mayor o menor distancia siendo as que la clorofila de tipo a solo recorre una
distancia mnima mientras que los carotenos recorren una mayor distancia a los dems
INTRODUCCIN
La cromatografa es una de las muchas pruebas para el reconocimiento y anlisis de
caso de los pigmentos vegetales estos son de suma importancia ya que cumple.
pertenezcan.
MARCO TERICO
CROMATOGRAFIA
Cromatografa plana: Es un tipo de cromatografa lquida en la que la fase
estacionaria est extendida sobre la superficie de un plano y la fase mvil fluye a travs
gravedad.
soporte de la fase estacionaria, que suele ser agua. No obstante tambin existen
papeles impregnados (con adsorbentes como gel de slice o almina, con silicona
Pg. 390)
se desea aislar un compuesto el grosor puede variar entre 0.5 y 2mm. Esta capa
es fijada a una placa o lmina firme de vidrio, aluminio o plstico que acta
(fase mvil o eluente). De los tres materiales usados como soporte, el vidrio es
sobre el slido soporte o activo retenido en una columna recta, generalmente de vidrio,
Pg. 437)
Cromatografa de lquidos
Cromatografa de gases
COLUMNA
por lo que el tiempo de separacin est determinado por el tiempo que demora el
PARTE EXPERIMENTAL
MATERIALES
MUESTRAS
Flores color rojo intenso bien secas
Hojas de espinaca
REACTIVOS
cido clorhdrico al 1%
Metanol
cido actico
Benceno
PROCEDIMIENTO
Para la formacin extracto de hojas espinacas, era necesario que estn bien secas, se
tritur con ayuda el mortero hasta convertirla en polvo fino .despus se ech 5mL de
hasta que la muestra qued con bastante lquido sobrenadante dbilmente coloreado.
Una vez tenida la muestra completamente triturada, se filtr para el retirar las posibles
su posterior uso.
Para la segunda muestra de hojas de espinaca se realiz con los mismo pasos solo que
muestra quedo con bastante liquido sobrenadando y de apariencia verdosa muy oscura,
teniendo las flores rojas bien secas se pas a triturarlas con ayuda del mortero, se le
aadi alcohol y continu triturando hasta llegar a una mesclas con bastante contenido
B. CROMATOGRAFA DE PAPEL
Previamente ya teniendo lista muestras, se cort papel filtro lento para la cromatografa
de tamao adecuado para ser colocados en el vaso de precipitado sirviendo este como
cmara cromatografa. Se traz con un lpiz 1.5cm del borde inferior del papel y otra a
3cm del borde superior. Luego se marc 3 puntos donde se aplicaron la muestra.
Posteriormente se coloc como fase mvil benceno en el fondo del recipiente con la
ayuda de la pipeta siempre evitando mojar las paredes y se tap con una placa Petri.
que el solvente alcanz el borde superior. Por ltimo se retir al papel y se dej secar.
Este mismo procedimiento se realiz 2 veces ms utilizando en cada caso como fase
como fase mvil un mescla de alcohol benceno, alcohol y una mesclase de alcohol
Se utiliz un cromatofolio de 5cm de largo por 2 cm de ancho, luego se traz una lnea
a 1 cm del borde inferior del cromatofolio y otra a una distancia de 5cm del borde
superior asimismo tuvimos que tener cuidado al marcar de manera leve la lnea con el
lpiz con el fin de que la capa adsorbente se interrumpa por esta accin y esta no
benceno en el fondo del recipiente con ayuda de la pipeta evitando mojar las paredes
sobre los puntos marcados cuya mancha era aproximadamente de 3mm dejndola secar.
RESULTADOS
EXTRACTO DE ESPINACA
mientras que el segundo extracto con benceno se observ de un color verde oscuro
Benceno Benceno
Benceno- Alcohol
compuestos de manera adecuada, haciendo esto menos evidente los colores de estos en
la cromatografa.
Alcohol-Alcohol
Al darse el ascenso del solvente se observ que el soluto ascenda muy rpido asciendo
que los compuestos no tengan una separacin, por lo que se observ a los compuestos
Se observ que el solvente corri al mismo ritmo que el solvente haciendo que los
compuestos se separen, sin embargo no hubo una distancia adecuada entre los
compuestos, aunque se logr observar y idnticar los compuestos en un tono muy bajo
Se observ al inicio una separacin correcta de compuestos pero mientras ascenda los
colores tomaron un tono ms claro llegando a observarse solo al inicio (clorofila)al final
clara .
Se realiz un solo extracto de flores rojas con alcohol en donde se observ de un color
Alcohol-Benceno
Se observ al solvente ascender con el soluto sin embargo el tono del soluto era muy
debido a la coloracin.
Alcohol-Alcohol
El ascenso del solvente fue muy rpido, sin embargo el soluto no ascendi quedndose
Se observ que durante la cromatografa el solvente corri muy rpido haciendo que el
soluto ascienda y se acumule en el frente del solvente, por lo que no se observ una
correcta separacin de los compuestos y llego a visualizarse como una mancha de color
CLCULOS
CALCULO DEL
Frente de solvente
FACTOR DE
RETENCION
Frente de origen
()
=
()
CROMATOGRAFIA DE EXTRACTO
DE ESPINACA EN PAPEL
BENCENO-BENCENO
2 4,4
() = = 0,33 , () = = 0,73
6 6
BENCENO MEZCLA
4 cm 3 cm
1,5 cm
1,5 3
() = = 0,375 , () = = 0,75
4 4
DISCUSIN DE RESULTADOS
esto se debe al mejor arrastre que tiene el benceno (o sus derivados) sobre estos
pigmentos orgnicos.
Prueba adicional de ello se evidencia en que las cromatografas realizadas en las que la
fase mvil utilizada fue el benceno presentan mejor separacin que cuando variamos la
Caso contrario ocurre con las antocianinas, pigmento caracterstico de hojas rojas como
las utilizadas en la segunda parte de la prctica, ya que segn su estructura son solubles
CONCLUSIONES
Para garantizar una buena cromatografa cuyos resultados sean los adecuados se
debe tener en cuenta que la fase mvil se desplaza no solo por capilaridad sino
tambin por evaporizacin del solvente y para ello el recipiente debe estar
de cumplirse que:
papel cuyo solvente fue el benceno nos arroj los valores mejores diferenciados
RECOMENDACIONES
Para tener una buena extraccin y tener una cromatografa en donde los compuestos se
extraccin de espinaca con benceno y la de flores con alcohol ya que los compuestos de
ambas son solubles en tales, adems es importante tener un buen papel filtro lento.
Evitar realizar la cromatografa con papel filtro comn ya que este tienen demasiados
proceso .El tiempo en el cual se coloque el papel filtro lento dentro de la cmara tiene
que ser mnimo ,ya que se corre el riesgo de que si se tiene abierto la cmara mucho
.Al trabajar con el benceno procurar trabajar en la campaa y guantes para evitar daos
al operador .
BIBLIOGRAFA
Guarnizo F., Anderson. Martnez Y., Pedro. Experimentos de QUMICA