UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULDAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

EAP GENETICA Y BIOTECNOLOGIA

DESARROLLO EMBRIONARIO EN
ERIZO DE MAR (Tetrapygus niger)

BIOLOGIA DEL DESARROLLO

PROFESOR: Fernando Retuerto

ALUMNO: Renzo Cortez Pacheco

HORARIO: Grupo 1 (Miercoles 10-12 am)

 INTRODUCCION

En los organismos con reproduccin sexual el vulo es fecundado por el espermatozoide

formndose el cigoto, a partir del cual se originar el nuevo individuo. El proceso de fecundacin
comprende una serie de sucesos que en la mayor parte de los organismos pueden resumirse en:

Activacin del espermatozoide (capacitacin), que ocurre en respuesta a las secreciones

del oviducto (fecundacin interna) o al contacto con el medio acuoso (fecundacin
externa).
Reaccin acrosmica que permite que el espermatozoide se abra paso a travs de las
distintas cubiertas que posee el vulo hasta la membrana plasmtica.
Fusin de las membranas plasmticas del espermatozoide y del vulo.
Bloqueo de la polispermia para evitar que un mismo vulo sea fecundado por ms de un
espermatozoide
Continuacin de la meiosis en caso de que el vulo expulsado del ovario se encuentre
detenido en alguna de las fases del proceso meitico (en humanos se encuentra en
metafase II, mientras que en equinodermos ya ha finalizado la meiosis).
Fusin de los proncleos, formndose un ncleo diploide de fecundacin, o bien los
cromosomas maternos y paternos se ordenan directamente sobre la placa ecuatorial en la
primera divisin de segmentacin.
Activacin metablica del huevo y comienzo del desarrollo embrionario.

La prctica realizada se centra en el anlisis y monitoreo del desarrollo embrionario en una

especie de erizo de mar, Tetrapygus niger desde la fecundacin y formacin del cigoto hasta la
formacin de la larva pluteus

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 MATERIALES Y METODOS
Materiales usados:

Erizos de mar (Tetrapygus niger)

Agua de mar

Lminas portaobjetos y cubreobjetos

Beakers

Pipetas Pasteur

Lminas portaobjetos

Microscopio

Procedimiento

1. OBTENCION DE GAMETOS

Las gnadas de los erizos se encuentran ubicados en la superficie aboral interna; y se distinguen
entre s por el color. Los huevos de esta especie, Tetrapygus niger, son de color granate mientras
que el esperma es de color cremoso.

Para obtener las gnadas se colocaron los erizos en placas Petri y se les cort la regin
aboral para extraer las gnadas las cuales se colocaron en placas petri una para
masculina y la otra para femenina.

Luego se introducen las gnadas femeninas del erizo en un beaker con agua de mar, se
agita el agua para que se liberen los gametos tornndose el agua de color rojizo.

En el caso de las gnadas del erizo de mar macho, se agreg una un poco de agua de
mar para que los espermatozoides puedan estar en movimiento.

Otro mtodo que permite obtener los gametos consiste en inyectar pequeas
cantidades de solucin salina KCl en el celoma del erizo, lo que lo induce a liberar los
gametos por el gonoporo.

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 Ovocitos 10X Espermatozoides 40X

Tabla 1. Gametos masculino y femenino vistos al microscopio luego de ser colectados (20/04)

2. FECUNDACION

Para que el ovocito sea fecundado se coloca un poco de suspensin de espermatozoides junto
con la suspensin de ovocitos para que estn en contacto en el agua de mar. La mezcla se
coloca en una lmina portaobjetos y se observa al microscopio.

Al ser este un proceso rpido lo que se observa al microscopio ya es el ovocito fecundado

rodeado por la membrana de fecundacin recin formada, la que se nota en forma de halo
transparente.

Ovocito sin fecundar Ovocito fecundado

Membrana de fertilizacin Espermatozoides

Tabla 2. Comparacin entre un ovocito sin fecundar y uno fecundado (se nota la membrana de fertilizacin en el
segundo) 20/04 2:44 pm

3. SEGUIMIENTO DEL DESARROLLO EMBRIONARIO

Luego de la fecundacin, se llevaron a cabo conteos del nmero de clulas encontradas;

diferencindolas en los diferentes estadios de desarrollo embrionario. Los resultados se
muestran a continuacin.

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 RESULTADOS

Estadios entre 1 a 4 clulas 20/04 4:38 pm

Estadio 4 clulas

Estadio 2 clulas

Tabla 3. Dos horas despus de la fecundacin, puede observarse clulas que han pasado la primera divisin y otras
que an no 20/04 4:38 pm

Conteo: 1 clulas (60), 2 clulas (262), 4 clulas (15) y en total 337 clulas

Estadios entre 2 a 8 clulas 20/4 5:53pm

Estadio 2 clulas

Estadio 4 clulas

Estadio 8 clulas

Tabla 4. Tres horas despus de la fecundacin, puede observarse clulas que han pasado la primera divisin y
segunda divisin

Conteo: 14 de una clula; 70 de 2 clulas, 215 de 4 clulas, 29 de ocho clulas y en total 328
clulas

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 20/04 Estadios entre 8 a 32 clulas. Hora: 19:45

Estadio 16 clulas

Estadio 4 clulas

Tabla 5. Siete horas despus de la fecundacin, se pueden observar estadios de 8 a 32 clulas. Estadios previos a la
formacin de blstula

La divisin celular

Caracteriza el paso del estado unicelular al estado pluricelular dado por mitosis sucesivas y
rpidas que conducen a la formacin de la blstula. Cada blastmero sufre una biparticin en
clulas jvenes. La segmentacin es total, igual y meridional hasta la fase de 8 blastmeros,
luego se vuelve desigual.

2 blastmeros

El primer surco de separacin aparece alrededor de una hora treinta despus de la fecundacin.
Una constriccin meridional resulta al mismo tiempo que nuevas membranas plasmticas son
elaboradas por los dos primeros blastmeros que nacen.

4-8 blastmeros

El segundo surco de separacin es tambin meridiano y perpendicular al primero, separando

cuatro clulas de dimensiones idnticas. El tercer surco de separacin es ecuatorial y
perpendicular a los dos precedentes. Se forman ocho clulas similares.

16 blastmeros

A partir de la fase 16 blastmeros, las divisiones celulares se convierten en desiguales. En el

hemisferio animal, los planes de separacin son meridianos y generan ocho clulas similares. En
el hemisferio vegetativo, los planes de separacin son latitudinales y claramente compensados
hacia el polo vegetativo. Dos clases de clulas hijas son resultantes: los macrmeros prximos a
Ecuador y los micromros del polo

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 Blstula 21/04 10:15 am

Blastocele
Blastocele

Blstula 21/04 12:40 pm

Blastocele

Tabla 6. Blstula, se puede observar el blastocele al interior del embrin.

Blastulacin

En los embriones con relativamente poco vitelo

(huevo oligolecito) -como en el erizo de mar- la
segmentacin es uniforme, abarca el embrin
entero y forma clulas de tamao similar.
El embrin luego pasa por una etapa de mrula.
Luego se crea una cavidad llena de fluido en el
centro del embrin, conocida como blastocele.
Cuando el blastocele est completamente formado,
el embrin se llama blstula y sus clulas son las
blastmeras. La blstula del erizo de mar tiene,
aproximadamente, el mismo tamao que la clula
huevo a partir de la cual se desarroll.

Grafica 1. Comparacin entre formacin del

blastocele en erizo de mar, rana y ave.

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 Prisma 22/04 9:40 am
Blastoporo Blastoporo

Prisma 22/04 1:45 pm

Ectodermo Blastoporo
Ectodermo
Blastoporo

Clulas del mesodermo

Tabla 7. Prisma, se empiezan a formar las capas embrionarias. Se puede notar el blastoporo.

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Gastrulacin

En el erizo de mar, la gastrulacin propiamente dicha comienza con la formacin del blastoporo,
una abertura en la blstula. Luego, la capa entera de clulas ms prxima al blastoporo se
invagina, movindose a travs del blastocele hacia el polo opuesto y formando el arquentern
que finalmente desarrollar el tubo digestivo. El blastoporo se transformar en el ano. La
formacin del ano en el blastoporo -o cerca de l- es la caracterstica que define a los
deuterstomos, que incluyen a los equinodermos y a los cordados.

Grafica 2. Proceso de gastrulacin, formacin del blastoporo y las capas germinales.

Larva pluteus temprana 23/04 1:30 pm

Tabla 8. Larva pluteus

La larva plutus es nadadora y planctnica. Avanza dirigiendo su cara oral hacia el frente. El
pluteus se alimenta con diatomeas planctnicas para luego a travs de metamorfosis producir
un joven erizo de mar.

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 DISCUSION DE RESULTADOS
Luego de estimular la fecundacin del erizo de mar se observ al microscopio los cambios
instantneos que sufra el cigoto recin fecundado; el cambio principal fue la formacin de la
membrana de fecundacin la cual se vio en forma de halo y que implica el desarrollo de un
mecanismo de prevencin de la polispermia (Giudice 1973), tambin se observ la presencia de
varios espermatozoides adheridos a la superficie del cigoto recin fecundado los que no pueden
ingresar debido a la formacin de esta. Estos procesos incluyen la activacin de los grnulos
corticales, lo cual constituye un bloqueo mecnico contra la polispermia que llega a activarse
cerca de un minuto despus de la primera fusin exitosa entre el espermatozoide y el gameto
femenino.

Conforme las horas fueron avanzando y se realizaban los monitoreos a intervalos de tiempo, se
observaron las clulas realizando clivajes. Cada vez que ocurre una divisin en la clula, los
blastmeros resultantes son de menor tamao por lo cual Balinsky (1978) afirma que los
blastmeros no aumentan de tamao antes de que empiece la siguiente divisin, por lo que
despus de cada divisin celular, los blastmeros resultantes tienen la mitad del tamao original
En las primeras horas se ven clulas de 2, 4 y 8 blastmeros dentro de las primeras 3 horas de
producida la fecundacin. Se hicieron dos conteos del nmero de clulas presentes en estadios
tempranos y se observ que conforme el tiempo transcurra la proporcin de embriones en
distintos estadio variaba; disminuyendo los de estadios iniciales (1 y 2 blastmeros) y
aumentando los de estadios siguientes (4 y 8 blastmeros), productos del clivaje de los
anteriores.

Las fases de blstula y gstrula se observaron a las 20 horas y 44 horas despus de la fertilizacin,
cuando la gstrula tiene una forma de cono alargado luego del cual aparecen las espculas y se
transforma en larva pluteus. (Ruppert y Barnes 1996).

En esta especie de erizo no es fcil la observacin de estructuras en los diferentes estadios

debido a la pigmentacin caracterstica presentada, estudios en otras especies como Lytechinus
variegatus (Gmez M., 2005) permiten observar claramente el nmero de clulas en estadios
tempranos as como la gastrulacin y formacin del arquentern debido a que el embrin es
ms transparente.

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 BIBLIOGRAFIA

1. Ivan Fuentes, Claudio Barros, Larval development and metamorphosis of cultured

Tetrapygus niger (Echinodermata Echinoidea): an uncommon form of echinoplutei

2. Scott F. Gilbert, Biologa del desarrollo

3. Frank J. Dye, Dictionary of Developmental Biology and Embryology

4. M. F. Barker, Echinoderms 2000: Proceedings of the 10th International Conference,

Dunedin

5. Giudice, G. 1973. Developmental biology of the sea urchin embryo. Academic Press,
New York. London 469 p

6. Olga Gmez M., Alfredo Gmez G. (2005) Desarrollo embrionario y larval de

Lytechinus variegatus (Echinoidea: Toxopneustidae) en condiciones de laboratorio en
la Isla de Margarita-Venezuela. Rev. Biol. Trop 53 : 313-318

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