Práctica 6
Práctica 6
Práctica 6
5. Investigar qué otros medios de cultivo pueden emplearse para que se formen las
clamidoconidias, además del agar harina de maíz. Anotar los componentes de cada uno de
ellos.
Agar arroz:
Pasta de tomate (Hunt’s) 10 g. Cereal mixto para bebé (Beech-nut o fruto del haya) 10 g. Sulfato
de magnesio 1 g. Fosfato de potasio 1 g. Nitrato de sodio 1 g. Agar bacteriológico 20 g. Agua
destilada 1 000 ml.
Preparación: mezclar y llevar a ebullición. Enfriar y ajustar pH de 5.6 con NaOH. Esterilizar a 121°C
durante 20 minutos.
Pulpa de zanahoria 20 g. Pulpa de papa 20 g. Agar bacteriológico 20 g. Agua destilada 1 000 ml.
Preparación: las pulpas maceradas se hierven a fuego lento por 1 h, posteriormente se filtran con
gasa y se le adiciona al filtrado la cantidad respectiva de agua para completar a 1 L. Se esteriliza en
autoclave a 121°C, durante 15 minutos.
Se realiza en suero humano o sueros con glucosa, glucosamina o sales de amonio. Se siembra la
cepa a investigar en 0.5 ml de suero, se incuba a 37°C durante 3 a 3½ horas, después se practica
un examen en fresco con algún colorante o tinción (Gram).
Preparación: remojar el alpiste negro en 1 000 ml de agua, hervir durante 30 minutos; después
filtrar en gasa y papel fi ltro. Aforar a 1 000 ml de agua. Esterilizar en autoclave a 110°C, por 15
minutos.
Se realiza en medio sólido base peptonado, carente de carbohidratos, los cuales se agregan en
forma de penicilindros o sensidiscos (de manera similar a como se emplean en los antibiogramas);
con anticipación se siembra la cepa problema, y el carbohidrato a investigar se aplica en una
solución del 1 al 2%; se incuban a 25°C durante cinco a 15 días. El desarrollo de la colonia
alrededor del carbohidrato indica una lectura positiva.
Debe realizarse en medio de cultivo líquido con una proporción de carbohidrato que fl uctúa entre
1 y 5%, agregándole un indicador para pH ácido (rojo fenol o púrpura de bromocresol) y una
campana de fermentación, para detectar la producción de gas. Los medios se siembran a partir de
colonias diferenciadas, después se incuban a 25°C durante 5 a 15 días; la lectura debe hacerse por
el viraje del indicador, así como por la formación de gas.