PRODUCCION

BIOTECNOLOGICA DE ACIDO
POLILACTICO
Separación y purificación de PLA

Laboratorio y taller de proyectos 7°

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Profra: ARABE
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INTRODUCCIÓN

El ácido láctico tiene un amplio rango de aplicaciones en la industria alimenticia, química, farmacéutica,
química y cosmética, entre otras. Recientemente se ha acelerado la investigación en L (+) y D (-), ácido láctico,
por vía biotecnológica, debido a su posibilidad de transformación en poli-láctico biodegradable (PLA). Los
esfuerzos en la investigación del ácido láctico, están enfocados a disminuir los costes de producción a través
de nuevos sustratos, nuevas tecnologías de fermentación y separación, y nuevos microorganismos capaces de
alcanzar altas concentraciones de ácido láctico, altos rendimientos y altas productividades

El ácido láctico fue descubierto en 1780 por el químico sueco Scheele, quien lo aisló de leche agria, fue
reconocido como producto de fermentación por Blonodeaur en 1847 y tan solo en 1881, Littlelon inicia la
fermentación a escala industrial. Es un compuesto muy versátil utilizado en la industria química, farmacéutica,
de alimentos y de plásticos.

En 1932 Wallace Carothers, científico para Dupont, obtuvo un producto de poco peso molecular calentando
ácido láctico al vacío. En 1954, después de otras mejoras, Dupont patento el proceso de Carothers.

Cargill fue una de las primeras compañías que desarrollo los polímeros de ácido poliláctico. Cargill comenzó a
investigar la tecnología de producción de PLA en 1987, y su producción en planta data de 1992. En 1997 Cargill
se asoció con la empresa Dow Chemical Company, creando LLC de los polímeros de Cargill (CDP), instalado
en Blair, Nebraska.

Un impedimento importante en el desarrollo del polímero ha sido el elevado costo de producción. Pero gracias
a los avances en la fermentación de la glucosa para obtener ácido láctico, ha experimentado una bajada
importante el costo de producción del ácido láctico y por consiguiente, un interés creciente en el polímero.

Existen dos procesos básicos de obtención de ácido láctico (LA) que consisten en rutas químicas y
biotecnológicas. Actualmente la ruta biotecnológica produce más del 95 % del consumo mundial de LA.

Existen dos isómeros ópticos, el D (-), láctico y el L (+) láctico y una forma racémica constituida por fracciones
equimolares de las formas D (-) y L (+). A diferencia del isómero D (-), la configuración L (+) es metabolizada
por el organismo humano.

Ambas formas isoméricas del ácido láctico pueden ser polimerizadas y se pueden producir polímeros con
diferentes propiedades dependiendo de la composición.

FUNDAMENTO

Debido a la naturaleza quiral del ácido láctico, pueden obtenerse distintos tipos de polímero: el poliácido-L-
láctico (PLLA) es el producto resultante de la polimerización de ácido L, L-láctico (también conocido como L-
láctico). El PLLA tiene una cristalinidad de alrededor del 37%, una temperatura de transición vítrea entre 60-
65ºC, una temperatura de fusión entre 173-178ºC y un módulo de elasticidad entre 2,7 a 16 GPa. Sin embargo,
el PLA resistente al calor pueden soportar temperaturas de 110ºC (230º F).
El PLA tiene propiedades mecánicas similares al PET, pero tiene una temperatura máxima de uso continuo
significativamente más bajos.
El ácido poliláctico se puede procesar, como la mayoría de los termoplásticos, en fibra (por ejemplo, usando el
proceso convencional de hilatura por fusión) y en película. La temperatura de fusión del PLLA se puede
aumentar 40-50ºC y la temperatura de deflexión al calor puede incrementarse en aproximadamente 60ºC hasta
190ºC por mezclado físico del polímero con PDLA (poliácido-D-láctico). El PDLA y el PLLA forman un
estereoconflexión muy regular con mayor cristalinidad. La estabilidad de la temperatura se maximiza cuando se
utiliza una mezcla 50:50, pero incluso a bajas concentraciones de 3.10% de PDLA, existe una mejora sustancial.
En este último caso, el PDLA actúa como un agente de nucleación, lo que aumenta la velocidad de cristalización.
La biodegradación de PDLA es más lenta que para el PLA debido a la mayor cristalinidad del PDLA. El PDLA
tiene la útil propiedad de ser ópticamente transparente.
También hay poliácidos (L-láctico-co-D, L-láctico) (PLDLLA), usado como PLDLLA / TCP (andamios) para la
ingeniería del hueso.

Propiedades del ácido láctico

Fórmula C3H6O3
Peso molecular 90,08
Índice de refracción 1,4414
Punto de fusión L(+) y D(-) 52,8 a 54 ºC
Punto de ebullición 125-140 ºC
Gravedad específica 1206
Calor de combustión 3616 cal/g
Viscosidad 40,33 mNsm-2
Densidad 1,249
Constante dieléctrica 22ε

PRODUCCIÓN INDUSTRIAL

El ácido láctico puede ser obtenido por vía química o biotecnológica. La producción química, está basada en
la reacción de acetaldehído con ácido cianhídrico (HCN) para dar lactonitrilo, el cual puede ser hidrolizado a
ácido láctico; otro tipo de reacción se basa en la reacción a alta presión de acetaldehído con monóxido de
carbono y agua en presencia de ácido sulfúrico como catalizador. La síntesis química tiene la desventaja que
el ácido láctico producido es una mezcla de D y L ácido láctico óptimamente inactivo, por lo cual el 90% del
ácido láctico producido en el mundo es elaborado por vía biotecnológica.

La producción biotecnológica está basada en la fermentación de sustratos ricos en carbohidratos por bacterias
u hongos y tiene la ventaja de formar enantiómeros D (-) o L (+), óptimamente activos. La producción
biotecnológica depende del tipo de microorganismo utilizado, la inmovilización o recirculación del
microorganismo, el pH, la temperatura, la fuente de carbono, la fuente de nitrógeno, el modo de fermentación
empleado y la formación de subproductos.

Las bacterias que pueden utilizarse para la producción de ácido láctico son cocos y bacilos Gram positivos,
anaerobios facultativos, no esporulados, inmóviles y catalasa negativo, pertenecientes a los géneros
Lactobacillus, Carnobacterium, Leuconostc, Tetragenococus,…

Las bacterias del ácido láctico (LAB) tienen requerimientos nutricionales complejos debido a su limitada
habilidad para sintetizar aminoácidos y vitamina B. La mayoría de LAB producen únicamente una forma
isomérica de ácido láctico. Las especies de los géneros Aerococcus, Carnobacterium, producen únicamente
isómeros L, mientras las especies del género Leuconostc producen únicamente isómeros D. Sin embargo,
algunas LAB producen formas racémicas donde el isómero predominante depende de cambios en la aireación,
cantidad de NaCl, tipo de fermentación, incrementos en el pH y concentración de sustrato.

Acorde con los productos finales de la fermentación de los hidratos de carbono las LAB se dividen en
homofermentativas y heterofermentativas. En el metabolismo homofermentativo, se produce
predominantemente ácido láctico y las bacterias usan la hexosa. Algunas de las bacterias que tienen este
metabolismo son delbruekii, helveticus, etc. La estequiometría clásica de la fermentación homoláctica es la
siguiente:

C6H12O6 + 2 ADP + 2 Pi => 2CH3-CHOH-COOH + 2 ATP

En la fermentación heteroláctica hay formación de xilulosa-5 fosfato por el sistema de la glucosa-6 fosfato
deshidrogenada. La estequimetría heteroláctica a partir de glucosa es la siguiente:

C6H12O6 + 2 ADP + 2 Pi => CH3-CHOH-COOH + CH3CH2OH+CO2+ 2ATP

El ácido láctico además puede ser producido en mayor o menor proporción por bacterias que no suelen incluirse
en el grupo láctico, tal es el caso de Bifidobacterium, algunas especies de Bacillus, Clostridium,…

De las LAB, Lactobacillus delbrueckii es el microorganismo más utilizado en la producción a gran escala de
ácido láctico, ya que tiene la ventaja de producir únicamente isómeros L (+), consumir eficientemente glucosa
y ser un microorganismo termófilo con temperatura óptima de crecimiento 41.5ºC, lo que reduce costes de
enfriamiento y esterilización, así como riesgos de contaminación microbiológica en el fermentador. Este
microorganismo crece bien a un pH entre 5,5 y 6,5 por lo que el ácido producido debe ser continuamente
neutralizado.

Los hongos utilizados en la producción de ácido láctico son mohos y levaduras que pertenecen a los géneros
Rhizopus, Zymomonas, Saccharomyces. Desde finales de los años 80, se ha venido estudiando ampliamente
Rhizopus oryzae para la producción biotecnológica de ácido láctico ya que presenta la ventaja de que no
requiere fuente de nitrógeno orgánico para su crecimiento, tiene la habilidad de producir directamente grandes
cantidades de L (+) ácido láctico de almidón y es fácilmente separado del medio de fermentación en el proceso
de recuperación y purificación. Sin embargo la dificultad que presenta la producción de ácido láctico con moho
es su forma física ya que el gran tamaño de los micelios o sus agregados puede provocar un aumento en la
viscosidad del medio de fermentación lo que causa un alto incremento en la demanda de oxígeno y resistencia
a la transferencia de masa en el proceso fermentativo, lo que a su vez aumenta los tiempos de fermentación,
aumenta los subproductos formados especialmente etanol, y disminuye los rendimientos en conversión.

En la producción biotecnológica de ácido láctico con bacterias o con hongos, se utilizan como sustratos,
sacarosa proveniente de la caña de azúcar y de la remolacha azucarera, pero debido a que el azúcar puro es
de alto coste se han venido investigando otros sustratos (desechos agrícolas) para disminuir los costes de
producción. Sin embargo la producción de ácido láctico de estas fuentes renovables requiere de los siguientes
pasos:

1) Hidrólisis del sustrato hasta azúcares fermentables.

2) Fermentación de azúcares a ácido láctico.

3) Separación de biomasa y partículas sólidas del medio de fermentación.

4) Purificación del ácido láctico obtenido.

En la obtención comercial con bacterias lácticas, al sustrato puro se le adiciona una fuente de vitaminas y de
cofactores, se utiliza una mezcla de de 10 a 15% de glucosa, cantidades menores de fosfato de amonio, extracto
de levadura y 10% neutralizante. El medio se inocula y se agita sin aireación para optimizar la neutralización
del ácido formado. La fermentación dura entre 2 a 4 días y se termina cuando todo el azúcar es consumido, con
el fin de facilitar la purificación. Al final de la fermentación el medio es ajustado a pH 10 y si se utiliza carbonato
de calcio, el medio es calentado para solubilizar el lactato de calcio y coagular proteínas presentes.
Posteriormente el medio se filtra para eliminar sustancias insolubles, así como biomasa. El ácido libre se obtiene
por adición de ácido sulfúrico seguido de filtración para eliminar el sulfato de calcio formado. El ácido láctico es
entonces concentrado por evaporación.

Debido a que el tipo de fermentación descrito ( en discontinuo) está limitado por el daño que sufren las células
por la acumulación en el medio de fermentación de la forma no disociada del ácido, se han investigado otros
modos de fermentación como son la fermentación en discontinuo con alimentación intermitente y la
fermentación en continuo y se han desarrollado una serie de procesos basados en la eliminación del producto
por filtración y concentración de las células usando una unidad de retención. La fermentación en discontinuo
con alimentación intermitente es un proceso en el cual el birreactor es alimentado de continua o
secuencialmente con sustrato, sin la eliminación del medio de fermentación, mientras que la fermentación en
continuo la corriente de producto posee la misma composición que el líquido presente en el reactor. La
fermentación en continuo da en la mayoría de los casos mayores concentraciones y mayores rendimientos,
comparado con la fermentación en discontinuo.

RECUPERACIÓN Y PURIFICACIÓN

La separación, purificación y preconcentración del ácido láctico obtenido de los medios de fermentación es
difícil debido a la alta afinidad del ácido por el agua y a su baja volatilidad. En la mayoría de los procesos, el
ácido láctico es recuperado bajo la forma de lactato de calcio, y los tratamientos posteriores van a depender de
la pureza deseada e incluyen: tratamiento con carbón activo, purificación con resinas de intercambio iónico,
extracción con solventes o esterificación con metanol seguido por destilación e hidrólisis.

Sin embargo, con el fin de limpiar los residuos generados en el proceso, se han desarrollado otros métodos
de recuperación y purificación que incluyen clarificación de medios de fermentación por microfiltración con flujo
cruzado, tratamientos con resinas, entre otras.

Comparado con técnicas de adsorción, precipitación o filtración por membranas, el método de extracción por
solventes con componentes organofosforados, aminas terciarias o amonios cuaternarios, es más selectivo y
favorece la eficacia del proceso y la pureza del producto obtenido. Sin embargo los solventes orgánicos plantean
dos problemas: son tóxicos para los microorganismos y el pH óptimo de la extracción y de la fermentación no
coinciden, por lo que se ha propuesto el uso de membranas poliméricas de Triacetato de celulosa con sales de
amonio cuaternario como fase móvil y o-nitrofeniloctil éter como plastificante, para la separación in situ de ácido
láctico.

En cuanto a la electrodiálisis, es un proceso que ha sido diseñado para separar, purificar y concentrar sales
de ácidos de medios de fermentación. El método permite separar el ácido a medida que se produce, eliminando
la necesidad de agregar agentes neutralizantes. La concentración de ácido en el medio de cultivo por este
sistema permanece en niveles muy bajos, por lo cual se ha evaluado una modificación al mismo que emplea la
electodiálisis periódica acoplada a un sistema de control de pH, lo que hace que se aumente la concentración
de lactato en el medio y se disminuyan los tiempos de fermentación. Con este método de fermentación se
aumenta la productividad 1,5 veces respecto a la electrodiálisis convencional.

La electrodiálisis puede además utilizarse después de la fermentación tipo batch y más recientemente se han
propuestos sistemas en continuo que tienen la ventaja de mantener constante el volumen del medio de
fermentación y de disminuir las pérdidas de glucosa en la solución recuperada, por este método se logra obtener
19,5 veces más ácido láctico que con la electrodiálisis convencional y 9,7 veces más ácido láctico comparado
con la electrodiálisis intermitente.

A pesar de todos estos avances la mayoría de industrias productoras de ácido láctico emplean aún los
procesos de precipitación para la purificación de ácido láctico, lo cual genera una tonelada de yeso por cada
tonelada de ácido láctico producido que se desecha al ambiente como residuo.

USOS Y ESPECIFICACIONES

Una de las características que ha suscitado gran interés en el PLA es su capacidad de biodegradarse bajo
condiciones adecuadas a diferencia del resto de los polímeros. Lo que le confiere una gran ventaja desde el
punto de vista ecológico. Además es un polímero obtenido de recursos renovables.
El ácido láctico y sus derivados como sales y ésteres son ampliamente utilizados en la industria alimenticia,
química, farmacéuticas, del plástico, textil, la agricultura, alimentación animal entre otros.

En la industria alimenticia se usa como acidulante y conservante. Las industrias químicas lo utilizan como
solubilizador y como agente controlador de pH. En la producción de pinturas y resinas, puede ser utilizado como
solvente biodegradable. En la industria de plásticos es utilizado como precursor del ácido poliláctico (PLA), un
polímero biodegradable con interesantes usos en la industria y la medicina; se considera ésta la principal
aplicación del ácido y la causa por la cual a aumentado considerablemente su demanda.

Mezclas de estéreo-complejas de PDLA y PLLA tienen una amplia gama de aplicaciones, tales como camisas
de tejido, bandejas para microondas, las aplicaciones de llenado en caliente, e incluso plásticos de ingeniería
(en este caso, el estéreo-complejo se mezcla con un polímero similar al caucho, tales como ABS ). Tales
mezclas tienen una buena estabilidad y transparencia, que los hace útiles para aplicaciones de embalaje de
gama baja.

Avances de la biotecnología se ha traducido en el desarrollo de la producción comercial de la forma enantiómero

D, algo que no era posible hasta hace poco
El PLA se utiliza actualmente en una serie de aplicaciones biomédicas, tales como suturas, stents, medios de
diálisis y dispositivos de administración de fármacos. El tiempo de degradación total del PLA es un par de años.
También se están evaluando como material para la ingeniería de tejidos y huesos. El PLDLLA es ampliado con
ß-TCP (fosfato beta tricálcico). El material cerámico ß-TCP es similar a los componentes minerales del tejido
óseo. Por este motivo, los tornillos alcanzan resultados extraordinarios en la reabsorción y el reemplazamiento
óseo.

El PLA es una alternativa sostenible a los productos derivados de la industria petroquímica, ya que es obtenido
de la fermentación de subproductos agrícolas, tales como almidón de maíz y otras sustancias ricas en
carbohidratos, como el maíz, la caña azúcar o el trigo.
El PLA es más costoso que muchos materiales convencionales derivados del petróleo, pero su precio ha ido
cayendo a medida que aumenta la producción y aumenta el precio del petróleo.
El PLA se utiliza para vasos desechables biodegradables y compostables para bebidas frías, bolsas y envases
tipo almeja para empaque de alimentos, bolsitas de té, platos y cubiertos desechables, etc.

Las botellas son la aplicación más novedosa del PLA que ofrece sus mejores prestaciones en aguas, leche y
yogur, aceite vegetal y zumos frescos. No así en bebidas carbónicas, para las cuales su barrera a los gases no
es suficiente. La empresa británica Belu Water vende una botella de agua hecha con PLA desde julio 2005.

OBJETIVOS

 Llevar a cabo el proceso de esterificación del acido láctico a partir de biomasa

 Separar el acido obtenido de los demás subproductos mediante destilación
 Purificar el acido ya separado por evaporación
 Esterificar el acido láctico para obtener acido polilactico (PLA)

HIPOTESIS

Si mediante la reacción de esterificación, utilizando el acido láctico como precursor, entonces se espera obtener
el monómero lactato, precedente del PLA.

CONCLUSIONES

El PLA es un polímero biodegradable hecho de recursos renovables. Y como material versátil que es, está
aumentando su uso en la medicina, en las diferentes aplicaciones de la industria textil y del empaquetado,
principalmente en esta industria esta despertando mucho interés por sus excepcionales características y su
biodegradabilidad. El PLA es un polímero que veremos mucho en el futuro por ser una verdadera innovación
en materiales de empaquetado.

BIBLIOGRAFIA
www.leia.es
www.ptonline.com
www.sciencedirect.com
www.bioplastics24.com
www.fpintl.com
CHEMICAL MARKET REPORTER - VOLUME 260 NO.8
www.eis.uva.es