Guía de Laboratorio de Análisis Instrumental
Guía de Laboratorio de Análisis Instrumental
Guía de Laboratorio de Análisis Instrumental
ANÁLISIS INSTRUMENTAL I
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Guía de Prácticas de Laboratorio - Análisis Instrumental
ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN 4
2. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO 4
3. INSTRUCCIONES GENERALES 9
4. EVALUACIÓN 9
5. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA 9
6. PRÁCTICAS DE LABORATORIO 10
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Guía de Prácticas de Laboratorio - Análisis Instrumental
1. INTRODUCCIÓN
Ingeniería Química es una disciplina que traslada los resultados obtenidos en el laboratorio al
diseño de procesos industriales que permiten transformar las materias primas en productos
elaborados, los cuales pretenden mejorar la calidad de vida del ser humano. Es por ello una
disciplina mundialmente reconocida desde hace muchos años.
Conocer acerca del trabajo en el laboratorio es por tanto importante en la formación del
ingeniero, pues ello le permite acercarse a los fenómenos físicos y químicos de manera
controlada antes de ponerlos en práctica a nivel industrial. Además, cabe recalcar que muchos
de los datos que sirven como sustento para un diseño son obtenidos de experiencias en
laboratorio.
Este manual ha sido diseñado con el propósito de poner en práctica la teoría adquirida en esta
asignatura. Además, de que el estudiante adquiera la experticia necesaria para desenvolverse en
un laboratorio de manera segura y con el conocimiento necesario para poder reaccionar ante un
incidente con base en las fichas de seguridad de cada uno de los reactivos utilizados. El
estudiante trabajará con una gran variedad de reactivos químicos, aprenderá acerca de sus
características, manejo, y disposición final.
2. SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
La seguridad es muy importante al momento de trabajar en un laboratorio, como ya se mencionó
el estudiante estará en constante contacto con reactivos químicos los cuales deben ser
manejados con base en sus fichas de seguridad para evitar cualquier incidente. A lo largo de esta
sección se mencionarán algunas reglas a seguir durante el trabajo en las prácticas
experimentales.
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Grado técnico: Los reactivos de grado técnico se emplean generalmente para análisis
cualitativo ya que su pureza no está comprobada, también se los conoce como grado comercial,
pues son el tipo de reactivo que se utiliza en un proceso industrial.
Grado USP (United States Pharmacopeia): Estas substancias tampoco son aconsejables para
su uso en procesos analíticos, sin embargo, cumplen las especificaciones que exigen las normas
de los Estados Unidos en cuanto a contenidos máximos de contaminantes no peligrosos.
Grado Reactivo o Analítico (ACS): Estos reactivos cumplen las especificaciones del Reagent
Chemical Committee of the American Chemical Society (ACS), se pueden emplear en el trabajo
analítico generalmente se presentan con una etiqueta donde aparecen los porcentajes máximos
de impureza permitidos por dicha entidad internacional.
Grado estándar primario: Son reactivos de alta pureza y los resultados de los análisis
realizados sobre ellos aparecen en las etiquetas. Se emplean como patrones primarios en la
preparación de soluciones estándares.
Otros reactivos químicos: Son substancias que se preparan para su uso en aplicaciones
específicas, como solventes para espectroscopia y para cromatografía líquida de alta eficiencia.
En las etiquetas llevan la información pertinente.
Es importante que el estudiante conozca esta clasificación puesto que de acuerdo con la práctica
a realizar se requerirá que los reactivos tengan un grado de pureza determinado.
Los reactivos químicos por otra parte también pueden clasificarse por su peligrosidad, esta
clasificación es muy importante para conocer cómo manejar una substancia y cómo reaccionar
en caso de algún incidente. A continuación se presentan los pictogramas de seguridad más
usados asociados al tipo de reactivo químico.
Corrosivos: Sustancias que en contacto con los tejidos vivos puedan ejercer
sobre ellos una acción destructiva. Ej: Ácido Sulfúrico.
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De acuerdo con esta información se presentan a continuación las normas para trabajar con
reactivos en el laboratorio.
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gran cantidad de agua. Los líquidos insolubles, y sólidos o líquidos tóxicos o peligrosos se
guardan en recipientes adecuados.
NO apuntar a nadie, ni a sí mismo, al abrir los frascos de reactivos y los embudos de
separación.
Tener cuidado al trabajar con sustancias inflamables, hacerlo en lugares ventilados y lejos
de fuentes de calor (mecheros, reverberos, muflas, resistencias, serpentines eléctricos, etc.)
Nunca calentarlas aún en cantidades pequeñas con o cerca de una llama; a menos que el
solvente esté en un frasco bajo reflujo o unido a un sistema de destilación. No verter
solventes inflamables de un recipiente a otro cuando se halle cerca una llama.
Nunca calentar sistemas cerrados.
Nunca pesar los sólidos (especialmente NaOH, es altamente corrosivo) directamente en el
plato de la balanza; usar siempre un recipiente de vidrio o papel.
NO REETIQUETAR ninguna botella o recipiente.
Fuego grande: Cerrar la entrada de gas inmediatamente, aislar el fuego utilizar los extintores
adecuados Si el fuego no se puede controlar rápidamente, avisar a los bomberos y evacuar el
edificio.
Fuego en el cuerpo: Si se incendia la ropa estirarse en el suelo y rodar sobre sí mismo para
apagar las llamas. No correr ni intentar llegar a la ducha de seguridad si no está muy cerca. Es
responsabilidad ayudar a alguien que se esté quemado Cubrirlo con una manta anti fuego,
conducirlo hasta la ducha de seguridad, si está cerca o hacerle rodar por el suelo. No utilizar
nunca un extintor sobre una persona Una vez apagado el fuego, mantener a la persona tendida y
proporcionarle asistencia médica.
Quemaduras: Las pequeñas quemaduras producidas por material caliente, baños, placas o mantas
calefactores, etc, se tratarán lavado la zona afectada con agua fría durante 10 - 15 minutos. Las
quemaduras más graves requieren atención médica inmediata. No utilizar cremas y pomadas grasas
en las quemaduras graves.
Cortes: Los cortes producidos por la rotura de material de cristal son un riesgo común en el
laboratorio. Estos cortes se tienen que lavar bien, con abundante agua, corriente, durante 10
minutos como mínimo. Si son pequeños y dejan de sangrar en poco tiempo, lavarlos con agua y
jabón y taparlos con una venda u oposito adecuado. Si son grandes y no paran de sangrar,
requiere asistencia médica inmediata.
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Derrame de productos químicos sobre la piel: Los productos químicos que se hayan vertido
sobre la piel han de ser lavados inmediatamente con agua corriente abundante, como mínimo
durante 15 minutos. Las duchas de seguridad instaladas en los laboratorios serán utilizadas en
aquellos casos en que la zona afectada del cuerpo sea grande y no sea suficiente el lavado en un
fregadero. Es necesario sacar toda la ropa contaminada a la persona afectada lo antes posible
mientras esté bajo la ducha. Recuerda que la rapidez en el lavado es muy importante para
reducir la gravedad y la extensión de la herida. Proporcionar asistencia médica a la persona
afectada.
Corrosiones en la piel:
Por ácidos: Cortar lo más rápidamente posible la ropa. Lavar con agua corriente
abundante la zona afectada. Neutralizar la acidez con bicarbonato sódico durante 15-20
minutos. Sacar el exceso de pasta formada, secar y cubrir la parte afectada con
linimento óleo – calcáreo o parecido.
Por álcalis: Lavar la zona afectada con agua corriente abundante y aclararla con una
disolución saturada de ácido bórico o con una disolución de ácido acético al 15%. Secar
y cubrir la zona afectada con una pomada de ácido tánico.
Corrosiones en los ojos: En este caso el tiempo es esencial (menos de 10 segundos) Cuanto
antes se lave el ojo, menos grave será el daño producido. Lavar los dos ojos con agua corriente
abundante durante 15 minutos como mínimo en una ducha de ojos y, si no hay, con un frasco
para lavar los ojos. Es necesario mantener los ojos abiertos con la ayuda de los dedos para
facilitar el lavado debajo de los párpados. Es necesario recibir asistencia médica, por pequeña
que parezca la lesión.
IMPORTANTE: NO bloquear los pasillos, ni las salidas para que las personas puedan
circular fácilmente por el laboratorio y salir en caso de emergencia. El incumplimiento de
cualquiera de las reglas antes mencionadas involucra la expulsión del laboratorio y la no
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3. INSTRUCCIONES GENERALES
Las prácticas del Laboratorio de Análisis Instrumental son semestrales y tienen como co-
requisito la materia de Análisis Instrumental.
Para aprobar el laboratorio, cada estudiante deberá realizar TODAS las prácticas, presentar
un informe por cada una de ellas. Para recuperar una práctica no realizada se deberá
presentar una solicitud con la justificación correspondiente validada por la oficina de
Bienestar Estudiantil en el plazo máximo de 48 horas.
Durante la práctica se evaluará el fundamento teórico y el procedimiento como parte de la
participación, cabe indicar que el coloquio puede ser individual o grupal.
Las prácticas de laboratorio comienzan a la hora indicada. El coloquio se tomará 5 minutos
después. En caso de retraso no se podrá rendir el coloquio.
La práctica solo se podrá realizar en presencia del profesor y/o del ayudante.
Las prácticas se realizarán en grupos a los cuales se les entregará el material correspondiente
el mismo día de su realización, TODOS los miembros del grupo serán responsables del
material, cualquier pérdida, extravío o deterioro del mismo deberán reponerlo con uno de las
MISMAS CARACTERÍSTICAS.
Los informes deberán ser presentados según el formato establecido. La bibliografía se
redactará según el formato de tesis de la FIQA (APA 6ta edición).
La discusión debe tratar sobre los resultados, analizar sus posibles causas y compararlos con
otras investigaciones desarrolladas acerca del tema (bibliografía).
4. EVALUACIÓN
Cada práctica se calificará sobre 10 puntos en los cuales se evaluará la participación, el informe
y el coloquio como se detalla en la Tabla 1.
5. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA
Skoog Douglas., Principios de Análisis Instrumental, Cenagel, Sexta Edición, México,
2008.
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6. PRÁCTICAS DE LABORATORIO
6.1. P1. CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA
Preguntas antes de empezar la práctica
NOTA: El día de la práctica los estudiantes deberán traer hojas de espinaca frescas, una
regla de 30 cm y un lápiz de grafito.
Objetivos
Identificar sustancias no coloreadas por medio de cromatografía de capa fina con el uso de
revelado UV y revelado químico.
Materiales y Reactivos
Separación de Aminoácidos
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Procedimiento
4. Con la ayuda de un lápiz trazar líneas paralelas en la placa cada 3 cm. Tener en cuenta
de no dañar su superficie. Aplicar el extracto a 2 cm del extremo inferior de la placa con
el uso de un capilar para ello mantener el capilar en posición vertical respecto a la placa
y dejar fluir el extracto hasta lograr una mancha bien concentrada.
6. Colocar la placa cromatográfica sobre el eluyente, de manera que éste no llegue a tocar
las marcas con la muestra, esperar que el eluyente suba por la placa, y arrastre los
componentes del extracto.
Separación de Aminoácidos
1. Con la ayuda de un lápiz trazar líneas paralelas cada 3 cm empleando un lápiz. Tener en
cuenta de no dañar la superficie de la placa. Aplicar las muestras de aminoácidos a 2 cm
del extremo inferior de la placa con el uso de un capilar para ello mantener el capilar en
posición vertical respecto a la placa y dejar fluir el extracto hasta lograr una mancha
bien concentrada.
3. Colocar la placa cromatográfica sobre el eluyente, de manera que éste no llegue a tocar
las marcas con la muestra, esperar que el eluyente suba por la placa, y arrastre las
muestras.
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4. Luego de que la fase móvil haya ascendido ¾ partes de la placa, retirarla y marcar
inmediatamente el frente del solvente. Dejar que el solvente se evapore al ambiente.
5. Rociar la placa con la solución reveladora y esperar 30 min hasta que la reacción se
lleve a cabo. Analizar y determinar los componentes y determinar sus Rf.
1. Con la ayuda de un lápiz trazar líneas paralelas cada 3 cm. Asegurarse de no dañar la
superficie de la placa. Aplicar las muestras a 2 cm del extremo inferior de la placa con
el uso de un capilar para ello mantener el capilar en posición vertical respecto a la placa
y dejar fluir el extracto hasta lograr una mancha bien concentrada.
3. Colocar la placa cromatográfica sobre el eluyente, de manera que éste no llegue a tocar
las marcas con la muestra, esperar que el eluyente suba por la placa, y arrastre las
muestras.
4. Luego de que la fase móvil haya ascendido ¾ partes de la placa, retirarla y marcar
inmediatamente el frente del solvente. Dejar que el solvente se evapore al ambiente.
5. Llevar la placa cromatográfica a la cámara ultravioleta y señalar las marcas con lápiz.
Analizar y determinar los componentes y determinar sus Rf.
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Objetivos
Metodología
3. Realizar lecturas de la absorbancia para todas las soluciones y con ello construir la
curva de calibración del colorante (Gráfica absorbancia vs concentración).
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Nota: los estudiantes deberán traer al menos 20 g de clavo de olor (no en polvo)
Objetivo
Estudiar la extracción sólido-líquido por medio del Soxhlet y el efecto del tamaño de partícula
sobre el rendimiento de la extracción.
Introducción
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Metodología
4. Colocar el solvente de extracción en los balones de destilación del equipo, con cuidado
de no perder el mismo.
7. Pesar el contenido final, calcular los costos y el rendimiento, compararlos entre sí y con
la bibliografía.
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Introducción
Figura 6.4.1. Estructura del rojo de metilo en medio básico y medio ácido
Objetivo
Determinar la influencia del pH en la extracción del rojo de metilo desde una disolución acuosa
a un disolvente orgánico y viceversa.
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Metodología
4. Tapar embudo con firmeza para que no se salga líquido al invertir, y sácalo del aro
sujetando firmemente el tapón y el cuello del embudo con una mano y la llave con la
otra. Agitar la mezcla durante 30 s, es importante orientar el vástago del embudo a una
zona libre del laboratorio.
6. Cerrar la llave y agitar nuevamente durante 30 s para que las dos fases se pongan en
contacto, abrir la llave para dejar salir posibles gases, cerrarla y repetir el proceso una o
dos veces.
7. Al finalizar la agitación, colocar el embudo de nuevo sobre el aro, aflojar el tapón para
igualar presiones, y dejar reposar hasta que exista una separación nítida entre las fases.
11. Colocar un matraz Erlenmeyer de 250 mL bajo el embudo. Extraer la fase inferior (más
densa) al abrir la llave. Cuando queden aproximadamente 1-2 mL en el embudo se
cierra la llave, se levanta el embudo del aro y se le imprime un ligero movimiento
circular para que las gotas retenidas en las paredes desciendan. Se deja reposar de nuevo
y se separa.
2. Añadir sobre esta fase 100 mL de una disolución acuosa de NaOH 0,1 M.
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7. Recoger todas las porciones de fase orgánica en un matraz Erlenmeyer y las de fase
acuosa en otro.
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El coloquio podrá basarse en las siguientes preguntas, sin embargo, también se podrá incluir
datos específicos de la práctica demostrativa.
¿En qué se basa la cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) y ultra alta eficiencia
(UPLC)?
¿Cuáles son las diferencias entre HPLC y UPLC?
¿Cómo está constituido un equipo de HPLC y UPLC?
¿Qué tipo de muestras se pueden inyectar?
¿Qué detectores se utilizan comúnmente en esta técnica?
Indique aplicaciones de esta técnica en la industria
Importancia de la presión y temperatura en cromatografía líquida
Interpretación y forma de cromatogramas
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Al final de la clase se tomará un coloquio, que será evaluado sobre 3 puntos y los otros 7 puntos
corresponderán a la presentación del informe, el cual consistirá en analizar los espectros
obtenidos de las distintas muestras sólidas y líquidas analizadas durante la práctica y una
investigación bibliográfica acerca de la técnica.
El coloquio estará basado en las preguntas específicas relacionadas con la clase demostrativa.
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