Protocolos de Laboratorio
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2018
BOGOTÁ D.C
TABLA DE CONTENIDO.
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REGIONAL NARIÑO
CENTRO INTERNACIONAL DE PRODUCCIÓN LIMPIA LOPE
1. INTRODUCCIÓN
2. NORMAS DE SEGURIDAD
3. LAS MUESTRAS
4. PARÁMETROS FISICOQUÍMICOS
4.1. TEMPERATURA
4.2. PH
4.3. SOLIDOS TOTALES SECO A 103 -105 °C
4.4. SÓLIDOS FIJOS Y VOLÁTILES TOTALES A 550 °C
4.5.SÓLIDOS DISUELTOS
4.6.SÓLIDOS NO DISUELTOS
4.7.TURBIDEZ POR ESPECTROFOTOMETRÍA
4.8.COLOR POR ESPECTROFOTOMETRÍA
4.9.DETERMINACIÓN DE COLOR APARENTE
4.10.DETERMINACIÓN DE COLOR VERDADERO
4.11.CLORO RESIDUAL, LIBRE Y TOTAL POR ESPECTROFOTOMETRÍA
4.12.HIERRO TOTAL POR ESPECTROFOTOMETRÍA
4.13.SULFATOS TOTALES POR ESPECTROFOTOMETRÍA
4.14.ACIDEZ TOTAL A LA FENOLFTALEINA
4.15.ACIDEZ DE ÁCIDOS FUERTES O ACIDEZ MINERAL
4.16. ACIDEZ DE SALES HIDROLIZABLES
4.17.ACIDEZ DE GASES DISUELTOS Y ÁCIDOS VOLÁTILES (ACIDEZ DÉBIL)
4.18. ALCALINIDAD
4.19. DETERMINACIÓN COMPLEXOMÉTRICA DE LA DUREZA TOTAL DEL AGUA
4.20. DETERMINACIÓN COMPLEXOMETRICA DE LA DUREZA CALCICA.
4.21. DETERMINACIÓN DE LA DUREZA MAGNÉSICA
4.22. DETERMINACIÓN VOLUMÉTRICA DE LOS CLORUROS
4.23. DETERMINACIÓN DE CONCENTRACIÓN Y DOSIS ÓPTIMA PARA TRATAMIENTO DE AGUAS.
4.24. DEMANDA DE CLORO
4.25. OXIGENO DISUELTO.
4.26. DEMANDA BIOLOGICA DE OXIGENO DBO5
4.27. DEMANDA QUÍMICA DE OXIGENO SISTEMA CERRADO Y MÉTODO FOTOMÉTRICO
4.28. DETERMINACION DE GRASAS Y ACEITES
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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1. INTRODUCCIÓN
El presente documento establece los procedimientos que se deben llevar a cabo en este ambiente de
aprendizaje (laboratorio de control de calidad) referente a la forma de actuar a la hora de realizar un
análisis fisicoquímico de agua, siguiendo procedimientos ya estandarizados los cuales tienen como
objetivo apropiar en el aprendiz SENA las competencias de formación relacionadas, siguiendo las pautas
de seguridad pertinentes descritas en el protocolo de seguridad en el laboratorio. Nota: el laboratorio de
control de calidad se reserva los resultados de los análisis que en este se realizan, ya que son resultados
de procesos de aprendizaje y no pueden tener uso comercial alguno. Toda la información concerniente a
los resultados de análisis debe registrarse en el formato B-2 suministrado por el laboratorio.
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Balanza Analítica
La balanza es un instrumento que sirve para medir la masa. La balanza analítica es una clase de balanza utilizada
principalmente para medir pequeñas masas. Este tipo de balanza es uno de los instrumentos de medida más
usados en laboratorio y de la cual dependen básicamente todos los resultados analíticos.
Las balanzas analíticas modernas, que pueden ofrecer valores de precisión de lectura de 0,1 µg a 0,1 mg, están
bastante desarrolladas de manera que no es necesaria la utilización de cuartos especiales para la medida del
peso. Aun así, el simple empleo de circuitos electrónicos no elimina las interacciones del sistema con el
ambiente. De estos, los efectos físicos son los más importantes porque no pueden ser suprimidos.
Balanza Analítica
Localización de la balanza
La precisión y la confianza de las medidas del peso están directamente relacionadas a la localización de la balanza
analítica. Los principales puntos que deben de ser considerados para su correcta posición son:
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Quedar firmemente apoyada en el suelo o fija en la pared, de manera a transmitir un mínimo de vibraciones
posible.
Ser rígida, no pudiendo ceder o inclinarse durante las operaciones de medida. Se puede utilizar una de
laboratorio bien estable o una de piedra.
Localizarse en los sitios más rígidos de la construcción, generalmente en los rincones de la sala.
Ser anti magnética (no contener metales o acero) y protegida de cargas electrostáticas (no contener
plásticos o vidrios).
Cuidados Operacionales
Cuidados básicos
El frasco de medida
El plato de medida
La lectura
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Verificar si el mostrador indica exactamente cero al empezar la operación. Tare la balanza, si es necesario.
Leer el resultado de la operación luego que el detector automático de estabilidad desaparezca del
mostrador.
Calibración
Calibrar la balanza regularmente, más todavía cuando está siendo operada por vez primera, si fue cambiada
de sitio, después de cualquier nivelación y después de grandes variaciones de temperatura o de presión
atmosférica.
Mantenimiento
Temperatura
Efecto observado: el mostrador varía constantemente en una dirección.
Motivo: La existencia de una diferencia de temperatura entre la muestra y el ambiente de la cámara de medida causa
corrientes de aire. Esas corrientes de aire generan fuerzas sobre el plato de medida haciendo con que la
muestra parezca más leve (conocida por fluctuación dinámica). Este efecto solo desaparece cuando el equilibrio
térmico es establecido. Además, el filme de humedad que cubre cualquier muestra, que varía con la
temperatura, es encubierto por la fluctuación dinámica. Esto hace con que un objeto más frío parezca más
pesado, o un objeto más caliente parezca más leve.
Acciones correctivas:
Variación de masa
Efecto observado: el mostrador indica lecturas que aumentan o disminuyen, continua y lentamente.
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Motivo: aumento de masa debido a una muestra higroscópica (aumento de humedad atmosférica) o pérdida de
masa por evaporación de agua o de substancias volátiles.
Acciones correctivas:
Usar frascos limpios y secos y mantener el plato de medida siempre libre de polvo, contaminantes o gotas
de líquidos.
Usar frascos de medida con cuello estrecho.
Usar tapas o corchos en los frascos de medida.
Electrostática
Efecto observado: El mostrador de la balanza queda inestable e indica masas distintas a cada medida de la misma
muestra. La reproducibilidad de los resultados queda comprometida.
Motivo: El frasco de medida está cargado electrostáticamente. Estas cargas son formadas por fricción o durante el
transporte de los materiales, especialmente si son en gránulos o en polvo. Si el aire está seco (humedad relativa
menor que 40%) estas cargas electrostáticas quedan retenidas o son dispersas lentamente. Los errores de
medida ocurren por fuerzas de atracción electrostática que actúan entre la muestra y el ambiente. Si la muestra
y el ambiente están bajo el mismo efecto de cargas eléctricas de misma señal [+ o -] hay repulsión, mientras
que bajo el efecto de cargas opuestas [+ y -] se observan atracciones.
Acciones correctivas:
Magnetismo
Efecto observado: baja reproducibilidad. El resultado de la medida del peso de una muestra metálica depende de su
posición sobre el plato de la balanza.
Motivo: Si el material es magnético (ej.: hierro, acero, níquel, etc.) puede estar ocurriendo atracción mutua con el
plato de la balanza, y pueden estar siendo creadas fuerzas que originen una medida falsa.
Acciones correctivas:
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Gravitación
Efecto observado: el valor del peso varía de acuerdo con la latitud. Cuanto más cerca del ecuador, mayor la fuerza
centrífuga debida a la rotación de la tierra, que se contrapone a la fuerza gravitacional. Así, la fuerza actuando
sobre una masa es mayor en los polos que en el ecuador. Las medidas dependen además de la altitud en
relación al nivel del mar (más exactamente, en relación al centro de la tierra). Cuanto más alto, menor la
atracción gravitacional, que disminuye con el cuadrado de la distancia.
Acciones correctivas:
Medidas diferenciales o comparativas o de precisión, hechas en distintas latitudes (ej.: en el piso bajo o en
otros pisos de un mismo edificio) deben de ser corregidas.
Empuje
Efecto observado: el resultado de una medida del peso hecha a presión atmosférica no es el mismo que al vacío.
Motivo: este fenómeno es explicado por el principio de Arquímedes, según el cual “un cuerpo sufre una pérdida de
peso igual al peso de la masa del medio que es deslocado por él”. Cuando se mide el peso de materiales muy
densos (ej: Hg) o poco densos (ej: agua), deben de ser hechas correcciones, en favor de la precisión.
Acciones correctivas:
Medidas diferenciales o comparativas o de mucha precisión, efectuadas en días distintos, deben siempre ser
corregidas con relación al empuje, teniéndose en cuenta la temperatura, la presión y la humedad
atmosférica. Los trabajos corrientes de laboratorio normalmente dispensan estas acciones.
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PRACTICA 4:
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES A DIFERENTES CONCENTRACIONES EN PORCENTAJE
EN PESO
Tomado de https://es.wikipedia.org/wiki/Fracci%C3%B3n_de_masa_(qu%C3%ADmica)
4.4. REACTIVOS
Cloruro de Sodio NaCl (99.98% de pureza)
Glucosa C6H12O6 (99,97% de pureza)
Sulfato de Magnesio MgSO4 (90% de pureza)
Nitrato de Potasio KNO3 (85% de pureza)
Agua Destilada
4.5. EQUIPOS
Balanza analítica de precisión.
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4.6 MATERIALES
DESCRIPCION CANTIDAD
Balones aforados de 50 ml 5
Balones aforados de 100 ml 5
Balones aforados de 200 ml 5
Balones aforados de 500 ml 5
Balones aforados de 1000 ml 5
Vidrios de reloj pequeños 5
Espátulas pequeñas 5
Beakers de 100 ml 10
Frascos lavadores 5
Marcadores de vidrio 2
4.7 PROCEDIMIENTO
Realizar el cálculo matemático para determinar la cantidad de soluto necesario en la preparación
de las soluciones
Hacer la corrección del peso, según el grado de pureza del reactivo solicitado
Identificar los materiales y equipos de laboratorios necesarios en la preparación de las soluciones
Preparar las soluciones solicitadas, pesando cuidadosamente el reactivo en la balanza analítica y
llevando posteriormente la sustancia pesada al balón aforado correspondiente completando con
agua hasta el aforo.
4.8. FORMULAS
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Para la corrección de la masa con el porcentaje de pureza del reactivo, se despeja de la siguiente
fórmula, la Masa 2:
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PRACTICA 5:
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES A DIFERENTES CONCENTRACIONES EN PARTES POR
MILLON
Partes por millón (ppm) es una unidad de medida de la concentración, de las soluciones; se refiere a la
cantidad de unidades de una determinada sustancia (agente, etc) que hay por cada millón de unidades
del conjunto. Por ejemplo, en un millón de granos de arroz, si se pintara uno de negro, este grano
representaría una (1) parte por millón. Se abrevia como "ppm".
La fórmula para calcular partes por millón depende del tipo de solución:
Si la solución es LIQUIDA: ( litros, mililitros, centímetro cúbicos, metros cúbicos, etc.). Se utiliza:
ppm= mg de soluto
litros de solución
Es un concepto homólogo al de porcentaje, solo que en este caso no es partes por ciento sino por millón,
se podría tomar la siguiente equivalencia:
10 000 ppm = 1 %
Es decir que 10 000 ppm equivalen al uno por ciento. De lo anterior, se puede deducir que esta unidad es
usada de manera análoga al porcentaje pero para concentraciones o valores mucho más bajos. Por
ejemplo cuando se habla de concentraciones de contaminantes en agua o en aire, disoluciones con muy
bajas concentraciones o cantidad de partículas de polvo en un ambiente, entre otros.
Esta concentración, se utiliza especialmente en el Análisis químico del agua: las ppm se refiere a mg de
analito por litro de agua; mg/L (equivalente a ug/ml). Por ejemplo: Cloruros = 20 ppm equivale a 20 mg/L
como Cl- que quiere decir, veinte miligramos de ion cloruro por litro de agua.
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4.4. REACTIVOS
Cloruro de Sodio NaCl (99.98% de pureza)
Glucosa C6H12O6 (99,97% de pureza)
Sulfato de Magnesio MgSO4 (90% de pureza)
Nitrato de Potasio KNO3 (85% de pureza)
Agua Destilada
4.5. EQUIPOS
Balanza analítica de precisión.
4.6 MATERIALES
DESCRIPCION CANTIDAD
Balones aforados de 50 ml 5
Balones aforados de 100 ml 5
Balones aforados de 200 ml 5
Balones aforados de 500 ml 5
Balones aforados de 1000 ml 5
Vidrios de reloj pequeños 5
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Espátulas pequeñas 5
Beakers de 100 ml 10
Frascos lavadores 5
Marcadores de vidrio 2
4.7 PROCEDIMIENTO
Realizar el cálculo matemático para determinar la cantidad de soluto necesario en la preparación
de las soluciones
Hacer la corrección del peso, según el grado de pureza del reactivo solicitado
Identificar los materiales y equipos de laboratorios necesarios en la preparación de las soluciones
Preparar las soluciones solicitadas, pesando cuidadosamente el reactivo en la balanza analítica y
llevando posteriormente la sustancia pesada al balón aforado correspondiente completando con
agua destilada, hasta el aforo.
4.8. FORMULAS
Para la corrección de la masa con el porcentaje de pureza del reactivo, se despeja de la siguiente
fórmula, la Masa 2:
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2. NORMAS DE SEGURIDAD
Es de gran importancia seguir al pie de letra las normas de seguridad previstas en el protocolo de
seguridad del laboratorio de control de calidad, las cuales son mencionadas y vigiladas por los
laboratoristas, estas son de estricto cumplimiento y su no cumplimiento será sancionada dependiendo de
la gravedad del caso.
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3. LAS MUESTRAS
Las muestras de trabajo deben estar bien rotuladas indicando la fecha, hora, lugar y responsable del
muestreo, las muestras deben tener como mínimo un litro de agua y el recipiente debe ser el adecuado
para el tipo de análisis que se vaya a realizar, generalmente polietileno o vidrio Pyrex bien sellado, sin
perdidas. También se debe indicar la temperatura, pH, Cl, y demás parámetros que se hayan tomado en el
lugar de muestreo y la cadena de custodia que se realice a la muestra si esta proviene de un lugar
diferente al centro de formación, si la muestra no cumple con lo anteriormente descrito el analista
puede rechazar la muestra de agua.
El muestreo se debe realizar de la siguiente forma
Si se va a analizar el agua de un pozo profundo en servicio por mucho tiempo solo se necesitará una
muestra sencilla puntual para darnos una idea de su condición. Esto es porque su calidad es uniforme.
En las aguas de río donde ocurren cambios lentos una muestra diaria sería lo adecuado.
En aquellas muestras en donde los materiales sufren grandes cambios en un período de 24 horas, se
recomienda tomar muestras compuestas a intervalos frecuentes de tiempo.
En los desechos industriales se pueden tomar muestras cada 10 ó 15 minutos. Las muestras
individuales servirán para medir parámetros como pH, acidez y alcalinidad y luego al combinar las
muestras de 2, 4, 8 a 24 horas y componerlas se hará un análisis más completo.
Las muestras compuestas son importantes para evaluar la eficiencia de los tratamientos de los desechos
en donde los resultados promediados son adecuados. Estas muestras se toman a espacios regulares de
tiempo (cada hora o dos) y se juntan para formar una sola sobre las 24 horas. En cada tiempo de
recolección, se elimina una parte, considerando solamente la cantidad que se debe tomar de cada
muestra individual proporcional al flujo. Cuando se tomen períodos de recolección menores a las 24
horas, se debe estudiar detenidamente las horas a iniciar y culminar dependiendo del tipo de muestra a
integrar.
4. PARÁMETROS FISICOQUÍMICOS
4.1 TEMPERATURA
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Una muestra bien mezclada es evaporada en una cápsula tarada y secada a peso constante en una estufa a
100 -105 °C. El incremento de peso sobre la cápsula vacía representa el residuo total.
Con anterioridad, colocar una cápsula limpia a ignición a 550°C por una hora en la mufla. Enfriar en un
desecador hasta temperatura ambiente. Pesar la cápsula al inicio.
Transferir 15 ml de la muestra a la cápsula tarada y evaporar a sequedad en una estufa de secado.
Secar la muestra evaporada durante 1 hora a 100-105 °C.
Enfriar la cápsula en un desecador y pesar. Repetir el ciclo de pesado a 103-105 °C, enfriando, desecando
y pesando hasta obtener un peso importante.
Cálculos:
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Someter a ignición el residuo producido en el análisis anterior (determinación del residuo total seco) en
un horno a temperatura de 550 +/- 5 °C.
Tener el horno a esta temperatura antes de introducir la muestra, someter dicha muestra a ignición
durante 15 minutos.
Dejar enfriar el recipiente parcialmente en aire hasta que la mayor parte del calor se haya disipado y
transferirlo al desecador para enfriamiento final en una atmósfera seca.
Pesar el recipiente tan pronto como se haya enfriado completamente. Reportar la pérdida de peso como
el residuo volátil y el residuo pesado como el residuo fijo total.
Cálculos
A causa de que un residuo excesivo en el recipiente de evaporación puede formar una costra con agua
atrapada, usar una muestra que produzca no más de 200 mg de residuo filtrable total. El filtrado del residuo
no filtrable puede ser usado para la determinación del residuo filtrable.
Antes de iniciar la filtración pesar ya frío y desecado un filtro de 0.45 μm (previo secado a 100°C por 1
hora
Igualmente se pesa la cápsula fría y desecada (previa ignición a 550°C por 1 hora).
Filtrar 15 ml o más de la muestra bien mezclada a través del filtro
Transferir 15 ml del filtrado a la cápsula de evaporación ya pesada, y evaporar a sequedad sobre un
baño de vapor.
Secar la muestra evaporada a la menos 1 hora en una estufa a 180 ° C, enfriar en un desecador y pesar.
Cálculos:
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Luego de filtrar los 30 ml del anterior procedimiento, esperar por aproximadamente diez minutos hasta
que acabe de escurrir toda el agua del filtro. Medir el volumen filtrado.
Colocar el filtro que ha retenido el residuo no filtrable total, en el vidrio reloj y llevarlo a secar a 103 -
105 °C por una hora.
Cálculos:
% Sólidos no disueltos = (F - G) x 100
m2
Donde:
F= Peso del Filtro y el Residuo Seco (g).
G = Peso del Filtro (g).
m2= ml de agua filtrada total.
Nota: Una vez determinado el residuo total y el filtrable, por diferencia puede ser determinado el no
filtrable, este parámetro también puede ser determinado por espectrofotómetro.
Antes de iniciar la lectura de una serie de muestras se debe encender y programar el equipo
adecuadamente.
Enjuague la cubeta 1 vez con agua destilada y posteriormente con la muestra a medir.
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Abrir la cubierta del equipo para encender el espectrofotómetro; este efectúa un auto chequeó del
sistema, programé el espectrofotómetro adecuadamente
Lavar la celda con una porción de agua destilada y luego con la muestra.
Llenar la celda con la muestra a analizar e insertarla en el equipo. La celda debe estar bien limpia y
seca antes de introducirla en el equipo.
Anotar el valor obtenido.
Lave muy bien una celda con agua destilada y púrguela con la muestra por l menos tres veces, deposite
25ml de la muestra.
Encienda el espectrofotómetro y programe la medición de cloro libre y residual, no olvide ajustar la
longitud de onda del equipo según el caso requerido, el equipo hace este requerimiento, de no hacerlo la
medición será errónea.
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Una vez el equipo esté preparado introduzca la celda con la muestra en el equipo y presione el botón zero
de esta forma el equipo queda en cero.
Seque la celda con la muestra y agregue un sobre del indicador DPD, agite y espere un minuto, introduzca
la celda nuevamente al equipo y apunte el resultado.
Lave muy bien una celda con agua destilada y púrguela con la muestra por lo menos tres veces, deposite
25ml de la muestra.
Encienda el espectrofotómetro y programe la medición de hierro total, no olvide ajustar la longitud de
onda del equipo según el caso requerido, el equipo hace este requerimiento, de no hacerlo la medición
será errónea.
Una vez el equipo esté preparado introduzca la celda con la muestra en el equipo y presione el botón zero
de esta forma el equipo queda en cero. Esta muestra se la considera como el blanco
Saque la celda con la muestra y agregue un sobre del reactivo Ferrover, agite y espere un minuto,
introduzca la celda nuevamente al equipo y apunte el resultado.
Lave muy bien una celda con agua destilada y púrguela con la muestra por lo menos tres veces, deposite
25ml de la muestra.
Encienda el espectrofotómetro y programe la medición de Sulfato, no olvide ajustar la longitud de onda
del equipo según el caso requerido, el equipo hace este requerimiento, de no hacerlo la medición será
errónea.
Una vez el equipo esté preparado introduzca la celda con la muestra en el equipo y presione el botón zero
de esta forma el equipo queda en cero. Esta muestra se la considera como el blanco
Saque la celda con la muestra y agregue un sobre del reactivo Sulfaver 4, agite y espere un minuto,
introduzca la celda nuevamente al equipo y apunte el resultado.
Medir 100 ml de la muestra ó una alícuota de ella diluida con agua destilada (solamente de ser
necesario), y pasarla a un Erlenmeyer.
Añadir 2-3 gotas del indicador fenolftaleína.
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Cálculo:
Acidez Total (mg/l CaCO3) = VT x N x 50000
m
Donde:
Medir 100 ml de la muestra ó una alícuota de ella diluida con agua destilada (solamente de ser
necesario), y pasarla a un Erlenmeyer.
Añadir 2 -3 gotas de indicador mixto.
Titular la Acidez con el álcali valorado (NaOH 0.02 N) hasta el cambio de color del indicador de rojo
a azul. Anotar el volumen gastado (V3).
Cálculo
Acidez Mineral (mg/l CaCO3) = V3 x N x 50000
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m
Donde:
V3 = ml de NaOH estándar gastados en neutralizar la acidez mineral o fuerte.
Cálculo:
Se obtiene restando del valor de la acidez total de la muestra el valor de la acidez de la muestra hervida.
Cálculo:
Acidez de gases disueltos (mg/l CaCO3) = Acidez Total - Acidez de sales hidrolizables
4.18 ALCALINIDAD
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Medir 100 ml de la muestra ó una alícuota de ella diluida con agua destilada (solamente de ser
necesario), y pasarla a un Erlenmeyer.
Si la muestra contiene cloro residual, este debe eliminarse por adición de 1 gota de la solución de
tiosulfato de sodio 0.1 N.
Agregar de 2-3 gotas de indicador fenolftaleína. Si la muestra se torna de color rosa o rojizo, se
debe titular sobre superficie blanca con el ácido sulfúrico 0.02 N hasta lograr la desaparición del
color. Este volumen (F) corresponderá a la alcalinidad a la fenolftaleína. Si no presenta coloración no
presenta alcalinidad a la fenolftaleína.
Sobre la misma muestra, agregar 2-3 gotas del indicador mixto, Si la muestra contiene alcalinidad a
este indicador, tomará un color azul definido y se debe titular con H 2S04 0.02N hasta el cambio del
indicador a pH 4.6 gris perla. Este volumen (M) corresponde a la alcalinidad al indicador mixto.
Proceder a realizar los cálculos de las diferentes clases de alcalinidad, teniendo en cuenta la fórmula
que se indica más adelante.
Formula General:
Alcalinidad Total (mg/l CaCO3) = T x N x 50000
m
T =F + M
F = Volumen de titulante gastado para cambio de la fenolftaleína (ml)
M =Volumen de titulante gastado para cambio del indicador mixto (ml)
N =Normalidad del titulante
50000 =Pesos eq. del CaCO3 y Factor de conversión de g a mg
m = Volumen de la muestra (mL)
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Medir 100 ml de la muestra. Si la muestra presenta color o turbiedad debe eliminarse por filtración.
Trasvasar la muestra al erlenmeyer.
Añadir 1 ml de la solución de amonio 1-1 y una pizca del indicador NET.
Si la muestra contiene iones Ca+2 y Mg+2 se tornará de color rojo vinoso; titular con la solución estándar
de EDTA hasta cambio de color del indicador a azul nítido sin restos de rojo. Anotar el volumen de
EDTA gastado.
Cálculos:
Donde:
V = Volumen de titulante EDTA en ml
N = Normalidad del titulante EDTA
50000 = Pesos meq. del CaCO3
m = Volumen de la muestra (ml)
Este tipo de dureza se halla por la diferencia entre la dureza total y la dureza cálcica.
CALCULOS:
Cl- (mg/l) = (M-B) x N x 35.46 x 1000
m
Donde:
M = ml AgNO3 gastados en la muestra
B = ml AgNO3 gastados para el blanco
N = Normalidad del Nitrato de Plata
m = ml muestra empleados en valoración.
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La dosificación del coagulante puede variar mucho. Usualmente está entre 30 - 40 mg/l. Sin embargo
algunas veces se necesita más o menos dosificación. Es usual considerar que no puede ser mayor de 50
mg/l. En la presente práctica se empezará a determinar la dosificación óptima dejando fija la
concentración y variando el volumen añadido. Luego con el volumen óptimo fijado se variará la
concentración. Se utilizarán diferentes tipos de coagulantes. Escoger uno por grupo o el que le asigne la
persona encargada de la práctica.
Se selecciona como concentración óptima de coagulante, aquel cuya muestra produzca la menor
turbiedad.
Una vez obtenido la concentración óptima, proceda a determinar la cantidad optima
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Deposite dos litros de la muestra de trabajo en cada una de los recipientes del equipo de "Prueba de
Jarras".
Prepare las concentraciones sugeridas de coagulante en vasos pequeños de precipitados o en su
defecto en recipientes plásticos.
Succione con una jeringa médica provista de una aguja hipodérmica la concentración óptima obtenida
anteriormente de cada uno de los vasos preparados a diferentes concentraciones. Ya con el
coagulante, la jeringa y su aguja se coloca junto a la jarra correspondiente.
Haga girar las paletas del aparato entre 100 y 200 r.p.m. (promedio de 150 r.p.m.) e inyecte el
contenido de cada jeringa en la jarra que le corresponde, la mezcla rápida debe durar entre 30 y 60
segundos (promedio de 45 segundos), se debe cuidar que la solución penetre profundamente para que
la dispersión sea más rápida. En esta forma se evitan las imprecisiones en la cantidad dosificada,
ocasionadas por el uso directo de la pipeta.
Una vez hecha la mezcla rápida se disminuye la velocidad de rotación de las paletas de 30 a 60 r.p.m.
(promedio de 40 r.p.m.) y se deja flocular el agua entre 10 y 30 minutos (15 minutos) o el tiempo
necesario en función de la altura o durante el tiempo teórico de detención para obtener en el ensayo
condiciones similares a las cargas superficiales usadas en el proceso de sedimentación.
Luego del periodo de floculación, suspenda la agitación, extraiga las paletas, coloque los sifones para
la toma de la muestra y deje sedimentar el agua el tiempo estimado necesario para que se produzca la
sedimentación (15 minutos).
Tome las muestras descartando los primeros 10 ml y colectando en vasos de aproximadamente 50 ml y
proceda a efectuar la medida de turbiedad en cada muestra. Si se requiere muestra para otro tipo de
análisis tómelas posteriormente a las tomadas para medir turbiedad.
Seleccione como dosis óptima, aquella cuya muestra arroje la menor turbiedad.
Los resultados de dosis óptima se dan en mg/l. Para ello se debe graficar en diagrama de barras, los
datos obtenidos de dosis vs la turbiedad obtenida.
Medir al menos 8 porciones iguales de la muestra de 200 ml, preferiblemente en frascos ámbar con
tapón esmerilado o en erlenmeyers de tapón esmerilado de amplia capacidad para permita la mezcla.
Añadir una cantidad de la solución patrón de cloro a la primera porción, equivalente a una dosis de 0.1
mg/l. Para el cálculo se debe utilizar la concentración obtenida de la estandarización de la solución
patrón.
Mezclar bien y determinar el tiempo exacto a partir de esta adición.
A cada una de las siguientes porciones añadir la solución patrón incrementando la dosis entre ellas, en
0.2 mg/l. Determinar así mismo el tiempo exacto de contacto.
Dejar en reposo las porciones, por 15 minutos, protegiendo las muestras cloradas de la luz solar a lo
largo de la prueba.
Al final del tiempo de contacto, determinar el cloro residual libre para cada una de las porciones,
utilizando los reactivos del Kit de cloro y la escala colorimétrica.
Graficar el cloro residual vs. Cloro aplicado. Si es necesario se puede completar el análisis con
exámenes bacteriológicos de las muestras.
Reportar la demanda de cloro y definir cuál sería la dosis de cloro apropiada después del punto de
ruptura o "Break Point".
Los niveles de oxígeno disuelto (OD) en aguas naturales y residuales dependen de la actividad física,
química y bioquímica del sistema de aguas. El análisis de OD es una prueba clave en la contaminación del
agua y control del proceso de tratamiento de aguas residuales. Se describen dos métodos para el análisis
de OD: el de Winkler o yodométrico y sus modificaciones, y el electrométrico. El método yodométrico es
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un procedimiento titulométrico basado en la propiedad oxidante del OD, mientras que el método del
electrodo de membrana se basa en la tasa de difusión del oxígeno molecular a través de una membrana.
Reactivos
• Solución de sulfato de manganeso (II): Se disuelve 120 g de MnSO 4.4H2O, 100 g de MnSO4.2H2O o 91 g
de MnSO4. H2O en agua destilada, fíltrese y dilúyase a 250mL. La solución de MnSO4 no debe dar color
con almidón cuando se añade una solución acidificada de yoduro de potasio (KI).
• Reactivo álcali-yoduro-azida: Se disuelve 125 g de NaOH (175g de KOH) y 33.75 g de NaI (o 37.5g de
KI) en 250mL. de agua destilada. Añadir 2.5 g de NaN3 disueltos en 10 mL de agua destilada. Este
reactivo no debe dar color con una solución de almidón cuando se diluya y acidifique.
• Ácido sulfúrico, H2SO4 concentrado.
• Almidón: Se utiliza una solución acuosa o mezclas solubles de polvo de almidón. Para preparar una
solución acuosa, se disuelve 2 g de almidón soluble calidad laboratorio y 0,2 g de ácido salicílico, como
conservador, en 100mL de agua destilada caliente.
• Titulante de tiosulfato sódico patrón: Se disuelve 1.55g de Na2S2O3.5H2O en 250mL agua destilada.
PROCEDIMIENTO
A la muestra recogida en un frasco de 250 a 300 mL se le añade 1 mL de solución de MnSO 4 y 1mL de
reactivo álcali-yoduro-azida, Tapar cuidadosamente para excluir las burbujas de aire y mezclar por
inversión varias veces. Una vez que el precipitado se ha depositado suficientemente se añade 1,0mL de
H2SO4 concentrado para dejar un sobrenadante claro por encima del hidróxido de manganeso floculado.
Volver a tapar y mezclar invirtiendo varias veces hasta la disolución completa. Titular un volumen
correspondiente a 200 mL de la solución anterior. Titular con solución 0,025 M de Na 2S2O3 hasta color
amarillo pálido. Añadir gotas de solución de almidón y continuar valorando hasta la primera desaparición
del color azul.
Calculo
Para titular 200 mL de muestra, 1 mL Na2S2O3 0,025 M = 1 mg OD/L.
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La Demanda Bioquímica de Oxígeno está relacionada con la cantidad de material orgánico biodegradable
que contiene una muestra de agua. Durante la degradación oxidativa de la materia orgánica, los
microorganismos aeróbicos actúan consumiendo el oxígeno presente en el agua como gas disuelto. La
Demanda Bioquímica de Oxígeno se expresa como el peso del oxígeno consumido por unidad de volumen de
agua durante un periodo definido de tiempo en una temperatura establecida, e. j. mg/L O2 (o ppm =
partes por millón) durante 5 días a 20 ºC.
MÉTODO TRADICIONAL.
Dependiendo del tipo de muestra de trabajo si esta es cruda se trabaja sin realizar diluciones, si esta
es potable de debe tratar la muestra con tiosulfato previamente para eliminar el cloro
Saturar la muestra y agua de dilución con oxígeno utilizando una bomba durante unos 30 a 45 minutos
elevando su contenido de oxígeno a 8 - 10 mg/l a 20 °C, dejar en reposo durante 10 minutos antes de
realizar la determinación y agregar 1 ml por cada litro de cada nutriente DBO5 al igual que la solución
buffer. (Si el agua es residual trabajar este punto solo con agua de dilución)
Si el agua para realizar el análisis es potable o cruda no se realiza dilución y se llena directamente con
el agua a analizar, dos Winkler por muestra, evitando la introducción de burbujas de aire.
Si el agua es residual llenar dos Winkler por muestra con agua de dilución ya oxigenada y realizar la
respectiva dilución según el criterio de fuente dentro del Winkler teniendo en cuenta que el volumen
de este es de 300mL
Llenar dos Winkler adicionales solamente con agua de dilución para ser usados como blanco.
Marcar las botellas Winkler claramente con la fecha y tipo de muestra o blanco al igual que el
responsable del grupo.
Una vez ya se tiene los Winkler listos y tapados verificando la inexistencia de burbujas de aire. Se
dispone un Winkler por cada muestra incluyendo el blanco para ser incubados a una temperatura
constante de 20 +/- 1°C durante 5 días.
El segundo Winkler por muestra se deja en reposo por 15 min y posteriormente se dispone para ser
analizado por el método de oxigeno disuelto, registrar el valor como C 0 y B0
Después de 5 días +/- 6 horas, determinar el contenido de oxígeno disuelto de las botellas incubadas y
registrar su promedio como C5 y B5
Cálculos
d = Factor de dilución (razón de volumen de muestra usada sobre el volumen del Winkler)
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Ejemplos de valores de D.B.O. El símbolo indica que los valores se refieren a 5 días de incubación a 20
°C. Los siguientes valores pueden ser utilizados como guías en escalas elegidas y diluciones a realizarse.
Fábricas de papel 200-4000
Curtidoras 500-1500
Destilerías12000-35000
Molinos de aceite 15000-70000
Empresas lecheras 200-6000
Mataderos 1000-2500
Impresión textil y teñidos 1000-12000
Empresas porcinas 7000-9000
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En muchos casos una muestra de agua debe ser sometida a tratamientos apropiados antes de la medición
de su D.B.O.:
Neutralización de muestras
Llevar el pH entre 6.5 y 7.5 utilizando soluciones de Acido Sulfúrico 1N ó de Hidróxido Sódico
respectivamente. El volumen añadido de ácido o base no debería del 0,5% del volumen de la muestra. Si es
necesario utilizar soluciones más concentradas.
Siembra bacteriana
Cuando las aguas residuales industriales están bajo examen es necesario sembrar las muestras con
bacterias para comenzar la absorción de oxígeno. Por lo general, las aguas residuales municipales, después
de 1-2 horas de sedimentación, se utilizan como siembra. Estas contienen de 103-106 bacterias por mL
Esta variabilidad hace necesaria un volumen de siembra del 3 al 30% del volumen de la muestra.
Generalmente se utiliza un volumen cercano al 10%.
Adición de nutrientes
De nuevo cuando se examinan aguas residuales industriales, hay que asumir que los llamados también
nutrientes (nitrógeno, fósforo y micronutrientes) están ausentes o presentes en cantidades insuficientes
para un desarrollo regular de la flora bacteriana. En estos casos es necesario añadir nutrientes mediante
la utilización de las siguientes soluciones:
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En una botella de incubación se introducen 250mL de la muestra diluida 1:10 con agua destilada, sembrada
con 1 o 2mL de lodo biológico. Después de 5 días se lee una D.B.O. de 200mg/L. En otra botella se
introduce la misma cantidad de agua destilada y siembra y, después de 5 días, se lee una D.B.O. de
15mg/L (valor del blanco). El valor real de la D.B.O., considerando la dilución de la muestra, es:
No sobra advertir que por la misma razón anterior, los tubos de reacción, sus tapas y todos los
materiales utilizados en la medición, deben estar escrupulosamente “limpios de materia orgánica”,
situación que conduce con frecuencia a errores “inexplicables”, causados por el exceso de confianza
que deriva del trabajo rutinario con series de muestras.
REACTIVOS
• Solución patrón de dicromato de potasio 0,1N (Solución Digestora): 167mL de H2SO4 concentrado
4,913g de K2Cr2O7, 33,3g de HgSO4 inhibidor de haluros, llevar a 1,0L con H2O destilada.
• Solución catalizadora: Ag2SO4 al 1,0 % en H2SO4: 2,5 g. de Ag2SO4 CATALIZADOR 250,0 ml de
H2SO4
• Solución titulante o FAS de concentración aproximada a 0,05N: 19,6g de Fe(NH4)2(SO4)2 .H2O,
20mL de H2SO4 concentrado, llevar a 1,0Litro con agua destilada
• Solución indicadora de ferroina: 1,485g de 1,10-fenantrolina 0,695g de FAS, Disolver a 100mL con
agua destilada.
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PROCEDIMIENTO
Ponga en cada tubo de reacción del digestor, “EXACTAMENTE”, las siguientes medidas:
Para blanco:
3 ml. de agua desmineralizada
2 ml. de solución digestora
3 ml. de solución catalizadora
Para muestra:
3 ml. de muestra homogenizada
2 ml. de solución digestora
3 ml. de solución catalizadora
Tape herméticamente y homogenice los tubos de reacción y colóquelos dentro del reactor. Prenda el
equipo y contabilice dos horas a partir del momento en que la temperatura alcance los 150ºC.
Transcurrido este tiempo, transfiera cuantitativamente la mezcla de reacción a un Erlenmeyer de50
ml, adicione dos gotas de indicador ferroína y titule en caliente con solución FAS, hasta viraje a Color
salmón. Justo antes de llegar a este punto la mezcla titulante pasa por una coloración azul
Característica que facilita la ubicación del punto final de la titulación.
Cálculos
NFAS = 2 mL x 0, 1N
mL de FAS consumidos por Blanco
Cálculo del DQO de las Muestras:
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Procedimiento:
Abrir el tubo de test de reactivo DQO, mantenerlo inclinado, cubrir lentamente el contenido con
2,0mL de solución muestra (sin mezclarlo). Enrosca fuertemente el tapón del tubo de test, sujetar el
tubo por el tapón de rosca, colocarlo en el recipiente de seguridad, agitarlo (precaución, el tubo se
calienta / la solución está turbia hasta que se calienta) y colocarlo en el calefactor. Poner éste en
funcionamiento. Por dos 2 h y 148°C, trascurrido el tiempo sacar el tubo de test del bloque calefactor,
agitarlo otra vez transcurridos unos10 min (todavía caliente) y dejarlo enfriar a temperatura
ambiente. Limpiar el tubo de test por el exterior y medir en espectrofotómetro a longitud de onda
436nm el equipo da el resultado en ppm de DQO
Este método se basa en la adsorción de grasas y aceites en tierra de diatomeas, los cuales son extraídos
en un Soxhlet empleando hexano o éter como disolvente. Una vez terminada la extracción seca el vial de
extracción y se pesa. Para el respectivo calculo
PROCEDIMIENTO.
Preparar el equipo de extracción Soxhlet introduciéndolo a la estufa a una temperatura de 103°C -
105°C, enfriar en desecador.
Preparar el material filtrante colocando un papel filtro en él y agregar 100mL de la suspensión de
tierra de diatomeas-sílice sobre el filtro, aplicar vacío y lavar con 100mL de agua.
Preparar la muestra acidificándola con acido clorhídrico o aumentado la polaridad con cloruro de
sodio.
Transferir entre 250 y 500mL de la muestra preparada Medir el volumen de la muestra final.
Con ayuda de unas pinzas, transferir el material filtrante a un vial de extracción soxhlet. Limpiar
las paredes internas del embudo y el frasco contenedor de la muestra, así como la parte interna
de la tapa del frasco con trozos de papel filtro previamente impregnados de disolvente (hexano o
éter) tener cuidado en remover la película de grasa y los sólidos impregnados sobre las paredes;
colocar los trozos de papel en el mismo cartucho. Evitar tocar con las manos el vial.
Secar el cartucho en una estufa a 60°C - 70°C por un período de 2horas. Transcurrido este
período dejar enfriar en un desecador y pesar en una balanza analítica (P1) introducir el vial de
extracción en el equipo Soxhlet.
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Adicionar el volumen adecuado de hexano, o éter al matraz de extracción. , para ello utilizar
pinzas ó guantes de nitrilo.
Colocar el equipo de extracción sobre la parrilla de calentamiento, controlar la temperatura del
reflujo y extraer a una velocidad de 20 ciclos/hora durante un período de 2 h.
Una vez terminada la extracción retirar el vial de extracción del equipo Soxhlet, y secarlo en un
horno a una temperatura de 60°C - 70°C durante 30min dejar enfriar en desecador y pesar en
balanza analítica.(P2)
CÁLCULOS
REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS
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