BANCO DE SANGRE BAULLAEL

DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEO MEDIANTE

PRUEBA DIRECTA EN BANCO DE SANGRE

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10 de agosto del 2021.

INDICE:

1. OBJETIVO

2. ALCANCE

3. RESPONSABILIDADES

4. INTRODUCCIÓN

5. FUNDAMENTO

6. PROCEDIMIENTO

7. BIOSEGURIDAD

8. FUENTES DE ERROR

9. REVISION Y ACTUALIZACIÓN

10. ANEXOS

11. BIBLIOGRAFÍA
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1.- Objetivo.
Determinar el grupo sanguíneo en banco de sangre.

2.- Alcance.
Aplica a todas las muestras de sangre venosa que lleguen al laboratorio baullael.

3.- Responsabilidades.
Es responsabilidad del personal de laboratorio baullael, acatar lo dispuesto en este documento, descrito
a continuación:
A) Responsable del laboratorio:
a. Revisar, que se cumpla con cada procedimiento.
b. Supervisar que se lleve a cabo correctamente cada procedimiento.
B) Auxiliar de laboratorio:
a. Llevar a cabo correctamente cada procedimiento.
b. Identificar y notificar cada una de las muestras.

ELABORÓ: REVISÓ: AUTORIZÓ:

Fecha: 31/03/19 Fecha: 10/08/19 Fecha: 10/08/19
Firma: Firma: Firma:
Nombre: Q. F. B. Javier Nombre: M. en C. Cesiah Hernández Nombre: M. en C. Cesiah
Fernando Bazan Jimenez Caballero Hernández Caballero
Puesto: Responsable Puesto: Dirección de calidad Puesto: Dirección General
Sanitario “BAULLAEL” BANCO DE SANGRE. “BAULLAEL” BANCO DE SANGRE
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1.1 INTRODUCCION

Los Bancos de Sangre representan un apoyo primordial para el área médica, en especial para urgencias ya que a
través de los análisis realizados en ellos se pueden diagnosticar el grado hematológico e inmunológico del
paciente, para así dar seguimiento y administrar el adecuando tratamiento que requiera. En este caso es da gran
importancia el grupo sanguíneo para pacientes con pérdida significativa de sangre, debido a alguna patología o
trauma sufrido, que le impida recuperar el volumen sanguíneo y le esté llevando a un descenso o perdida de la
vida. Es por eso, que consciente de la gran importancia y con la finalidad de alcanzar un trabajo de calidad, es
indispensable contar con buenas prácticas que nos pueda dar de manera formal y sistemática los procedimientos
adecuados de los Bancos de Sangre, de los establecimientos del primer nivel de Atención en Salud.

Los grupos sanguíneos son agrupaciones de la sangre según características dependientes de los antígenos de
superficie de las células eritroides.

Las dos clasificaciones más importantes para describir grupos sanguíneos en humanos son el grupo ABO
(antígenos) y el factor RH. Esta clasificación de grupos sanguíneos es importante ya que las transfusiones de
sangre entre grupos incompatibles puede provocar una reacción inmunológica que pueda desembocar en
hemolisis, anemia, fallo renal, shock o muerte.

2.1 FUNDAMENTO

Los eritrocitos poseen en su membrana diversas estructuras con carácter antigénico que son determinadas
genéticamente. Muchas de ellas se han podido identificar serológicamente mediante anticuerpos específicos. El
primer grupo de estas sustancias fue identificado por Landsteiner en 1901; a este grupo se le llamó sistema ABO,
en el cual un individuo puede expresar en la membrana de sus glóbulos rojos uno, dos, o ninguno de los antígenos
A y B. Esto da por resultado que si un sujeto expresa la sustancia A, posee el tipo sanguíneo A, si expresa la
sustancia B, será de tipo sanguíneo B; en cambio, si no expresa ninguna de estas sustancias, será de tipo sanguíneo
O. Como estas sustancias se expresan por un patrón mendeliano codominante (A y B son dominantes), hay
posibilidad de que se expresen ambas sustancias: tipo sanguíneo AB. En lo que toca al tipo O (ausencia de A y B),
su patrón hereditario se comporta como recesivo (ver el siguiente cuadro):
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Los individuos con tipo sanguíneo O tendrán anticuerpos anti-A y anti-B; los de tipo A tendrán anticuerpos anti-B;
en tanto que los de tipo B tendrán anti-cuerpos anti-A; y los de tipo AB no tendrán anticuerpos anti-A y anti-B (son
antígenos propios).

Estructura de los tipos sanguíneos (ABO).

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SISTEMA Rh

El sistema Rh es el grupo sanguíneo más complejo y polimórfico de la membrana del glóbulo rojo. Este sistema
presenta un gran interés clínico debido a que sus antígenos son sumamente inmunogénicos y juegan un papel
central en la patogénesis de la enfermedad hemolítica fetoneonatal, en algunas anemias hemolíticas autoinmunes
y en reacciones hemolíticas transfusionales. La tipificación del sistema Rh se realiza en el laboratorio clínico por
técnicas de hemaglutinación. Esta metodología presenta limitaciones atribuibles a la dificultad para obtener
reactivos con alta sensibilidad y a la imposibilidad de acceder al estudio del antígeno en ciertas situaciones clínicas.
La determinación de las bases genéticas de este sistema permitió desarrollar métodos de biología molecular,
basados principalmente en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para la genotipificación de estos
antígenos. Las técnicas inmunológicas y moleculares, utilizadas en conjunto, permiten el diagnóstico precoz de la
incompatibilidad fetomaterna. La genotipificación molecular resulta apropiada para la determinación de
antígenos de grupos sanguíneos en pacientes con anemia hemolítica autoinmune por anticuerpos calientes y en
pacientes politransfundidos. También es una herramienta útil para la selección de unidades de sangre compatible
en pacientes aloinmunizados y para la tipificación de glóbulos rojos con expresión alterada del antígeno D.En
1939, Levine y Stetson, reportaron el caso de una mujer con una intensa re-acción hemolítica después de haberle
practicado una transfusión con sangre donada por el esposo. El antígeno responsable fue diferente a los antígenos
conocidos en aquella época. En 1940, Landsteiner y Wiener inmunizaron conejos y cobayos con eritrocitos
obtenidos de Macacus rhesus, partiendo del planteamiento de que en los eritrocitos de estos monos podrían
existir antígenos similares a los humanos. El suero obtenido (anticuerpos) aglutinaba los glóbulos rojos de estos
monos y a los eritrocitos de 85% de la población blanca. Posteriormente, las investigaciones demostraron que el
antígeno involucrado en el caso de Levine y Stetson y en el antígeno hallado por Landsteiner y Wiener, los cuales
inicialmente se pensa-ban eran el mismo antígeno, resultaron ser distintos. Se estableció que el antígeno del
mono rhesus lo poseen la mayoría de los humanos y, además, otro diferente, pero relacionado. A sugerencia de
Levine, se conservó la denominación de factor Rh para el antígeno humano y LW para el antígeno común al
hombre y al mono. A mediados de los años 40 se habían identificado cinco antígenos pertenecientes al sistema
Rh (C,c,D,E,e). El D tiene dominancia antigénica, de tal manera que si un individuo expresa D en sus eritrocitos,
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será Rh positivo. Es hasta fecha muy reciente que se pudo caracterizar la estructura de estos antígenos, la cual
resultó ser muy compleja.

Los eritrocitos humanos pueden o no tener en su superficie alguna combinación de los antígenos del sistema ABO
y Rh. De la misma forma, algunos individuos tendrán en el suero isoanticuerpos dirigidos contra alguno de los
antígenos del sistema ABO; solamente tendrán en el suero isoanticuerpos anti-D aquellos individuos que hayan
sido previamente sensibilizados a este antígeno. En consecuencia, los sueros que contengan isoanticuerpos anti-
A aglutinarán a los eritrocitos que tengan al antígeno A y sucederá lo propio en otros casos.

Clasificación de los grupos sanguíneos ABO.

Antígeno en eritrocitos Anticuerpos en el suero Grupo sanguíneo

A Anti-A A

B Anti-B B

AyB No hay anti-A ni anti-B AB

No hay A ni B Anti-A y anti-B O

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3.1 PROCEDIMIENTO:
 Muestra requerida:

1 mL de Sangre completa con o sin anticoagulante.

 Materiales y reactivos:

- Tubos de ensayo 12 x 75 mm. - Antisuero RH (anti-D).

- Gradilla para tubos. - Guantes descartables.

- Puntas plásticas. - Solución salina 0.85%.

- Pipeta Pasteur con bulbo o pipeta transfer.

- Aplicadores de madera.

- Frasco lavador.

- Marcador de vidrio.

- Papel toalla.

- Antisuero ¨A¨.

- Antisuero ¨B¨.

 Equipo:

- Centrífuga.

- Reloj marcador.

- Pipetas automáticas.

- Lámpara para lectura de aglutinación.

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 Desarrollo de la técnica:

- Identificar previamente los tubos.

- Depositar 2-3 gotas de sangre en un tubo.

- Realizar 3 veces el lavado de células de la siguiente manera:

a) Agregar 1 mL de solución salina 0.85%.

b) Mezclar y llenar con solución salina 0.85% el tubo hasta 3/4 partes.

c) Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm .

d) Descartar toda la solución salina quedando en el fondo un paquete de glóbulos rojos.

- Preparar una suspensión al 5%, colocando una gota de los glóbulos rojos lavados y 19 gotas de solución salina y
mezclar.

- Rotular 3 tubos con las letras A, B, Rh por cada muestra a analizar, a cada uno agregar una gota de glóbulos rojos
al 5%.

- Depositar los antisueros respectivos:

a) Tubo A antisuero A.

b) Tubo B antisuero B.

c) Tubo Rh antisuero D.

- Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm .

- Leer la presencia o ausencia de aglutinación agitando suavemente los tubos.

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4.1 BIOSEGURIDAD:

El elemento más importante de la bioseguridad es el cumplimiento estricto de las prácticas y técnicas de

laboratorio estándar, pues ninguna medida, ni siquiera un excelente equipo sustituyen el orden y cuidado con el
que deben ejecutarse los procedimientos. Todas las personas que trabajan en un laboratorio deben conocer los
riesgos potenciales a los que se exponen y ser versados en las prácticas y técnicas requeridas para manipular
materiales infecciosos en forma segura. Cuando ocurre un accidente es fundamental que se haga un análisis de
sus causas y se adopten medidas correctivas para evitar su repetición.

5.1 FUENTES DE ERROR:

× Reactivos vencidos o deteriorados.

× No llevar a temperatura ambiente los reactivos.
× Hemólisis de los glóbulos rojos por mezcla inadecuada.
× Presencia de enfermedades autoinmunes.
× Iluminación inadecuada en el momento de la lectura.
× Dilución inadecuada de los glóbulos rojos.

6.1 REVISION Y ACTUALIZACION:

Este manual será revisado y actualizado al menos cada 2 años, o antes cuando sea necesario un cambio en las
metodologías. La revisión estará a cargo de un equipo técnico multidisciplinario, el cual enriquecerá con nuevos
aportes e integrará los conocimientos y experiencias en el área.
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7.1 ANEXOS:

 Forma de reporte:

Se reporta:

Grupo A: si aglutina el tubo marcado A.

Grupo B: si aglutina el tubo marcado B.

Grupo O: si no aglutinan los tubos marcados A y B.

Grupo AB: si aglutinan los tubos marcados A y B.

 Reacción de aglutinación. Tabla para determinación de grupo sanguíneo y factor Rh.

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8.1 BIBLIOGRAFÍA:

 Bryan NJ. An introduction to immunohematology. 2a. ed. Filadelfia: Saun-ders; 1982.

 Pérez JR., Fernández J. Manual de prácticas de laboratorio de hematología. 3 ed. Guatemala: Universidad

de San Carlos, 1997. 102p.

 Tood Sanford & Savid Sohn. El Laboratorio en el diagnóstico clínico, primera edición, 2006.

 Organización Panamericana de la Salud. Manual de Técnicas básicas para un laboratorio de salud, segunda

edición, año 1983.

 Weir DM. Inmunología. México: Editorial El Manual Moderno; 1990.

 Stites DO. Inmunología básica y clínica. 7a. ed. México: Editorial El Manual Moderno; 1991.

ELABORÓ: REVISÓ: AUTORIZÓ:

Fecha: 31/03/19 Fecha: 10/08/19 Fecha: 10/08/19
Firma: Firma: Firma:
Nombre: Q. F. B. Javier Nombre: M. en C. Cesiah Hernández Nombre: M. en C. Cesiah
Fernando Bazan Jimenez Caballero Hernández Caballero
Puesto: Responsable Puesto: Dirección de calidad Puesto: Dirección General
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