Asignatura: Fisiología Vegetal

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1. Título práctica de laboratorio:
POTENCIAL HÍDRICO

Integrantes: Código:

2. OBJETIVOS
General
Determinar el potencial hídrico de un tejido vegetal.

Específicos:
 Determinar los cambios en el peso de los tejidos de papa colocados en soluciones con diferentes
concentraciones de sacarosa.
 Determinar el potencial hídrico en tejidos de papa y zanahoria colocados en soluciones con
diferentes concentraciones de sacarosa.

3. REFERENTES CONCEPTUALES

El agua es el componente químico más abundante en las plantas, llegando a alcanzar hasta entre un 80 y 95% del
peso neto de los tejidos activos. Sus propiedades fisicoquímicas (molécula de tamaño pequeño y de naturaleza
dipolar; alta polaridad y capacidad de formación de puentes de hidrógeno; altos valores de calor específico y de
vaporización; facilidad para disolver sales iónicas; alta adhesión, cohesión y tensión superficial que permiten la
capilaridad y la alta fuerza tensil) explican que esta pueda cumplir gran variedad de funciones en la planta (Barceló
et al., 2014; Campbell et al., 2014). Así, el agua es el principal constituyente del citoplasma, es disolvente de gases,
iones y nutrientes que difunden por toda la planta, y participa en procesos metabólicos y en el mantenimiento de
la turgencia y de la temperatura mediante la transpiración (Barceló et al., 2014). El movimiento del agua en la
planta, desde el suelo hasta las hojas y luego la atmósfera (el denominado continuo suelo-planta-atmósfera), está
regido por gradientes de potencial hídrico (Ψw), de mayor potencial a menor potencial. En sí, Ψw es una medida
del potencial químico del agua, es decir de la cantidad de energía libre asociada a esta, dividido entre el volumen
molal parcial del agua, y usualmente expresado en mega Pascales (MPa) (Taiz & Zeiger, 2002).

En las plantas, los tres factores que influencian mayoritariamente al Ψwson la concentración de solutos, la presión
y la gravedad. El primero se conoce como potencial de soluto o potencial osmótico (Ψπ) y representa el efecto de
solutos disueltos sobre el Ψw. El segundo, la presión hidrostática o potencial de presión (Ψp), puede ser positivo
si se trata de la presión de turgor o negativo si se trata de tensión. Por su parte, el tercer factor, la gravedad (Ψg),
causa que naturalmente el agua tienda a moverse hacia abajo. Dicho esto, el Ψw se puede expresar en función
de estos tres factores como: Ψw = Ψπ + Ψp + Ψg , en donde Ψg es solo considerado por encima de 10 m de altura
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Preparo profesor Cardenas CdlA
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y Ψπ=-RTCs según la ecuación de van’t Hoff (Azcón-Bieto & Talón, 2008; Taiz & Zeiger, 2002).

Normalmente la determinación del Ψw se basa en que cuando una célula o tejido esta en equilibrio con el líquido
o vapor que lo rodea, el flujo dinámico es cero, es decir Ψw célula = Ψw medio , por lo que el Ψw de la solución
patrón o medio nos suministra el valor de Ψw de la célula o tejido. En función de esto, la determinación puede
darse al sumergir una muestra o tejido en distintas soluciones patrón de Ψw conocido y por observación de las
variaciones de peso o volumen se puede saber el Ψw del tejido, que corresponde al de la solución en donde no
tenga ningún cambio apreciable de peso (método gravimétrico) (Barceló et al., 2014).

Otros procedimientos, como el método de Chardakov, utilizan cambios densitométricos en las soluciones patrón
en las que previamente se había introducido la muestra o tejido para reconocer el equilibrio y por tanto el Ψw
(Barceló et al., 2014). Algunos, se basan en el equilibrio de vapor en vez de líquido, usando psicrómetros de
termopar. De los métodos más empleados, por su rapidez y practicidad, se encuentra el método de la cámara de
presión diseñado por Scholander, en el que el Ψw de las células de las hojas se compensa externamente por una
presión ejercida en la cámara hasta que sobresale sabia del xilema. Este valor de presión externa, es aproximado
al Ψw del tejido foliar (Barceló et al., 2014; Taiz & Zeiger, 2002).

El interés de estudio del estado hídrico y las relaciones hídricas radica en que son de importancia central en la
economía y optimización del agua para la planta y en los mecanismos internos reguladores frente a la situación
hídrica exterior (Barceló et al., 2014). En función de lo antes expuesto, en el presente estudio se describe la
determinación del potencial hídrico de tubérculos de Solanum tuberosum y Daucus carota mediante el método
gravimétrico, y la cámara de presión de Scholander.

CONSULTA PREVIA
a. ¿Qué es una regresión lineal?
b. ¿Ecuación de una recta?
c. ¿Qué es el potencial hídrico y que es el potencial químico?
d. ¿Explique que es la entropía y la entalpia?
e. ¿Cómo ejercen trabajo las moléculas de una solución?
f. ¿Direccion de un gradiente, de un flujo?
g. Como se mueven los líquidos en una célula y un tejido vegetal?

4. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Materiales y equipos Reactivos

4Vidrio de reloj 10 gramos de sacarosa (reactivo
2Probeta de 200ml analítico).
48 tubos de ensayo
4 Vasos de precipitado de 1000ml
3pipeteadores
Agua destilada
Bisturí
1Ajitador
Bascula analítica
Papel aluminio
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Gradilla
Marcadores
Computador
Excel

Materiales que debe traer el estudiante

Cinta de enmascarar 1 hoja blanca

Cuchillo pequeño 1 plumón indeleble sharpie
Papel de cocina 3 Lámparas
Pinzas sin garra 2 Zanahoria (Daucus carota L.)
Elementos de
(Bata, guantes de nitrilo, monogafas, tapabocas…etc)
bioseguridad
regla metálica 2Papas lavadas y con cascara (Solanum tuberosum L.)
1 bisturí Apio (Apium graveolens L.) 3 ramas


5. PROCEDIMIENTO

Preparar las siguientes soluciones de sacarosa conforme a la tabla 1.

Concentracion(mM) Ψ(Mpa) Peso inicial(g) Pesofinal(g) Dif. Peso (g) Dif. %

100 -0,244 6,07 6,45 0,38 6,26
200 -0,487 6,09 6,52 0,43 7,06
300 -0,731 6,18 6,45 0,27 4,37
400 -0,974 6,03 6,07 0,04 0,66
500 -1,218 6,1 5,54 -0,56 -9,18
Tabla 1. Modelo toma de datos para peso del tejido y concentración molar de sacarosa

Se dispondrá de las siguientes concentraciones molares de soluciones de sacarosa en agua destilada:

0,2; 0,25;0,3; 0,4;0,4,5; 0,5; 0,6, 0,7, 0,8, 0,9;0,95 y 1,
además, se tendrá como testigo un tubo de ensayo con agua destilada.

Se depositarán, en cada tubo de ensayo, 10 ml de las soluciones de sacarosa y de agua destilada

indicadas; es importante mantener el orden para no alterar la concentración. Con un sacabocado,
obtenga porciones de aproximadamente 1 cm de diámetro, de tejido de papa (Solanum tuberosum L.) ó
zanahoria (Daucus carota L.); luego, retire la epidermis, córtelos en fracciones de longitud uniforme y
séquelos, rápidamente, con servilleta de papel. (Si no hay sacabocados cortar cubitos de
aproximadamente 1 cm

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Mejores resultados se lograrán si los segmentos se manipulan con pinzas, pero evite exprimirlos.
Pese inmediatamente las porciones de tejido y, colóquelas en cada uno de los tubos de ensayo que
contienen las soluciones y el agua destilada; 30 o 45 min después de haber colocado el tejido, en los
tubos de ensayo (la duración del contacto con la solución depende del tiempo disponible), sáquelo y
séquelo con servilletas de papel y pese de inmediato.
Para conveniencia de los cálculos haga una tabla similar a la Tabla 1, los cambios de peso que se
presentarán en las rodajas de los tejidos, de acuerdo con las soluciones empleadas. Con base en los
registros de peso, obtenidos antes y después de sumergir los segmentos en las soluciones y el agua
destilada, establezca las diferencias alcanzadas y calcule el ψw del tejido (ψtejido) analizado.
Calcular el potencial osmótico de cada una de las soluciones de sacarosa con la siguiente fórmula:
Ψs= -miRT
Donde:
m = molaridad de la solución
i = constante que considera la ionización del soluto en la solución. Para solutos no ionizables como la
sacarosa, manitol y glucosa, i= 1
R = constante de los gases [0.00831 kg MPa/K mol]
T= temperatura (ºK).

Esta fórmula debe estar ingresada en Excel, para hacer los cálculos y la curva rápidamente
Resultados
Luego de plantear una ecuación, con ayuda de Excel, obtener una gráfica similar a la fig. 1
1. Graficar la diferencia % de peso de los cilindros de papa (Δ peso= peso final-peso inicial) contra
Ψs de la solución. El punto de intersección (aquel en que no hay ganancia ni pérdida de peso),
indica el potencial de agua del tejido. Ver ejemplo figura1

Fig 1 cambio de masa del tejido vegetal respecto a la concentración del medio exterior

2. determinar la ecuación y curva adecuada

Antes de la práctica
1. Explica el concepto de potencial hídrico.
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2. Explica ¿cuál es la diferencia entre difusión y ósmosis?

3. ¿calcular y registrar en el cuaderno las ecuaciones lineales para %masa vs molalidad, % masa vs
molaridad?
4. Acerca de la Metodología. Explica: ¿Qué hipótesis plantearías para este experimento?
5. Tener Grabadas en excel las fórmulas de las ecuaciones lineales para %masa vs molalidad, % masa vs
molaridad y por último la formula Ψs= -miRT

6. BIBLIOGRAFÍA

Modificado de:
Fernando Díaz de León Sánchez/David Díaz Pontones/Maria de Lourdes Martínez Cárdenas/Laura
Josefina Pérez Flores/Denise Raddatz Mota/Fernando Rivera Cabrera. Manual de prácticas de
laboratorio. Fisiología y Bioquímica Vegetal. Universidad Autónoma Metropolitana/Unidad
Iztapalapa/División de Ciencias Biológicas y de la Salud.

INFORME DE LABORATORIO

El informe de laboratorio se presenta en modelo de artículo científico, según modelo enviado al correo
por el profesor

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