GSIS Por Células β
GSIS Por Células β
GSIS Por Células β
La glucosa en sí misma es el secretagogo fisiológico de insulina más potente (ver Glosario) y existe
Es un mecanismo bien caracterizado para GSIS por las células β, que depende del metabolismo de
la glucosa.
[1] (Figura 1). La glucosa entra en las células β a través de los transportadores facilitadores de
glucosa (GLUT), y La glucocinasa (GCK), el marcapasos para GSIS, la fosforila para producir glucosa
6-fosfato. (Glc-6-P). Glc-6-P se metaboliza a través de la glucólisis en piruvato y entra en la
mitocondria. donde se metaboliza aún más a través del ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) y
finalmente conduce a una ncremento en la relación ATP: ADP.
Una alta relación ATP: ADP cierra los canales de potasio dependientes de ATP, causando la
despolarización de la membrana y la apertura de canales de calcio dependientes de voltaje, lo que
lleva Secreción hormonal [1]. Este proceso se conoce como la ruta de activación [1]. Además, hay
es una vía de amplificación que aumenta la eficacia de la exocitosis de insulina una vez que la vía
de activación Ha inducido una elevación del calcio intracelular.
Aunque permanece en gran parte sin caracterizar, La ruta de amplificación también depende del
metabolismo de la glucosa y de varios metabolitos / factores. de la vía de mitocondria y fosfato
pentoso están implicados como un posible acoplamiento agentes [1–3]. Como resultado, la
complejidad de la regulación intrínseca de GSIS no es completamente caracterizada
Es la consecuencia de las fluctuaciones en los niveles de metabolitos / factores que afectan el ATP:
Relación ADP, movilización de calcio y exocitosis, permitiendo que el flujo glicolítico sea
autorregulador [5].
Entre los muchos factores, la fructosa 1,6-bifosfato (Fru-1,6-P2) es una fuente principal de
oscilaciones glucolíticas.
quinasa (PFK) (PFKM), la enzima glucolítica clave que cataliza la fosforilación de la fructosa 6-
intermedios Las células β también expresan otras isoformas de PFK [6,7] y PK [8,9], que tienen
diferentes
Oscilaciones [7]. Por lo tanto, Fru-1,6-P2 es un metabolito fundamental para GSIS, que modula la
insulina oscilatoria.
secreción, que es fundamental para promover la sensibilidad a la insulina hepática para reducir
eficazmente la
Producción de glucosa [4]. En consecuencia, los individuos con diabetes presentan insulina
oscilatoria anormal
secreción [11]. En paralelo, la secreción de insulina bifásica (primera y segunda fase) se produce
enRespuesta a un bolo de glucosa intravenoso en individuos con tolerancia normal a la glucosa
[12]
(Figura 2). La secreción de insulina de primera fase es necesaria para suprimir eficientemente la
producción de glucosa hepática.
papel de la glucólisis en GSIS, se espera que la interferencia con su flujo normal tenga un impacto
negativo
(Figura 2). Por lo tanto, es una conclusión obvia que un mayor conocimiento de los mecanismos
celulares
corregir las alteraciones presentes en los estados prediabéticos, lo que a su vez retrasaría el
desarrollo de
diabetes.
Durante muchos años, el supuesto más importante en el estudio de GSIS en células β fue su total
[14-16]. Juntas, estas enzimas se expresan en niveles altos en los tejidos gluconeogénicos,
como el hígado y el riñón, y juegan un papel importante en la producción de glucosa endógena
para mantener
las enzimas en estos tejidos se asocian con hiperglucemia y diabetes [20,21]. G6Pase,
FBP y PCK evitan los pasos de limitación de velocidad respectivos catalizados por GCK, PFK y PK en
La glucólisis para formar los llamados ciclos fútiles de glucólisis / gluconeogénesis que ahora se
consideran
Encrucijadas metabólicas clave para una regulación exquisita a corto plazo [22,23]. Una vista
limitada de
estas enzimas han obstaculizado su estudio durante mucho tiempo, ya que se asocian
principalmente con la gluconeogénesis
Estas enzimas son esenciales en otras vías (por ejemplo, la síntesis de glicerol en el tejido adiposo
[17],
G6Pase
retículo [18]. La actividad enzimática depende de la expresión de uno de los tres G6PC
subunidades descritas hasta la fecha, es decir, G6PC1–3 [18], que a su vez identifica todo el
complejo.
G6PC1 es mayor en tejidos gluconeogénicos [18]. Las células β humanas y de ratón expresan
G6PC2 con
menor actividad que G6PC1 [26,27]. El estudio de un ratón knockout global G6PC2 fue crítico
demostrar inequívocamente que G6PC2 está activo en los islotes pancreáticos y que está
involucrado en
GSIS, ya que estos ratones mostraron un fenotipo metabólico leve con una disminución de ~ 15%
en el ayuno
glucemia [28-30]. Este fenotipo concuerda con la idea de que la expresión específica de
G6PC2 en células β permite el consumo de Glc-6-P a través de un ciclo de sustrato con GCK [29]
(Figura 3). Por lo tanto, la ablación de G6PC2 aumenta la disponibilidad de Glc-6-P y GSIS, lo que
resulta en la
estrés del retículo, movilización de Ca2 + deficiente y GSIS alterado en células β en lipotóxicos
tratamiento [31].
Curiosamente, los SNP que afectan la expresión / actividad de G6PC2 se han mapeado en el gen
G6PC2
[33] y los ratones hiperglucémicos [34] se asocian con la acumulación de glucógeno, que se
propone
ser tóxico para las células β [34]. Además, los SNP G6PC2 asociados con un aumento de la glucosa
en sangre en ayunas
a su vez se asocian con una mayor secreción de insulina [32]. Una posible explicación es que
[26,28,31]. A la G6PC3 se le ha asignado una función similar en la captación de glucosa por los
astrocitos humanos
[35]. Tomando estos hallazgos juntos, la expresión específica de G6PC2 en las células β agrega un
nuevo nivel de
Control a GSIS.
FBP
Dos isoformas bien caracterizadas codificadas por genes separados: FBP hepática (FBP1), presente
en
los islotes carecen de actividad de FBP [14], FBP1 se expresa funcionalmente en el páncreas de
rata y también fue
detectado en islotes pancreáticos humanos [37] (Figura 3). FBP2 mRNA también se ha detectado
en murino
Páncreas [34]. La actividad de FBP1 es inhibida por AMP, Fru-2,6-P2 y Fru-1,6-P2 [36], siendo una
claveSensor de estado de energía intracelular. Por el contrario, AMP, Fru-2,6-P2 y Fru-1,6-P2 se
activan
FBP1 desempeña un papel destacado en GSIS por las células β. Como se esperaba, debido a la
hidrólisis de Fru-1,6-P2,
FBP1 está regulada al alza en islotes pancreáticos de ratas hiperglucémicas [42], ratones diabéticos
[34] y
Sujetos diabéticos [41]. FBP2 también está regulada al alza en islotes de animales diabéticos
hiperglucémicos
modelos [34], aunque su participación en GSIS sigue siendo desconocida. La expresión PFKM
también es
reducción en los islotes de pacientes diabéticos [43], lo que indica que las alteraciones opuestas
combinadas
en la expresión de estas enzimas es una característica de la falla de las células β, lo que resulta en
un deterioro adicional
PCK
Las isoformas citosólicas (PCK1) y mitocondriales (PCK2) son proteínas homólogas (~ 71% de
identidad)
y depende de GTP para convertir oxaloacetato en PEP, PCK1 ha eclipsado por mucho tiempo la
contribución
de PCK2 [45]. Después de los primeros informes sobre la ausencia de PCK1 en las células β [16], se
demostró
que las células β murinas expresan PCK2 [46] (Figura 3). En particular, PCK2 no desempeña un
papel que está en
de cualquier manera, la misma que la de las otras dos enzimas gluconeogénicas, FBP1 y G6PC2,
como, más bien,
estimula GSIS [46]. Aunque el efecto estimulante de PCK2 sobre GSIS es de alguna manera
contradictorio
entre GSIS y el ciclo del piruvato [46]. Ciclo del metabolismo del piruvato en las células β, que
participa.
Señales citosólicas, se producen a través de al menos cuatro ciclos diferentes; a saber, el piruvato /
malato,
Ciclos de piruvato / citrato, piruvato / isocitrato y piruvato / PEP [2,3,46]. PEP es un intermedio
glucolítico.
que se convierte en piruvato por reacción PK. Entonces, el piruvato entra en la mitocondria.
Niveles en células β murinas [47]. PCK2 convierte el oxaloacetato de nuevo en PEP, lo que deja la
mitocondria
y se mezcla con la piscina citosólica, completando el ciclo [46] (Figura 3). Mientras que el
Se proponen otros ciclos de piruvato para acoplar el metabolismo mitocondrial a GSIS por
generación
de NADPH citosólico (ver [2,3] para revisiones detalladas del ciclo de piruvato en células β),
hidrólisis de
El GTP mitocondrial por PCK2 para producir PEP es la conexión propuesta para el ciclo de
piruvato / PEP [46].
El GTP es producido por la succinil-CoA sintetasa en proporción a la actividad del ciclo TCA y es
crítico
para GSIS [48]. Además, la regeneración de PEP por PCK2 podría agregar otro punto de regulación
a las oscilaciones
en GSIS controlando negativamente la actividad PFKM [38]. No hay información definitiva sobre
en la línea de células β del ratón MIN-6 [49] y el aumento progresivo en los islotes de rata [50] se
observaron en el
Presencia de glucosa.
La enzima mitocondrial que proporciona la mayor parte del sustrato oxaloacetato para la
propuesta
el ciclo del piruvato a través de PCK2 es más bajo en las células β murinas [6,47]. Por lo tanto, la
relevancia
G6Pase
La sal inorgánica tungstato de sodio, ampliamente estudiada debido a sus potentes propiedades
antidiabéticas y
la falta de efecto hipoglucémico [51], actúa como inhibidor de G6PC1 y G6PC2 in vitro [27] (Tabla
1),
aunque no influye en la actividad FBP1 [52]. Tungstato ha demostrado inducir glucógeno renal
Acumulación en ratones knockout para IRS2, que se ha atribuido en parte a la inhibición de G6PC1
actividad [53]. También se ha demostrado que el tungstato mejora la secreción de insulina basal y
GSIS en
la línea de células β BRIN-BD11 [54] de rata y el páncreas de rata perfundido [55] (Tabla 1). Sin
embargo, terapéutico.
El uso del tungstato sigue siendo controvertido debido a la posibilidad de que se produzcan
efectos indeseables significativos.
Efectos [56,57]. Curiosamente, un inhibidor selectivo de G6PC2 ha sido reportado que no inhibe
G6PC1 [27], lo que sugiere que se pueden diseñar inhibidores específicos contra G6PC2. Sin
embargo, al contrario
Para la intuición, los SNP G6PC2 no están asociados con un mayor riesgo de desarrollo de
diabetes, que probablemente se deba a la dependencia de sus efectos sobre la glucemia, ya que
Se ha demostrado que los niveles de glucosa en la sangre eliminan el impacto negativo [32]. Esto
puede ser explicado
por la regulación negativa de G6PC2 observada durante la hiperglucemia crónica [33,34], lo que
sugiere
G6PC2 podría reducir la glucemia en ayunas en estados prediabéticos cuando esta isoforma
todavía contribuye
A la patología de la enfermedad.
FBP
Se han diseñado muchos inhibidores de la FBP con diferentes modos de acción, aunque pocos
tienen
avanzar hacia un mayor desarrollo [58]. En particular, el inhibidor de FBP MB05032 exhibe
alta potencia y especificidad para FBP1 y FBP2 humanos [59] (Tabla 1). In vitro, MB05032
estimulado.
tanto la secreción de insulina basal como GSIS en la línea de células β MIN6 y los islotes aislados de
ratón,
Secreción de insulina de segunda fase en ratones [40] (Tabla 1 y Figura 2). MB06322 de primera
generación
llegó a un ensayo de Fase I y IIb pero se suspendió [58]. MB07803 de segunda generación es
actualmente
siendo evaluado por su valor clínico, habiendo completado con éxito cinco ensayos de Fase I en
como un estudio inicial de prueba de concepto en pacientes diabéticos, que muestra una
significación estadística y clínicamente significativa
reducciones de la glucemia en ayunas sin efectos hipoglucemiantes [58,60]. Por lo tanto, FBP
PCK
Aunque PCK2 fue la primera isoforma descrita [61], su función metabólica permanece en gran
parte sin resolver.
Idealmente, los inhibidores de PCK son terapias antidiabéticas atractivas, pero este papel es en
gran medida dependiente
control glucémico [62]. Dado el alto grado de identidad de secuencia entre PCK1 y PCK2,
contra PCK1 humano se ha informado [64], se espera que inhiba PCK2 también debido a la relativa
ácido, muestra inhibición mixta, unión al sitio activo y a un sitio alostérico novedoso de PCK1 [63].
Es teóricamente posible que se puedan desarrollar análogos para inhibir diferencialmente PCK1 y
PCK2
a través de la unión a este bolsillo alostérico [63]. La inhibición selectiva de PCK1 es claramente
importante si
La actividad de PCK debe orientarse en una capacidad terapéutica, ya que PCK2 tiene un efecto
positivo en GSIS
[65] (Tabla 1), lo que sugiere que la inhibición global de PCK es negativa para GSIS.
Células β
Las células β detectan los niveles de glucosa en la sangre y secretan insulina en respuesta. Esta
maquinaria sensora de glucosa.
es tan específico que las células β poseen un estricto programa de represión para evitar la
activación de
Vías metabólicas que pueden interferir con él [66]. Luego, expresión de enzimas gluconeogénicas.
en las células β debe proporcionar alguna ventaja, a pesar de su desregulación durante la diabetes,
contribuyendo finalmente
GSIS deteriorado.
Función de las células β [70]. La acumulación de glucógeno también se ha sugerido como una
adaptación
hiperglucemia a corto plazo, pero que la acumulación crónica de glucógeno es perjudicial, lo que
refleja la
Por GCK, el marcapasos para GSIS. Glc-6-P es tanto el precursor como un activador alostérico para
síntesis de glucógeno [74]. Sin embargo, la expresión / actividad de GCK se reduce tanto en
pacientes con
Forma monogénica de diabetes relacionada con mutaciones del gen GCK que afectan
negativamente su actividad.
[75] y en modelos animales de diabetes [76]. Incluso cuando GCK expresión no puede verse
afectada en
pacientes diabéticos poligénicos [6,43], se propone que el potencial total de GCK disminuya
debido a
a la alteración de otros mecanismos reguladores que a su vez modulan la actividad de GCK [77,78].
Dado
que GCK ejerce el mayor control sobre la capacidad de fosforilación de la glucosa de las células β,
incluso reducciones pequeñas
En la actividad GCK se harán reducciones paralelas en la producción de Glc-6-P. Puede la
hiperglucemia crónica
Como se mencionó anteriormente, la expresión de FBP1 se regula al alza en los islotes de ratones
hiperglucémicos y
Los intermediarios glicolíticos regresan a Glc-6-P para la síntesis de glucógeno. Cabe destacar que
la FBP
el inhibidor MB06322 estimuló GSIS en ratones no diabéticos de control [40], lo que indica que la
expresión
y la actividad de la FBP es lo suficientemente alta en las células β normales in vivo, por lo que su
inhibición influye
GSIS (Figura 2). En otras palabras, FBP puede tener un papel fisiológico en GSIS.
Curiosamente, FBP interactúa con la aldolasa Fru-1,6-P2 (ALDO), que cataliza la conversión
reversible
objetivo para la interrupción o estabilización de complejos de multienzimas, que son cada vez más
reconocidos
Como mecanismos reguladores clave [82]. El complejo FBP / ALDO es isoforma específico: FBP2
interactúa con el músculo ALDO (ALDOA) y FBP1 interactúa con el hígado ALDO (ALDOB) [79–81].
La constante de asociación FBP1 / ALDOB depende del estado metabólico de la célula: inhibidores
de FBP1
disminúyalo mientras que los metabolitos que estimulan la gluconeogénesis aumentan [79]. Por
otra parte, similar
a FBP1, ALDOB se regula al alza en las células β de los sujetos diabéticos [6,83] y a corto plazo
hiperglucemia in vitro [50], lo que indica que tanto el aumento de las cantidades de estas enzimas
y el contexto metabólico alterado contribuye a la actividad mejorada del complejo FBP1 / ALDOB
(Figura 3). Esta evidencia indica que la interrupción de las interacciones proteína-proteína entre
FBP1
y las enzimas ALDOB podrían ayudar a restaurar la homeostasis de la glucosa en los diabéticos.
Recientemente, Fru-1,6-P2 ha demostrado regular la proteína quinasa activada por AMP (AMPK)
[84].
AMPK se activa por la falta de glucosa y juega un papel clave en la reducción de GSIS e insulina.
expresión génica [85]. Sin embargo, se ha determinado que la producción reducida de Fru-1,6-P2
Presencia de glucosa alta, siendo esta capacidad dependiente de la presencia de ALDO para la
detección
Niveles de Fru-1,6-P2 [84] (Figura 3). Aunque este mecanismo de detección no ha sido
demostrado.
en las células β, sin embargo, puede agregar otra explicación de cómo la hiperglucemia crónica
causa glucotoxicidad
líneas [86]. Un complejo multienzimático similar formado por PFKM, FBP1, ALDOB y PKM2, todos
Los regulados por Fru-1,6-P2, pueden estar presentes en las células β, lo que permite una
regulación estricta de la glucosa.
Es de destacar que la FBP2 también está regulada al alza en los islotes de animales diabéticos
hiperglucémicos [34]. A pesar de que
que el aumento de la actividad de FBP2 no induce la síntesis de glucógeno, sino que aumenta la
insulminación
la captación de glucosa en el músculo esquelético, lo que sugiere que los inhibidores de la FBP
pueden tener una
hacia la inhibición de AMP y Ca2 + [80]. La expresión de ALDOA está regulada a la baja en islotes
de diabéticos.
con mayor sensibilidad a la glucosa de las células β [88] pero también con glucotoxicidad [50],
mientras que
GSIS deteriorado [43,89,90]. Cuarenta y ocho horas de hiperglucemia induce un aumento de todos
los glucolíticos
Niveles intermedios en células β, con niveles particularmente mayores de Glc-6-P y Fru-6-P [91].
Acumulación
[91], que puede atribuirse a una expresión reducida de G6PC2 y una mayor expresión / actividad
ratones diabéticos hiperglucémicos [34] y ALDOB a las 18 h en islotes de rata cultivados con alto
contenido de glucosa [50],
mientras que el ARNm de G6PC2 muestra una tendencia a la reducción a las 24 h y una regulación
negativa significativa
La inducción de FBP1 se revirtió cuando se cultivaron células β cultivadas a alto nivel de glucosa
durante 24 h
Desajuste de su regulación normal. Esto también puede ser cierto para ALDOB. Por lo tanto,
aumentado
pero la expresión reversible de FBP1 / ALDOB en el contexto de inalterado o ligeramente reducido
por la regulación positiva aguda de PPP1R3C en respuesta a la hiperglucemia a corto plazo [34,50],
que
puede contribuir a una mayor acumulación de glucógeno como una forma desesperada para que
las células β puedan lidiar con el exceso
Glc-6-P una vez que el flujo glucolítico se reduce como uno de los muchos mecanismos que
median la glucotoxicidad.
la idea previa de que las células β no expresan enzimas "gluconeogénicas" porque interfieren
estas enzimas están presentes y juegan un papel importante en el metabolismo de las células β.
Estas enzimas
a saber, G6PC2, FBP1 y PCK2 - se postulan para permitir el ajuste fino de GSIS mediante la
modulación
Ciclos de sustrato clave. Sin embargo, dado el papel crítico de la glucólisis en GSIS, las
interferencias crónicas
con su flujo normal tiene un impacto negativo en la secreción de insulina y su patrón oscilatorio.
Esto es
Los estudios adicionales de estas enzimas serán de gran importancia para entender tanto las
normales
y alteró GSIS (ver Preguntas pendientes), especialmente porque dos de ellas, G6PC2 y
FBP1, son moduladores conocidos del metabolismo de las células β humanas y constituyen
objetivos atractivos para
Expresiones de gratitud
Este trabajo fue apoyado por el Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (FONDECYT)
del Estado de Chile,
otorgue 11160854 a R.B. El financiador no tuvo ningún rol en el diseño del estudio, la recopilación
y el análisis de datos, la decisión de publicar o