Fermentadores para Cultivo Sumergido

fermentadores para cultivo sumergido
La principal fuente de producción industrial del ácido cítrico es la glucosa, de la

cual se obtiene el producto final por vía biofermentativa con un microhongo
llamado Aspergillus Niger. El ácido cítrico es utilizado en su mayoría como
acidulante orgánico y agente de control de pH en alimentos, bebidas,
farmacéuticos y en aplicaciones técnicas.
El proceso del ácido cítrico es muy similar al de azúcar de remolacha. El azúcar o
la melaza son fermentados y durante la fermentación se adicionan todos los
nutrientes requeridos. Para separar el citrato de calcio de la glucosa se adiciona
cal en la etapa de neutralización. Posteriormente el citrato de calcio es acidificado
con ácido sulfúrico, el cual lo convierte en ácido cítrico soluble y sulfato de
calcio insoluble. El ácido cítrico acuoso es concentrado utilizando evaporadores
antes de la cristalización. La producción del ácido cítrico puede finalizarse por
cualquiera de dos vías, bien sea como cristales de ácido cítrico que son filtrados
del licor madre y convertidos en cristales o polvo mediante secado, o como una
solución líquida al 50%.
a fuente de carbono que utilizará el microorganismo para la fermentación será la sacarosa

presente en las melazas de remolacha. Las melazas son un subproducto de la industria azucarera
rico en azúcares y otros nutrientes beneficiosos. Para que el microorganismo crezca y se desarrolle
adecuadamente se necesita, además de los que llevan las melazas, una serie de nutrientes
suplementarios en proporción adecuada, además de agua y aire.
Existe gran variedad de microorganismos que en condiciones adecuadas producen una alta
cantidad de ácido cítrico, de entre todos ellos se ha optado por el Aspergilus niger, ya que es un
microorganismo que da una producción elevada al usar melazas como medio de cultivo, además
es el microorganismo mas estudiado y empleado industrialmente a la hora de producir ácido
cítrico.
FERMENTACIÓN Tras el acondicionamiento y la esterilización del medio de cultivo dentro del

equipo de fermentación, se introduce el starter o inóculo, el cual comenzará a crecer en un medio
rico en nutrientes, aireado y agitado convenientemente, la aireación y agitación son esenciales
para el correcto crecimiento del cultivo. A lo largo del ciclo fermentativo, de 144 horas de
duración, el microorganismo crecerá hasta alcanzar la fase terminal de desarrollo, donde tiene
lugar en mayor medida la producción de ácido cítrico. Con el fin de maximizar la producción, se
controla a lo largo del proceso una serie de factores como son temperatura, pH, grado de
agitación, grado de aireación…etc, no controlar estos factores da lugar a una menor producción de
ácido cítrico. SEPARACIÓN Una vez terminado el proceso fermentativo se separa el ácido cítrico
del resto de componentes del caldo post-fermentativo. En primer lugar, se separa el micelio,
compuesto por células muertas de Aspergilus niger, del resto del caldo mediante un proceso de
filtración. En segundo lugar se realiza el llamado proceso cal-sulfúrico que consiste en mezclar el
caldo post-fermentativo con una lechada de cal, lo cual ocasiona que se forme la sal de calcio del
ácido cítrico, el citrato cálcico, que precipita y se separa mediante otra filtración. 4 El citrato
cálcico se descompone al mezclarlo con ácido sulfúrico, quedando ya el ácido cítrico libre y un
residuo sólido de sulfato cálcico que se separa mediante filtración. PURIFICACIÓN Tras el proceso
cal-sulfúrico nos encontramos con el ácido cítrico ya separado de las impurezas del caldo post-
fermentativo, pero se presenta en dilución con gran cantidad de agua. Para obtener el producto
sólido de esta disolución se efectúa un proceso de evaporación y cristalización mediante el cual la
disolución de ácido cítrico pasa a un evaporador de doble efecto que retirará el agua necesaria
para que en el cristalizador la disolución llegue al punto de saturación y se formen los cristales de
ácido cítrico. Los cristales formados en el proceso de cristalización aun contienen humedad, la cual
ha de ser retirada antes de proceder al empaquetamiento del producto, ya que el consumidor
demanda un producto seco, por lo tanto, para retirar esta humedad, se realiza una centrifugación
y posteriormente un secado del producto lo que retirará toda el agua sobrante quedando el ácido
cítrico en forma granular listo para ser empaquetado para su transporte. CONCLUSIÓN La
creciente demanda mundial de ácido cítrico, debida al aumento de la demanda de alimentos, y el
alto valor añadido de éste hacen pensar que la construcción de una planta de producción de ácido
cítrico generará grandes beneficios económicos y sociales, aprovechando además un residuo
industrial de alta producción como son las melazas de remolacha provenientes de la industria
azucarera. La construcción, puesta en marcha y funcionamiento de la planta ha de respetar, entre
otras, la legislación vigente en materia de seguridad y medio ambiente.
5. MATERIAS PRIMAS 5.1. AGUA El agua se usará para diluir las melazas de manera que se reduzca
la densidad y viscosidad de éstas, haciéndolas aptas para el cultivo microbiano. El agua usada se
deberá esterilizar para evitar el crecimiento de otros microorganismos que compitan por el
alimento. También será utilizada como refrigerante en la etapa de fermentación y en las etapas de
filtración para el lavado de la torta y como fluido calefactor o refrigerante en las reacciones
químicas. Además estará disponible para servicios auxiliares como limpieza, sanitario y contra
incendios. Para evitar fallos en el suministro de agua y obtener los caudales deseados, se utilizarán
depósitos de almacenamiento que asegurarán el suministro de agua cuando esta sea requerida.
5.2. AIRE Para la producción de ácido cítrico se utiliza un microorganismo que es el que, mediante
su metabolismo, transforma la materia prima en producto. Dentro de las células se dará la
reacción que transforma la sacarosa en ácido cítrico, esta reacción requiere oxígeno. Como fuente
de oxígeno, necesario para el metabolismo celular, se usará aire en exceso, que será suministrado
por un compresor y conducido hasta los fermentadores. Un déficit o ausencia de oxígeno
provocaría otro tipo de reacciones que darían otros productos distintos al que se busca obtener. El
aire deberá ser esterilizado, ya que podría transportar microorganismos que podrían alterar el
proceso, para ello se usará un sistema de filtros, que además limpiarán el aire de polvo y suciedad.
6. Aspergillus niger Entre los microorganismos que dan una aceptable producción de ácido cítrico
podemos encontrar numerosos tipos de hongos, levaduras e incluso bacterias, pero de todos ellos
se ha elegido el Aspergillus niger debido a que puede crecer en medios de cultivo muy baratos,
como las melazas de caña o remolacha y líquidos de maceración de maíz o trigo, con un
producción de ácido cítrico muy elevada. Otra característica del Aspergillus niger es su crecimiento
en forma de esferas de 2 mm de diámetro, la cual se da a partir del quinto día de fermentación. A
parte de ser una efectiva forma de reproducción, no aumenta la viscosidad del medio, lo cual
favorece la agitación y la aireación (la forma globular consume menos oxígeno que la filamentosa)
además da muchos menos problemas de crecimiento en paredes o en tuberías y la separación de
biomasa formada por filtración es más efectiva. Una de las cepas más usadas para la producción
de ácido cítrico es la ATCC 11414, es la que se utilizará para este proceso.
2.3.2. Factores físicos y químicos pH del medio: el pH inicial del medio se puede ajustar a un pH
neutro o ligermante ácido para favorecer la germinación y el crecimiento, el pH desciende durante
la fermentación. Para la biosíntesis de citrato es esencial mantener el pH por debajo de 2,0, puesto
que a pH superiores, el A. niger produce ácido oxálico en vez de citrato. Temperatura: La
temperatura óptima para las cepas productoras de ácido cítrico se encuentra entre 25°C y 35°C.
Oxígeno: la formación de ácido cítrico es un fenómeno de oxidación y por lo tanto, el oxígeno no
debe faltar nunca, una corta interrupción del suministro de oxígeno puede conducir al cese
irreversible de la producción de citrato.
Hay dos tipos de procesos en la producción comercial de ácido cítrico: 1) cultivo en superficie 2)
cultivo sumergido, utilizando fermentadores agitados o de columna de aire. En el sistema de
fermentación con micelio en superficie el medio líquido estéril, se coloca sobre bandejas de acero
inoxidable y se inocula con esporos del hongo. Las bandejas se apilan y se hace circular aire estéril
(filtrado) a través de ellas que sirve para suministrar oxígeno al cultivo como para eliminar el calor
de reacción. En las fermentaciones en medio líquido, se utilizan tanques aireados de acero
inoxidable, ya sea reactores agitados o fermentadores de columna de aire tipo air-lift. La
inoculación se realiza con esporas o con cultivo vegetativo. La fermentación se realiza entre 25 a
30 ºC dependiendo de la cepa y dura entre 5 u 8 día

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