Determinación Del Ácido Ascorbico

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO
I. INTRODUCCIÓN:
La vitamina C, llamada también ácido ascórbico, se encuentra principalmente en las
frutas cítricas, verduras, papas, leche.
La vitamina C, enantiómero L del ácido ascórbico o antiescorbútica, es un nutriente
esencial, en particular para los mamíferos.
La presencia de esta vitamina es requerida para reacciones metabólicas en todos los

animales y plantas y es sintetizada por casi todos los organismos excepto en el
hombre, por ausencia de la enzima L-gulonato oxidasa.
Su deficiencia causa ESCORBUTO, inhibiendo la síntesis de colágeno,

indispensable en los tejidos que se manifiesta en anemia, cansancio y debilidad,
encías inflamadas que sangran fácilmente, hemorragias en la piel etc..
En organismos vivos, la vitamina C o ascorbato es un antioxidante hidrosolubre,

que protege el cuerpo contra la oxidación mediante reacciones redox y es cofactor
en varias reacciones enzimáticas vitales, actúa junto con la vitamina E. El objetivo
de la práctica es determinar el contenido de la vitamina C en zumos de diferentes
alimentos.
II. . MATERIAL Y MÉTODO:
2.1 MATERIAL:
- Solución de 2,6-diclorofenolindofenol al 0,05% ( disolver en agua caliente )
- Solución acética-metafosfórica: ácido acético al 8% (p/v) y ácido
metafosfórico al 2% ( p/v ).
- Muestras de alimentos (Limón, papa y naranja)
- Bureta
- Pipeta
Matraz de Erlenmeyer
2.2 MÉTODO
La determinación se basa en la propiedad que tiene el ácido L-ascórbico de
reducir al 2,6- diclorofenolindefenol, que es un indicador redox. El 2,6-
diclorofenolindefenol oxidado es azul a un pH superior a 5,7 y rosado a un pH
inferior y al ser reducido se decolora ( leucoderivado ).
a) Fundamento:
La determinación se lleva a efecto mediante la titulación de la vitamina
C con una solución del indicador, en presencia de ácidos
acéticometafosfórico. Estos ácidos inhiben la oxidación aeróbica del
ácido ascórbico, precipitan las proteínas e inactivar las enzimas que
pueden interferir en la reacción. Debido al medio ácido en que se realiza
la titulación, el viraje que hay que considerar es el de rosado a incoloro.
b) Procedimiento
• Elegir los alimentos en los cuales va a analizar el contenido de vitamina
C (frutos cítricos, papa, tomate, manzana, pera).
• Extraer jugo del material a analizar y hacer una dilución al 1/20 en

solución acéticametafosfórica. ( 0.1 ml de zumo más 1.9 mL de sol
Ac.Acido-Metafosfórica.)
• Colocar 2 ml de esta dilución en un matraz Erlenmeyer y titular

agregando solución de 2,6-diclorofenolindofenol con una pipeta de 2 ml
hasta coloración rosada débil, persistente durante 5 segundos.
• Titular un blanco en las mismas condiciones ( 0.1 mL agua + 1.9 mL de

sol Ac. A-M).
c) Expresión de resultados
Expresar los resultados en mg de ácido ascórbico por 100 ml de jugo 0
100 g de alimento. Cada 1.0 ml de 2,6-diclorofenolindofenol equivale a
0,12 mg de ácido ascórbico. Entonces:
1ml 2,6 –DCFIF------ 0,12 mg de ácido ascórbico
Volumen Gasto ------ x mg de ácido ascórbico

III. DISCUSIONES:
La práctica consistió en la determinación de la vitamina C en algunos alimentos
previamente seleccionados, los cuales fueron: Limón, papa y naranja, a estos se les
extrajo una muestra de zumo que se filtró en 3 vasos distintos.
Con ayuda de un dispensador se prepararon 3 diluciones al 1/20 en solución acética-

metafosfórica (0,1 ml de zumo + 1,9 ml de solución acido meta-fosfóriaca) en tubos
de ensayo.
Luego a dicha dilución se le realizó una titulación agregándole la solución del

indicador 2,6 diclorofenolindofenol.
Los volúmenes gastados en cada tubo fueron:
Tubo 1:(Limón + ácido acético) = 5,2 ml
Tubo 2:( papa + ácido acético) = 0,6 ml
Tubo 3:(Naranja + ácido acético) = 2,6ml
El ácido acético meta fosfórico en cada tubo funciona como inhibidor con respecto a
la oxidación aeróbica del ácido ascórbico e inactiva las enzimas que pueden
interferir en la reacción.
Los resultados expresados en mg de ácido Ascórbico por 100 ml de jugo son:
1ml 2,6 –DCFIF------ 0,12 mg de ácido ascórbico
Volumen Gasto ------ x mg de ácido ascórbico
Limón = 0,624mg Ácido ascórbico.
Papa = 0,072 mg Ácido ascórbico.

Naranja = 0,312 mg Ácido ascórbico.
IV. CONCLUSIONES:
La vitamina C es muy importante en nuestro organismo porque participa en muchas
reacciones biológicas de nuestro organismo. Como cofactor también actúa en las
reacciones redox, por lo cual actúa como un antioxidante hidrosoluble natural.
El ácido acético meta- fosfórico funciona como inhibidor con respecto a la

oxidación aeróbica del ácido ascórbico.
El ácido ascórbico reduce al 2,6diclorofenilindofenil que es un indicador Redox

(pasa de un tono azul a un rosa débil)
V. BIBLIOGRAFÍA
Knight, John et al. (agosto de 2016). «Ascorbic Acid Intake and Oxalate Synthesis»
[Ingesta de ácido ascórbico y síntesis de oxalato]. Urolithiasis44 (4): 289-297.
GOBERNA RAIMUNDO. (2014): Actualizaciones en Bioquímica Clínica. 1ra

Edición. Secretariado de Publicaciones. Universidad de Sevilla. España.
MCKEE TRUDY. (2014). Bioquímica, las bases moleculares de la vida. 5ta

Edición. Editorial Mc Graw Hill- LANGE. España.

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La presencia de esta vitamina es requerida para reacciones metabólicas en todos los

Su deficiencia causa ESCORBUTO, inhibiendo la síntesis de colágeno,

En organismos vivos, la vitamina C o ascorbato es un antioxidante hidrosolubre,

II. . MATERIAL Y MÉTODO:

• Extraer jugo del material a analizar y hacer una dilución al 1/20 en

• Colocar 2 ml de esta dilución en un matraz Erlenmeyer y titular

• Titular un blanco en las mismas condiciones ( 0.1 mL agua + 1.9 mL de

1ml 2,6 –DCFIF------ 0,12 mg de ácido ascórbico

Volumen Gasto ------ x mg de ácido ascórbico

Con ayuda de un dispensador se prepararon 3 diluciones al 1/20 en solución acética-

Luego a dicha dilución se le realizó una titulación agregándole la solución del

Los volúmenes gastados en cada tubo fueron:

Tubo 1:(Limón + ácido acético) = 5,2 ml

Tubo 2:( papa + ácido acético) = 0,6 ml

Tubo 3:(Naranja + ácido acético) = 2,6ml

Los resultados expresados en mg de ácido Ascórbico por 100 ml de jugo son:

1ml 2,6 –DCFIF------ 0,12 mg de ácido ascórbico

Volumen Gasto ------ x mg de ácido ascórbico

Limón = 0,624mg Ácido ascórbico.

Papa = 0,072 mg Ácido ascórbico.

El ácido acético meta- fosfórico funciona como inhibidor con respecto a la

El ácido ascórbico reduce al 2,6diclorofenilindofenil que es un indicador Redox

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