Benemérita Universidad Autónoma de Puebla Alumnos:

Facultad de Ciencias Químicas Lizeth Arisaith Cruz García

Licenciatura en Químico Farmacobiólogo Osvaldo Padilla Ramírez
Laboratorio de Bioquímica I Janet Ramírez Reyes

Laboratorio de Bioquímica I

Introducción: Resultados:
Las caseínas de la leche y de las proteínas del suero son los dos grandes grupos de proteínas de la leche. Se Gracias al aplicar un aumento de la temperatura y con ayuda del acido acetico (figura 1) logramos la
encuentran en forma de suspensión coloidal y existen grandes diferencias entre sus estructuras y propiedades separacion de la caseina de la leche quedando un precipitado y un sobrenadante. (figura 2).
Fichas de seguridad
químicas. Cuando se agrego un ml de sobrenadante y un ml de sulfato de amonio en un tubo de ensaye se formó un
Existen dos sistemas de estabilidad de las proteínas de la leche: en uno de estos sistemas las proteínas se encuentran Alcohol Etílico
IDENTIFICACION
Rótulo NFPA EFECTOS PARA LA SALUD
Inhalación: Altas concentraciones del vapor pueden causar pequeño precipitado debido a que el sulfato de amonio es utilizado para la precipitacion salina de las
somnolencia, tos, irritación de los ojos y el tracto respiratorio,
en forma coloidal debido a una combinación de los mecanismos de carga eléctrica e hidratación. Sinónimos: Etanol, Alcohol anhidro, Metil carbinol, Alcohol
Desnaturalizado.
Fórmula: CH3CH2OH
dolor de cabeza y si ́ntomas similares a la ingestión.
Ingestión: Sensación de quemadura. Actúa al principio como
proteinas. (figura 3)
Estas proteínas tienden a precipitar en presencia de iones divalentes como el calcio y son insolubles en su punto Composición: Etanol: 95.00°alcoholico
Usos: Disolvente para resinas, grasa, aceites, ácidos grasos,
estimulante seguido de depresión, dolor de cabeza, visión
borrosa, somnolencia e inconsciencia. Al someter a baño maria otro tubo de ensaye con un ml de sobenadante tambien se formó un precipitado
hidrocarburos, hidróxidos alcalinos.
isoeléctrico, ejemplo: caseína. pero tardo para que esto sucediera. (figura 4)
PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS ALMACENAMIENTO Y MANIPULACION Manipulación:
En el segundo sistema, las proteínas están en suspensión coloidal estabilizadas por un mecanismo de hidratación. Apariencia: Li ́quido incoloro volátil de olor caracteri ́stico y agradable.
Punto de Ebullición (oC): 78 - 79
Almacenamiento: Lugares ventilados,
frescos y secos. Lejos de fuentes de calor e
Usar siempre protección personal asi ́ sea corta la exposición o la
actividad que realice con el producto. Mantener estrictas normas
Mediante la purificaciòn que se le practicó a la caseina con los solventes se logró obtener la proteina en su
Punto de Fusión (oC): -114 ignición. Separado de materiales de higiene, no fumar, ni comer en el sitio de trabajo.
Estas proteínas son más lábiles a la desnaturalización por calor y no son tan sensibles a los iones divalentes. Se Solubilidad: Soluble en agua, alcohol meti ́lico, éter, cloroformo, acetona
y benceno.
incompatibles. Rotular los recipientes
adecuadamente. Depositar en
estado más puro.
encuentran solubilizadas en su punto isoeléctrico, ejemplo: las proteínas del suero. contenedores herméticamente cerrados.

El método clásico para el fraccionamiento de las proteínas de la leche consiste en una precipitación de las caseínas Sulfato de Amonio Rótulo NFPA IDENTIFICACIÓ N DE LOS PELIGROS
Inhalación: Ardor de garganta, tos. Causa irritación en las vi ́as
en su punto isoeléctrico (pH 4.6) quedando como sobrenadante las proteínas del suero que pueden separarse por IDENTIFICACIÓN
Sinónimos: sulfato diamónico , sal diamónico.
Fórmula: (NH4)2SO4
respiratorias
Ingestión: Ardor de garganta, dolor estomacal nausea.Causa

medio de una precipitación selectiva con sales de sulfato de amonio (precipitación por salado). Masa molecular: 132,14 g/mol
Usos: Fertilizante
vómito y diarrea.

PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS ALMACENAMIENTO Y MANIPULACIÓN Manipulación

Estado fi ́sico a 20°: Sólido No puede ser almacenado para recuperarlo No está clasificado como mercanci ́a peligrosa
Color: Gránulos finos, blancos o cristales. o reciclarlo, debe ser manejado en un sitio
Olor: Ligero olor a amoni ́aco. apropiado y aprobado por las autoridades
Punto de fusión [°C]: 235-280 ° C ambientales.
pH: 5,5 (0,1 M de solución acuosa)
Densidad: 1,769g/cm3 (20°C) figura 1 figura 2 figura 3 figura 4 figura 5
Fundamento: Éter Etilico IDENTIFICACION DE LOS PELIGROS
RÓTULO NFPA Inhalación: Dolor de cabeza, somnolencia, vómitos,
La casei ́na es una protei ́na conjugada de la leche del tipo fosfoprotei ́na que se separa de la leche por acidificación IDENTIFICACIÓN
Nombre qui ́mico: Eter etilico
Sinónimos: Dietileter
narcosis, pérdida del conocimiento.
Puede afectar al SNC con algunos trastornos tales como:
Discusión:
somnolencia, perdida de reflejos
y forma una masa blanca. Fórmula: C 4 H 10 O
Ingestión: Vértigo, somnolencia, vómitos. Las proteínas presentan cambios en su estructura al someterse a diferentes estímulos externos tales como
La propiedad caracteri ́stica de la casei ́na es su baja solubilidad a pH 4,6. El pH de la leche es 6,6 aproximadamente, PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS
Aspecto y color: Li ́quido incoloro, higroscópico muy volátil Olor: olor
ALMACENAMIENTO Y MANIPULACION
Condiciones de manipuleo: Sistema cerrado,
Condiciones de almacenamiento: A prueba de incendio.
Separado de oxidantes fuertes. Mantener en lugar fresco,
el tratamiento térmico, en este caso al someter a baño maría la leche a una temperatura de 38 ºC; los
estando a ese pH la casei ́na cargada negativamente y solubilizada como sal cálcica. Si se añade ácido a la leche, la caracteri ́stico
Presión de vapor: 58.6
ventilación, equipo eléctrico y de alumbrado a
prueba de explosiones. Evitar la generación de
seco, y en la oscuridad. Almacenar solamente si está
estabilizado. cambios en el pH por adición de ácidos o bases que de manera similar esto se logró al adicionar ácido
Densidad relativa (agua=1): 0.7 cargas electrostáticas (por ejemplo, mediante
carga negativa de la superficie de la micela se neutraliza ( los grupos fosfato se protonan) y la protei ́na neutra Densidad relativa de vapor (aire=1): 1.9 Solubilidad en agua: 6.9
Punto de ebullición:35oc
conexión a tierra). NO utilizar aire comprimido
para llenar, vaciar o manipular. Utili ́cense
acético a la leche y cuando el pH de la leche disminuye hasta 4.6 se induce una coagulación de las caseínas.
Punto de fusión: -116oc herramientas manuales no generadoras de
precipita. Peso molecular: 74.1 chispas.

Las protei ́nas que aparecerán en el sobrenadante cuando precipitemos la casei ́na en medio ácido son protei ́nas RÓTULO NFPA IDENTIFICACION DE LOS PELIGROS
Conclusión:
HIDRÓXIDO DE SODIO
globulares, hidrofilicas y fácilmente solubles en agua asi ́ como susceptibles de desnaturalización por calor. IDENTIFICACION
Sinónimos: soda cáustica
Inhalación: Irritante Severo: Efectos de la inhalación de polvo o niebla varían desde una irritación leve
de daño grave del tracto respiratorio superior, dependiendo de la severidad de la exposición. Se aprendió que es posible la purificación parcial y el aislamiento de la caseína de la leche, mediante
Fórmula: NaOH Corrosivo! La ingestión puede causar quemaduras severas de la boca, garganta y estómago.
Usos: Neutralización de ácidos, limpiadores
comerciales y domésticos, pelado de frutas y
reacciones simples que dan lugar a la observación de sus características y propiedades, utilizando la poca
verduras en la industria de los alimentos
PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS ALMACENAMIENTO Manipulación: No ingerir. No respirar los gases / humos / vapores / aerosoles. No añadir agua a este
solubilidad que esta proteína tiene cuando se le lleva hasta su punto isoeléctrico, no obstante, el
Estado fi ́sico a 20°C: Sólido Y MANIPULACION producto. Evite el contacto con la piel y los ojos. Mantener alejado de sustancias incompatibles tales
Color: Incoloro, transparente.
Olor: Inodoro
Almacenamiento:
Mantenga el
como agentes oxidantes, agentes reductores, metales, ácidos, álcalis, humedad rendimiento puede ser variado si se considera que los métodos de purificación pueden ser variados así
Punto de fusión [°C]: 323 °C
Punto de ebullición [°C]: 1390 °C
recipiente
cerrado. Mantenga
bien
como comprobar que en la caseína se encuentran la mayoría de las proteínas de la leche y se pueden
Densidad: 2,1 g/cm3 el recipiente en lugar
Objetivos: pH: 13 a 14 (0,5% disoln.)
Solubilidad en agua: 111 g/100 ml (20 °C)
fresco
ventilado
y bien
desnaturalizar por diferentes métodos como la temperatura y el efecto sobre estas al agregar sales neutras
1. Aislar la proteína caseína de la leche. Peso Molecular: 39,99713 g/mol
en las proteínas también concluimos que puede obtener gran variedad de subproductos de la leche que
2. Comprobar que el efecto de las sales neutras en las proteínas (precipitación por salado). tiene su uso en gran variedad de la industria y la química
3. Comprobar el efecto de la temperatura sobre las proteínas. Procedimiento
Cuestionario:
1. ¿Cómo es la solubilidad de las proteínas en su pI?
Material: Reactivos: 7. Filtrar y exprimir el precipitado
en el papel filtro (presionar
8. Guardar la caseina siguiendo La solubilidad de una proteína es mínima en su punto isoeléctrico, ya que su carga neta es cero y desaparece cualquier
las indicaciones del profesor.
*1 matraz Erlenmeyer de 250ml *1 pipeta *Ácido acético 2N *Agua 1. Calentar en un matraz 200 ml de
leche a 38 ºC, sin retirar del baño.
ligeramente contras las paredes
del embudo con ayuda de un fuerza de repulsión electrostática que pudiera dificultar la formación de agregado. También, La solubilidad se incrementa
agitador)
*1 agitador de vidrio *1 embudo destilada cuando el pH se aleja del pI y viceversa.
*Papel filtro *2 vasos de precipitados *Éter etílico *NaOH 2. ¿Cuál es la explicación física de la precipitación por salado?
*3 tubos de ensaye *Baño maria a 38º C *Alcohol etílico La adición de las sales elimina el agua de la proteína hidratada y rompen los puentes de hidrógeno o las interacciones
2. Agregar gota a gota y con
6. Agregar 10 ml de eter, agitar y electrostáticas, dejando las regiones hidrofóbicas en libertad de combinarse intermolecularmente, aquellas proteínas que
*Solución saturada de sulfato de amonio agitación ácido acético 2N hasta
dejar reposar 5 min.
obtener un máximo de 9. Del sobrenandante obtenido presentan mayor número de regiones hidrofóbicas en su superficie, forman agregados y precipitan más rápidamente que
Bibliografía: precipitado coposo (aprox. 25ml). 5. Decantar y desechar el
sobrenadante.
en el paso 3 colocar un ml en el
tubo de ensaye y agregar un ml aquellas que presentan pocas regiones.
* Campbell, M. K., Campbell, M. K., Farrell, S. O., Camas Reyes, A., Cortés Gasco, J. H., Bonilla Talavera, J., & ... de solucion saturada de sulfato
de amonio y observar. 3. ¿Cómo afecta la temperatura a las proteínas?
Rodríguez Muñoz, G. Bioquímica. México: Cengage Learning, 2010. Cuando la temperatura es elevada aumenta la energía cinética de las moléculas con lo que se desorganiza la envoltura
* Voet, D., & Voet, J. G. (2006). Bioquímica. Buenos Aires: Media Panamericana, 2006. 3. Dejar reporsar 15 min y filtrar
(se obtendrá el precipitado y un 4.Transferir a un vaso de
acuosa de las proteínas, y se desnaturalizan. Así mismo, un aumento de la temperatura destruye las interacciones débiles
* Rendina, G. Técnicas de Bioquímica aplicada. México: Nueva Editorial Interamericana, S. A. 1974. sobrenadante, guardar el
sobrenadante para pasos
precipitado, agregar 20ml de y desorganiza la estructura de la proteína, de forma que el interior hidrofóbico interacciona con el medio acuoso y se
alcochol etilico, agitar y dejar
posteriores y trabajar con el
precipitado).
reposar diez minutos. 10. En un tubo de ensaye colocar
un ml de sobrenadante obtenido
produce la agregación y precipitación de la proteína desnaturalizada.
en el paso 3 y calentar a baño
maria a ebullición y observar.