PROTOCOLO DE LABORATORIO Fianl

PROTOCOLO DE LABORATORIO
CURSO MICROBIOLOGÍA
Código 151006
Patricia Manrique Bustos
Cédula: 1042212016
Claudia Patricia Jiménez Forero

Directora de curso
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Barrancabermeja 17 de noviembre del 2020
1
Contenido
Pág.
Introducción 5
Actividad práctica 1 A. Medios de cultivo, métodos de siembra y
características macroscópicas de cultivos bacterianos 7
Actividad práctica 1 B. Siembra de Microbiota normal. 18
Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos
bacterianos: Coloración de Gram 22
Actividad práctica 3. Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos:
difusión en disco. 26
Actividad práctica 4. Caracterización macroscópica y microscópica de
hongos. 30
Actividad práctica 5. Parásitos de importancia en salud. 35
Bibliografía 40
2
Lista de tablas
Pág.
Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas condiciones

del medio ambiente 7
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios sólidos10
Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en
cultivos sólidos. 11
3
Lista de figuras
Pág.
Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo. 9

Figura 2 Árbol filogenético de la vida 18
Figura 3 Características microscópicas observables en la coloración de
Gram. 22
Figura 4 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos
filamentosos, levaduriformes y bacterias 30
4
Introducción
La Microbiología es la ciencia que estudia aquellos organismos vivos

cuyo tamaño se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo
humano, desde luego, ciencia precedida por la invención del
microscopio, con sus principios estructurales tal como ahora se le
conocen, alrededor del año 1620. Un siglo después, la experimentación
en animales, el descubrimiento de los cultivos bacterianos, la relación
entre patógeno y patología, el perfeccionamiento de técnicas
microbiológicas, entre otros, abrió los canales para constituir el cuerpo
de conocimientos de esta ciencia.
Fue así como resultado de la observación y análisis, aquel otro reino

diminuto y antes inexistente por descubrir, trajo consigo nuevas ciencias
como la inmunología y la virología, afianzando la relación estrecha con
la Medicina. Hecho que no quedó allí puesto que estudios posteriores
sobre microbiota del suelo han resaltado la gran diversidad fisiológica de
los microorganismos y su ubicuidad, generando la necesidad de que
otras ciencias biológicas entraran a apoyar el estudio de
microorganismos, tales como la genética y la bioquímica, dando así paso
a la biología celular y molecular.
Por las atribuciones de esta ciencia, el amplio campo de acción y el
propósito de la comprensión cabal por parte del estudiante,
especialmente desde el punto de vista práctico, de lo que se debiese
hacer y cómo se debiese hacer, el curso de Microbiología de la Escuela
de Ciencias de la salud de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia
UNAD, está diseñado para que los estudiantes, a través de actividades
prácticas, lleven a cabo procesos para comprender, aplicar y desarrollar
nuevo conocimiento en el estudio de la Microbiología.
El objetivo propuesto aquí se divide básicamente en cuatro partes, una
que involucra aplicar conceptos en la resolución de problemas por parte
del estudiante, mediante el análisis de la información; otra que
desarrolla un pensamiento crítico y de análisis a través de la discusión;
una más, explicando los conceptos de microbiología con el lenguaje
técnico apropiado en los ejercicios académicos y, otra que contiene los
elementos generales para desarrollar habilidades en el estudiante, las
5
cuales les permitan la identificación de posible causalidad, factores de
riesgo y medidas preventivas en los eventos infecciosos en salud.
Por último, es bueno resaltar que esta guía no tiene la pretensión de ser
un profundo estudio teórico, ni una guía exhaustiva para el desarrollo de
prácticas, sino que principalmente se centra en interpretar lo mejor
posible a términos prácticos algunos aspectos propios de la
Microbiología, de modo que se facilite su manejo por parte de los
interesados.
6
Actividad práctica 1 A. Medios de cultivo, métodos de siembra y
características macroscópicas de cultivos bacterianos
Introducción
Los medios de cultivo son una preparación compuesta de biomoléculas

conformadas por macronutrientes tales como carbono, oxígeno,
hidrogeno, nitrógeno, fósforo y azufre, y de micronutrientes como el
magnesio, cobalto, entre otros; cuyo fin es lograr el crecimiento,
transporte o mantenimiento de microorganismos. Su clasificación se
puede observar en la Figura 1.
Sin embargo, los medios de cultivo no son los únicos necesarios para
generar multiplicación y desarrollo de microorganismos, se hacen
necesarias condiciones físicas tales como el pH, temperatura, luz,
presión, entre otras, su conocimiento permite el diseño de métodos para
control o destrucción de poblaciones de estos organismos. Según sean
estas condiciones, se desarrollarán algunos microorganismos y otros no,
por ello se han establecido clasificaciones para cada condición (Tabla 1).
Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas

condiciones del medio ambiente
Clasificación de los
Condición Definición Significado
microorganismos
Crecen entre pH 0
Indica la concentración Acidófilas
y 5.0 pH
de H+ en una solución e
Crecen entre pH
pH interfiere en el Neutrófilas
5.0 y 8.0
funcionamiento de
Crecen entre pH
biomoléculas Alcalófilas
8.5 a 11.5
Pueden crecer a
Magnitud que mide el 0°C, pero su
Psicrófilas
calor de un objeto e temperatura
Temperatura
influye en la velocidad optima es 15°C
de las reacciones Se desarrollan 25-
Mesófilas
químicas en los 40°C
microorganismos Se desarrollan 45-
Termófilas
60°C
Concentración de El oxígeno es un gas Se desarrollan en
Aerobias
Oxígeno incoloro e inodoro que 20% de O2
interviene en procesos Anaerobias facultativas Se desarrollan en
7
presencia o
ausencia de O2
de crecimiento Se desarrollan en
Anaerobias
bacteriano <2% de O2
Se expresa como Viven en medios
actividad de agua (aw) hipertónicos y se
Disponibilidad de
que es una medida del Osmófilos subdividen en
agua
agua disponible para el halófilos y
microorganismo sacarófilos.
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)
Conjunto a la creación de medios de cultivo y al descubrimiento de las

condiciones de crecimiento de los microorganismos, se han creado
métodos de siembra para cultivar y separar las diversas poblaciones de
microorganismos provenientes de las muestras a estudiar. La acción de
sembrar (o inocular) implica poner una porción de la muestra (ej. Agua,
alimentos, sangre, etc) en un medio de cultivo e incubarlo en
condiciones adecuadas. Según sea el medio de cultivo, se pueden
emplear instrumentos tales como: asas bacteriológicas, hisopos, pipeta
o asa de Drigalsky, teniendo en cuenta que todos ellos deben estar
estériles a la hora de hacer uso de ellos.
8
Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo.
Fuente: Rojas (2011). Conceptos y práctica de Microbiología general.

Manual.
En un medio líquido, el método de cultivo es relativamente sencillo,

consiste en agregar parte de la muestra al recipiente en dónde se
encuentra el medio; esa muestra puede agregarse con una pipeta o un
asa estéril. Mientras que, para los medios de cultivo sólidos, se han
generado diversos métodos (Tabla 2).
9
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios
sólidos
Método Proceso
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar
enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma
Siembra en picadura o
vertical y en el centro del tubo con medio de
punción
cultivo.
4. Saque el asa rápidamente y evite tocar las
paredes del tubo.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar
enfriar.
3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma
Siembra en estría vertical, en el borde inferior del tubo con medio
de cultivo inclinado.
4. Sacar, lentamente el asa, e inmediatamente
realizar estrías (líneas en zigzag) en la
superficie del medio, hasta su borde superior.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
enfriar.
3. Suspender la muestra en un extremo de la caja
con medio de cultivo, realizando estrías –no
superpuestas- sobre una tercera parte de la
Siembra por caja.
agotamiento 4. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
enfriar.
5. Realizar estrías en dirección perpendicular a las
estrías antes hechas, comenzando en la última
estría.
6. Repetir el paso 4 y 5.
7. Esterilizar asa.
Siembra en cuadricula 1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
enfriar.
2. Poner volumen de muestra en caja con medio
de cultivo, usando pipeta automática.
3. Distribuir la muestra con el asa, en forma de
línea recta por el centro del medio de cultivo.
4. Hacer estrías de lado a lado del medio de
10
cultivo y en sentido contrario a la línea recta
antes hecha.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías de lado a lado del medio y en sentido
contrario a las estrías hechas antes.
6. Esterilizar asa.
1. Destapar el hisopo estéril.
2. Introducir el hisopo en la muestra.
3. Sacar el hisopo y escurrirlo en las paredes del
recipiente dónde está la muestra.
4. Hacer estrías estrechas de lado a lado de la
caja con medio de cultivo, desde el borde
Siembra con hisopo
superior hasta el borde inferior.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías estrechas de lado a lado del medio y en
sentido contrario a las estrías hechas antes.
6. Repetir el paso 5, tres veces más.
7. Arrojar el hisopo en Guardián de desechos.
Hecho esto, posterior a la siembra de microorganismos, se espera

obtener crecimiento de microorganismos, el cual tendrá unas
características macroscópicas y microscópicas.
Las características macroscópicas de un microorganismo son todos

aquellos detalles observables a simple vista en los medios de cultivo
sembrados; en medios de cultivo líquidos se puede observar
enturbiamiento u opacidad (ligera, media o nula), precipitados o
sedimentos (compacto, polvoriento, granuloso, viscoso) o formación de
película. En los medios sólidos se pueden observar diversas
características de la morfología de las colonias, entre ellas la hemólisis,
la producción de pigmentos y las que se exponen en la tabla 3.
Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en

cultivos sólidos.
Características
11
Tamaño Grande >1mm
Mediano 1mm
Pequeño <1mm
Forma Puntiforme
Circular
Filamentosa
Irregular
Rizoide
Lanceolada
Borde Continuo
Ondulado
Lobulado
Espinoso, dentado o
lacerado
Filamentoso
Elevación Plana o aplastada
Convexa
12
Mamelonada
Pulvinada
Umbilicada
Superficie Lisa
Rugosa
Consistencia Blanda
Dura
Mucoide
Aspecto Brillante
Opaco
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de
Rojas 2011.
Objetivos
● Clasificar los diferentes tipos de medios de cultivo que se manejan en

el laboratorio de microbiología.
● Practicar los métodos de siembra de microorganismos en diferentes
medios de cultivo.
Materiales
Materiales de la práctica de laboratorio simulado
● Acceso a internet
● Protocolo de laboratorio
● Gelatina de cualquier color (simulará el medio de cultivo),
palillos largos (simulará el asa bacteriológica), recipientes
redondos (simulará cajas de Petri) y un vaso angosto o tubo de
vidrio (simulará tubo de cultivo inclinado).
● Ver vídeo introductorio en: https://www.youtube.com/watch?
v=30htD86TWzE
Procedimiento-Ejercicio trazo de siembra
1. Preparación de un medio de cultivo simulado (en gelatina): Prepare

en casa gelatina de cualquier color, póngala en 3 moldes redondos
13
del tamaño de su mano, preferiblemente transparentes y de una
profundidad aproximada de 3 a 4 centímetros. Ponga gelatina en un
tubo o vaso con tapa, déjelo en la nevera con una inclinación
aproximada de 45° de tal manera que la gelatina coagule haciendo
una superficie inclinada respecto al tubo.
2. En uno de sus cultivos redondos, pase uno de los palillos haciendo
una siembra simulada por método de agotamiento. Recuerde no
romper la gelatina sólo evidenciar el trazo.
3. En otro de sus medios de cultivo redondo, pase uno de los palillos
haciendo una siembra simulada por método de estría.
4. El que le queda haga el mismo ejercicio y siembre en rejilla.
5. En el medio de cultivo simulado con inclinación, siembre por estría.
6. Tome fotografías de la ejecución de cada uno de los puntos
anteriores y anéxalas como evidencia en la pregunta 2 del
cuestionario.
Cuestionario y resultados
1. Complete la siguiente tabla con datos consultados en internet:
Tabla 4.
Medios de cultivo
Nombre del medio de Componentes del agar Utilidad (para qué

cultivo sirve, que grupo de
bacterias ayuda a
identificar o crecen
en él)
Agar MacConkey Peptona pancreática de Agar Macconkey se
gelatina 17,0 g utiliza para el
Triptona 1,5 g aislamiento selectivo
Peptona de carne 1,5 g y la identificación de
Lactosa 10,0 g Enterobacteriaceae
Sales biliares 1,5 g de las heces, la
Cloruro sódico 5,0 g orina, aguas
Rojo neutro 30,0 mg residuales y
Cristal violeta 1,0 mg alimentos. También
Agar agar 13,5 g es un medio selectivo
y diferencial para el
aislamiento de
bacterias Gram-
14
negativas entéricas.
Agar Nutritivo Está compuesto Principalmente sirve

principalmente de para el subcultivo de
extracto de carne o especies,
extracto de levadura, mantenimiento de
peptonas o digesto cepas, contaje de
pancreático de colonias, como base
gelatina, agar-agar, para preparar agar
cloruro de sodio y agua sangre, entre otras.
destilada. Así mismo, por su
color beige claro
pueden distinguirse
de manera
excepcional la
producción de
pigmentos generados
por algunas cepas
bacterianas, tales
como el pigmento
verdoso
de Pseudomonas
aeruginosa, el
pigmento rojo ladrillo
producido
por Serratia
marcescens a
temperatura
ambiente, el
pigmento amarillo
dorado
de Staphylococcus
aureus, entre otros.
Agar SIM Está compuesto por especialmente
tripteína, peptona, diseñado para ayudar
sulfato de hierro, a la identificación de
sulfato de amonio, algunas bacterias,
tiosulfato de sodio y principalmente de la
agar. familia
Enterobacteriaceae.
15
Este medio permite
la ejecución de tres
importantes pruebas:
la producción de
sulfuro de hidrógeno
(H2S), la formación
de indol y la
motilidad, de allí
proviene el acrónimo
SIM. Por su gran
utilidad no puede
faltar en un
laboratorio de
bacteriología.
El medio SIM permite
distinguir
ciertas propiedades
específicas que
caracterizan a
algunas bacterias en
relación con otras.
Por
ejemplo, Escherichia
coli se distingue por
ser H2S (-), Indol (+)
y motilidad (+),
mientras que Proteus
mirabilis es H2S (+),
indol (-), motilidad
(+).
Microkit: medios de cultivo. (2015). Tomado de:

https://www.medioscultivo.com/mac-conkey-agar/
Agar Macconkey. (2019). Tomado de:

file:///C:/Users/admin/Downloads/0900_es_1.pdf
Gil, M. (2013). Agar nutritivo: fundamento, preparación y usos. Tomado

de: https://www.lifeder.com/agar-nutriente/
16
Gil, M. (s. f). medio SIM: fundametos, preparación y usos. Toamdo de:
https://www.lifeder.com/medio-sim/#:~:text=El%20medio%20SIM
%20es%20un,tiosulfato%20de%20sodio%20y%20agar.
2. Complete la siguiente tabla con los medios de cultivo empleados y

el esquema del tipo de siembra que realizó.
Tabla 4.
Procedimiento de siembra práctica.
Medio de cultivo Tipo de Siembra Esquema o

(preparado en fotografía de la
gelatina) siembra que
realizó
Estría
Agotamiento
Rejilla
17
Estría
3. Averigüe 3 microorganismos diferentes que puedan cultivarse en

al menos 2 de los medios de cultivos tratados en la pregunta 1 e
indique: En qué condiciones de temperatura y tiempo se realiza la
incubación.
Tabla 5.
Microorganismos cultivados en agar nutritivo, Macconkey y sim.
Medio Microorganism Condiciones Tiempo se

o de realiza la
temperatura incubación
Agar nutritivo Staphylococcus entre 34- A las 18-24
aureus 37ºC[ CITATIO horas se
N Tri15 \l observan
9226 ]. colonias de 1-3
mm[ CITATION
Tri15 \l 9226 ].
Agar Klebsiella Incubar las Examinar las
Macconkey pneumoniae placas a 35 ± 2 placas después
°C en una de 18 – 24
atmósfera h[ CITATION
aerobia[ CITATI Dic14 \l 9226 ].
ON Dic14 \l
9226 ].
Agar sim Escherichia coli Incubar los 18 – 24 h en
tubos a 35 ± 2 una atmosfera
°C[CITATION aerobia[ CITATI
BBL \l 9226 ]. ON BBL \l 9226
].
18
4. Describa las características macroscópicas de las colonias
resultantes de la siembra en los medios de cultivo usados en el
siguiente video de la Universidad de Salamanca.
https://www.youtube.com/watch?v=6hfS1XbPfQk
Recuerde: 1. Ver el video, indicar la cepa sembrada en cada uno de los

Agares expuestos. 2. Describir las características de la cepa o
microorganismo en el cuadro respectivo y tomar la fotografía del vídeo o
dibujar lo que ve. 3. Si desea ampliar su observación puede buscar en
los siguientes Atlas microbiológicos la cepa sembrada en el agar
correspondiente.
Atlas disponibles para ampliar visualización:
Atlas de Socalemi: http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-

microbiologia (en este atlas puede revisar los microorganismos por su
clasificación)
Atlas de microbiología Online:

https://www.microbiologyinpictures.com/atlas%20de
%20bacteriologia.html (en este atlas debe hacer click sobre las fotos del
encabezado de la página para ver todos los recursos, hacer la búsqueda
y ampliar la visualización).
Tabla 6.
Agar MacConkey sembrado con Escherichia coli.
Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada: Escherichia

coli
Características Descripción de la Dibujo o fotografía
macroscópicas cepa tomada del vídeo
Tamaño Grande
19
Forma Circular
Superficie lisa
Consistencia Blanda
Aspecto Brillante
Color Magenta oscuro
Imágenes tomadas de Atlas de microbiología Online:

https://www.microbiologyinpictures.com/atlas%20de%20bacteriologia.html .
Tabla 7.
Agar Nutritivo sembrado con Escherichia coli.
Medio de cultivo Agar nutritivo
20
cepa sembrada: Escherichia coli
Características Descripción de la cepa Dibujo o fotografía tomada del
macroscópicas vídeo
Tamaño Mediano
Forma Puntiforme
Superficie lisa
Consistencia Blanda, mucoide
Aspecto Brillante
Color beige
Tabla 8.
Agar EMB sembrado con Escherichia coli.
21
Medio de cultivo Agar EMB cepa sembrada: Escherichia coli
Características Descripción de la cepa Dibujo o fotografía tomada del
macroscópicas vídeo
Tamaño Grande
Forma Circular
Superficie Lisa
Consistencia Blanda
22
Aspecto seco
Color Rojo Oscuro, halo verdoso

5. Revise el siguiente simulador de siembra de cultivos

https://conteni2.educarex.es/mats/14380/contenido/ (Recuerde
activar adobe flash).
Figura 2. Simulador de cultivos.
Observe las variables necesarias para producir el crecimiento de un

microorganismo en un medo de cultivo y cómo ocurre el crecimiento,
23
presente la evaluación del simulador y tome pantallazo de la calificación
obtenida.
Figura 3. Simulador de cultivos, respuestas.
Actividad práctica 1 B. Siembra de Microbiota normal.
Introducción
El árbol filogenético de la vida consta de tres dominios: Bacteria,

Archaea y Eukarya, siendo un dominio el rango taxonómico más alto de
los organismos. Muchos miembros de los dos primeros dominios
mencionados viven una vida simbiótica dentro de nosotros.
24
Figura 4 Árbol filogenético de la vida
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de

Woese, 1996.
El cuerpo humano aloja comunidades microbianas complejas cuya

población supera a nuestras propias células en al menos un factor de
10. Con el fin de caracterizar la ecología de las comunidades
microbianas asociadas con el hombre, los Institutos Nacionales de Salud
lanzaron en 2007 el Proyecto Microbioma Humano y en el 2012 se
publicaron los siguientes resultados: 4.788 muestras analizadas de 33
hábitats, tanto femeninos como masculinos, que representaban cinco
áreas principales del cuerpo (cavidad oral y orofaringe, piel, fosas
nasales, tracto gastrointestinal y vagina) de 242 adultos sanos. Las
comunidades encontradas en cada uno de los hábitats del cuerpo
poseían una fuerte especialización en su sitio, tanto dentro de este como
entre individuos. Así mismo, se observó que, dentro de los hábitats, la
variabilidad interpersonal es alta, mientras que los individuos presentan
una variabilidad temporal mínima.
Los análisis de la diversidad taxonómica asociada con la microbiota

humana -colección de microorganismos que están presentes en una
comunidad de un hábitat corporal definido- se han convertido en tema
de gran importancia, ya que estudiar los taxones comúnmente
compartidos, en comparación con los menos prevalentes, permite
25
establecer un elemento de base para comparar personas sanas o
enfermas.
La microbiología médica moderna se centró en microorganismos

patógenos, considerando a la microbiota normal como una población de
microbios vasta y desconocida. Sin embargo, esta visión ha ido
cambiando, el estudio de esta ha emergido como un importante factor
en la fisiología y la enfermedad en humanos.
Las relaciones entre los cerca de 100 trillones de simbiontes microbianos

y el cuerpo humano nos han facilitado la extracción de energía de los
alimentos, proporcionado factores de crecimiento, promovido la
diferenciación y función de la mucosa, estimulado el sistema inmune y
proporcionado resistencia a la colonización por patógenos. Si la
microbiota afecta la fisiología humana, los cambios de su composición
pueden alterar la homeostasia del huésped y, por tanto, incrementar el
riesgo a enfermar. De hecho, en enfermedades como el asma, la
obesidad, la vaginosis bacteriana y la enfermedad inflamatoria intestinal
se han encontrado comunidades microbianas alteradas. Lo anterior,
también sugiere que se si se conoce la composición de la microbiota
normal, se pueden generar intervenciones para su restablecimiento y,
por lo tanto, se puede superar la situación de enfermedad.
Objetivo
● Evidenciar la diversidad de microorganismos existentes en las

diferentes zonas del cuerpo humano en estado de salud.
Materiales
Materiales de la práctica de laboratorio mediado
● Ver vídeo de microbiota humana de la Universidad de Sevilla
en: https://www.youtube.com/watch?v=TVVfAEdpj7I
26
1. Complete ¿qué géneros de microorganismos pueden encontrarse en

las siguientes zonas anatómicas?
Tabla 9.
Géneros de microorganismos encontrados en diferentes partes del
cuerpo.
Zona Microorganismos Morfología y afinidad
tintorial
Piel Staphylococcus spp. Coco-Gram positivo y
Brevibacterium spp., bacilos Gram positivos
Dermatobacter spp.,
Propionibacterium spp,
Corynebacterium xerosis
y Corynebacterium
minutissimum[ CITATION
Ang13 \l 9226 ].
Boca Streptococcus Coco-Gram positivo,
mitis, Streptococcus bacilos Gram positivos y
salivarius, Granulicatella bacilos gram negativos.
adiacens, Neisseria
flavescens, Rothia
mucilaginosa y Prevotella
melaninogenica,
Fusobacterium
nucleatum en la placa
dental;
periodontopatógenos
como Porphyromonas
gingivalis, Tannerella
forsythia, Prevotella
intermedia, Treponema
denticola y Filifactor
alocis[ CITATION
San17 \l 9226 ]
Tracto Pseudomonas, Coco-Gram positivo y
27
respiratorio Streptococcus, Prevotella bacilos gram negativos.
superior y
Haemophilus[ CITATION
Edu17 \l 9226 ]
Tracto Escherichia coli, Lactobacillus bacilos gram negativos.
gastrointestina sp, Bacteroides sp, Clostridia
l sp, Eubacteria
sp y Bifidobacteria
sp[ CITATION Gua03 \l
9226 ].
Tracto genital Lactobacillus crispatus, L. bacilos grampositivos
jensenii y L. gasseri, anaerobios
Corynebacterium, aerotolerantes, bacilos
Gardnerella, grampositivos anaerobios
Staphylococcus facultativos, Bacilos y
(fundamentalmente S. cocos grampositivos
epidermidis), Escherichia, anaerobios estrictos.
Klebsiella, Proteus
Atopobium, Peptococcus,
Peptostreptococcus,
Clostridium,
Bifidobacterium,
Propionibacterium,
Eubacterium[ CITATION
Reb08 \l 9226 ].
2. Reporte en la siguiente tabla, 3 microorganismos diferentes entre

sí, que pertenezcan a nuestra microbiota humana y que haya listado en
la tabla anterior. Explique en qué medio de cultivo los pondría crecer y
porqué.
Tabla 10.
Microorganismos del cuerpo sembrados en agar nutritivo, MacConkey y
Saburoud.
28
Medio de cultivo Nombre del
Microorganismo Porque escoge
este medio de
cultivo
Agar nutritivo Staphylococcus aureus. Es un medio de
enriquecimiento
general para
organismos
aerobios, siendo
Staphylococcus un
organismo de fácil
crecimiento y
cultivo.
Agar MacConkey Proteus sp. Esta fórmula fue
diseñada sabiendo
que las sales biliares
precipitan por acción
de ácidos y
determinados
microorganismos
entéricos
fermentan la
lactosa, mientras
que otros no
presentan dicha
capacidad[ CITATIO
N Dic14 \l 9226 ].
Siendo Proteus sp
un organismo de
estas
características.
Agar Sabouraud Candida sp. El aislamiento de
hongos de muestras
biológicas que no
contienen flora
bacteriana asociada.
Las muestras que
presentan
una flora mixta
(fúngica y
bacteriana)
29
[ CITATION Bio19 \l
9226 ]
3. Registre las referencias citadas, usando norma APA

Bio-Rad. (2019). SABOURAUD AGAR. Obtenido de https://www.bio-
rad.com/webroot/web/pdf/inserts/CDG/es/56524_2019_07_ES.pdf
Dickinson, B. (2008). BBL Sim Medium.
doi:https://legacy.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007503(08)
(0408)_ES.pdf
Dickinson, B. (2014). BD MacConkey II Agar. Obtenido de
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8770
Guarnera, & Malageladaa. (2003). La flora bacteriana del tracto digestivo.
Martína, R., Soberóna, N., Vázqueza, F., & Suáreza, E. (2008). La microbiota
vaginal: composición, papel protector, patología asociada y perspectivas
terapéuticas. El sevier, Vol. 26. Núm. 3.
Monsó, E. (2017). El microbioma respiratorio: más alla del cultivo. Bronconeumonia
Vol. 53. Núm. 9.
Patiño, A., & Morales, A. (2013). Microbiota de la piel: el ecosistema cutáneo. Rev
Asoc Colomb Dermatol.
Sabalete, T. (2015). Fundación io. Obtenido de Staphylococcus aureus:
http://fundacionio.org/img/bacteriology/cont/Staphylococcus_aureus.html
Sjostrom, S. M., Arias, D., & Mazón, G. (2017). Microbiota de los ecosistemas de la
cavidad bucal. Revista Cubana de Estomatología.
Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos

bacterianos: Coloración de Gram
Introducción
Dentro de las técnicas de diagnóstico directo en enfermedades

infecciosas se emplea frecuentemente el examen microscópico, con el
propósito de observar las características de los microorganismos de la
muestra a estudiar. Dicho examen puede hacerse a través de la
realización de una preparación en fresco de la muestra o se puede
30
realizar coloreando la misma. Dentro de las coloraciones más empleadas
en la Microbiología se encuentra la coloración de Gram, la cual fue fruto
de la curiosidad del médico Danés Hans Christian Joachim Gram, en
1884, cuando este examinaba tejido pulmonar obtenido de un paciente
fallecido por neumonía, observando que las bacterias presentes en la
muestra tomaban diferentes coloraciones cuando se les colocaban
distintos colorantes.
Pero ¿para qué hacer coloración? Los microorganismos no solo son

invisibles para el ojo humano, sino que también son semitransparentes;
esto hace que su visualización a través del microscopio sea aún más
difícil. Por lo anterior, la coloración de Gram permite revelar tamaño,
forma, agrupación y afinidad tintorial (Figura 1), características que
hacen posible la clasificación de microorganismos.
Figura 5 Características microscópicas observables en la

coloración de Gram.

Con la coloración de Gram se pueden establecer dos grandes grupos de
bacterias: Gram positivas y Gram negativas. Las bacterias Gram
positivas se observarán moradas, debido a que retienen el complejo
cristal violeta-lugol, a pesar de la exposición a la solución de alcohol-
acetona; mientras que las bacterias Gram negativas se observaran
rojas, debido a que no retienen el complejo cristal violeta-lugol y por lo
tanto dejan el espacio al colorante de contraste: la safranina. Esta
diferencia en la afinidad tintorial está dada por la pared celular
bacteriana, compuesta de peptidoglicano o mureína, que para las
31
bacterias Gram positivas es más gruesa y forma más entrecruzamientos
que en las bacterias Gram negativas.
En conclusión, esta coloración es un gran aporte al estudio de las

enfermedades infecciosas; técnica sencilla, rápida y que aporta
información valiosa a la hora de apoyar un diagnóstico, ya que no sólo
permite identificar el microorganismo sino que esta puede sugerir
antimicrobianos efectivos para tratar el mismo.
Objetivos
● Conocer la coloración de Gram en las muestras a estudiar.

● Clasificar las bacterias por su afinidad tintorial, su morfología y
agrupación.
Materiales
● Hojas blancas y colores, o uso de Word con herramientas para
gráficos con colores.
● Ver vídeo de coloración de Gram de la Universidad de Navarra
en: https://www.youtube.com/watch?v=nqzDzuwOvXo
● Revise la clasificación de las bacterias con tinción de Gram en el
simulador de tinción de bacterias en
http://glencoe.mheducation.com/sites/dl/free/0078802849/383
941/BL_06.html (Recuerde habilitar en su computadora adobe
flash para visualizar el simulador)
1. Describa el paso a paso de la realización de una tinción de Gram, por

medio de un esquema gráfico (o flujograma) que incluya dibujos y
colores acorde con dicho procedimiento. Puede realizarlo a mano o en
Word.
Figura 6. Diagrama de Tinción Gram.
32
2. Siga los pasos del simulador (1. Lea el libro, 2. Arrastre el gotero de
la tinción de Gram a cada lámina. 3. Ponga cada lámina en el
microscopio. 4. Visualice en la pantalla el microorganismo) Con cada
lámina tome pantallazo de lo que visualiza y registre los resultados
de las 3 muestras en la Tabla de datos que debe diligenciar (Data
Table). Para finalizar el ejercicio, tome pantallazo de su tabla de
datos con los resultados de las 3 láminas.
33
Figura 7. Simulador tinción Gram.
Fuente: Fotografía tomada del Simulador Virtual lab. (2020).
Figura 8. Simulador tinción Gram Escherichia coli.
34
Figura 9. Simulador tinción Gram Vibrio cholerae.
35
Figura 10. Simulador tinción Gram Sarcina sp.
36
Tabla 11.
Microorganismos encontrados en el simulador.
3. Explique ¿Por qué las bacterias Gram positivas no se decoloran

cuando se les agrega la solución de alcohol-acetona?
37
Porque tienen una gran capa de peptidoglicano que imposibilita la perdida de
color que queda fijada, gracias al mordiente o Lugol que crea una capa
impermeabilizadora en la membra que evita la salida del colorante, que
queda fijado en el peptidoglicano, a diferencia de las negativas que tienen
poco peptidoglicano en la membrana si se decoloran con el alcohol que les
deshidrata la membrana.
4. Según el video de la coloración de Gram, diligencie la siguiente tabla.
Tabla 12.
Tinción Gram.
Características Gram positivas Gram negativas
microscópicas
Morfología Cocos Bacilos
Afinidad tintorial Cristal violeta Safranina
Agrupación Diplococos Bacilos
Dibujo o fotografía de
las bacterias y el color
que toman con la
tinción de Gram
finalizada
Fuente: [ CITATION Uni11 \l 9226 ].

Simulador de tinción de bacterias (2020) tomado de :
http://glencoe.mheducation.com/sites/dl/free/0078802849/383941/BL_06.html
Universidad de Navarra. (7 de marzo de 2011). Demostración de una

tinción de Gram por un doctorando de la Universidad de
Navarra.mpg. Obtenido de YouTube:
https://www.youtube.com/watch?v=nqzDzuwOvXo
38
Actividad práctica 3. Prueba de susceptibilidad a
antimicrobianos: difusión en disco.
Introducción
Los antimicrobianos son compuestos que hemos empleado para

combatir los microorganismos causantes de infecciones. Entre estos se
encuentran los antiprotozoarios, los antivirales, los antimicóticos o
antifúngicos y los antibacterianos. Pero en este perpetuo combate,
algunos microorganismos han desarrollado adaptaciones que los hacen
resistentes a la acción de estos compuestos, mientras que otros
permanecen siendo sensibles, esta manifestación determinará el efecto
terapéutico de un antimicrobiano.
Las pruebas de susceptibilidad a antivirales, antiprotozoarios y

antihelmintos son complejas, costosas y no suelen realizarse en el
laboratorio clínico; mientras que las pruebas de susceptibilidad a
antibacterianos –denominadas también antibiogramas- son las mejores
estandarizadas y las más empleadas. Por su parte, las pruebas que se
hacen para antimicóticos aún están en estandarización.
A pesar de lo expuesto, las pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos

tienen por objetivo tratar de predecir el efecto terapéutico de un
antimicrobiano y aunque han sido realizadas tanto in-vitro como in-vivo,
en los laboratorios clínicos se lleva a cabo la primera modalidad, bajo
recomendaciones emitidas por entidades internacionales o nacionales.
Sin embargo, estas pruebas in-vitro sólo contemplan el antimicrobiano y
el microorganismo, mas no las variables en ser humano (ej. interacción
con proteínas, variación de concentración con el tiempo, distribución del
antimicrobiano en los tejidos), que es en dónde se da la enfermedad
infecciosa.
39
La susceptibilidad a los antibacterianos esta categorizada en tres
grupos: sensible, intermedio, resistente. Una bacteria es sensible si
esta es inhibida por una concentración de un antimicrobiano que se
asocia a una alta probabilidad de éxito terapéutico. Por otro lado, una
bacteria es resistente si es inhibida por una concentración de un
antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad de fracaso
terapéutico. Mientras que, en la categoría de susceptibilidad intermedia,
se encuentra la bacteria que es inhibida in vitro por una concentración
de un antimicrobiano que se asocia a un efecto terapéutico incierto.
Existen diversos métodos para evaluar la susceptibilidad a

antibacterianos, pero dentro de los más usados se encuentra el método
de Kirby-Bauer o difusión en disco. Este consiste en que se siembra el
microorganismo en estudio, de manera masiva, en un agar
estandarizado y posteriormente se colocan discos de papel impregnados
con una concentración dada de antibacteriano, que corresponde a
niveles que pueden obtenerse si el antimicrobiano se administra
sistémicamente. A medida que los antibacterianos se difunden en el
medio van matando el microorganismo en estudio-si este es sensible-, y
de esta manera se van generando unas zonas sin crecimiento
microbiano, cuyo diámetro se corresponde con la categoría de
susceptibilidad del microorganismo.
Objetivos
● Conocer la prueba de susceptibilidad a antibacterianos por difusión

para microorganismos determinados.
● Interpretar la zona de inhibición para los microorganismos en
estudio.
Materiales
● Ver vídeo Bacterias, Antibióticos y Resistencia de Medlineplus
en: https://www.youtube.com/watch?v=ODgdIVu1xac
40
1. Ingrese a Educaplay, y realice el crucigrama Resistencia a los

antibióticos alojado en: https://es.educaplay.com/recursos-
educativos/4992454-resistencia_a_antibioticos.html de este
crucigrama, tome captura de pantalla cuando lo haya completado.
Figura 11. Crucigrama resistencia antibióticos.
2. Investigue y defina los siguientes conceptos: Betalactámicos,

Resistencia microbiana, Antibióticos, amplio espectro.
 Betalactámicos: Constituyen la familia más numerosa de

antimicrobianos y la más utilizada en la práctica clínica. Se trata
de antibióticos de acción bactericida lenta, con actividad
dependiente del tiempo, que en general tienen buena distribución
y escasa toxicidad (Suárez, C. & Gudiol, F., 2009)
 Resistencia microbiana: La resistencia microbiana se produce
cuando los microorganismos, sean bacterias, virus, hongos o
parásitos, sufren cambios que hacen que los medicamentos
41
utilizados para curar las infecciones causadas por ellos dejen de
ser eficaces (Valdés, S., 2017)
 Antibióticos: Es una sustancia química producida por un ser
vivo o derivado sintético, constituyen un grupo heterogéneo de
sustancias con diferente comportamiento farmacocinético y
farmacodinámico, ejercen una acción específica sobre alguna
estructura o función del microorganismo, tienen elevada potencia
biológica actuando a bajas concentraciones y la toxicidad es
selectiva, con una mínima toxicidad para las células de nuestro
organismo (Seija, V., & Vignoli, R., 2006).
 Amplio espectro: El amplio espectro se refiere a la cantidad de
microorganismos que son sensibles o no a la acción de un
antibiótico. Esto quiere decir que, los antibióticos de amplio
espectro son aquellos que actúan contra una amplia gama de
microorganismos (Maguiña-Vargas, C., 2006).
3. Observe las siguientes fotografías y registre el resultado obtenido y

su interpretación en el siguiente cuadro, recuerde que la numeración
de los sensidiscos es igual en todas las fotografías.
Tabla 13.
Interpretación sensidiscos.
Resultado e Interpretación
Interpretación
Resultado (Sensible o (Describa porque es
Fotografía Resistente a cada sensible o resistente
antibiótico) según lo que puede
observar)
1. Resistente En esta fotografía se
2. Sensible puede observar que la
3. Resistencia bacteria es sensible al
4. Resistencia antibiótico 2 puesto que
su halo de inhibición es
de aproximadamente
16 mm. Por el
contrario, los
antibióticos 1,3 y 4 no
producen una reacción
considerable ante esta
bacteria. Sin embargo,
42
el antibiótico 1 presenta
un pequeño halo que
podría medir más de 11
mm clasificándose, así
como intermedio
(Cantón, R., 2010).
En esta fotografía el
único antibiótico que
produce inhibición en la
bacteria inoculada es el
1, debido a la presencia
de un gran halo que nos
indica la muerte de
estos microorganismos
cercanos al disco. El
antibiótico 2 y 3
muestran una marcada
1. Sensible
resistencia ya que no se
2. Resistente
puede observar un halo
3. Resistente
significativo y aunque el
4. Resistente
4 muestra de igual
4.
manera una marcada
resistencia, se puede
observar la presencia
de un pequeño halo lo
que podría indicar que a
mayores
concentraciones de este
antibiótico quizás esta
bacteria pueda ser
sensible (Arena, F. et
al. 2015).
1. Resistente Se puede observar que
2. Sensible el antibiótico 1, aunque
3. Resistente se clasifica como
4. Resistente resistente aún posee un
pequeño halo de
inhibición mostrándonos
que la bacteria puede
ser sensible a unas
concentraciones más
43
altas de este o a
medida que ha pasado
el tiempo ha ido
desarrollando esta
resistencia y es cada
vez más fuerte. Como
se citó inicialmente un
halo mayor a 16 mm
nos da a entender que
la bacteria es sensible,
así como nos muestra el
antibiótico 2 al
desarrollar un halo con
una medida
considerable.
Finalmente, el
antibiótico 3 y 4
presentan muy poco
efecto sobre la bacteria
inoculada ya que no
existe ningún tipo de
halo (Cantón, R.,
2010).
1. Sensible En esta fotografía se
2. Resistente puede observar como la
3. Sensible bacteria es sensible a
4. Sensible los antibióticos 1,3 y 4
debido a que presentan
un halo de inhibición de
16 mm o más,
dándonos a entender
que este impide el
crecimiento de esta
alrededor de él.
También se puede ver
como el antibiótico 2 no
es tan efectivo frente a
la bacteria, pero
desarrolla un halo que
no es demasiado
grande para que la
44
bacteria sea sensible
pero tampoco
demasiado pequeño
para que esta sea
totalmente resistente,
lo que lo ubicaría en
una posición intermedio
ya que su circunferencia
mide menos de 16 mm
pero más de 11 (Arena,
F. et al. 2015).
Fuente fotografías: F. Benakashani et al., (2016). Biosynthesis of silver nanoparticles
using Capparis spinosa L. leaf extract and their antibacterial activity, Karbala
International. Journal of Modern Science
http://dx.doi.org/10.1016/j.kijoms.2016.08.004
4. Usted tiene que seleccionar 4 antibacterianos para hacer la prueba de

susceptibilidad a antimicrobianos de una cepa de S. aureus (Indique
sus nombres). En la siguiente tabla mencione 3 aspectos que tendría
en cuenta para hacer esta selección, explíquelos brevemente y con
sus palabras.
 Vancomicina
 Gentamicina
 Oxacilina
 Clindamicina
Tabla 14.
Aspectos para tener en cuenta para antimicrobianos.
Aspectos Explicación
Se busca que un antibiótico ataque la pared
celular de una bacteria para destruir
Inhibición de la totalmente su composición, al realizar el
síntesis de la pared antibiograma se podría ver si esa bacteria es
celular susceptible a esta clase de medicamentos.
Debido a esto, se escogió la vancomicina y la
gentamicina para la prueba de susceptibilidad.
Como bien se sabe el S. Aureus ha
Amplio espectro
desarrollado gran resistencia a muchos de los
45
antibióticos comercializados en los últimos
años. Por tal razón, será utilizada la
Clindamicina la cual es un antibiótico
de amplio espectro con actividad contra los
aerobios grampositivos y una extensa gama
de bacterias anaerobias, entre ellas los
patógenos productores de betalactamasa
como lo es el S. Aureus.
Para realizar pruebas se susceptibilidad se
busca utilizar antibióticos específicos para el
tipo de bacteria a tratar, por esto, se escogió
la Oxacilina un antibiótico betalactámico, de
espectro reducido del grupo de las penicilinas,
Especificidad
por lo que se indica en el tratamiento de
infecciones causadas por bacterias Gram
positivas, en particular las especies de
estafilococos que suelen ser resistentes a
otras penicilinas como el S. Aureus.

Arena, F., Viaggi, B., Galli, L., & Rossolini, G. M. (2015). Antibiotic
susceptibility testing: present and future. The Pediatric
infectious disease journal, 34(10), 1128-1130.
Cantón, R. (2010). Lectura interpretada del antibiograma: una
necesidad clínica. Enfermedades Infecciosas y microbiología
clínica, 28(6), 375-385.
Maguiña-Vargas, C., Ugarte-Gil, C. A., & Montiel, M. (2006). Uso
adecuado y racional de los antibióticos. Acta Médica
Peruana, 23(1), 15-20.
Seija, V., & Vignoli, R. (2006). Principales grupos de
antibióticos. Temas de bacteriología y virología médica, 2, 631-
633.
Serra Valdés, Miguel Ángel. (2017). La resistencia microbiana en el
contexto actual y la importancia del conocimiento y aplicación en
la política antimicrobiana. Revista Habanera de Ciencias
Médicas, 16(3), 402-419.
46
Suárez, C., & Gudiol, F. (2009). Antibióticos
betalactámicos. Enfermedades infecciosas y microbiología
clínica, 27(2), 116-129.
47
Actividad práctica 4. Caracterización macroscópica y
microscópica de hongos.
Introducción
Los hongos son organismos conformados por células eucariotas y

agrupados dentro del dominio Eukarya, siendo diferentes de los
protozoos, los animales y las plantas. De estos se han identificado
aproximadamente 200.000 especies, y sólo 100 generan infección en el
humano. Las infecciones causadas por estos hongos se denominan
micosis, es la micología médica quien se encarga de estudiarlas y a los
hongos raíz de la cadena causal.
Estos organismos no hacen fotosíntesis, son heterótrofos, saprofitos y

pueden llegar a ser parásitos. Adicionalmente, habitan diferentes
entornos tales como las mucosas de mamíferos, tierra, superficies
abióticas, entre otros. Poseen una pared celular constituida de
polisacáridos, que en su mayoría son quitina, mananos y α glucanos.
De acuerdo a sus características morfológicas, los hongos pueden ser

macroscópicos (ej. Champiñones) o microscópicos. Los hongos
microscópicos pueden presentar dos estructuras fúngicas básicas: las
Hifas (filamentos) que son filas de células que crecen apicalmente y
cuyo conjunto se denomina micelio; y las levaduras (blastoconidias) que
son estructuras ovaladas o esféricas unicelulares.
Figura 11 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos

filamentosos, levaduriformes y bacterias
48
Fuente: *Mold (Filamentos), Yeast (levadura). Tomado de Wolfe (2014).
De acuerdo a lo anterior, desde una perspectiva clínica, los hongos se

pueden agrupar en filamentosos y levaduriformes. Sin embargo, hay
unas especies de hongos que pueden ser filamentosos en la naturaleza
o en el laboratorio (a menos de 30 °C) y, en cambio, presentarse como
levaduriformes en los tejidos (a 37 °C). Estos son llamados hongos
dimórficos y algunos de ellos son: Candida albicans, Sporothrix schenkii,
Histoplasma capsulatum y Paracoccidioides brasiliensis.
Los cultivos de hongos pueden presentar dentro de sus características

macroscópicas, una apariencia cremosa –propia de los hongos
levaduriformes-; o apariencias: correosa, aterciopelada, algodonosa,
polvorienta y granulosa –propias de hongos filamentosos-.
Objetivo
● Identificar características macroscópicas y microscópicas de los

hongos.
Materiales
● Guantes y tapabocas
● Explorar el Atlas Socalemi, sección de micología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
● Ver vídeo Levaduras y Hongos en:
https://www.youtube.com/watch?v=rT5cFN0fOYY
Procedimiento
1. Deje a la intemperie una fruta o pan por al menos 5 días o busque en

su hogar una fruta, verdura o pan que tenga apariencia de estar
contaminada con hongos. Recuerde al tomarla y manipularla ponerse
guantes y tapabocas con anterioridad.
49
2. Tómele fotos, obsérvela de cerca, describa lo que observa. recuerde
durante la observación no tocarla directamente, no respirar u oler la
fruta, verdura o pan seleccionado, no estornude, no sople o quite el
nada de allí.
Tabla 15.
Observación crecimiento del hongo.
La fruta se Después de un Unos días Finalmente, la

encuentra de tiempo la fruta después el hongo fruta cambia
buen aspecto comienza a comienza a totalmente su
y forma. perder la textura esparcirse por la forma y es
de la cascara, su fruta. La textura invadida
color y a de la fruta sigue totalmente por
desarrollar un cambiando y ya el hongo el cual
hongo de color se torna de un ya presenta un
café en su parte color más oscuro color café claro,
superior. debido a la una textura
invasión del aterciopelado y
hongo que de mal olor.
presenta unas
tonalidades cafés
y blancas.
3. Deseche cuidadosamente los guantes, tapabocas, y elementos

contaminados y posteriormente lávese las manos adecuadamente.
50
1. Paso 2. Paso
3. Paso
Detecte cambio en Utilice todos los
elementos de Deseche lo
apariencia contaminado
bioseguridad
Colores blanco, café Continué con el
o negro Observe y describa
cuestionario
1. ¿Cuáles son los agares más usados para hongos?
Tabla 16.
Agares más usados para hongos.
Nombre del agar Imagen
Agar glucosado de Sabouraud
51
Agar Infusión Cerebro Corazón
Agar papa dextrosa
Agar extracto de malta
52
OGYE
Rosa bengala cloranfenicol
Fuente: Madigan, MT (2008).
2. De acuerdo al cultivo micótico de la fruta verdura o pan complete el

siguiente cuadro.
Tabla 17.
Descripción cultivo micótico.
Fotografía de Describa Investigue que Describa las

la Fruta, las tipos de Características
Verdura o Caracterí hongos microscópicas del
Pan sticas pueden haber hongo que supone
contaminado macroscó atacado la crece en él
picas Fruta verdura
o pan
53
-Textura: Los tipos de Penicillium:
aterciopela hongos que presenta hifas
da pudieron atacar hialinas septadas.
la fruta son Los conidióforos
-Color:
Aspergillus o tienen ramas
Café
Penicillium, secundarias,
-Aspecto: basándose en denominadas
Rugoso las métulas. Estas son
características de forma cilíndrica,
-
macroscópicas con paredes lisas y
Consistenc
que presentó la portan de 3 a 6
ia: Blanda
fruta durante el fiálides en forma de
Relieve: proceso de matraz; de las
Plano crecimiento de cuales surgen largas
este. Además, cadenas sin ramificar
(Acevedo,
estos son de esporas o
D. 2015).
algunos de los conidios formando el
hongos más penacho o pincel
comunes que característico del
afectan las género (Visagie, CM,
frutas respecto a et al., 2014)
su aspecto
Aspergillus: Tienen
físico, valor
hifas tabiculares y
nutricional y
conidioforas cuya
características
cabeza está
organolépticas
localizada en el
(Trigos, Á. et
extremo de una hifa,
al., 2008).
compuesta por una
vesícula rodeada por
una corona de
fiálides en forma de
botella directamente
insertadas sobre la
vesícula. De las
fiálides se
desprenden las
esporas o conidios
(Abarca, M. L.
54
2000).
3. Los hongos filamentosos pueden causar infecciones en humanos
¿Qué condiciones debe tener un ser humano para ser infectado por
estos hongos?
Estas infecciones son más frecuentes en personas oncohematológicas

que cursan con neutropenia, en especial aquellos con leucemia
mieloide aguda; sin embargo, existen otros grupos de riesgo pacientes
sometidos a trasplante de órganos sólidos o de precursores
hematopoyéticos, enfermedad injerto contra hospedero, enfermedad
granulomatosa, SIDA, pacientes con infecciones asociadas a
traumatismos (especialmente los penetrantes y contaminados) o
inmunosupresión y pacientes con neumonías y abscesos pulmonares o
cerebrales tras la inmersión accidental en aguas contaminadas
(Estrada Salazar, G. I., & Ramírez Galeano, M. C. 2019).
4. De las siguientes fotografías al microscopio, defina por sus

características que hongo cree ver:
Tabla 18.
Características de hongos.
55
Característica
Imagen Nombre
microscópica
Tienen hifas tabiculares y
conidioforas cuya cabeza
está localizada en el
extremo de una hifa,
compuesta por una
vesícula rodeada por una
Aspergillus corona de fiálides en
forma de botella
directamente insertadas
sobre la vesícula. De las
fiálides se desprenden las
esporas o conidios
(Abarca, M. L. 2000).
Las células de las
levaduras son redondas u
ovales, miden entre 3 y 30
micrones de diámetro. La
forma de la levadura
puede ser desde esférica a
ovoide, en forma de limón,
Levaduras piriforme, cilíndrica,
triangular, e incluso
alargada formando un
verdadero micelio o un
falso micelio (Mendoza, M.
,2005).
56
Micelio filamentoso, hifas
en forma de raqueta,
macronidias fusiformes y
verruogosas,de pared
gruesa, con tendencia a
que sus extremos
puntiagudos se curven.
Microsporum
Micronidias en forma de
maza, sésiles; con
clamidosóras, hifas
pectineas y cuerpos
nodulares (Estrada
Salazar, G. I., & Ramírez
Galeano, M. C. 2019).
Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest e imágenes de google de

acceso libre.
Abarca, M. L. (2000). Taxonomía e identificación de especies

implicadas en la aspergilosis nosocomial. Rev Iberoam
Micol, 17(3), S79-84.
Acevedo, D. (2015). Morfología macroscópica y microscópica de los
hongos. Universidad Autónoma de México, Facultad medina.
México D.F.
Estrada Salazar, G. I., & Ramírez Galeano, M. C. (2019). Micología
general. Manizales, Colombia. Centro Editorial Universidad
Católica de Manizales
Madigan, MT, Martinko, JM, Dunlap, PV y Clark, DP (2008). Brock
biología de microorganismos 12ª ed. En t. Microbiol , 11 , 65-73.
Mendoza, M. (2005). Importancia de la identificación de
levaduras. Revista de la Sociedad Venezolana de
Microbiología, 25(1), 103-117.
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Trigos, Á., Ramírez, K., & Salinas, A. (2008). Presencia de hongos
fitopatógenos en frutas y hortalizas y su relación en la seguridad
alimentaria. Revista mexicana de micología, 28(SPE), 125-129.
Visagie, CM, Houbraken, J., Frisvad, JC, Hong, SB, Klaassen, CHW,
Perrone, G., ... y Samson, RA (2014). Identificación y
nomenclatura del género Penicillium. Estudios en
micología , 78 , 343-371.
58
Actividad práctica 5. Parásitos de importancia en salud.
Introducción
La parasitología es la división de la biología que tiene por objeto de

estudio el parasitismo generado por protozoarios, helmintos y
artrópodos; siendo el parasitismo la relación simbiótica en la cual un
organismo (parásito) vive a expensas de otro (denominado huésped) y
le ocasiona daño.
Los protozoarios son organismos eucariotas, unicelulares, que no poseen

pared celular, heterótrofos -en su mayoría-, algunos móviles según el
aparato de locomoción que posean, con reproducción asexual y sexual.
Los helmintos son organismos eucariotas, pluricelulares que conforman
gusanos que se pueden clasificar en tres filum: platelmintos, nematodos
y acantocéfalos; sin embargo, los parásitos de importancia médica se
encuentran en los dos primeros filum mencionados.
Los platelmintos son gusanos planos de simetría bilateral, que pueden

ser de vida libre o endoparásitos, no poseen sistema circulatorio, pero si
un sistema digestivo. Estos gusanos se clasifican en tres clases, siendo
las clases Trematoda (duelas) y Cestoda (tenias) en donde se localizan
parásitos de humanos y animales. Los nematodos son gusanos
cilíndricos, no segmentados que mudan periódicamente su cutícula y se
reproducen sexualmente, depositando aproximadamente 200.000
huevos por día. Poseen sistema digestivo completo (boca-ano) y su boca
presenta estructuras particulares adaptadas a su estilo de alimentación.
Dentro de este grupo se encuentran el oxiuro (Enterobius vermicularis),
el trichuro (Trichuris trichiura), las uncinarias (Ancylostoma spp. y
Necator spp.), nematodo (Ascaris lumbricoides) y la triquina (Trichinella
spiralis).
Por otra parte, los artrópodos son animales invertebrados cuya

característica principal es la presencia de apéndices articulados. Así
mismo, poseen simetría bilateral, ojos compuestos, un exoesqueleto
conformado por quitina y segmentación variable en donde se pueden
encontrar los apéndices articulados; por ejemplo, en insectos se pueden
identificar tres segmentos: cabeza, tórax y abdomen. En su mayoría son
ovíparos, pero en algunos grupos puede darse la ovoviviparidad y la
viviparidad. Estos animales se dividen en cuatro grupos: Quelicerados
59
(arañas, ácaros), Crustáceos, Hexápodos (insectos: moscas, mosquitos,
pulgas, piojos), Miriápodos (ciempiés y milpiés). Su importancia radica
en que estos pueden causar patologías directas (parasitosis, reacciones
alérgicas) o patologías indirectas, debido a que pueden actuar como
vectores o huéspedes intermediarios de microorganismos patógenos.
Finalmente, para que los protozoarios, helmintos y artrópodos lleguen a

ser parásitos tienen que existir ciertas condiciones tanto del parasito
como del huésped, entre ellas se encuentra la cantidad de parásitos
inoculados, factores de virulencia, fase del parásito y la susceptibilidad
del huésped.
Objetivo
● Observar parásitos causantes de enfermedades de importancia en

salud pública.
Materiales
● Explorar el Atlas Socalemi, sección de parasitología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
● Ver vídeo Parásitos en: https://www.youtube.com/watch?
v=RTI1DB42BZ4
1. ¿Qué son las geohelmintiasis? Mencione 5 medidas preventivas para

estas parasitosis.
Se refiere a la infección causada por ingestión de alimentos o bebidas

contaminadas con huevos de gusanos procedentes del suelo, o por
penetración de larvas o gusanos de estos parásitos a través de la piel
cuando el suelo está contaminado con materia. Afecta más a los niños
y niñas; el grupo de entre 5 y 14 años de edad concentra el 80% de la
carga parasitaria.
Las geohelmintiasis de mayor importancia en salud pública son
producidas por cuatro parásitos cuyas formas adultas se alojan en el
60
intestino y sus huevos se eliminan por las heces; los nombres en latín,
son:
 Áscaris lumbricoides
 Trichuris trichiura
 Ancylostoma duodenale
 Necator americanus
MEDIDAS PREVENTIVAS.
1. Desparasitar masivamente a ciertos grupos de población en

riesgo
2. Trabajar en la parte educativa de las personas para promover
hábitos higiénicos adecuados
3. Uso de calzado
4. Promover el acceso a servicios básicos como agua potable
5. Disposición adecuada de excretas y basuras.
2. Observe las siguientes fotografías y complete la tabla:
A. B.
C. D.
61
Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest, Wikipedia e imágenes de
google de acceso libre.
Tabla 19.
Características de parásitos comunes.
Tipo de
parasito
Patologí
Nombr (protozoar
Nombre Características a con la
e del io,
del observadas para que se
organis helminto
organismo su tipificación relacion
mo (huevo-
a
adulto),
artrópodo)
Color pardo, forma
Tricocefal
elíptica, mide
osis
aproximadamente
(Zavala,
Trichiuris Helminto 45-55 micras de
A. J. T., &
trichiura (Huevo) largo y 20-25 de
Vega, J.
ancho y presenta un
T. S.
tapón mucoso a
2002)
cada lado.
Etapa de Gametocito
Malaria o
con forma de luna
paludism
creciente o
o
salchicha; cromatina
(Vásquez
Plasmodium Protozooari difusa
B. , Ana
falciparum o (microgametocito) o
María y
en una sola masa
Tobón,
(macrogametocito).
Alberto.2
Masa de pigmento
012)
oscuro.
C. Giardia Protozooari Trofozoito: forma de Giardiasi
o pera, con un anterior s
ancho y un posterior (Monis,
muy atenuada. Mide PT., et
10-12 µm de largo y al.,
5-7 µm de ancho, 2003)
simétrico
62
bilateralmente y
tiene dos núcleos.
También es
relativamente
aplanado, con un
gran disco de
succión en el lado
ventral anterior
Núcleo ovoide, Enfermed
uniflagelado, ad de
Trypanosoma Protozooari membrana Chagas
D. cruzi o ondulante y (Rossi
mitocondrias con IV, et al.,
kinetoplasto 2019)
3. De acuerdo a lo observado en el vídeo y lo que ha consultado ¿qué

características hacen que los parásitos sean exitosos infectando
poblaciones? Explique, brevemente, su repuesta.
La característica principal que hace que los parásitos puedan infectar

poblaciones es su capacidad adaptativa durante el ciclo de vida que
cada uno de ellos maneja y así mismo la utilización de vectores
animales muy comunes en cada lugar. Lo anterior, permite a los
parásitos mantenerse vivos para llegar así a sus hospederos, cubrir
extensas distancias por medio de sus vectores y desarrollar las
patologías que cada uno de ellos posee muchas veces sin ser
percibidos hasta que ya es demasiado tarde por lo que en muchas
ocasiones el huésped muere y por medio de él, también se disemina
más la enfermedad.

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66

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Patricia Manrique Bustos

Claudia Patricia Jiménez Forero

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas condiciones

Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo. 9

La Microbiología es la ciencia que estudia aquellos organismos vivos

Fue así como resultado de la observación y análisis, aquel otro reino

Los medios de cultivo son una preparación compuesta de biomoléculas

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas

Conjunto a la creación de medios de cultivo y al descubrimiento de las

Fuente: Rojas (2011). Conceptos y práctica de Microbiología general.

En un medio líquido, el método de cultivo es relativamente sencillo,

Hecho esto, posterior a la siembra de microorganismos, se espera

Las características macroscópicas de un microorganismo son todos

Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en

Elevación Plana o aplastada

● Clasificar los diferentes tipos de medios de cultivo que se manejan en

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

Procedimiento-Ejercicio trazo de siembra

1. Preparación de un medio de cultivo simulado (en gelatina): Prepare

Nombre del medio de Componentes del agar Utilidad (para qué

Agar Nutritivo Está compuesto Principalmente sirve

Microkit: medios de cultivo. (2015). Tomado de:

Agar Macconkey. (2019). Tomado de:

Gil, M. (2013). Agar nutritivo: fundamento, preparación y usos. Tomado

2. Complete la siguiente tabla con los medios de cultivo empleados y

Medio de cultivo Tipo de Siembra Esquema o

3. Averigüe 3 microorganismos diferentes que puedan cultivarse en

Medio Microorganism Condiciones Tiempo se

Recuerde: 1. Ver el video, indicar la cepa sembrada en cada uno de los

Atlas disponibles para ampliar visualización:

Atlas de Socalemi: http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-

Atlas de microbiología Online:

Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada: Escherichia

Color Magenta oscuro

Imágenes tomadas de Atlas de microbiología Online:

Medio de cultivo Agar nutritivo

Consistencia Blanda, mucoide

Color Rojo Oscuro, halo verdoso

Imágenes tomadas de Atlas de microbiología Online:

5. Revise el siguiente simulador de siembra de cultivos

Figura 2. Simulador de cultivos.

Observe las variables necesarias para producir el crecimiento de un

Figura 3. Simulador de cultivos, respuestas.

Actividad práctica 1 B. Siembra de Microbiota normal.

El árbol filogenético de la vida consta de tres dominios: Bacteria,

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de

El cuerpo humano aloja comunidades microbianas complejas cuya

Los análisis de la diversidad taxonómica asociada con la microbiota

La microbiología médica moderna se centró en microorganismos

Las relaciones entre los cerca de 100 trillones de simbiontes microbianos

● Evidenciar la diversidad de microorganismos existentes en las

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

1. Complete ¿qué géneros de microorganismos pueden encontrarse en

2. Reporte en la siguiente tabla, 3 microorganismos diferentes entre

3. Registre las referencias citadas, usando norma APA

Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos