Tarea - Guía y Cuestionario Práctica #02 - I Unidad - "Demostracion de La Actividad Catalitica de La Peroxi

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE INGENIERÍA EN CIENCIAS PECUARIAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA


ZOOTECNISTA

PRACTICA N. 02

Tema : Demostración de la actividad catalítica de la


peroxidasa

Docente : Vilca Gavidia, Marleny Elizabeth

Alumna : Leiva Saavedra, Leidy Mariela

Curso : Bioquímica

Ciclo : IV

Grupo : A1

PRACTICA Nº 02

DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD CATALÍTICA DE LA


PEROXIDASA

Introducción:

Los peroxisomas son vesículas simples limitadas por membranas que pueden
contener un centro denso y cristalino de enzimas oxidativas.
Los peroxisomas son organelos con múltiples funciones y contienen más de 50
enzimas que participan en actividades tan diversas como la oxidación de ácidos grasos
de cadena muy larga (24 a 26 carbonos) y la síntesis de plasmalogenos.
.
Además los“peroxisomas”son sitios donde se sintetiza y degrada el peróxido
de hidrogeno (H2O2), un agente oxidante muy reactivo y toxico. El peróxido de
hidrogeno se produce por acción de varias enzimas peroxisomicas, incluida la oxidasa
de urato, oxidasa de glucolato y oxidasas de aminoácidos, que utilizan oxigeno
molecular para oxidar sus sustratos respectivos. El H2O2 generado en estas reacciones se
degrada pronto mediante la enzima catalasa, que está presente en grandes
concentraciones en estos organelos.
2 H2O2 CATALASA 2 H2O + O2

Un catalizador aumenta la velocidad de una reacción química, pero no se altera de


forma permanente por la reacción. Los catalizadores realizan esta hazaña debido a que
disminuyen la energía de activación que se requiere para una reacción química;
entendamos por energía de activación a la energía mínima necesaria para que se
produzca una reacción química dada.
Diferencias en la energía de activación en la catálisis del peróxido de hidrógeno

Objetivos:

1. Diferenciar un catalizador de un biocatalizador por el desprendimiento de


oxigeno molecular.
2. Demostrar cómo se evalúa la actividad catalítica de la peroxidasa.
3. Demostrar la presencia de peroxidasas en los diferentes tipos de Células.
4. Demostrar el efecto oxidante del 02 sobre el alcohol etílico mediante el
reactivo de Schiff.

Material y Reactivos:

- Agua Oxigenada 10Vol. - Gradillas


- Limaduras de Hierro - Tubos de ensayo
- Buffer Fosfato pH 7.2 - Reactivos de
- Papa, rábano, carne o hígado Schiff
- Levadura de panificación - Alcohol etílico
Procedimiento Experimental:

Armar el siguiente sistema:

SISTEMAS
COMPONENTES: 1 II III IV V VI
Buffer Fosfato pH: 7.2 2 2 2 2 2 2m
ml ml ml ml ml l
Agua destilada 4 1m
ml l
Limaduras de Fierro 0,5
g
Trozos de papa o rábano 0,
5g
Trozos de carne o hígado 0,
5g
Levadura de panificación 0,
5g
Agua oxigenada 10 volúmenes 3 3 3 3 3
ml ml ml ml ml
Observar x 15 minutos
Alcohol Etílico 2 2 2 2 2 2m
ml ml ml ml ml l
Reactivo de Schiff 1 1 1 1 1 1m
ml ml ml ml ml l
A.- Anotar el desprendimiento del O2 y la actividad catalítica en los diferentes sistemas.
B.- Anotar la coloración que produce con el reactivo de SCHIFF.

RESULTADOS DESPUÉS DE LOS 15 MIN.


A1 desprendimiento de oxígeno muy Bl Incoloro
escaso(nada de burbujeo)
A2 desprendimiento de oxígeno muy B2. Incoloro
escaso( nada de burbujeo)
A3 desprendimiento de oxígeno escaso(burbujeo B3. Fucsia (grosella)
escaso)
A4 desprendimiento de oxigeno moderado B4. Fucsia (grosella)
(burbujeo moderado)
A5 desprendimiento de oxígeno abundante B5. Incoloro
(burbujeo abundante )
A6 desprendimiento de oxígeno B6. Fucsia ( Grosella )
moderado(burbujeo moderado)

Cuestionario
1. ¿Mencione Ud. ¿Las diferencias entre catalizador y biocatalizador?
Un catalizador es una sustancia que acelera el transcurso de una reacción química,
un biocatalizador o enzima es una sustancia que acelera en un organismo vivo , que
sin su presencia podría tardar en realizarse años .
2. ¿Cuál es la función de la peroxidasa en la célula?
Reducen peróxidos usando diversos aceptores de electrones el peróxido tiene una
función protectora contra organismos patógenos.
3. ¿Qué diferencias hay entre peroxidasa y catalasa?
En la peroxidasa el peróxido de hidrógeno actúa como aceptores de electrones
como el ascorbato , la catalasa utiliza una molécula de h2o2 como sustrato donador
de electrones y otra molécula de h2o2 como oxidante o aceptor de electrón.

4. ¿Explique Ud. como en la célula se forman los peróxidos (H2O2) y que acción
tienen

Se forma por acción de varias enzimas peroxisomicas incluida la axidasa de urato ,


oxidada de glucolato y oxidadas de aminoácidos. Que utiliza oxígeno molecular para
oxidar sus sustratos respectivos. Luego el peroxido se degrada pronto mediante la
enzima catalasa, que está presente en grandes concentraciones en estos organelos.
.

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