Desinfecion y Esterilizacion 2021

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Esterilización y desinfección

¿Qué es esterilización?

Proceso físico o químico que destruye toda forma de vida


microbiana, incluidos virus y esporas por métodos físicos y
químicos

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Métodos Físicos: Radiación UV

Bacteria
• Disminuye replicación
de ADN
• Mutaciones

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Realizar las siembras
correspondientes

Incubar placas y realizar


las lecturas

Someter a UV de acuerdo
a tiempos

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Métodos Físicos: Calor
CALOR SECO CALOR HUMEDO

Calor: húmedo
Temperatura: 121 °C
Tiempo: 15 minutos
Presión: 15 libras o 1 atm

HORNO
Temperatura: 180 °C
Tiempo: 30 min.
Yuri Puicón
Métodos Físicos: Calor húmedo
Tiempo térmico letal (TTL)
Tiempo mínimo requerido para la eliminación de una
población bacteriana

Punto térmico letal ( PTL )


Temperatura mínima que elimina una población
bacteriana en un tiempo determinado (normalmente
el tiempo es de 10 minutos)

En este ejemplo: Bacteria mesófila

Tiempo térmico letal.


50°C: > 50min
60°C: 40 min
Efecto de la temperatura sobre la viabilidad
de bacterias mesófilas 70°C: 10 min. 70ºC
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
¿Cómo usar un autoclave?

https://www.youtube.com/watch?v=o1OTjpi4qYw
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
¿Qué ocurre dentro del autoclave?

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
A partir de un cultivo de
Calor húmedo 24 horas, se coloca 1
gota en cada tubo

Tiempo de exposición a
las temperaturas: 10
minutos

Temperatura 40°C 70°C 100°C


ambiente

Incubación de tubos a 37°C Tras el tratamiento se


por 24 horas agrega 5 ml de caldo a
cada tubo

Lectura de resultados
Turbidez: crecimiento
Transparencia: no crecimiento
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Desinfección química
Desinfección Química
¿Qué es desinfección? ¿Qué es desinfectante?

¿Qué es antiséptico?

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Desinfectantes : Mecanismos de acción
Cloro
Inhibe reacciones enzimáticas y desnaturaliza
proteínas

Yuri Puicón
Yodo y iodóforos:
Penetra la pared celular y actúa
como oxidante generando
precipitación de proteínas y muerte
celular

Alcohol:
Daña membrana y
desnaturalización las proteínas
produciendo lisis celular
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Efecto bacteriostático o bactericida de
desinfectantes
Bacteriostatico Bactericida

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal
Hisopo

Cultivo de E. coli Agar Tripticasa de Discos de papel


Pinzas Desinfectantes
18 horas soya (TSA) filtro estériles

1 Colocar los discos


3 equidistantes sobre
superficie de agar

Cultivo a escala
Hisopo Hisopar en 3 sentidos en
de MacFArland
superficie de agar
0.5
Incubar a 37°C por 24 horas
2 4

Tomar un disco e impregnar con uno de los


desinfectantes. Se repite el procedimiento para cada Realizar lecturas midiendo halos de inhibición y
desinfectante reportar en mm
Yuri Puicón Ruth Cristóbal
Crecimiento

Disco con
desinfectante

Zona de inhibición
(no crecimiento)

Desinfectante 1
Desinfectante 2
Desinfectante 3
Desinfectante 4
Desinfectante 5

Yuri Puicón
Ruth Cristóbal

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