Revista Agua y Conocimiento, Año 2016 | Vol.2 | No.1.

19-33
http://revistacira.unan.edu.ni

Desarrollo, validación y estimación de incertidumbre de un método cromatográfico para

determinar residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate.

Mariano Guerrero S1, Jonathan Herrera M1

1 Centropara la Investigación en Recursos Acuáticos de Nicaragua (CIRA/UNAN-Managua)
Apartado Postal 4598, Managua Nicaragua. [email protected]

Resumen
Nicaragua es un país agrícola que hace de detección y cuantificación para el sistema
amplio uso de plaguicidas para proteger los cromatográfico y el método analítico,
cultivos; sin embargo, carece de aplicación sensibilidad, linealidad y exactitud; Además
de normas para la regulación de plaguicidas y se estimó la incertidumbre del método. Los
en consecuencia los productos pueden resultados obtenidos, se evaluaron por medio
acarrear concentraciones de agroquímicos de criterios de aceptación, la linealidad del
que podrían afectar la salud del consumidor. método determinada por regresión entre 50
Se desarrolló una metodología que permita ng.g-1 a 120 ng.g-1 y cumpliendo el criterio de
determinar residuos de nueve plaguicidas aceptación r2 ≥ 0,99; la exactitud del método
fosforados y un piretroide en tomate estimada por veracidad que a la vez se evalua
(Solanum lycopersicum), además se pretende por sesgo y recuperación ambas con análisis
que sea de utilidad para evaluar en futuros del t-crítico de student y la precisión medida
estudios, si este producto cumple con los por repetibilidad en base al coefientes de
límites máximos de residuos establecidos en variación de Horwitz, ambos componentes
el Codex Alimentarius. cumplieron los criterios, demostrando que el
método produce resultados exactos. El límite
Los compuestos estudiados aplicando la
de detección del método se encuentra en un
técnica de cromatografía de gases con
rango de 2,84 ng.g-1 a 51,01 ng.g-1 este se
detector de captura de electrones (GC-ECD)
son: Mocap, Diazinón, Metíl-paratión, determinó por repetibilidad y analizadas por
el t-crítico; al cumplir los criterios se
Fenclorfos, Malatión, Etíl-paratión,
demuestra que el método es eficiente para los
Clorfenvinfos, DEF, Etión y Cipermetrina y
fines desarrollados.
empleando la guía Analytical Chemistry in
Europe (EURACHEM) se evaluaron los Palabras claves: inocuidad, plaguicidas
siguientes parámetros de validación: límite fosforados, piretroides, validación, tomate.

Abstract
Nicaragua is an agricultural based country chemicals that could affect the consumer’s
that makes extensive use of pesticides to health. A methodology for the residues
protect crops; however, there is a lack of determination of nine organophosphorus
normative for the application and regulation pesticides, and pyrethroid in tomato
of pesticides, as a consequence, agricultural (Solanum lycopersicum) was developed. The
products can lead concentrations of methodology developed is intended to be

Recibido: 03/06/2016 / Aceptado: 17/08/2016

19
 Guerrero, M. & Herrera, J.

useful for future studies, related to the 120 ng.g-1 and fulfilling the acceptance
compliance of maximum residue limits stated criteria of r2 ≥ 0.99; method accuracy was
in the Codex Alimentarius. estimated through veracity, which in turn was
evaluated for bias and recovery, both using
The chemical compounds: Mocap, Diazinon,
analysis of student t-critical, the precision
Methyl parathion, Fenchlorphos, malathion,
was measured by repeatability, based on the
Parathion ethyl, Chlorfenvinphos, DEF,
Horwitz variation coefficients, both
Ethion and Cipermetrina were analyzed using
components meet the criteria, demonstrating
gas chromatography with the electron capture
that the method produces accurate results.
detector (GC-ECD) technique. According to
The detection limit of the method is found in
the guidelines of Analytical Chemistry in
a range of 2.84 ng.g-1 to 51.01 ng.g-1.This was
Europe (EURACHEM), the following
determined by repeatability and analyzed by
validation parameters were evaluated:
the t-critical. The methodology developed,
detection and quantification limit for the
meet the validation and uncertainties criteria,
chromatographic system and the analytical
showing that the method is efficient for the
method, sensitivity, linearity and accuracy;
intended purposes.
besides, the method uncertainty was estimate.
The results were evaluated through Keywords: safety, organophosphorus
acceptance criteria and method linearity was pesticides, pyrethroids, validation, tomato.
determined by regression between 50 ng.g-1-

Introducción
En la actualidad la producción y distribución Nicaragua es un alto productor de alimentos
de alimentos naturales inocuos es una vegetales, es claro que se está haciendo
preocupación de interés mundial, por lo tanto constante uso de plaguicidas
se busca optimizar la protección de los organofosforados y cipermetrina en distintas
cultivos para minimizar las pérdidas; en este plantaciones como café, lechuga, repollo y
sentido la produccion de alimentos también principalmente en tomate. Sin embargo, por
está ligada al uso de plaguicidas debido a la las características físico-químicas de estos
vulnerabilidad de estos al ataque de las compuestos, una pequeña parte llega al
plagas. En Nicaragua, existen pocas objetivo mientras que la mayor parte alcanza
investigaciones con enfoque a la un destino diferente impactando de diversas
determinación de plaguicidas fosforados y formas al medio ambiente. Cabe mencionar,
cipermetrina en tomate; sin embargo, en que en estudios realizados en otros
países como Chile, Colombia, México y compartimentos ambientales como agua
Costa Rica si ha surgido la inquietud de superficial, agua subterránea, sedimento y
conocer el estado de vegetales de consumo suelo se han identificado estos plaguicidas
nacional en cuanto a residuos de plaguicidas (MAGFOR, 2002).
y han analizado muestras de tomate en los Los plaguicidas fosforados y el piretroide
que se han determinado metamidophos, cipermetrina son compuestos de alta
forate, malatión, butrofezin, Oxamyl entre toxicidad (Tabla 1), que pueden
otros y que incluso han superado los limites bioacumalarse en distintos organismos y
máximos permisibles establecidos por el
provocar grandes daños como
Codex Alimentarius (Gutiérrez, J.A. & inmunodeficiencia en la fauna del suelo,
Londoño, A. 2009; Ramírez, L. 2009). transtornos reproductivos en el ser humano,

20
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

inhibe algunas vitaminas, produce cánceres y pesticida para análisis de residuos de

otras enfermedades que se manifiestan plaguicidas; cloruro de sodio 99.5% de
incluso de 5 a 10 años de estar expuestos a pureza, Sulfato de Sodio 99% de pureza
ellos. (Ficha tecnica Ethion, 2001., Ficha (previamente calcinado en mufla durante 4
técnica Cipermetrina, 2011). horas a 550°C) , Florisil adsorvente (fisher
Chemical) calcinado a 550°C.
En vista a todo lo mencionado anteriormente
y tomando en cuenta que el tomate es uno de Estándares
los cultivos con mas demanda por la
En la Tabla 1 se describe los estándares
población nicaragüense y a la vez añadiendo
utilizados (CHEM SERVICE) y sus modos
que no recibe ningún tipo de tratamiento por de acción, con un grado de pureza entre el
los consumidores para eliminar residuos de 98% al 99%.
estos plaguicidas antes de ser consumidos,
surge la importancia y necesidad de Tratamiento de las Muestras
desarrollar una metodología eficiente que nos Los tomates fueron seleccionados de
permita conocer la cantidad de residuos de mercados locales en Managua y para asegurar
estos plaguicidas en el tomate para ello se que no tuvieran resíduos de plaguicidas
seleccionaron nueve plaguicidas fosforado y provenientes del campo, fueron
el piretroide cipermina siento estos los mas primeramente lavados con acetona y se
utilizados en este tipo de cultivo. Tambien analizaron blancos matriz para determinar
cabe señalar que el consumo de este vegetal cualquier contaminación que pudiese alterar
sin una debida orientación o regulación de los resultados. Se procedió a realizar el
este tipo de contaminación puede ser el análisis de la siguiente manera. Los analitos
causante de muchos daños tóxicos en la salud se extraen de 10 g de tomate (fortificados
de las personas. (Ficha del tomate, previamente con la mezcla trabajo de nueve
Nicaragua, 2007). analitos fosforados) licuados con 30 mL de
acetona, filtrados al vacío y extractados 3
veces con 50 mL de diclorometano haciendo
Materiales y métodos uso de un embudo de separación. El extracto
Equipos utilizados obtenido se reconcentra a 2 mL en un
rotaevaporador a 35 °C y 90 rpm, se traslada
El desarrollo del método esta meramente
a un tubo de ensayo de 12 mL y luego de
ligado a pruebas experimentales, por tal
reconcentrarse con nitrógeno se afora a 2 mL
razón, se utilizaron distintos tipos de equipos
de los cuales 1 mL se limpia en una columna
eléctricos, digitales y volumétricos de vidrio
empacada con 10 g de florisil activado,
como: Licuadora (Waring Comercial),
eluyéndose los analitos a través de la
balanza analítica (Metter AE 160, PE 1600),
columna con los siguientes solventes: 70 mL
Cromatografo de gases CLARUS 500-ECD
Hexano, 50 mL de mezcla (70:30) de
(PERKIM ELMER), rotaevaporador
Hexano/Diclorometano, diclorometano 40
(BUCHI 461 RE 121), bombas de vacío
mL y 60 mL de acetona con esto se obtienen
(gast), campana extractora de gases, mufla
tres fracciones en las cuales se encuentran los
(Fisher Scientific) y material volumetrico
plaguicidas organofosforados y
clase A.
Cipermetrina, se reconcentra y se afora a 1
Reactivos mL y se inyecta en el clarus 500 (CG-ECD).
Los solventes y reactivos utilizados fueron:
Acetona, Diclorometano y n- Hexano grado

21
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Tabla 1. Estándares de plaguicidas fosforados y cipermetrina.

Análisis Cromatográfico 000 ng.mL-1, Diazinón 1 000 ng.mL-1, m-

paratión 400 ng.mL-1, Fenclorfos 142,72
Los componentes de las muestras son
ng.mL-1, Malatión 600 ng.mL-1, E-Paration
identificados y cuantificados en un
142,94 ng.mL-1, Clorfenvinfos 300 ng.mL-1,
Cromatógrafo de gases con detector de
DEF 200 ng.mL-1, Etión 200 ng.mL-1,
captura de electrones y columna capilar, con
cipermetrina 500 ng.mL-1.
las áreas proporcionadas por el cromatógrafo
y la ecuación siguiente determinamos las
concentraciones en muestras.
Validación y cálculo de incertidumbre
Ecuación 1
Incertidumbre combinada del método
𝐴𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 ∗𝐶𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ∗𝑉𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜 𝑛𝑔
𝐶𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎𝑠 = = La Ecuación 1 relaciona los parámetros
𝐴𝐸𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ∗ 𝑚𝑀𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 (𝑔) 𝑔
involucrados en la medición, por lo tanto
aplicandole la ley de propagación de la
Las concentración de las soluciones incertidumbre formamos la ecuación de la
preparadas de los analitos en estudio con los incertidumbre combinada del método que
que se fortificaron las muestras son: Mocap 2 estaría dada por:

22
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

(𝑢𝐴𝑚 ∗ 𝑐𝐴𝑚)2 + (𝑢𝐶 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑑𝑎𝑟 ∗ 𝑐𝐶 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑑𝑎𝑟 )2 + (𝑢𝑉−𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜 ∗ 𝑐𝑉−𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜 )2

𝑢[𝐴𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡𝑜] = √ Ecuación 2
+(𝑢𝐴−𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ∗ 𝑐𝐴−𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 )2 + (𝑢𝑚 ∗ 𝑐𝑚 )2

Donde:
𝑢𝐴𝑚 =Incertidumbre en las áreas de la muestra.
𝑢𝐶 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑑𝑎𝑟 = Incertidumbre en la concentración del estándar.
𝑢𝑉−𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜 = Incertidumbre en el volumen de aforo (balón de 2 ml).
𝑢𝐴−𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 =Incertidumbre en las áreas del estándar.
𝑢𝑚 = Incertidumbre en la masa de muestra pesada (incertidumbre de la balanza).
𝑐𝐴𝑚 =Coeficiente de sensibilidad para el área de la muestra.
𝑐𝐶 𝐸𝑠𝑡𝑎𝑑𝑎𝑟 =Coeficiente de sensibilidad para la concentración del estándar.
𝑐𝑉−𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜 = Coeficiente de sensibilidad para el volumen de aforo.
𝑐𝐴−𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 = Coeficiente de sensibilidad para el área del estándar.
𝑐𝑚 = Coeficiente de sensibilidad para la masa de muestra pesada.
(CENAM, 2004)
Nota: Los coeficientes de sensibilidad describen que tan sensible es el mesurando con respecto a las variaciones de
la magnitud y se calculan por medio de la derivada parcial en función de cada componente de la ecuación.

Incertidumbre Expandida (U) el instrumento utilizado. Se inyectó una curva

de calibración y se calculó usando la
Una vez determinada la incertidumbre
metodología de los mínimos cuadrados según
combinada del método, se calculó la
incertidumbre expandida la cual define un Miller N. J. & Miller, J.C. (2002) usando las
siguientes ecuaciones:
intervalo de confianza, donde se espera que
se encuentre la cantidad que se está midiendo.
Se obtiene multiplicando la Incertidumbre 3sy
Combinada por factor de cobertura k; para un LOD = a + x
Ecuación 4
grado de confiabilidad del 95%, k=2.
𝑼= u∗ k Ecuación 3 10𝑠𝑦
LOQ = 𝑎 + Ecuación 5
𝑥
(CENAM, 2004)
Donde
Parámetros de validación
a: Intercepto
Límite de detección (LOD) y cuantificación
instrumental (LOQ) 𝑠𝑦: Desviación estándar con respecto a las
concentraciones
El límite de detección instrumental es la
cantidad mínima que puede ser detectada por

23
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Sensibilidad del método referencia (esto en caso que se tenga un

material de referencia certificado) o
La sensibilidad es el coeficiente entre el
estadístico (t-student). Se evaluó por medio
cambio en la indicación de un sistema de
del sesgo y la recuperación.
medición y el cambio correspondiente en el
valor de la cantidad objeto de medición. Sesgo
Se evaluó por medio del análisis de una Diferencia entre la expectativa relativa a los
regresión (Tabla 2) y el valor se sensibilidad resultados de un ensayo o una medición y el
es la pendiente (b) debido a que nos permite valor verdadero (X0), se calculó con la
una discriminación adecuada de los valores siguiente ecuación.
de concentración en base a la lectura, entre
S=𝑋̅ -X0 Ecuación 6
más se acerque la pendiente al eje y mas
sensible es el método a los cambios de Luego para evaluar el sesgo se analizaron
concentraciones del analito en estudio. siete réplicas fortificadas a las
concentraciones de la mezcla de trabajo (ver
Exactitud del método
etapa de análisis cromatográfico); se calculó
La exactitud representa la proximidad de los el estadístico “t” (Ecuación 7) de la media
resultados de una medición al valor de aritmética (𝑿 ̅ ) de las concentraciones
referencia o valor aceptado. Evalúa los recuperadas y se aplicó el siguiente criterio
efectos sistemáticos y los aleatorios por de aceptación t-crítico calculado ≤ t-crítico
medio de dos componentes los cuales son la student. El valor de referencia de “t” de las
veracidad y la precisión. Tablas estadísticas de student a un grado de
Veracidad confianza del 95%, y n-2 grados de libertad
“t”= 2,57.
Proximidad de la media aritmética de una
serie de resultados de pruebas a un valor de

(𝑋̅𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑅𝑒𝑐𝑢𝑝𝑒𝑟𝑎𝑑𝑎𝑠 −𝐶𝐴𝑔𝑟𝑒𝑔𝑎𝑑𝑎 )∗√𝑛

𝑡𝐶𝑟í𝑡𝑖𝑐𝑜 𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = Ecuación 7
𝑆

𝐶𝑆𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ∗𝑉𝑎𝑓𝑜𝑟𝑜 (𝑚𝐿 )

𝐶𝐴𝑔𝑟𝑒𝑔𝑎𝑑𝑎𝑠 = Ecuación 8
𝑀𝑎𝑠𝑎 (𝑔)

Miller N. J. & Miller, J.C. (2002)

Recuperación
Se utiliza en casos que no se disponga de (C𝑅𝑒𝑐𝑢𝑝𝑒𝑟𝑎𝑑𝑎 )
%𝑅= *100 Ecuación 9
material de referencia certificado (MRC), útil C𝐴𝑔𝑟𝑒𝑔𝑎𝑑𝑎
para el monitoreo de la calidad en muestras (Guía Técnica sobre Trazabilidad e
con matrices complejas con grandes Incertidumbre en CG y CLAR, 2004)
interferencias
La Evaluación práctica de la recuperación se
El recobro se calculó a través de la siguiente realizó una curva de calibración fortificando
ecuación: réplicas de matriz (tomate) a cinco niveles de

24
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

concentraciones por triplicado y en un rango C= concentración agregada del analito

del 65.5 a 150 % (los cuales serán expresados expresada en g/mL.
en la linealidad del método). Se aplica
también la prueba del t-crítico de student la
cual se calcula con la siguiente ecuación: Límite de Detección (LDM) y Cuantificación
del Método (LQM)

[100−%𝑅] Para determinar el límite de detección y

𝑡𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = Ecuación 10 cuantificación del método, se utilizó la
𝑆∗√𝑛
metodología señal – ruido, lo que consistió en
comparar la respuesta del blanco matriz con
Donde: la respuesta de los analitos en estudio en los
distintos niveles de una curva de calibración.
𝑡𝑐𝑎𝑙𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = t calculado del promedio de las
Se elige el nivel de la curva en el que los
mediciones.R= recuperación
analitos se pueden distinguir de las señales
S= desviación estándar de las lecturas del ruido y el límite de detección del método se
porcentaje de recobro calculó multiplicando por tres la
n= número de lecturas o valores observados concentración seleccionada y por seis para el
límite de cuantificación.
Precisión
Luego con la concentración seleccionada se
Es la proximidad de los resultados unos con fortificaron siete réplicas y se analizaron se
otros y se evaluó a través de la repetibilidad. realiza la prueba de comparación de medias
(Guía Técnica sobre Trazabilidad e (estadístico del t-critico de student) para ver
Incertidumbre en CG y CLAR, 2004). si existen errores significativos en las
La repetibilidad repeticiones el valor. (Guía Técnica sobre
Trazabilidad e Incertidumbre en CG y
Se analizaron siete réplicas fortificadas con CLAR, 2004).
los analitos en estudio, se calculan las
concentraciones recuperadas con (Ecuación Linealidad del método
1) y luego se determina el Coeficiente de Habilidad del método para obtener resultados
variación (C.V.). proporcionales a concentración variables1. La
Para el análisis de la repetibilidad se aplica el evaluación práctica consistió en preparar por
criterio de aceptación en base al coeficiente triplicado, muestras fortificadas a cinco
de variación de Horwitz, que expresa que la niveles de concentración diferentes (62.5%,
precisión se considera aceptable cuando su 75%,100%, 125%, 150%), la concentración
coeficiente de variación experimental es del nivel central (100%) debe ser la que
inferior a la mitad del valor calculado con la comúnmente se prepara la solución de trabajo
ecuación de Horwitz (C. V < C. V h% / 2 ) para el análisis con el método, luego se
preparan dos niveles superiores y dos
Para calcular el coeficiente de variación de inferiores a esta concentración (Tabla 2). El
Horwitz se usa la siguiente ecuación: criterio de aceptación se hace en base al
𝑪𝑽𝒉% = 𝟐(𝟏−𝟎,𝟓) 𝐥𝐨𝐠 𝑪 Ecuación 11 coeficiente de determinación r 2 ≥ 0.99.

1 Usar Ecuación 8 para calcular concentraciones ng/g

(Guía técnica sobre trazabilidad e incertidumbre en
CG y CLAR, 2004).

25
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Tabla 2. Concentraciones de la regresión para evaluar la linealidad del método.

Resultados Resultados de las incertidumbre asociada

El método desarrollado permite determinar la a las concentraciones
presencia de los nueve plaguicidas En la Tabla 3 se presentan los resultados de
organofosforados y la cipermetrina en la estimación de la incertidumbre expandida
tomate; sin embargo tambien es necesario del método para cada analito estudiado. Se
determinar las fortalezas y debilidades del puede observar que no existe influencia
método y por tal razón, se evaluaron los significativa de parte de las fuentes de
parámetros de validación y el cálculo de la incertidumbre en los análisis realizados.
certidumbre, obteniendo los resultados que se
plantean a continuación.
Tabla 3. Incertidumbre estimada para las concentraciones recuperadas.

26
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

Resultados de límites de detección y concentración mínima que puede ser

cuantificación instrumental. detectada y cuantificada por el cromatógrafo
(Clarus 500), para cada analito estudiado.
Los límite de detección y cuantificacion
Ademas que observamos la respuesta ante los
instrumental, nos permiten establecer la
cumpuestos estudiados. (Tabla 4)

Tabla 4. Límite de detección y cuantificación instrumental

Resultados para el límite de detección del que las respuesta de los analitos de interés se
método diferencien del efecto matriz. En la Tabla 5 se
plantean los límites con el críterio de
Se determinó el límite de detección del
aceptación correspondiente.
método para establecer la concentración en la

Tabla 5. Límite de detección del método.

27
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Resultados de la exactitud (veracidad y aceptado y los errores aleatorios por medio de

precisión) la precisión, al observar la cercanía entre los
resultados de distintas repeticiones. En la
La exactitud estudia los errores sistemáticos
Tabla 6 se plantean los resultados de la
por medio de la veracidad, la cual al estimar
exactitud y en la Tabla 7 se muestran los
el sesgo se obtiene la diferencia entre las
resultados de la veracidad por medio de la prueba
mediciones y un valor de referencia o valor
de Recobro.
Tabla 6. Resultados de veracidad y precisión.

Tabla 7. Resultados de la veracidad por medio de la prueba de Recobro.

28
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

Resultados de la Linealidad y sensiblidad evalua la respuesta del método

Sensibilidad del método ante las distintas concenttraciones; en la
Tabla 8 y se presentan los resultados y
La linealidad establece un rango en el que el
criterios de aceptación para las pruebas
método produce resultados lineales y la
realizadas.

Tabla 8. Resultado de la regresión para el Mocap.

Tabla 9. Valores de pendiente y coeficiente de determinación para los demás analitos.

29
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Discusión aceptación del t- crítico de student, se

demuestra que no existe diferencia
La metodología desarrollada es apta y
significativa con respecto al valor verdadero,
eficiente para determinar residuos de nueve
por lo tanto, el método desarrollado permite
plaguicidas fosforados y el piretroide
conocer los residuos de plaguicidas en
cipermetrina en tomate, esto se comprobó por
muestras de tomate y a la vez tener la certeza
medio de la validación en lo cual observamos
que los errores sistemáticos no afectan
que se cumplen los criterios de aceptación
significativamente el resultado.
para cada uno de los parámetros evaluados y
la estimación de la incertidumbre, la cual La precisión evaluada por repetibilidad en la
permitió estimar la dispersión que causaron que se utilizaron siete réplicas fortificadas,
las fuentes de incertidumbre en el transcurso evaluó la capacidad del método de producir
del análisis. resultados parecidos entre ellos y repetibles
con variaciones mínimas, lo cual se
Los límites de detección y cuantificación
comprobó al cumplir con el criterio en base
instrumental (Tabla 4) nos permitieron
al coeficiente de variación de Horwitz, estos
establecer la concentración mínima que
resultados nos indica que los errores
puede ser detectada y cuantificada, además se
aleatorios no influyen significativamente en
comprobó que produce resultados lineales y
el análisis.
es sensible para determinar estos tipos de
plaguicidas, debido a que el cambio de La linealidad y sensibilidad del método
respuesta fue proporcional a los cambios de cumplieron con el criterio de aceptación al
concentración. obtener un r2 ≥ 0,99, estos resultados
muestran que el método desarrollado es
El límite de detección del método (Tabla 5)
sensible y eficiente para determinar
determinado por la metodología señal-ruido
concentraciones bajas y altas en muestras de
para el cual se fortificaron siete réplicas,
tomate dentro del rango determinado para
cumplió con el criterio de aceptación del
cada analito (Tabla 2).
t-critico de student para un nivel de confianza
del 95% y n-2 grados de libertad, lo que nos Por medio de la estimación de la
da certeza que las respuestas obtenidas con incertidumbre identificamos las variaciones
ésta metodología se debieron a la causadas en cada una de las etapas de
identificación inequívoca de los analitos en medición provenientes de las condiciones
estudio y se diferenciaron del ruido matriz. ambientales de trabajo, errores de equipos
electrónicos y asignamos un rango con el
La exactitud (Tabla 6) se evaluó en dos
95% de confiablidad que dentro del cual se
componentes que son veracidad y precisión a
encuentre el valor verdadero de nuestra
través de los resultados pudimos conocer la
medición.
influencia de los errores sistemáticos y
aleatorios en las mediciones.
La veracidad que a la vez se evaluó por sesgo Conclusiones.
nos brinda información de los errores El método analítico desarrollado permite la
sistemáticos provenientes de los instrumentos determinación de residuos de nueve
de medición utilizados o mala manipulación plaguicidas organofosforados y cipermetrina
en el momento del análisis. El sesgo en tomate usando un cromatógrafo de gases
determinó la diferencia que existe entre el
acoplado a un detector de captura de
valor obtenido del análisis y el valor real de electrones (CG-ECD).
la medición, al cumplir el criterio de

30
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

El método analítico para la estimación La precisión también cumplió con el criterio

cuantitativa de Plaguicidas Organofosforados de aceptación de Horwitz, ya que la
y Cipermetrina en tomate utilizando incertidumbre asociada a las concentraciones
Cromatografía de Gases satisface los criterios recuperadas de cada analito por el método,
de aceptación establecidos en la norma nos muestra que no hubo dispersión
EURACHEM para los parámetros de significativa en la medición por parte de las
validación evaluados, esto nos permite fuentes de incertidumbre en el análisis de los
concluir que el método presenta un buen mismos.
desempeño en el análisis de plaguicidas
fosforados y la cipermetrina en tomate.
Agradecimientos
El cromatógrafo utilizado produjo resultados
lineales, al ser evaluado su desempeño con Nuestro agradecimiento al Centro para la
curvas de calibración en el rango de Investigación en Recursos Acuáticos
concentraciones entre 40 ng.mL-1 a 400 (CIRA/UNAN) de la Universidad Nacional
ng.mL-1 base al Mocap, para los nueve Autónoma de Nicaragua (UNAN-Managua),
plaguicidas organofosforados y en el rango por brindarnos apoyo en la realización de este
de 50 ng.mL-1 a 500 ng.mL-1 en el caso de la trabajo monográfico en el laboratorio de
cipermetrina. Contaminantes Orgánicos.
En cuanto a los resultados del límites de A nuestro tutor MSc. Jorge Cuadra Leal y
detección y cuantificación concluimos que asesor Lic. Josseth Martin Díaz por
nos permiten la identificación y brindarnos apoyo con sus experiencias y
cuantificación inequívoca de los analitos de conocimientos muy necesarios para el
interés, los resultados para el límite de desarrollo de este trabajo.
detección instrumental se encuentra en un A maestros y personal de laboratorio de
rango de los 0,4747 ng.mL-1 a 69,6074 Contaminantes Orgánicos del CIRA-UNAN,
ng.mL-1 y el límite de cuantificación por brindarnos de su tiempo, apoyo,
instrumental entre los 1,5824 ng.mL-1 a 232 conocimientos y excelentes valores
ng.mL-1, por otro lado, el límite de detección transmitidos en el desarrollo de nuestra
del método está entre 2,8470 ng.g-1 y 51,0112 formación profesional.
ng.g-1.
El método desarrollado es lineal y sensible ya
que presenta buena respuesta a la Referencias
recuperación de las distintas concentraciones Araoud, M., Douki, W., Rhim, A., Najjar,
de los analitos en estudio, este cumple con los M. F., & Gazzah, N. (2007).
criterios de aceptación establecidos por la Multiresidue analysis of
guía EURACHEM pues los coeficientes de pesticides in fruits and vegetables
determinación fueron mayores a 0.99. by gas chromatography-mass
El método es exacto ya que cumplió con los spectrometry. Journal of
criterios de aceptación, en cuanto al cálculo Environmental Science and
de la veracidad, la prueba del sesgo y la Health Part B, 42(2), 179-187.
prueba de recuperación. En ambos casos se Corpeño, B. (2004). Manual del cultivo
obtuvo que el t-crítico es menor al t-crítico de de tomate. Centro de inversión,
referencia, lo que demostró que los valores desarrollo y exportación de
obtenidos están cercanos al valor real. agronegocios.

31
 Guerrero, M. & Herrera, J.

Solano, J. C. (2004). Prácticas cálculo de la incertidumbre del

recomendadas para determinar y material volumétrico, laboratorio
reportar la incertidumbre de las de contaminantes orgánicos
mediciones en química analítica- CIRA/UNAN.
1. Editorial Universidad de Costa Trujillo, S., & Arias, R. (2002).
Rica.
Incertidumbre en la calibración de
EURACHEM/CITAC CG4. et. al. un matraz volumétrico. Centro
(2000). Guide Quantifying Nacional de Metrología,
Uncertainty in Analytical CENAM, México. http://
Measurement. Second edition. www.cenam.mx>
Garrido-Frenich, A.; Plaza-Bolaños, P.; Gutiérrez, J. A., & Londoño, A. (2009).
Martínez-Vidal, J. L. 2007. Determinación de plaguicidas
“Multiresidue analysis of organoclorados y
pesticides in animal liver by gas organofosforados en tomates de
chromatography using triple mercados de cadena en las
quadrupole tandem mass ciudades de Pereira y Armenia,
spectrometry”. Journal of Colombia. Boletín
Chromatography A. 1153. Latinoamericano y del Caribe de
Plantas Medicinales y
http://www.dolzhnos.com.ar/htm/densid
Aromáticas.
ad_del_aire.htm
Ramírez, L. G. (2009). Determinación de
PNUD/MARENA (2006). Antecedentes
pesticidas en vegetales mediante
de los plaguicidas en Inventario
cromatografía de gases-
nacional de plaguicidas cop en
espectrometría de masa/masa
Nicaragua, proyecto habilitante
(GC-MS/MS).Universidad
COP.
Tecnológica de la Mixteca,
Julio C Gaviola. 2011. Manual de Instituto de Agroindustrias,
producción de semillas Laboratorios de Ciencias
Hortícolas. Clasificación botánica Químico-Biológicas, Huajuapan
del tomate capítulo 2. Cosme de León, Oaxaca, México.
Argerich. Pág. 1 a 12.
Ministerio de Fomento, Industria y
Ministerio agropecuario y forestal Comercio Managua, Nicaragua.
MAGFOR. 2002. Dirección del (2007). Ficha del Tomate.
registro nacional y control de www.mific.gob.ni.
insumos agropecuarios. Situación
Centro Nacional de Meteorología,
actual en el uso de plaguicidas e
(CENAM) México, Mayo 2004.
importaciones autorizadas.
Guía Técnica sobre Trazabilidad e
Nicaragua.
Incertidumbre de Mediciones
Miller, N.J & Miller, J.C., (2002). Analíticas que emplean las
Estadística y Quimiometría para técnicas de Cromatografía de
Química Analítica. Pearson Gases (CG) y Cromatografía de
Education, S.A. líquidos de alta resolución
Proc-co-25. 2012. procedimiento (CLAR).
operativo para la calibración y

32
 Residuos de plaguicidas organofosforados y cipermetrina en tomate

Centro Nacional de Metrología, ETHION división de toxicología

(CENAM). México. Noviembre. y medicina oriental ToxFAQs.
2005. Eurachem-Guia- Agency for Toxic Substances and
Validacion-CNM-MRD-030-2da- Disease Registry (ATSDR),
ed. Febrero 2011. Ficha técnica
Agency for Toxic Substances and CIPERMETRINA división de
Disease Registry (ATSDR), toxicología y medicina oriental
Febrero 2001. Ficha técnica ToxFAQs.

33