BIOTECNOLOGÍA DE LAS

FERMENTACIONES, BIORREACTORES Y
BIOCOMBUSTIBLES
ASPECTOS GENERALES DE
LOS PROCESOS DE
FERMENTACIÓN
 INTRODUCCIÓN
• Proceso conocido desde la antigüedad
• Técnica de conservación
• Obtención de amplia gama de productos
• Mejora del contenido nutricional
 FERMENTACIÓN
C
A A
T Proceso que se lleva a cabo en un N
A fermentador, mediante el cual A
B determinados sustratos que componen B
O el medio de cultivo son transformados O
L por acción microbiana en: L
I I
S S
Metabolitos Biomasa M
M
O O
 FERMENTACIÓN
Punto de vista Microbiológico

Cualquier crecimiento
microbiano en condiciones
oxigénicas o anoxigénicas.
 ASPECTOS A TENER EN CUENTA

II. MATERIAS
PRIMAS

III. CONDICIONES
AMBIENTALES

III. CONDICIONES
AMBIENTALES
I. ORGANISMO IV. PRODUCTO
FINAL
 ORGANISMOS
ORIGEN:
• AMBIENTE NATURAL
• COLECCIONES DE CULTIVO
• FERMENTACIONES NATURALES
• ANIMALES, INSECTOS Y PLANTAS ENFERMOS
 ORGANISMOS
PROPIEDADES:

• PRODUCIR LA SUSTANCIA DE INTERÉS

• GENÉTICAMENTE ESTABLE - SUSCEPTIBLE DE

MANIPULACION GENÉTICA

• CRECER EN MEDIO DE CULTIVO A GRAN

ESCALA
 ORGANISMOS
PROPIEDADES:

• CRECIMIENTO RÁPIDO

• CAPAZ DE CRECER EN MEDIO DE CULTIVO LÍQUIDO Y

ECONÓMICO

• FACILIDAD DE SEPARACIÓN DEL MEDIO

 ORGANISMOS
PRINCIPALES TIPOS DE M.O:

• BACTERIAS

• LEVADURAS

• HONGOS FILAMENTOSOS
 REQUERIMIENTOS
NUTRITIVOS
Selección de componentes apropiados:
• Bases técnicas
• Funciones fisiológicas
• Objetivo de la fermentación
• Restricciones sobre la
recuperación del producto final
• Costos
• Disponibilidad de compuestos
alternativos
 REQUERIMIENTOS
NUTRITIVOS

Diseño del medio de cultivo :

Satisfacer las necesidades

nutricionales del microorganismo.

Ser económico
FUENTES DE CARBONO UTILIZADAS
POR LOS MICROORGANISMOS

• Azúcares

• Polisacáridos
FUENTES DE CARBONO UTILIZADAS
POR LOS MICROORGANISMOS

• Lípidos

• Alcoholes
 OTROS REQUERIMIENTOS
NUTRICIONALES

• Fuente de oxígeno
• Fuente de nitrógeno
• Fuente de fósforo
• Fuente de azufre
• Metales
• Vitaminas
EFECTORES EXTERNOS

1. Efectores químicos

2. Efectores físicos
EFECTORES INTERNOS

1. Dotación genética del organismo

 PRODUCTOS
BIOMASA: CÉLULAS DE LEVADURA

http://www.jovenclub.cu/libros/Libros_1/ciencia2/43/htm/SEC_8.HTM
 PRODUCTOS
PRODUCTOS DE LAS CÉLULAS
• ETANOL – Saccharomyces cerevisiae
 PRODUCTOS
PRODUCTOS DE LAS CÉLULAS
• ÁCIDO CÍTRICO – Aspergillus niger
 PRODUCTOS
PRODUCTOS DE LAS CÉLULAS
• ANTIBIÓTICOS: Penicillium chrysogenum
 PRODUCTOS
PRODUCTOS DE LAS CÉLULAS
• ENZIMAS
• ADITIVOS ALIMENTICIOS

BIOCONVERSIONES
• BIOCONVERSIONES DE ESTEROIDES
 PRODUCTOS
PRODUCTOS ALIMENTICIOS
• YOGUR: Lactobacillus acidophilus y Streptococcus
thermophilus
 ESQUEMA GENERAL DE UN
PROCESO DE FERMENTACIÓN

Procesos y operaciones Tratamiento

Propagación Fermentación de separación y
de cultivos purificación
de efluentes

Separación

Efluentes
Esterilización
Purificación

Preparación de Tratamiento
medios Producto

Materias primas
 1. PROPAGACIÓN DE
CULTIVOS

• Laboratorio
• Aislamiento preservado
• Previamente seleccionado
• Producción de inóculo: volúmenes crecientes
(agitadores en vaivén o rotatorios)
 2. FERMENTACIÓN

• Esterilización del sustrato

• Tanque de inóculo (50, 500 o 1000 L)
• Fermentador industrial: el volumen
depende del producto y de su
concentración (10.000- 100.000 L)
 3. OPERACIONES Y PROCESO DE
SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN DE LOS
PRODUCTOS

• Separación de insolubles por filtración,

centrifugación o decantación
• Separación por extracción líquido -líquido, o
extracción a dos fases acuosas, o
cromatografía de afinidad
• Aislamiento del producto
 4. TRATAMIENTO DE
EFLUENTES

• Representa una etapa imprescindible porque

es fundamental controlar la cantidad de
efluente que sale de la fábrica y que es
enviado generalmente a un curso de agua,
sea un canal, arroyo, un río o al mar.
BIOINSUMOS
INTRODUCCIÓN

Pseudomonas sp.

ÁREA ÁREA BIOPROCESOS, ÁREA

AGROINDUSTRIAL TECNOLOGÍA AMBIENTAL FARMACOLÓGICA
Y BIOCONVERSIÓN
 AREAS DE APLICACIÓN

Efecto invernadero
Problemas de
contaminación
ÁREA Decremento de los
recursos fósiles
AGROINDUSTRIAL - Amplia demanda por
AMBIENTAL energía renovable a partir
de biomasa
Cultivos promisorios.
 JUSTIFICACIÓN

• Agotamiento de las reservas

• Dependencia económica de los
combustibles fósiles
• Desarrollo sostenible
•  Emisiones contaminantes Cultivos microbianos
• Implementación de soluciones
biotecnológicas
• Aprovechamiento de residuos
vegetales

Biorefinería (York,Cummings.
NE) 2003.
 CIMAD
DESECHOS DEL PROCESO DEL CACAO
Theobroma cacao L.
Colombia aporta entre 1,5% y
12,4% a la producción mundial
y regional, respectivamente.
Según (FAO, 2009).

En el procesamiento industrial
se obtienen desechos en cada
una de las etapas para la
fabricación de los derivados del
cacao
La actividad agroindustrial de
este producto genera una gran
cantidad de residuos,
aproximadamente 90 % del
peso total del producto
cosechado
Los residuos se compone de
complejos carbohidratos de las
paredes celulares (celulosa,
hemicelulosa ), lignina. y otras
sustancias asociadas a los vegetales;
considerando componentes no
estructurales pectinas
 Elaeis guineensis
Colombia es el primer país
productor de aceite de palma
en latinoamérica y el quinto en
el mundo.
En el procesamiento industrial
se obtienen desechos durante la
etapa de extracción del aceite.

Se estima que del peso total de

frutos de palma de aceite que se
recogen en Colombia, entre Los desechos solidos del
25% y 30% quedan como proceso de extracción de
residuo. aceite son llamados cáscaras y
cascarillas, el porcentaje de
cascaras en el racimo de fruta
es de 5-7 % aprox.

Los residuos se compone de

complejos carbohidratos de las
paredes celulares (celulosa,
hemicelulosa ), lignina. Y
generan en su descomposición
(Potasio, Nitrógeno y Fósforo.)
Normatividad Propiedad Intelectual

BIODIVERSIDAD

Fotos: Archivo Dra. Simoní Campos

DIVERSIDAD
Chytridiomycota Ascomycota

Zygomycota Basidiomycota

Deuteromycotina
HONGOS BIOPROSPECCIÓN
• Son heterótrofos
• Descomponedores, parásitos o simbiontes
• Cerca de 1,5 millones de especies, solamente
descrito el 5.5%
• Son fundamentales en diferentes sistemas y en el
reciclaje de los elementos

IMPORTANCIA
•Bioprodutos: biocombustibles, fibras naturales
• Enzimas en la Industria: producción y
blanqueamiento de pulpa y textiles
•Procesos de alimentos (vino, cerveza, producción
de azúcar, producción de alcohol, etc.)
• Hongos utilidad ambiental: biorremediación,
bioconversión, biodegradación y bioindicadores)
Cummings. 2003.
 Desafío:
Vencer la recalcitrancia de la pared
celular
Glucosa
Celulosa ~37-40%
Xilosa, arabinosa
Hemicelulosa ~28-35%
(pentosas), galactosa
Lignina ~21%
Compuestos aromáticos

Lignina

Celulosa

Hemicelulosa

Estructura de la pared celular (Ramos, 2003)

- La hemicelulosa forma ligaciones covalentes cruzadas con la

lignina y con microfibras de celulosa. 39
Biomasa da caña-de-azúcar

Paja

Bagazo
Biomasa da caña de azúcar

Co-generación

Mais de 85 millones de ton/año

Paja La quema para colecta será eliminada hasta 2014 – 2017

50%
 TIPOS DE PRE-TRATAMIENTO

Mecánicos
Físicos
Térmicos

Físico - químicos

Fraccionamiento con solventes

Pre-tratamientos
Químicos ácidos
Pre-tratamientos agentes
alcalinos
Agentes oxidantes

No existe técnica de pre-tratamiento universal !

 Explosión a vapor en presencia de CO2

Bagazo no tratado

Bagazo tratado por explosión a vapor

 Molino de bolas

Tratamiento de
bagazo y de paja

Reduce la cristalinidad y el tamaño de las partículas de la biomasa

 Molino de discos

Defibrilacion de la biomasa
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DE LA
CELULOSA
Endoglucanasas

Exoglucanasas

β-glucosidasas
Hidrólisis enzimática de la celulosa

Endoglucanasas

Celulosa
 Hidrólisis enzimática da celulosa
Domínio catalítico
Exoglucanasas
Domínio de ligacion

1° paso: adsorcion 2° paso: localizacion de las 3° paso: formacion del

extremidades libres complejo enzima-sustrato

4° paso: hidrólisis de las ligaciones β

Formacion de la
celobiosa
Pre-tratamiento Biológico
 CELULASES
• Synergistic
collaboration

• Primary enzymes:
• Endo--1,4-glucanases
• Exo- -1,4-glucanases
• -glucosidases
 MECHANISM FOR CELLULOSE
BREAKDOWN

Roltz et al. (1979)

POTENCIAL DE PRODUCIÓN DE ETANOL DE SEGUNDA
GENERACIÓN

340 Kg de paja (10% humedad)

1 ton de caña 300 Kg de bagazo (50% humedad)
360 Kg de caldo da caña

80L de etanol (primeira geração)

88% bagazo cogeneración de energía

50% de la paja debe permanecer en campo

Disponibilidad: 12% bagazo (18 Kg) + 50% paja (153 Kg)

36,5L de etanol de celulose

(asumiendo 30% de celulosa y densidad del etanol de 0.79 g/cm3)
 Ethanol from Biomass

Bagasse and/or Straw

Pentoses (hemicellulose)
•Enzyme Production Pre-treatment
•Bio-Refineriy

Enzymatic Hydrolysis Lignin

Enzyme
(Solid Fuel)

GLUCOSE

Sucrose Ethanol

Sucrose Juice or Ethanol Fermentation Yeast

Molasses

Distillation Stillage

Ethanol