Practica de Laboratorio 2

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA

INFORME DE PRACTICAS VIRTUALES TUTORIADAS DE


LABORATORIO

CARRERA: Agroindustrias

NIVEL Y PARALELO: Sexto semestre paralelo A

MATERIA: Biotecnología

ALUMNO/A: Cesar Sanchez

CÓDIGO: 247

PROFESOR: Bryon Díaz.

TEMA DE LA PRÁCTICA: Extracción del ADN vegetal.

FECHA DE REALIZACIÓN: 15/05/2021

FECHA DE PRESENTACIÓN: 22/05/2021

CALIFICACION:

OBSERVACIONES DEL PROFESOR:


TEMA:
Extracción del ADN vegetal.
OBJETIVOS:
- Conectar una muestra biológica de un organismo vivo que contenga material
genético
- Extraer y observar el ADN contenido en la muestra biológica (Plátano)

REVISIÓN DE LITERATURA

El ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico. Hace referencia al material


genético de los organismos. Es aquel componente químico primario de los cromosomas
y el material que forma los genes. Existen diversas técnicas para la extracción y
obtención del ADN, siendo la más conocida la Reacción en cadena de la polimerasa
(PCR, por sus siglas en inglés), de la cual existen variantes como la PCR punto final,
PCR tiempo real, PCR inversa, PCR anidada, PCR mutagénica, entre otras. Para realizar
esta técnica se requiere contar con una muestra libre de proteínas, tanto citoplasmáticas
como nucleares que se encuentran asociadas al DNA. [CITATION Amb \l 3082 ]

Muchos estudiosos del tema consideran al ADN como aquellas instrucciones


propias de la vida que cada ser humano posee y que lo diferencia de sus semejantes.
Históricamente hablando cabe destacar el revolucionario descubrimiento de James
Watson y Francis Crick en 1953, basados en estudios y propuestas anteriores
donde se sabía que el ADN almacena la información genética en todos los seres
vivos, se sabía que el ADN estaba formado por la combinación de unas
moléculas más pequeñas llamadas nucleótidos, con estos antecedentes y otros
datos se descubrió de forma exitosa la molécula de ADN y que está formada por
dos largos filamentos cada uno de ellos es una cadena de nucleótidos
que se enrollan entre sí para dar lugar a una doble hélice. [ CITATION Amb \l
3082 ].

Estructura

Existen cuatro bases: dos púricas denominadas adenina (A) y guanina (G) y dos
pirimidínicas, denominadas citosina (C) y timina (T). Para formar el ADN, se unen
largas cadenas de estas bases mediante moléculas de fosfato y azúcar. La estructura de
doble hélice del ADN no se descubrió hasta 1953 por James Watson y Francis Crick;
ellos también, mostraron el modo en que el ADN se podía "desenrollar" para que fuera
posible su lectura o copia.

Una larga hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra hebra y forma un par
entrelazado. Dicha hélice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de diámetro, y está
formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de nucleótidos enfrentados por sus bases
nitrogenadas. [CITATION Cañ05 \l 3082 ]

CIENCIA, TECNOLOGÍA Y SOCIEDAD EN LA EXTRACCIÓN DE


ADN CON MATERIAL COTIDIANO
El estudio del ADN es uno de los campos de la enseñanza en los que más se pueden
resaltar las interacciones CTS, ya que las múltiples aplicaciones biotecnológicas y las
técnicas de Ingeniería Genética están presentes en la vida diaria de los alumnos,
fundamentalmente a través de los medios de comunicación. Así, son frecuentes noticias
sobre alimentos transgénicos de mayor calidad nutrimental, plantas resistentes a plagas,
enfermedades o a variaciones extremas en las condiciones ambientales (temperatura,
salinidad o sequía); sobre diagnóstico prenatal, terapia génica, pruebas de paternidad,
investigación forense, control de calidad alimentaria, generación de organismos
modificados genéticamente para producir sustancias químicas.

Además, abordar estos temas en el aula permite tratar algunas implicaciones éticas que
conlleva el uso de estas técnicas, y que también llegan al entorno de los alumnos, como
los límites de la clonación, la generación de embriones modificados genéticamente, la
privacidad de la información genética o el aumento del control del mercado alimentario
por las grandes multinacionales biotecnológicas. [ CITATION Mer19 \l 3082 ]

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:

Equipos
o Refrigerador
o Licuadora

Materiales
o Probeta graduada (10ml en 10ml)
o Vaso de precipitación (2) (250ml)
o Papel filtro (colar café #2)
o Pipeta gotero
o Cuchara plástica
o Mini caja Petri
o Papel secante

Reactivos
• Agua destilada (20ml)
• Shampo sin color
• Sal yodada
• Alcohol etílico 96°
PROCEDIMIENTO:

Preparar una solución de banana procesada con sal, agua destilada y shampo
(detergente) mediante los siguientes pasos:

1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).
2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle.
3. En una taza, preparar una solución consistente en una cucharadita de té de
shampo y dos pizcas de sal.
4. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.
5. Disolver la sal y el shampo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico
evitando formar espuma.
6. A la solución preparada en el paso 3, agregar tres cucharaditas de té de la mezcla
de banana del paso 1.
7. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.
8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro
miembro pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otra taza de plástico. Doblar el
borde del filtro alrededor de la taza para que el filtro no toque el fondo de la
taza.
9. Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por
algunos minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear.
10. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío. Para mejores resultados el alcohol
debe estar tan frío como sea posible.
11. Llenar la pipeta plástica con la solución de banana y agregarla al alcohol. El
ADN no es soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los
componentes, excepto el ADN, permanecen en la solución mientras el ADN
precipita en la capa de alcohol.
12. Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el
tubo de ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de
alcohol.
13. Cuando se obtienen buenos resultados, habrá suficiente ADN para levantar con
una varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de
Pasteur que haya sido calentada en la punta para formar un gancho, se puede
recuperar (tomar) algo de ADN. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y
fibroso.

GRACFICOS

Ilustración 1Licuado del Banao Ilustración 2 Materiales de trabajo Ilustración 3 Filtración de ADN
Ilustración 4 ADN Obtenido

RESULTADOS:
• Se pudo observar el ADN precipitado en la parte inferior del tubo de ensayo que
tenia el aspecto de mucosa cristalina con unas burbujas.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
Conclusiones

• Se pudo extraer, precipitar y observar de manera clara el ADN de la banana una vez
que se terminó la práctica.

• El ADN se precipito aproximadamente un centímetro y medio, y se pudo notar una


pequeña parte de material genético un poco más arriba, también unas burbujas
bastante transparentes.

• Se puede observar el ADN debido a las diferentes funciones que cumplieron los
materiales, siendo el Shampo unos de los materiales importantes para la obtención
del AD.

Recomendaciones

• Tener materiales a la temperatura ideal, en el caso del alcohol etílico, el cual debe
tener temperaturas bajas, para poder obtener resultados buenos al momento de
extraer el ADN.

• Tener cuidado al momento de agitar el Shampo, debido a que no se necesita de


mucha espuma para la presente práctica.

Bibliografía
Ambar, E., Andrade, A., & Canela, L. (2021). "EXTRACCIÓN DE ADN". Research
Gate.
Cañedo, R., & Guerrero, J. (2005). Nociones de bioquímica y genética útiles para los
profesionales de la información del sector de la salud. Scielo.
Merino, J., Gallego, R., & Ochoa, J. (2019). Extracción de ADN con material cotidiano:
desarrollo de una estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos
científicos. Scielo.

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