Discusion

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DISCUSION

Las muestras utilizadas en la tinción de Gram se observaron claramente en el microscopio


compuesto. En la primera muestra observada, de
Bacillus., se observó que toda la población en la muestra fijó el cristal violeta y todas las
células quedaron completamente teñidas, adquiriendo una coloración azul oscura, lo cual
nos permite afirmar que de acuerdo con la base teórica de la tinción Gram
Bacilus sp. es una bacteria Gram positiva. De la misma forma, la muestra de las
agrupaciones racimosas de Staphylocccussp. fijó el color azul oscuro, siendo por lo tanto
una bacteria Gram positiva. Finalmente al seguir el procedimiento de la tinción Gram y
observar que la muestra de Escherichia coli fue teñida de un rosado claro, el color de la
safranina utilizada como colorante de contraste. Determinó que la especie es Gram
negativa. Debido a que nuestros resultados observados coinciden con la literatura revisada
acerca de la naturaleza de la pared celular en Bacillussp., Staphylococcus sp. y E. coli
y su respuesta ante la tinción de Gram,

Podemos confirmar que el procedimiento fue correctamente seguido y se respetaron los


pasos y el tiempo requerido para que cada solución actúe sobre las muestras fijadas.
Algunos factores pueden alterar los resultados de las observaciones en una tinción Gram,
factores como la edad del cultivo, el tiempo de coloración, el p$ de los colorantes, el
tiempo de decoloración y de lavado, siendo los puntos críticos la edad del cultivo y el
tiempo de coloración

Las muestras de Bacillussp. yStaphylococcus sp. fijaron fuertemente el cristal violeta. Ya


que las paredes celulares de estos dos géneros poseen un grosor mayor que en bacterias
Gram negativas y presentan una mayor cantidad de enlaces entre subunidades de
peptidoglucano, puede afirmarse que la fuerte fijación del cristal violeta se debe al tipo de
pared celular que poseen. Por otra parte, observamos una tinción menos intensa de la
safranina en la muestra de E. coli, si bien luego del lavado con el decolorante el color del
cristal violeta no permaneció fijado en la muestra, esto es sabido por la poca abundancia de
peptidoglucano en el espacio externo a la membrana citoplasmática E. coli
y la ausencia de enlaces transversales entre capas de peptidoglucano. Debido a que
posterior a la aplicación de safranina no hubo lavado con decolorante alguno, puede
considerarse que la poca intensidad del tinte podrá deberse al tiempo de espera luego de
colocar safranina en la muestra fijada de E. coli. parte de las observaciones ya
mencionadas, las muestras fueron visibles y los materiales y procedimientos permitieron
cumplir el objetivo de la práctica de laboratorio

Finalmente es importante mencionar que observar estos cultivos por separado es en cierta
forma una limitación a la tinción de Gram. Una observación que contraste muestras de
cultivos Gram positivos y Gram negativos en una sola lamina porta/objetos no fue
realizada, este procedimiento podrá permitirnos una práctica más acorde al fin de la tinción
de Gram, que es en sí una tinción diferencial, útil para discernir en la observación de una
sola muestra la presencia de bacterias Gram negativas entre una población de bacterias
Gram positivas o viceversa.

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