Practica 2: Extracción de ADN

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UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MÉXICO - CAMPUS LOMAS VERDES

PRÁCTICA 02. Extracción de ADN


Flurscheim Lopez Ana Paula, Marin Villalobos Adriana Mariel, Santos Bernal Abril
Mariel, Valencia Ortiz Fernanda
Asignatura: Biotecnología Forense
Licenciatura en QFBT
Periodo 2020-2
Fecha de entrega: 25 de Agosto de 2021
Docente: Dr. en C. Silva Escobedo Jesús Gabriel

Resumen:
El DNA se encuentra en el interior del núcleo de las células eucariotas rodeado de proteínas
(histonas) que lo mantienen unido y compactado. Para poder aislarlo y observar se deben
deshacer la membrana plasmática y la envoltura nuclear y también se precisa la
desnaturalización de las proteínas. En esta práctica se llevó a cabo el procedimiento para
realizar estas funciones y también se aclarará el por qué de cada paso.

Palabras clave: DNA , Membrana plasmática , envoltura nuclear , desnaturalización .

Introducción: concepto de célula como unidad funcional


La extracción de ADN (ácido y estructural de los seres vivos.
desoxirribonucleico) con material cotidiano
es una actividad práctica que se realiza Posteriormente se puede tratar la
en eventos de divulgación científica, y estructura celular, recordando que todas
forma parte de las prácticas realizadas en las células están rodeadas por una
institutos y facultades. Habitualmente esta membrana grasa y además, en las células
actividad se centra en mostrar la sencillez de plantas, por una pared celular rígida.
de uno de los métodos clave de la Conocer la composición y características
Biotecnología y en resaltar su importancia de estas dos estructuras es imprescindible
en servicios biotecnológicos, como el para comprender y poder iniciar el
diagnóstico de enfermedades o el análisis proceso de extracción: la composición
forense. Se trata de una práctica grasa de las membranas y la rigidez de la
interdisciplinar, ya que su compresión pared celular determinan el método de
implica relacionar conceptos ruptura celular idóneo.
pertenecientes a Química, Física y Las membranas biológicas, tanto la
Biología. citoplasmática como las de los orgánulos
celulares, están formadas
La actividad comienza con la selección y fundamentalmente por lípidos que se
troceado de una muestra biológica, que organizan en forma de bicapa debido a su
puede ser un vegetal. Este paso sirve carácter anfipático. Esta característica
para recordar que el material hereditario, grasa de las membranas hace que un
ADN, es un atributo común a todos los detergente sea una sustancia adecuada
seres vivos y a algunos agentes para disgregarlas.
acelulares, como los virus. Esto permite
abordar la diversidad de los seres vivos y La actividad enzimática es sensible a la
sus niveles de organización e introducir el temperatura y el pH, entre otros factores,
por lo que ambos deben ser tenidos en
cuenta en el proceso de extracción. La Metodología:
baja temperatura ralentiza la actividad
enzimática, evitando que las moléculas
biológicas, como el ADN, sean
degradadas tras la ruptura de las
membranas celulares que conlleva la
liberación de los componentes
subcelulares.

Planteamiento del problema:


¿Cuál es la importancia de la extracción
de ADN en un crimen?

Justificación:
Las pruebas de ADN son consideradas el Resultados:
estándar de oro como evidencia en cierto
tipo de casos, especialmente en la
identificación. Cada ser humano tiene una
combinación única e irreversible de este
material genético. Por eso la importancia
de la extracción, debido a que en un
hecho delictivo el responsable dejará un
rastro biológico el cual se podrá identificar,
por medio del análisis del ADN, dando
vestigios biológicos del autor sobre la
víctima o el lugar del delito como cabellos,
saliva, células de la piel, semen o sangre,
los cuales servirán para identificar algún
individuo por métodos de Biología
Fig.1. Material para el experimento. (sal, agua
molecular.
fria, alcohol 70%, ablandador de carne,
(Miguel Angel Tadeo Rangel, 2013)
detergente, licuadora y chícharos)

Objetivo General:

● Aislar y observar el DNA de un


chícharo con reactivos caseros.

Fig.2. Mezcla y filtración de los primeros


ingredientes.
Fig.3. Adición de detergente y reposo durante
10 min.

Fig.4. Colocación de enzimas usando


ablandador de carne.

Fig.7. Grupos de ADN enredados.

Análisis de resultados:
Trituración de los chicharos ( Figura 2 )
Incrementar el área superficial ayuda a
hacer la superficie de la membrana más
fácil de disolver y también permite una
absorción más efectiva del calor y de las
soluciones que se añadirán.
Fig.5. Adición de alcohol.
Detergente ( Figura 3 ) : Las membranas
de las células están formadas por dos
capas de lípidos con proteínas
transmembrana a través de estas. El
detergente ayuda a romper la bicapa de
fosfolípidos de las membranas
plasmáticas y la envoltura nuclear
( figura 2).

Ablandador de carne en la solución de


extracción (Figura 4 ) La molécula de
DNA es soluble en agua y por tanto
Fig.6. Separación de las dos fases. invisible, pero si se pone en contacto DNA
que haya estado en un medio salado y
alcohol frío el DNA se vuelve insoluble y
precipita. Por lo tanto el agua salada Referencias:
ayuda a la precipitación en el alcohol. La Miguel Angel Tadeo Rangel. (2013) La
sal también ayuda a separar el DNA de genética forense en México su aplicación legal
las histonas. y el banco de datos Genéticos. Recuperado
de:
https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Po
Los lípidos de la membrana se
rtal2015/Licenciaturas/qfb/tesis/tesis_tadeo_ra
descomponen debido al detergente que
ngel.pdf
deshace las uniones que mantienen la
membrana junta. Cuando el detergente se
pone en contacto con los lípidos éstos se
separan de la membrana rompiéndola. La
estructura de los lípidos es similar a la del
detergente y eso hace que se combinen,
formando una burbuja de detergente y
lípidos (Figura 6 y 7).

El alcohol ( Figura 6 ) actúa como en el


DNA es una molécula polar, pero la
reacción con el etanol a muy baja
temperatura hace que se vuelva apolar e
insoluble en el etanol formándose un
precipitado justo entre la capa con etanol
líquido y la capa con el extracto. El DNA
es el único componente de la solución
que no es soluble en el etanol, y se hace
visible porque las diferentes cadenas se
van aglutinando ( Figura 7 ) entre sí al
precipitar debido a la acción de fuerzas
físicas. El alcohol es menos denso que el
agua del extracto y por eso flota sobre la
capa del extracto.

Conclusión:
La extracción de ADN requiere de un
proceso secuencial, en el cual se trata de
aislar a esta molécula de los demás
componentes de la célula. Todo el
proceso realizado provoca el
desenrollamiento del ADN que tiene la
apariencia de material fibroso.
El procedimiento de extracción de ADN es
un procedimiento de extracción de ácidos
nucleicos, y el cuál puede ser extraído de
cualquier ser vivo, y de cualquier célula.

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