t6 Tarea 1 TGL

Soluciones amortiguadoras María O.
Requesens
2
Disoluciones reguladoras
Introducción
La preparación de tampones constituye

una tarea de rutina en un laboratorio. Su
utilización no solo es indispensable en la
manipulación de cualquier enzima, sino
que todas aquellas técnicas, analíticas o
preparativas, para la separación de
moléculas biológicas capaces de
ionizarse, basadas precisamente en la
diferencia de carga (electroforesis,
cromatografía de intercambio iónico) de
las distintas moléculas implican la
utilización de tampones adecuados que
permitan una ionización diferenciada de
las moléculas y, por tanto, su separación.
Es imprescindible, en consecuencia,
familiarizarse con la preparación y
características de los tampones. ¿Cómo
preparar un tampón adecuado?,¿Cuál es
la capacidad de un tampón?, y, en
definitiva ¿Cómo debe prepararse?.
En este trabajo repasaremos los
conceptos teóricos y practicos del pH,
pKa, disociación de ácidos débiles etc.
Soluciones amortiguadoras María O.Requesens
pKa= - log Ka
1. Las soluciones amortiguadoras
El pH interviene en las reacciones 1.4.Reacción de Henderson-

químicas, de manera que si este no es el Hasselbalch
adecuado, puede no producirse o que el
producto resultante no tenga las Esta ecuación relaciona el pH con el pKa
propiedades esperadas. del ácido y las concentraciones del ácido
y de la sal.
Utilizamos las soluciones
amortiguadoras para mantener el nivel [𝑠𝑎𝑙]
de acidez y basicidad dentro de un 𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + 𝑙𝑜𝑔
[ACIDO ]
intervalo acotado de pH.
Nos dice cuando que cuando se igualan
1.1.Composición de las soluciones la concentración del ácido y la de la sal,
el pH se iguala al pKa, puesto que la
Normalmente podemos encontrar un fracción tenderá a uno, y el logaritmo de
acido débil y una sal del mismo acido 0, es 1. Esta propiedad permite elegir el
con una base fuerte o una base débil y la tampón adecuado en unas condiciones de
sal de esta base con un acido fuerte como pH adecuadas. Se elige el ácido débil con
componentes más simples de estas el pKa mas próximo al pH que se desea
disoluciones. mantener y se ajusta el ph deseado
regulando el cociente entre las
El ácido o la base agregado solo produce concentraciones de la sal y del acido.
un pequeño cambio en la disolución
gracias al tampón amortiguador. Con ella obtenemos las concentraciones
de sal y de acido necesarias.
Además se produce un sistema de La concentración del acido será la
equilibrio. concentración de la disolución menos la
que le corresponde a la sal.
1.2.Constante de disociación
Es la medida de la fuerza de un ácido 2. Ejercicio práctico

débil (Ka) o una base débil (Kb) que no
se disocia totalmente.
Estamos esrudiando un enzima que es
["#$]· [()*+]
𝐾𝑎 = capaz de catalizar las reacciones
[,-./0]
químicas en un rango de un pH próximo
a 2,5. Necesitaremos una disolución
1.3.Pka
apropiada para el estudio. Para ello,
utilizamos los reactivos
Es una magnitud que cuantifica la
H3PO4/KH2PO4 cuyo pKa es igual a
tendencia que tienen las moléculas a
2,1.
disociarse en solución acuosa.
4
2.1.Disolución tampón de 250 mL, 0,035 moles de ácido.

cuya concentración sea de 0,5M.
89$
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑎𝑙 ∶ 0,357 :
· 0,25 L;
Aplicamos la fórmula de Henderson-

0,089 moles de sal.
Hasselbald:
["#$]
pH= pKa + log [,-./0] 𝐴 = 𝜋𝑟 1 Por último, para poder hallar los gramos
que necesitamos de cada sustancia,
Teniendo en cuenta que la concentración usamos el valor de la masa molecular:
de acido es igual la concentración de la
disolución menos la concentración de la H3PO4= (1·3)+ 31 + (16·4) = 98 g/mol
sal:
KH2PO4 = 39 + (1·2) + 31 + (16·4) =
["#$] 136 g/mol
2,5= 2,1 + log 2,45 ["#$] ;
;< =>#89" ?@ áBC?9
0,035 mol ácido · 7 DEF áGHIE
=
["#$] 3,503 gramos del ácido.
2,5 - 2,1= + log 2,45 ["#$] ;
7)J = "#$
#
0,089 mol 7 DEF KLF = 12,104 gramos de la
siendo el log x = a ; 𝑥 = 10
sal.
["#$]
102,6 = ; 3. Procedimiento
2,45 ["#$]
["#$]
2,511= ; Teniendo la
2,45 ["#$] Material:
concentración de la sal como la incognita
de la ecuación [𝑠𝑎𝑙 ] = 𝑥 ; despejamos: • Vaso de precipitado.
• Matraz aforado de 250 mL.
2,511 · (0,5 – x) = x ; 1,255 – 2,511x = x • Pipeta Pasteur.
• Espátula o cucharilla
1,255 = x + 2,511 ; 1,255= 3,511x ;
• Agitador magnético
7,144 • Balanza de precisión
x = ),477 ; x = 0,357 • Papel de filtro o vidrio de reloj
• Imán
[ácido] = 0,5 – 0,357 = 0,143 M
Calculamos los moles de acido y de la 1. Una vez hemos calculado las

sal, mediante la concentración y el cantidades de soluto y disolvente,
volumen de la disolución, 250 los preparamos y pesamos en la
mL(0,25L). balanza de precisión. 3,503
gramos de H3PO4 y 12,104
89$
Moles de ácido: 0,143 · 0,250 L; gramos de KH2PO4.
:
5
Podemos usar varios tipos de

calibración, en este caso calibramos en
tres puntos, ph 7 ,ph 4, ph 9.
2. Como vamos a utilizar agitador
magnético, utilizamos el vaso de Con un vaso de precipitado al lado,
precipitado con agua, sacamos el electrodo de su envase de
introducimos el iman y lo conservación y lo introducimos en el ph
colocamos en el agitador 4. Limpiamos el elcetrodo en el vaso de
magnético. precipitado y secamos, y volvemos a
introducir a un ph 7. Limpiamos y
3. Ponemos en marcha el agitador secamos y volvemos a introducir a ph 9.
magnético y vertemos los 3,503
gramos de ácido en el vaso de
precipitado así como los 12,104 4.2.Medición
gramos de la sal.
Una vez calibrado, introducimos el
4. Enrase. Transferimos la electrodo en la solución amortiguadora
disolución a un matraz aforado para comprobar su pH. El electrodo
de 250 mL con ayuda de un captara los iones para medir el pH.
embudo. Añadimos agua
destilada al matraz hasta enrasar 4.3.Funcionamiento de un pHmetro.
, para ello utilizamos la pipeta
pasteur. Con buen ojo, buscamos El pH-metro está compuesto por:
el menisco. electrodo de referencia (hidrógeno,
calomelanos y plata), electrodo
5. Homogeneizamos la muestra con indicador (metálicos y de membrana), y
movimientos circulares. electrodos combinados.
6. Etiquetamos la solución
amortiguadora. La sonda de pH mide la actividad de los
iones de hidrógeno mediante la
generación de una pequeña cantidad
4. Phmetro. de tensión en el sensor y el tubo de
referencia. El medidor de
Antes de realizar ninguna operación con voltaje convierte a un valor de pH y la
el aparato para medir el pH de la muestra en la pantalla digital,
disolución, comprobamos si esta situado permitiendo así la cómoda medición de
adecuadamente, lo enchufamos, cualquier líquido o suelo.
chequeamos el electrodo y la sonda de
temperatura si están correctamente Por otro lado algunos medidores de
conectados, vigilamos la temperatura y pH digitales vienen con una función
la humedad del ambiente, comprobamos denominada compensación automática
que el mismo electrodo esta bien de temperatura. Éstos medidores tienen
conservado y que la membrana de vidrio un termómetro
no presenta fisuras y esta limpia. incorporado que automáticamente se
ajusta para cualquier discrepancia de
4.1.Calibración la línea de base de 25 °C.
Es importante hacer un mantenimiento

de los phmetros y seguir las
instrucciones del fabricante.
6
o
La calibración es fundamental para el
proceso de medición del pH y para el
mantenimiento del propio equipo.
Imagen 1. Phmetro. Funcionamiento,

calibración y puesta en marcha practica.
Foto tomada por la autora.
Imagen 2. Medir el ph de una solución.

Foto tomada por la autora.
7
5. Bibliografía
o Altamar Editorial, A. E. (2021). Técnicas generales de laboratorio. Atlántida
CIDEP. https://anatomia.atlantidavirtual.es/mod/resource/view.php?id=4369

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La preparación de tampones constituye

El pH interviene en las reacciones 1.4.Reacción de Henderson-

Es la medida de la fuerza de un ácido 2. Ejercicio práctico

2.1.Disolución tampón de 250 mL, 0,035 moles de ácido.

Aplicamos la fórmula de Henderson-

Calculamos los moles de acido y de la 1. Una vez hemos calculado las

Podemos usar varios tipos de

Es importante hacer un mantenimiento

Imagen 1. Phmetro. Funcionamiento,

Imagen 2. Medir el ph de una solución.

o Altamar Editorial, A. E. (2021). Técnicas generales de laboratorio. Atlántida

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