UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CURSO DE ECOLOGIA GENERAL

Practica Nº 12

1.TEMA: PROCEDIMIENTOS PARA LA DETERMINACIÓN DE LA

DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO (DBO)

A.- La demanda bioquímica de oxígeno (DBO) es una forma de estimar el

oxígeno que una población microbiana heterogénea requiere en un tiempo y
a una temperatura dados para oxidar la materia orgánica en una muestra de
agua.

B.- Su DBO normalmente se determina después de cinco días (DBO 5). Esto
no indica nada acerca de la velocidad de reacción.

1. El método de determinación de DBO5 varía de un laboratorio a otro.

2. En esta conferencia discutiremos algunos de los métodos
desarrollados y aceptados internacionalmente para la determinación
de la DBO5 (ver última edición de los Métodos Estándares para el
Análisis de Aguas y Aguas de Desecho).
3. La determinación de la curva de DBO ( ej. DBO después de 1, 3, 5, 7 y
14 días) permite estimar l DBO total o la DBO después de un tiempo t

C.- Método Directo

1. Con agua superficiales no muy contaminadas (aquellas cuya DBO 5 es

menor que 8) se puede incubar la muestra sin diluir.
2. Con desechos domésticos e industriales, efluentes tratados, y con
aguas superficiales contaminadas es necesaria diluir la muestra antes
de incubarla.
En general.

DBO5, mg/l % de muestra

5 – 20 25 - 100 Ríos contaminados
20 – 100 5 – 25 Efluentes de desechos tratados
100 – 500 1–5 Desechos domésticos
500 – 5000 0.1 – 1.0 Desechos industriales

El agua de dilución consiste en fosfato, sulfato de magnesio, cloruro de

calcio, cloruro férrico (véase Métodos Estándares para mayores detalles), y
sirve tanto par amortiguar la solución (pH 7.2) como proveer ciertos
nutrientes básicos.
D. Procedimientos.

1.- Técnica de dilución de cilindros

a. Estime la DBO5 de la muestra y determine las diluciones a ser
utilizadas; las que consumen por los menos 2 mg/l y dejan un residuo
de 1 mg/l son las más confiables. Para muestras desconocidas deben
usarse por lo menos tres diluciones por duplicado.
b. Prepare la dilución deseada en un cilindro graduado de un litro (o en
un recipiente más grande sí es necesario).
c. Pase la mezcla del cilindro a tres botellas de 300 ml c/u.
d. Determine la concentración de O.D. de una de las botellas por el
método Winkler. Esto corresponde al “O.D. inicial”.
e. Incube las otras dos botellas a 20 ºC en la oscuridad. Las tapas de las
botellas deben quedar selladas con agua.
f. Después de cinco días de incubación, u otro tiempo deseado,
determine oxígeno disuelto en las botellas. El promedio de los
resultados es el “O.D”

2.- Técnica de dilución directa

a. Se hace la dilución con cuidado directamente en una botella de 300
ml, o de otro volumen conocido.
b. Se sigue el proceso como en 1 d, e y f.

3.- Técnica de dilución en cilíndricos y con inóculo.

a. Muchos desechos son estériles (sin bacteria) debido a una cloración,
efectos de tóxicos, calor, pH desfavorables, u otro factor. La validez del
resultado de la DBO depende de la presencia de organismos. En tales
casos es necesario corregir la causa de la condición estéril ( ej. Ajuste
del pH) y después inocular el agua con microorganismos.
Generalmente se obtienen los microorganismos de aguas residuales
domésticas guardadas a 20 ºC durante 24 a 36 horas. La
concentración normal del inóculo es de 1 a 2 ml por litro de agua de
dilución. Algunas muestras muy tóxicas requieren de un inóculo que
puede corresponde al efluente del proceso biológico que trata el
desecho tóxico o la corriente receptora, aguas debajo de la descarga
del desecho.
b. Determine mediante ensayos la cantidad necesaria del inóculo. La
concentración debe causar un comienzo de actividad biológico in tener
una DBO propia que influya en los resultados de la muestra.
c. Estime la concentración de la muestra deseada de acuerdo con 1a y 3
a.
d. Agregue aproximadamente la mitad del agua de dilución necesaria, la
cual se requiere para asegurase la ausencia de un efecto de toxicidad
en los organismos del inóculo.
e. Mida una cantidad de inóculo y agréguelo al cilindro. Llene el cilindro
con agua de dilución.
f. Proceda igual que las secciones 1d, e y f.
4.- Cálculo de DBO

a. Sin inoculación:

mg/l DBO =

b. Con inoculación:

mg/l DBO =

c. Incluyendo Demanda de Oxígeno Disuelto Inmediato (DODI)

Mg/l DBO =

d. Demanda de Oxígeno Disuelto Inmediato (DODI)

DODI =

El valor de DC puede ser calculado o determinado directamente.

En todas las fórmulas dadas:

Do = OD del agua de dilución.
D1 = OD de la muestra diluida 15 min. después de la preparación.
D2 = OD de la muestra diluida después de incubar.
S = OD de la muestra original sin diluir
p = fracción decimal de agua de dilución empleada
Dc = OD en muestra diluida a tiempo c ero
= Dop + SP
B1 = OD de dilución de inóculo (control antes de incubar
B2 = OD de dilución de inóculo (control) después de incubar
f = razón de inóculo en muestra e inoculo en control

% inóculo en D1
% inóculo en B1
corrección del inóculo – (B1- B2) f

E.- Interpretación d e los resultados

1. El ensayo de la DBO tiene una mayor aplicación en la medición de la

carga orgánica de aguas residuales y en la evaluación de la eficiencia de
remoción de la DBO en plantas de tratamiento de aguas residuales. La
comparación de valores de la DBO no es válida a menos que los resultados
hayan sido obtenidos bajo las mismas condiciones de ensayo.

2. El ensayo es de un valor limitado en la medición de la DBO de aguas

superficiales debido a que la extrapolación de sus resultados a las
demandas reales de oxígeno en las corrientes de agua es muy dudosa. Esto
se debe a que el ambiente del laboratorio no reproduce las condiciones de la
corriente (río) con respecto a factores tales con temperatura, luz solar,
población biológica, movimiento de agua y concentración de oxígeno.

3. Un estudio hecho por la Agencia de Protección Ambiental en los Estados

Unidos (1971) dio los siguientes resultados con relación a la exactitud y
precisión en el ensayo de la DBO:
Aguas Aguas
Destiladas/ Inoculadas Naturales
Numero de muestras de población 86 73
Valor verdadero, mg DBO/litro 2.2 194
Exactitud como porcentaje de error -3.7 -9.8
relativo
Desviación Estándar mg DBO/litro 0.7 26
Desviación relativa, % 33.2 15.0
Rango, mg DBO/litro 5.5 118

F: Técnica de Reaeración para la Determinación de la DBO (Alternativa)

1.- Consiste en hacer una reaeración cuando el O.D baja a

aproximadamente 1.0 mg/l, y posteriormente se determina nuevamente la
DBO. La DBO se calcula en base a la suma de oxígeno consumido.

2.- Es común usar un electrodo especial para medir oxígeno disuelto y así
evitar el gasto de muestras necesarias en el método de Winkler.

3.- No es recomendable utilizar este método cuando la DBO excede 50 mg/l.

II.- EFECTO DE ALGUNAS VAIABLES EN EL ENSAYO DE DBO

A.- Tiempo
1.- ecuación básica de la DBO,
Y1 = L(1-10k1t) incluye el tiempo como variable.
La constante K1 indica que una cantidad específica de oxígeno será
consumida durante cada intervalo.

2.- El trabajo preparado por Adney (Informe a la Comisión Real Británica)

cita cinco días como máximo para tiempo entre la descarga en la fuente y su
llegada al mar en las corrientes inglesas. El octavo Informa (1909) estableció
la filosofía del ensayo de la DBO, incluyendo los cinco días. Cualquier valor,
que sea de cinco días o más , no da ningún resultado sobre el valor de la
DBO total. Por ejemplo, el porcentaje de materia varía en la siguiente forma,
según el valor del constante K1:
K1 %oxidado en 5 días
0.15 42
0.10 67
0.15 84
0.25 94
0.50 99

B. Temperatura
1.- Para el efecto de tasa de oxidación la corrección de temperatura es dad
por:

= (T1 – T2)

donde :
k1= constante a temperatura T1
k2= constante a temperatura T2
= coeficiente de temperatura. Streeter y Phelps encontraron el valor de
1.047 para el rengo de temperatura entre 15-30ºC

Para un valor de = 1.047, k = 0.04 a 0 ºC

K= 0.10 a 20 ºC

C.- pH

1.- Normalmente, un rango de pH entre 6.5 y 8.3 es aceptable.

2.- Si el pH es mayor que 8.3 o menor que 6.5, se recomienda un ajuste del
pH a 7.2
3.- El agua de dilución es amortiguada a pH 7.2

D.- Nutrientes esenciales

1.- La diferencia de minerales, nitrógeno y fósforo en aguas industriales, son

causa común de valores bajos de la DBO
2.- El contenido de minerales del agua de dilución, se aproxima al promedio
del contenido de minerales de las aguas superficiales de los Estados Unidos.

E.- Población Microbiológica

1.- Cuando hay varias especies la degradación de desechos es más efectiva

que cuando hay una sola.

2.- En general, los microorganismos demoran, desde algunas horas hasta

algunas semanas, en adaptarse a nuevas condiciones ambientales.

3.- Una inoculación obtenida d la corriente que recibe el desecho se

aproxima más a la realidad.
4.- Las algas pueden causar variaciones importantes en el O.D. de las aguas
superficiales.

F.- Toxicidad.

1.- La toxicidad `puede producir en período de “retraso”, debido al tiempo de

adaptación requerido por los organismos.

2.- Se puede determinar la presencia de toxicidad por medio de diluciones,

puesto que el efecto del tóxico disminuye o desaparece a medida que
disminuye la concentración del desecho como indican los siguientes datos.

Conc. De Desecho % Cons. De Oxigeno en mg/l DBO5 mg/l

10 3.51 35
5 4.53 91
2 2.80 140
1 1.52 152
0.5 0.74 148

G.- Nitrificación

1.- La DBO ocurre en dos etapas:

a.- La primera etapa (carbonácea) corresponde a la oxidación de los

compuestos orgánicos.
O2
CHO CO2 + H2O

b.- La segunda etapa (nitrógeno) corresponde a la oxidación de amoníaco y

otros compuestos de nitrógeno.
O2
NH3 NO2 NO3

c.- A veces las dos etapas ocurren simultáneamente

Yt = [ Lc ( 1 – 10kct) + Lo (1 – 10kn5)]

Cuando
i.- Hay bacterias nitrificantes
ii.- Hay O.D. insuficiente (0.5 – 1.0 mg/l)
iii.- El nitrógeno está presente en exceso de la concentración requerida
(-7 mg/l)
iv.- Hay ausencia de tóxicos

2. Normalmente la nitrificación ocurre después de la demanda carbonácea.

La población nitrificante demora de 5 a 10 días para establecerse.

3.- El grado de nitrificación puede determinarse solamente por medio de un

análisis periódico de amoníaco, nitrógeno-orgánico, nitrito, y nitrato.
La conversión de amoníaco y nitrógeno orgánico a nitrógeno oxidado (nitrito
y nitrato)es un indicador de nitrificación.

4.- Se requiere el doble de oxígeno tanto par convertir NH 3 – N a NO3 – N

como para convertir C a CO2, y en consecuencia la nitrificación puede ser un
factor importante en una corriente de agua.

H.- Efecto de Dilución.

Los valores d e DBO varían según la dilución. Por lo tanto se obtiene

solamente un valor aproximado de DBO

Concentración de O.D. Consumo de DNO, mg/l

la muestra oxígeno mg/l
Inicial 8.2 - -
Final 1% 5.5 2.7 270
2% 3.3 4.9 245
4% 0.0 completo -

III.- BASES MATEMÁTICAS DE LA DBO

A.- Teóricamente, el tiempo requerido para completar la bioxidación de la
materia orgánica es infinitamente largo. Por lo tanto , la tasa de cambio con
el tiempo de concentración de la materia orgánica dL/dt depende de la
cantidad de material biodegradable “ L” que existe en un momento dado. Es-
ta relación suele ser representante matemáticamente así:

dL = - KL (1)
dt

dL = - Kdt
L

Donde:
K: coefciente
L = concentración (por satisfacer) de la DBO en mg/l

Integrando la expresión anterior:

ln Lt = -Kt (2)
L

En término de logaritmos comunes:

log Lt = -Kt
L (3)
o Lt = 10-Kt
L
Generalmente se usa K mayúscula cuando se trabaja con logaritmos
neperianos y K minúscula cuando la expresión se presenta en logaritmos
comunes. La fracción de DBO que queda es por lo tanto L t/L ó 10-Kt y la
parte oxidada es:
1 –Lt =1- 10-Kt (4)
L

Multiplicando ambos lados de la expresión por L:

L – Lt = L ( 1 -10-Kt) (5)

En la cual L – Lt es la cantidad de material biodegradable oxidada en el

tiempo T
Usualmente la ecuación se escribe así:
y= L( 1 -10-K1t) (6)

En donde y = L-Lt es la DBO, satisfecha en el tiempo t tal como se mide en el

laboratorio (mg/l).

L = Demanda total (última) que corresponde a la oxidación completa de

materia biodegradable.
t = Intervalo de tiempo a partir del comienzo del ensayo (días)
K1= Constante de la reacción o de desoxigenación (días –1)

B.- Existe varios métodos para determinar los valores de k1 y L

1.- Método simplificado de Susag. Consiste en construir una curva en base a

tres puntos equidistantes.

K= log

Donde t se refiere a cualquier unidad de tiempo.

2.- Método de laboratorio para establecer la constante partir de la curva por

medición del decaimiento de oxígeno, los días, 1, 2, 4, 5, 6, 7, 10, etc.

3.- Método de relación rápida

Referencia: J.P Sheehy, Journal WPCF, Vol. 32, 646 (Junio, 1960)

4.- Método de la pendiente de Thomas

Referencia : Thomas, Sewage Works Journal, Vol. IX, Nº3 , p 425 (Mayo ,
1973)

05.- Método gráfico de Thomas

Referencia : Thomas, Water and Sewage Works , 97, 123 (Marzo , 1950)
06.- Método de los momentos de Moore, Thomas y Snow
Referencia : E.W. Moore, H.A. Thomas y W.B Snow, Sewage Ind. Wastas, 22,
1343 (1950)

7.- Método de las referencias diarias de Tsivoglou

Referencia Tech. Rpt. W 58-2, U.S. Public Héalth Service (1958)

8. Método de Reed Theriault

Referencia: Public Health Bulletin (1927). Programa de computación en el
CEPIS

IV.- DEMANDA QUÍMICA DE OXIGENOP (DQO) Y RELACIÓN ENTRE DQO

Y DBO

A.- Definición
1.-La DQO es una estimación de la materia susceptible de ser oxidada por
un oxidante de químico fuerte
2.-Una variedad de términos han sido y son utilizados parea el ensayo
descrito como DQO
a. Oxígeno adsorbido (OA) utilizado principalmente por los ingleses.
b. Oxígeno Consumido (OC) – no muy popular
c. Demanda Química de Oxígeno (DQO) – usado comúnmente hoy en día
d. Demanda Completa de oxígeno (DCO) – nombre equivocado
e. Demanda de Oxígeno Dicromado (DOD)- Utilizado PARa distinguir el
método de dicromato de los que utilizan otros oxidantes.

3.-El concepto de DQO es casi tan antiguo como el de DBO. Muchos

oxidantes han sido utilizados pero ninguno es completamente satisfactorio.
a.- Se ha investigado el sulfato cérico, pero no ha dado resultados
satisfactorios.

b.- El permanganato de potasio fue uno de los primeros oxidante

utilizados en Inglaterra en un ensayo de cuatro horas a temperatura
ambiental, y se encontró que sus resultados no son reproducibles.

c.- El iodato de potasio o el ácido iódico son excelentes oxidantes, pero los
métodos que emplea esta reacción demandan tiempo y requieren un
control exacto

d.- El dicromato de potasio es un excelente oxidante y ha dado muy

buenos resultados. Ha sido comparado estadísticamente con otros
oxidantes (Anal. Chm,23:1297,1951)

e.,- Muchos investigadores han tratado de determinar carbón elemental.

i.- Van Slyke – utilizó mezcla de oxidantes
ii.- Van Hall – Tubo de combustión con detector por infrarrojo.
 CALCULO DE LOS RESULTADOS

Método Gráfico
El valor en mg/l de OD restante se determinó para una serie de cuatro
diluciones de aguas cloacales de origen doméstico después de cinco días
de incubación, Los resultados fueron los siguientes:

ml de muestra seleccionada mg/l de OD restante

2.0 7.50
3.0 6.75
6.0 4.50
9.0 2.25

Los valores de OD se trazaron contra el valor en ml de muestra

seleccionada y una línea recta dibujada como se muestra en la Fig 1. Si
se realiza correctamente un conjunto d e diluciones de DBO con una
muestra homogénea, la gráfica del valor en mg/l de OD restante contra el
volumen de la muestra resultaría en una línea recta. El valor de la
intersección de la recta con el eje Y es igual al contenido de OD del agua
de dilución después de la incubación, a pesar de que no se ha medido
realmente. En este caso, fue igual a 9.0 mg/l y la OD de la muestra de
aguas cloacales de origen doméstico se supuso igual a cero. Si se utiliza
otro tipo de muestra, se debe medir la OD de una muestra sin diluir ya
sea con la titulación Winkler o potenciométricamente.

La fórmula de la Asociación para la Salud pública de EE.UU. (APHA)para

calcular la DBO también se puede escribir como se indica a continuación
( no está aprobada para fines de información):

Valor en mg/l de OD Valor en mg/l de OD

restante con un volumen - Restante con un volumen
de muestra menor de muestra menor x 300-ODD + S
ml del volumen ml del volumen
de muestra mayor - de muestra mayor
= valor en mg/l de DBO

Utilizando esta Información en el ejemplo anterior:

Valor en mg/l de OD restante con un volumen de muestra menor = 7.50
Valor en mg/l de OD restante con un volumen de muestra mayor = 2.25
ml de volumen de muestra mayor = 9.0
ml de volumen de muestra menor = 2.0
300= volumen (ml) de la botella _DBO
ODD = mg/l de OD del agua de dilución = 9.0
S = valor en mg/l de OD de la muestra = suponemos en este caso que es
cero
Por lo tanto:

0.75 x 300 – 9 =
225 – 9 =
216 = mg/l DBO

Utilizando la ecuación del Paso 10:

(pendiente x 300) – intersección con el eje y + OD de la muestra = mg/l de
DBO

Donde :
Pendiente = seleccionamos arbitrariamente el punto A en la –Figura 1. En
este punto, el mg/l de OD restante es igual a 3.0 mg/l. El valor en ml de
muestra en este punto es 8 ml. La diferencia entre la intersección con el eje
Y de 9.0 mg/l y 3.0 mg/l es igual a 6 mg/l 6 mg/l divido por 8 ml = 0.75
mg/l por ml

Intersección con el eje Y = 9.0 mg/l

OD de la muestra = Debido a que la muestra es de desechos de origen

doméstico, suponemos que es cero.

Por lo tanto:
(0.75 x 300) – 9.0 + 0 = DBO
225 – 9 = 216 mg/l DBO

Métodos Estándar
Cuando el agua de dilución no está sembrada:

DBO5 mg/l =

Cuando el agua de dilución esta sembrada:

DBO5 mg/l =

Donde:
D1 = OD de la muestra diluida inmediamente después de la preparación,
mg/l
D2 = OD de la muestra diluida después de 5 días de incubación a 20 ºC,
mg/l

p = fracción volumétrica decimal de la muestra utilizada.

B1 = OD del control del cultivo antes de la incubación, mg/l
B2 = OD del control del cultivo después de la incubación en mg/l y.

f = relación entre el cultivo de la muestra diluida y el cultivo en el

control del cultivo = (% de cultivo en la muestra diluida)(% del cultivo en el
control del cultivo)

Si se agrega material de cultivo directamente a la muestra o a las botellas de

control de cultivo:
f = (volumen del cultivo en la muestra diluida) / (volumen de cultivo en
el control del cultivo)

Si la nitrificación está inhibida, informe los resultados como CDBO 5. Si más

de una dilución cumple con los criterios de una OD residual de 1 mg/l como
mínimo y no hay evidencia de toxicidad en mayores concentraciones de
muestras o de la existencia de una anomalía evidente, el promedio resulta en
el rango aceptado.

Ing. Jose A. Soplin R.

Docente del Curso