Practica 08 Informe Extracción de ADN y Electroforesis
Practica 08 Informe Extracción de ADN y Electroforesis
Practica 08 Informe Extracción de ADN y Electroforesis
DOCENTE:
ESTUDIANTES:
TRUJILLO - 2022
INTRODUCCIÓN:
MH22
OBJETIVO
MATERIALES Y EQUIPOS:
1. Materiales
Fresa
Papel filtro
Gasa
Bolsa Ziploc
Champú o detergente transparente
Mortero y pilón
Microtubos de centrífuga
Gotero
Beakers
Sal de mesa
2. Equipos
Ultracentrífuga
Nanofotómetro
1. Materiales
Búfer TAE 50x
Agarosa
GelRed
Marcadore de peso
Microtubos de centrífuga
Puntas de plástico
Parafilm
Dye para ADN
2. Equipos
Ultracentrífuga
Nanofotómetro
Cámara de electroforesis horizontal
Fotodocumentador
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MÉTODO:
Dilución en Agua
Diluir con 1000ul de agua destilada diluir el pellet con la punta de la micropipeta.
Agitar con vórtex y colocar en agitador térmico a 60°C por 10 minutos.
Conservación de ADN
Rotular y conservar en congelación a -20°C para electroforesis
posterior.
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2. Preparación de Muestras para Corrido Electroforético
Preparar parafilm con la misma rotulación de las muestras que se van a analizar. Agregar
1 parafilm para marcador de peso molecular.
El volumen final en cada vial será de 10ul, en que se colocan muestra, agua y dye. Se
recomienda:
- 2ul de dye.
- 3ul de muestra (la proporción de la muestra puede variar, dependiendo de la
concentración de ADN en cada muestra y la muestra se reemplaza por Ladder 1Kb para
los viales con marcador de peso molecular).
- 5ul de agua grado molecular (la proporción de agua puede variar, dependiendo de la
cantidad de muestra que se agregó).
Agitar las muestras con vórtex y centrifugar 1 minuto a 12000 rpm para asegurar que toda
la muestra vaya al fondo del vial.
Mantener los viales en hielo, mientras se prepara el sistema de electroforesis.
MH22
Verificar el corrido de la muestra en la dirección correcta, según la separación de los
colorantes del dye.
Interpretación de bandas
Se espera aparición de 1 banda correspondientes al ADN genómico.
Explicar la presencia de barridos, más de una banda, o ausencia de la misma.
RESULTADOS:
Podemos apreciar que los primeros dos resultados son de las muestras de guía
lo que nos indica que ninguna muestra tomada por los grupos pudo extraer
ADN
MH22
DISCUSIÓN:
BIBLIOGRAFIA:
MH22
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