2022 11 Influenza Aviar IDEXX

IDEXX Poultry
IDEXX Livestock, PoultryDiagnostics

and Dairy
Influenza Aviar
Rodrigo Cascante MVZ
Poultry Sales Consultant Sr. Mexico & LAD
[email protected]
© 2022 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. 0

IDEXX Poultry
and Dairy
El virus, aspectos clínicos y

epidemiológicos

IDEXX Poultry
and Dairy
Virus de Influenza Aviar
Género: Alphainfluenzavirus
Especie: Virus de Influenza A
✓ Genoma segmentado: 8 segmentos de RNA
✓ Dos proteínas de superficie

✓ Hemaglutinina HA Mutación / Deriva antigénica
✓ Factor de virulencia
✓ 16 subtipos
✓ Neuraminidasa NA Recombinación Romero Beltrán Lesly
(2020). Virus de
Influenza, mucho más
✓ Evita la aglomeración de viriones que solo Hemaglutinina.
Avicultura.mx
✓ 9 subtipos

IDEXX Poultry
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Pruebas serológicas
El Virus de Influenza Aviar

Género: Alphainfluenzavirus
Especie: Virus de Influenza A
✓ Genoma segmentado: 8 segmentos de RNA

Romero Beltrán Lesly
➢ Segmento 1 Polimerasa PB2 Transcripción de RNAv a RNAm (2020). Virus de
Influenza, mucho más
➢ Segmento 2 Polimerasa PB1 Elongación de RNAm y RNAv, factor de virulencia, replicación que solo Hemaglutinina.
viral, coinfección bacteriana, modula respuesta inmune Avicultura.mx
➢ Segmento 3 Polimerasa PA Actividad endonucleasa y de replicación viral

➢ Segmento 4 Hemaglutinina Reconocimiento e ingreso del virus a la célula huésped
➢ Segmento 5 Nucleoproteína Encapsulamiento del RNAv, activación de LT citotóxicos
➢ Segmento 6 Neuraminidasa Liberación de la progenie viral, inhibe actividad del moco
➢ Segmento 7 Matriz: M1 y M2 Componente estructural de los viriones
➢ Segmento 8 NS No estructural, inhibición del interferón

IDEXX Livestock, Poultry and Dairy
Virus de Influenza A
Mamíferos Aves
Patos Aves Aves
Subtipo Humanos Suinos Equinos silvestres costeras comerciales
H1 ++ ++ + + ++
H2 (++) + + +
H3 + ++ ++ ++ +
H4 ± ++ + +
H5 ± ± + + ++
H6 ++ + +
H7 ± ± (++) + + ++
H8 + +
H9 ± ± + ++ ++
H10 + + +
H11 + + +
H12 + +
H13 ++ +
H14 +
H15 + +
H16 +
H17N10: detectado en murciélagos en Guatemala
Tomado de Mary Pantin Jackwood USDA
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Ciclo Infeccioso

IDEXX Poultry
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Hemaglutinina y Neuraminidasa
Segmento del
Polipéptido Función
genoma
HA Hemoaglutinina Se enlaza a glicoproteínas y glicolípidos
de la membrana celular que contienen
ácido siálico y que son usados como
receptores para la infección viral
NA Neuraminidasa Degrada el ácido siálico de las

glicoproteínas y glicolípidos usados
como receptores para la infección viral

Determinantes de Virulencia
Virulencia Secuencia de aminoácidos en sitio

Cepa
HAa HA1-HA2a
A/Chicken/Morelos/433/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/Puebla/437/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/Aguascalientes/438/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/Aguascalientes/434/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/México/426/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/Querétaro/386/2015 Baja PQRKTR↓G
A/Chicken/Puebla/439/2015. 2 Baja PQRKTR↓G

R = Arginina
K = Lisina A/Chicken/Puebla/435/2015 Baja PQRKTR↓G
Angel E. Absalón, CIBA-IPN Tlaxcala

R = Arginina
K = Lisina

R = Arginina
K = Lisina

Baja y Alta Patogenicidad
R = Arginina
K = Lisina

Baja y Alta Patogenicidad
✓ Son una familia diversa de monosacáridos

✓ Se expresan ampliamente en todas las superficies celulares de los vertebrados, invertebrados
más evolucionados y ciertas bacterias que interactúan con los vertebrados
http://www.bionova.org.es/animbio/anim/influenza.swf
Baja Patogenicidad
Lesiones respiratorias son las más comunes
Característica inflamación catarral, fibrinosa, serofibrinosa, mucopurulenta y fibrinopurulenta
✓ Tráquea Edema, congestión y hemorragia ocasional, exudado seroso o caseoso con oclusión de
vías aéreas
✓ Sacos aéreos Exudado fibrinopurulento con infección bacteriana secundaria
✓ Seno infraorbital Inflamación con exudado mucoso a mucopurulento
✓ Pulmón Bronconeumonía fibrinopurulenta con infección bacteriana secundaria por Pasteurella
multocida o Escherichia coli
✓ Intestino Enteritis catarral a fibrinosa
✓ Oviducto Inflamación con exudado catarral a fibrinoso, edema, con problemas de calcificación de
cascarón, huevos en fárfara, huevos deformes, huevos frágiles y huevos con pigmentación
deficiente
✓ Ovarios Regresión ovárica, inicia con hemorragia en folículos grandes y progresa a la regresión
✓ Cavidad celómica Inflamación catarral a fibrinosa y postura abdominal
Ocasionalmente….
✓ Riñón Nefromegalia con deposición visceral de uratos
✓ Páncreas Firme, palidez moteada y hemorragia Swayne, David (Editor in chief),
(2020). Diseases of Poultry. AAAP

Sinusitis IABP

Sinusitis: Exudado fibrinopurulento en
senos nasales (corte transversal de
cabeza) IABP

Aerosaculitis IABP

Bronconeumonía IABP

Regresión o atresia de folículos
ováricos IABP

Postura abdominal con peritonitis

IABP

Calcificación deficiente en IDEXX Livestock, Poultry and Dairy
el cascarón IABP
Brugère-P Jeanne (editor). Manual

de patología Aviar. (2015) AFAS
(Asociación Francesa para el
avance de las ciencias)
Alta Patogenicidad

MUERTE SÚBITA
https://www.nadis.org.uk/disease-a-z/game-birds/avian-influenza/
https://www.nadis.org.uk/disease- Brugère-P Jeanne (editor). Manual

a-z/game-birds/avian-influenza/ de patología Aviar. (2015) AFAS

Alta Patogenicidad
Variedad de lesiones edematosas, hemorrágicas y necróticas en órganos viscerales y piel
✓ Muerte súbita No se observan lesiones macroscópicas

✓ Cabeza y cara Edema subcutáneo con hemorragias petequiales o equimóticas, edema periorbital
✓ Cuello Edema subcutáneo con hemorragias petequiales o equimóticas
✓ Patas Edema subcutáneo con hemorragias petequiales o equimóticas
✓ Piel Focos necróticos, hemorragia, cianosis en apterilos, cresta y barbillas
✓ Órganos viscerales Hemorragias en superficies serosos y mucosas y focos necróticos en el parénquima
✓ Corazón Hemorragia en pericardio
✓ Músculo Hemorragia en pechuga
✓ Corazón Hemorragia en pericardio
✓ Proventrículo Hemorragia
✓ Ventrículo Hemorragia
✓ Placas de Peyer Necrosis y hemorragia
✓ Pulmón Hemorragia y edema severos, neumonía intersticial difusa, congestión
✓ Páncreas Focos necróticos
✓ Bazo Focos necróticos, esplenomegalia
✓ Higado Focos necróticos
✓ Riñón Focos necróticos, depósitos de uratos Swayne, David (Editor in chief),
✓ Bolsa cloacal Atrofia (2020). Diseases of Poultry. AAAP
✓ Timo
© 2022 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved.
Atrofia 22
Necrosis multifocal y hemorragia de
cresta y barbillas IAAP 7DPI
Swayne, David (Editor in chief),

Edema severo de cresta y barbillas

con edema periorbital y necrosis de la
epidermis en la base de la cresta
IAAP 7DPI

Necrosis de cresta y barbillas

IAAP

avance de las ciencias) 25
Hemorragias subcutáneas severas de

las patas en pollo de 3 semanas de
edad IAAP 5DPI

Necrosis subcutánea de cojinetes
plantares IAAP

avance de las ciencias) 27
Signos nerviosos
IAAP

Hemorragias petequiales en grasa del

epicardio IAAP 4DPI

Sufusiones en Corazón IAAP

Hemorragia y edema pulmonar
severos IAAP 2DPI

Enfisema y edema pulmonar IAAP Neumonía hemorrágica IAAP

Hemorragias petequiales en mucosa
alrededor de las glándulas
proventriculares en pollo de 3
semanas de edad IAAP 2DPI

Necrosis y hemorragia en la mucosa

del proventrículo IAAP

Hemorragia y necrosis del páncreas
IAAP 2.5DPI

Pancreatitis necrosante IAAP

avance
© 2022 de las ciencias)
IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. 36
Hemorragia en tejido linfoide de las

placas de Peyer, divertículo de Meckel
en el yeyuno y tonsilas cecales en
pollo de 3 semanas de edad IAAP
1DPI
Nefromegalia y hemorragia en riñón

IAAP

avance
Necrosis en bazo IAAP

avance
✓ 44 IAAP epizoóticos con distintos

linajes virales que han tenido
mutaciones de hemaglutininas H5 y
H7 de IABP
✓ La mayoría fueron emergentes y
erradicados
✓ Algunos permanecieron = H5Nx
euroasiático y H7N3 norteamericano
Dr. David Swayne:

Laboratory Director at Poultry Research Laboratory in Athens, Georgia

Ecología / Epidemiología Aves acuáticas IDEXX Livestock, Poultry and Dairy
silvestres
del Virus de Influenza Aviar
Aves acuáticas
domésticas
IABP
(H1-16)
Principal reservorio
Aves terrestres Aves terrestres IAAP

domésticas domésticas H5Nx
HA H5/H7 Aves acuáticas

IABP Mutación IAAP silvestres
(H1-13) (H5Nx, H7Nx)

Anas carolinensis Anas americana Anas platyrhynchos Anas acuta
Anas strepera Aix sponsa Accipiter cooperii Falco rusticolus
Falco peregrinus
© 2022 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. Haliaeetus leucocephalus42 Bueo jamaicensis Bubo virginianus
Infectividad IAAP H5N2 2014-2015 en Norteamérica
Dr. David Swayne:

Laboratory Director at Poultry
Research Laboratory in
Athens, Georgia
✓ Introducción única y diseminación inicial por aves

acuáticas silvestres
✓ Diseminación posterior de granja a granja vía la actividad
humana
Aparición de nuevos linajes H5Nx y H7Nx: 1959 - 2020
Dr. David Swayne:

Linaje Euroasiático IAAP H5 Gs/GD

✓ Desde 1996 la HA H5 ha cambiado gradualmente
(deriva antigénica) hasta formar clados
genéticamente divergentes del IAAP H5
✓ El linaje actual es el quinto clado identificado:
2.3.4.4a, 2.3.4.4b, 2.3.4.4c…….. 2.3.4.4h
✓ La recombinación genética de la NA ha generado:
H5N1, H5N2….. <<<<<<H5N9 y otras
recombinaciones en 6 segmentos genéticos
✓ El linaje 2.3.4.4b se mantiene en poblaciones de
aves acuáticas silvestres
✓ Existe detección de este linaje en aves acuáticas
migratorias y aves terrestres domésticas en algunas
regiones geográficas
Linaje de H5 A/Goose/Guangdong/1/1996 (gs/GD)

Dr. David Swayne:

Linaje Euroasiático IAAP H5 Gs/GD ✓ Desde el otoño de 2020 el clado 2.3.4.4b se

ha movido de Asia Central a Europa, el Este
Asiático, Medio Oriente, África y Norteamérica
✓ Existe evidencia de movimiento bi-direccional
durante las migraciones de otoño y primavera
Afectados (países/estados) 36 45
Brotes (parvadas) 2,398 450
Sacrificados+Muertos 45M 44.15M
Aves silvestres 2,733 2,276
Año 2014-15 2022

Estados: Comercial/Traspatio 21 40
Casos Parvadas Comerciales 211 210
Casos Aves de Traspatio 21 240
Aves afectadas 50.4M 44.15M
Estados: Aves silvestres 15 44
Casos Aves silvestres 98 2,276
Dr. David Swayne:
Laboratory Director at Poultry Research Rutas migratorias afectadas 3 4
Laboratory in Athens, Georgia

Rutas Migratorias Aves

Caracterización Genética del H5N1 IAAP
✓ Tres introducciones a Norteamérica

1. Otoño 2021: Relacionado a virus de primavera 2021 el norte
de Europa
2. Invierno 2022 (ene-mar): Pequeña incursión al Noreste de
Dr. David Swayne:
Estados Unidos relacionados a virus del otoño 2021 en Laboratory Director at Poultry Research
Europa Laboratory in Athens, Georgia
3. Primavera 2022: Limitado a aves silvestres vía el Estrecho de

Bering y relacionados a virus de Japón

Situación en el Mundo de la IAAP H5N1
36 países
5,907 brotes
66 países 52,010,388 aves
8,142 brotes 11 países
+120 millones de aves 678 brotes
afectadas 5 países 17 países 8,277,009 aves
915 brotes 641 brotes
50,445,208 aves 10,164,855 aves
7%
8%
42%
43%

1-ene a 23-nov de 2022 IDEXX Poultry
and Dairy
IAAP H5Nx y H7Nx
Aves domésticas y silvestres

and Dairy
IAAP H5Nx y H7Nx
Aves domésticas

and Dairy
IAAP H5Nx y H7Nx
Aves silvestres

and Dairy
IAAP H5N1

IAAP H5N2 IAAP H5N4
Aves domésticas y silvestres Aves domésticas y silvestres
IDEXX Poultry
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IAAP H5N5

IAAP H5N8 IAAP H5 No Tipificado
Aves domésticas y silvestres Aves domésticas y silvestres
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IAAP H7N3

IDEXX Poultry
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El diagnóstico y el monitoreo

IDEXX Poultry
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El diagnóstico y el monitoreo

IDEXX Poultry
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Estrategia de Pruebas Diagnósticas: Concepto

Prueba de Prueba
Cribado / Tamiz Confirmatoria
✓ Rápida ✓ Altamente específica
Resultado positivo
✓ Altamente sensible ✓ Buena caracterización
✓ Un gran número de ✓ Puede llevar más tiempo
pruebas pueden ser que la prueba de
realizadas fácilmente cribado/tamiz
Estrategia de Pruebas para Influenza Aviar

Prueba de Prueba
Cribado / Tamiz Confirmatoria
Resultado positivo ✓ Identificar el subtipo

✓ Identificar Influenza Tipo A ✓ H5 y H7 son prioritarios por
✓ Prueba altamente que pueden ser de alta
Dr. David Swayne:
Laboratory Director específica de tipo patogenicidad
at Poultry Research
Laboratory in
Athens, Georgia
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El virus, aspectos clínicos y

epidemiológicos

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Países o regiones con brotes

y casos clínicos comprobados

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Manual Terrestre 2021 WOAH Capítulo 3.3.4
Hisopos Aislamiento Subtipificación:

Traqueales en Embrión Inhibición de la
de Pollo Hemaglutinación Secuenciación
H5/H7
Hisopos Genética
Cloacales Subtipificación:
Inhibición de la
Neuraminidasa Secuenciación
Macerado RT-PCR en Sitio de
de Órganos Tiempo
RT-PCR en Tiempo Análisis Escisión HA0
Real
Real Influenza Filogenético
Influenza A
Aviar Subtipo Índice de
Específico Patogenicidad
Intravenosa
ELISA de Subtipificación:
Bloqueo Inhibición de la ++
++++
Influenza A Hemaglutinación Sensibilidad Subtipificación:
Sueros Sensibilidad
Inhibición de la
Sanguíneos Subtipificación: Neuraminidasa
AGID ELISA subtipo
Inmunodifusión +++
++ específico
en Gel de Agar Sensibilidad
Sensibilidad
IDEXX Poultry
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Países o regiones sin brotes y

casos clínicos comprobados

IDEXX Poultry
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ELISA de Subtipificación: Subtipificación:

Bloqueo Inhibición de la ++ Inhibición de la
++++ Neuraminidasa
Influenza A Hemaglutinación Sensibilidad
Sueros Sensibilidad
Sanguíneos
AGID Subtipificación:
Inmunodifusión
++ ELISA subtipo +++
en Gel de Agar Sensibilidad
Sensibilidad específico
Secuenciación
Hisopos
RT-PCR en RT-PCR en Tiempo
Genética H5/H7
Traqueales
Tiempo Real Influenza
Real Aviar Subtipo Secuenciación
Hisopos
Influenza A Específico Análisis Sitio de
Cloacales
Filogenético Escisión HA0
Índice de
Patogenicidad
Intravenosa

64
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Pruebas
Serológicas
ELISA
HI
Pruebas AGID
Directas
RT-PCR
Aislamiento Viral
Días post infección

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Detección del Agente

Aislamiento en embrión de pollo
➢ Inoculación a partir de hisopos traqueales o cloacales y macerado de órganos
➢ 2 a 7 días de incubación
➢ Líquido alantoideo de embriones muertos o moribundos y todos al final de la incubación
➢ Presencia de actividad hemaglutinante: Prueba de hemaglutinación
➢ Prueba de inmunodifusión en gel de agar (AGID): antisuero contra nucleoproteína y/o matriz
➢ ELISA de captura de antígeno
RT-PCR en tiempo real en fluido alantoideo

➢ A partir de líquido alantoideo, hisopos traqueales o cloacales y macerado de órganos

IDEXX Poultry
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Subtipificación serológica
➢ Prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI) o inhibición de la neuraminidasa
➢ Batería de antisueros policlonales o monoespecíficos contra:
➢ 16 subtipos de hemaglutinina (H1-16)
➢ 9 subtipos de neuraminidasa (N1-9)
Subtipificación genética
➢ Identificación genómica de subtipos H y N específicos
➢ RT-PCR en tiempo real = Primers y sondas específicos de subtipo
➢ Secuenciación y análisis filogenético

IDEXX Poultry
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Evaluación de la patogenicidad
➢ Subtipos H5 y H7 únicos con cepas de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad (IAAP)
➢ Secuenciación del sitio de escisión o ruptura HA0
➢ Secuencias similares en virus de alta patogenicidad
➢ Aminoácidos básicos = Arginina o Lisina
➢ Diferenciar alta o baja patogenicidad

IDEXX Poultry
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Evaluación de la patogenicidad
➢ Indice de Patogenicidad Intravenosa (IVPI)
➢ Diferenciar el grado de patogenicidad
➢ Inoculación intravenosa del virus infeccioso
➢ Alta patogenicidad:
➢ >75% de mortalidad en 10 días es alta
➢ IVPI > 1.2

IDEXX Poultry
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ELISA
➢ Anticuerpos contra la nucleoproteína y matriz
➢ Epítopos conservados en todos los virus de Influenza A
➢ Específicos de especie = ELISA Indirecta
➢ Multiespecie = ELISA de Bloqueo (o de competencia)
➢ Mayor sensibilidad que la Inmunodifusión (AGID) SCAHLS (SUB-COMMITTEE ON ANIMAL HEALTH LABORATORY STANDARDS
[AUSTRALIA/NEW ZEALAND]) (2009). SCAHLS Approved Tests. Avian Influenza b-ELISA. http://www.scahls.org.au/new_tests/scahls_approved_tests
➢ Para cribado (tamiz) de alto rendimiento
➢ Resultados en 3 a 4 horas (incluyendo la preparación del material)

IDEXX Poultry
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ELISA
➢ Aplicada en programas de serovigilancia a gran escala
➢ Comparativamente mejor que HI ARNOLD M.E. (2018). Evaluation of ELISA and haemagglutination inhibition as screening tests in serosurveillance for
H5/H7 avian influenza in commercial chicken flocks. Epidemiol. Infect., 146,1–8.
➢ Resultados positivos deben hacerse prueba de Subtipificación
➢ Inhibición de la hemaglutinación para H5 y H7
➢ ELISA para H5, H7 y H9
➢ Tienen menos sensibilidad que el ELISA para Influenza A

IDEXX Poultry
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Inmunodifusión en Gel de Agar (AGID)
➢ Anticuerpos contra la nucleoproteína y matriz
➢ Antígeno de matriz difunde más rápido que el de la nucleoproteína
➢ Poco confiable en especies aviares diferentes al pollo y al pavo
➢ No todas las especies aviares producen anticuerpos precipitantes (p.e. patos)
➢ Menor sensibilidad que la ELISA SCAHLS (SUB-COMMITTEE ON ANIMAL HEALTH LABORATORY STANDARDS [AUSTRALIA/NEW ZEALAND]) (2009).
SCAHLS Approved Tests. Avian Influenza b-ELISA. http://www.scahls.org.au/new_tests/scahls_approved_tests
➢ Prueba de cribado o tamiz que debe ser seguida de HI para subtipificar
➢ Resultados en 24 a 48 horas

IDEXX Poultry
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Inhibición de la Hemaglutinación (HI)
➢ Variabilidad en los reactivos necesarios de un laboratorio a otro y de un lote a otro
➢ Placas de fondo V o fondo U, eritrocitos de aves SPF lavados 3 veces en PBS isotónico,
solución de Alsever, antígenos y antisueros positivos y negativos
➢ Emplea hemaglutinina específica de subtipo o filogenéticamente heterólogas
➢ Puede pasar por alto algunas infecciones (falsos negativos)
➢ Con 4UHA la dilución 1/16 (4 log2) o mayor es positiva
➢ Con 8UHA la dilución 1/8 (3 log2) o mayor es positiva
➢ Sueros de especies aviares diferentes al pollo pueden dar aglutinación inespecífica

IDEXX Poultry
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Inhibición de la Hemaglutinación (HI)
➢ Puede haber interferencia con anticuerpos anti N
➢ Botón de eritrocitos en el fondo de la placa similar al control
➢ Ocurre cuando se usa antígeno de virus completo para la Subtipificación
➢ Usar 2 antígenos para cada subtipo de H con N heteróloga (H5N1, H5N6)
➢ Podría dar lugar a falsos resultados de tipificación
➢ Se puede usar antígeno H recombinante o purificado son proteína N
➢ Otros factores pueden causar una unión inespecífica del antígeno H y el suero, dando lugar a una
reacción de inhibición inespecífica

IDEXX Poultry
and Dairy

IDEXX Poultry
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Arnold ME et al (2018).
Evaluation of ELISA and haemagglutination
inhibition as screening tests in
serosurveillance for H5/H7 avian influenza in
commercial chicken flocks. Epidemiology and
Infection 146, 306–313.

IDEXX Poultry
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Infection 146, 306–313.

IDEXX Poultry
and Dairy
Infection 146, 306–313.

IDEXX Poultry
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Diseño del Programa de

Monitoreo Integral para
Influenza Aviar

IDEXX Poultry
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Fases del Proceso Analítico del Programa de Monitoreo Avícola
Preanalítica Analítica Postanalítica
Realizada en conjunto por el

Realizada por el MVZ o Realizada por el laboratorio
profesional en campo y el
profesional en campo de diagnóstico
laboratorio
Objetivo del monitoreo

Selección de la prueba Sensibilidad y especificidad Análisis de resultados
analítica y diagnóstica
Método de muestreo Epidemiología
Procedimiento de la prueba
Tamaño de muestra Análisis de tendencias
Buenas prácticas de
Momento del monitoreo laboratorio Líneas base
Calidad de la muestra
80
IDEXX Poultry
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Objetivo del Monitoreo
Vigilancia Epidemiológica / Brote - Desafío
1. Mostrar la ausencia de infección
2. Detectar infecciones subclínicas
3. Diagnosticar la causa de una enfermedad clínica

81
IDEXX Poultry
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Frecuencia del Monitoreo
Monitoreo Pasivo
✓ De acuerdo a la ocurrencia y sospecha
Monitoreo Activo
✓ Mensualmente
✓ Aves clínicamente sanas

IDEXX Poultry
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Selección de la Prueba

ELISA IDEXX Influenza A Ab Test
❖ La prueba IDEXX Influenza A Test es un

inmunoensayo enzimático para la detección de
anticuerpos frente al virus de la Influenza A en
muestras de suero de diferentes especies animales
❖ Detecta la reactividad de los anticuerpos frente a 14

subtipos de HA (H1-14) y 9 subtipos de NA (N1-9)
❖ ELISA de Bloqueo
❖ Especificidad diagnóstica: 99.7%

❖ Sensibilidad diagnóstica: 95.4%

Sensibilidad y especificidad generales

❖ Se obtuvieron sueros aviares de una variedad de

regiones y especies diferentes Estatus serológico AI
❖ Los sueros fueron confirmados como positivos o Pos Neg Total

negativos por los resultados de las pruebas de
Pos 1,192 15 1,207
referencia o por el estado de exposición a la IA IDEXX
Influenza Neg 58 4,992 5,050
❖ Cada muestra se analizó de acuerdo con el A Test
protocolo de ensayo estándar Total 1,250 5,007 6,257
❖ La prueba IDEXX Influenza A Ab demuestra una

sensibilidad del 95,4% y una especificidad del Influenza A
99,7% para las especies aviares Especificidad 99.7%
Sensibilidad 95.4%

Influenza A Ab
Muestra Dilución IDEXX Livestock, Poultry and
AGPDairy
S/N Resultado
Especificidad diagnóstica Subtipos H1N7 Suero limpio
Dilución 1:16
0.37
0.28
+
+
NT
+1
ELISA IDEXX Influenza A Ab Test H2N9 Suero limpio 0.22 + NT
Dilución 1:16 0.26 + +1
H3N8 Suero limpio 0.26 + NT

❖ Se muestran resultados individuales de muestras Dilución 1:16 0.16 + +2
puras y diluidas. Se detectaron 14 subtipos HA y Dilución 1:16 0.19 + +2
9 subtipos NA en sueros de pollo mediante la H5N9 Suero limpio 0.35 + NT

Dilución 1:16 0.36 + +2
prueba IDEXX y AGP. H6N5 Suero limpio 0.26 + NT
Dilución 1:16 0.38 + +1
❖ Los subtipos H15 y H16 no se incluyeron ya que H7N3 Suero limpio 0.28 + NT
Dilución 1:16 0.18 + +2
no estaban disponibles para su evaluación. H8N4 Suero limpio 0.25 + NT
Dilución 1:16 0.33 + +1
❖ Cada subtipo probado arrojó una media de S/N H9N2 Suero limpio 0.33 + NT
Dilución 1:16 0.23 + +1
que indicaba un resultado positivo en la prueba Suero limpio 0.19 + NT
H10N1
Dilución 1:16 0.26 + +1
ELISA IDEXX.
Dilución 1:16 0.22 + +2
❖ Este resumen demuestra que la prueba IDEXX
Influenza A Ab puede detectar la exposición a H1- Dilución 1:16 0.24 + +1
H14 en combinación con múltiples subtipos N. Dilución 1:16 0.17 + +1

© 2022 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. 85 Dilución 1:16 0.26 + +2
Sensibilidad diagnóstica
❖ Respuesta serológica de muestras temporales de

3 grupos de aves expuestas al virus de Influenza
Aviar, utilizando la prueba IDEXX Influenza A Ab
❖ Se inocularon 3 grupos de aves SPF con vacunas

contra la influenza. Aves expuestas a un subtipo
diferente de IA: H1N1, H5N2 y H7N3
❖ Muestras de suero antes de la inoculación y luego

en los días 5, 8, 13, 21 y 28 postinoculación
❖ La prueba IDEXX Influenza A Ab detectó la

seroconversión en el día 13 para todos los 3
subtipos

Sensibilidad diagnóstica comparativa

AGP HI
Pos Neg Total Pos Neg Total
Pos 20 0 20 Pos 7 0 7
IDEXX IDEXX
Influenza Neg 1 24 25 Influenza Neg 0 6 6
A Test A Test
Total 21 24 45 Total 7 6 13
Influenza A Influenza A
Sensibilidad 98% Sensibilidad 100%

RealPCR* Influenza A Virus RNA Test
❖ Identificación y diferenciación del ARN de Influenza

A en hisopos traqueales y tejido traqueal en pools de
hasta 11 muestras
❖ Objetivos / Canales
❖ Identificación de ARN de IAV en el canal FAM
❖ Control Interno (IPC) en el canal HEX
❖ Número de piezas: 99-56200
❖ Compatibilidad con PC - v1.8 o superior

❖ Compatibilidad con IPC - v1.5 o superior
❖ Master Mix requerido = RNA

Sensibilidad analítica
❖ Se probaron diluciones logarítmicas del objetivo sintético

por triplicado (1x107 copias a 1 copia) Influenza A RNA
Media Réplicas
copias por
❖ Límite de detección (LDPCR) 10 copias por reacción Valor Ct detectadas
reacción
10,000,000 13.7 3/3

1,000,000 16.7 3/3
100,000 20.3 3/3
10,000 23.5 3/3
1,000 26.5 3/3
100 30.2 3/3
10 34.9 3/3
1 36.8 1/3

Sensibilidad y especificidad diagnóstica

Método de referencia Influenza A (FAM*) CL bajo CL alto
Pos Neg Total Sensibilidad 97.8% 94.1% 99.3%
IDEXX Pos 174 1 174 Especificidad 99.4% 96.2% 100.0%

RealPCR*
Influenza Neg 4 162 166
A Virus
RNA Test Total 178 163 341

92
IDEXX Poultry
and Dairy
Método de Muestreo
La mejor recomendación es:

Monitorear todas las unidades epidemiológicas
Cuando menos 1 unidad epidemiológica por lote
Siempre la misma unidad epidemiológica durante todo el

programa de monitoreo

93
Método de Muestreo

94
Tamaño de la Muestra

95
IDEXX Poultry
and Dairy
Caso clínico / Vigilancia Epidemiológica
Tamaño de muestra necesario para obtener una probabilidad del 95% de
uno o más resultados positivos en una parvada infectada
Prof. Sjaak de Wit, DVM, PhD, Dipl. ECPVS. Royal GD. Netherlands

96
IDEXX Poultry
and Dairy
Calidad de la Muestra
MATERIALES TÉCNICA DE SANGRADO

Jeringas Braquial
Aguja Yugular
Tubos Cardiaca
Viales Otras
MANEJO DE LA MUESTRA TRASLADO Y/O ENVÍO

Hemólisis Información
Separación del coagulo Tiempo
Temperatura Refrigeración
Empacado Congelación



IDEXX Poultry
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El caso mexicano

Población avícola comercial en México
Tipo de Ave # Aves
Ponedora en producción 172,190,265
Ponedora en crianza 51,657,079
Reproductora en producción 1,454,267
HUEVO Reproductora en crianza 600,923
Progenitora en producción 9,000
Progenitora en crianza 9,000
Pollo de engorda al ciclo 310,421,660
Reproductora en producción 10,145,660
POLLO Reproductora en crianza 9,063,499

Progenitora en producción 245,581
Progenitora en crianza 169,865
Pavos de engorda al ciclo 525,390
PAVO Reproductoras en crianza 1,500
Total 556,493,737

Principales estados productores en México
Huevo Pollo

Situación en México de la IAAP H5N1
Aves domésticas y Información al 23 de

silvestres libres y en noviembre de 2022
cautiverio
Estado Casos
Baja California 8
Sonora 45
Chihuahua 12
Nuevo León 6
Jalisco 21
Aguascalientes 10
Estado de México 29
Puebla 10
Chiapas 5
Yucatán 1

Chiapas -Traspatio
Nuevo León -
Postura Comercial

Sonora - Postura Com. y Reproductoras Chihuahua - Postura Comercial
Jalisco – Postura Comercial

Yucatán – Postura Comercial
Estado de México - Traspatio

IDEXX Poultry
and Dairy
Vacunación contra Influenza

Aviar de Baja Patogenicidad
H5N2

En 2016 = 136 aislamientos

En 2017 hay 36 aislamientos con perfil genético de ALTA patogenicidad
Perfiles de secuencia de aminoácidos del sitio de ruptura de la Hemaglutinina







Distribución de Linajes en México
Primavera 2014
Invierno 2013
Invierno 2014
Resurgimiento


IDEXX Poultry
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Vacunación contra Influenza

Aviar de Alta Patogenicidad
H7N3

En todos los casos tienen perfil genético de ALTA patogenicidad
Perfiles de secuencia de aminoácidos del sitio de ruptura de la Hemaglutinina




Distribución de Linajes en México
Linaje 1 (2015-2017)
Linaje 4 (2015-2017)
Linaje 5 (2015-2016)
Linaje 6 (2017)


IDEXX Poultry
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Programas de Vacunación
IAAP H7N3 y IABP H5N2

Calendarios de Vacunación
Pollo de Engorda
Tipo Antígenos Dosis Edad
Vectorizada HVT 0 Poxvirus + IAH5 Variable 1 a 3 días
1 Emulsión Doble
IAH5 Autógenas u Oficial +
Newcastle LaSota
0.5 mL /ave 8 a 12 días
Vectorizada Newcastle LaSota+ IAH5 0.03 mL/ave 10 a 12 días
2 Emulsión Doble
Concentrada
Newcastle LaSota
0.2 mL /ave 1 día

Emulsión Doble 0.5 mL /ave 8 a 12 días
Newcastle LaSota

Pollo de Engorda
3 Emulsión Doble
Concentrada
Newcastle LaSota
0.2 mL /ave 1 día
Emulsión Doble IAH5 Autógenas u Oficial +

0.3 mL /ave 8 a 12 días
Concentrada Newcastle LaSota
4 Emulsión Doble
Concentrada
Newcastle LaSota
0.2 mL /ave 1 día
IAH7 GenRev Autógena u

Emulsión Triple Oficial + IAH5 Autógenas u 0.5 mL /ave 8 a 12 días
Oficial + Newcastle LaSota

Pollo de Engorda
5 Emulsión Doble
Concentrada
Newcastle LaSota
0.2 mL /ave 1 día

Emulsión Triple Newcastle LaSota + 0.5 mL /ave 8 a 12 días
Bronquitis Mass o Arkansas

Gallina de Postura

Emulsión Doble 0.5 mL /ave
Newcastle LaSota
1 a 3 semanas
Emulsión IAH7 GenRev Autógena u Oficial 0.5 mL /ave
1 Emulsión Doble
Newcastle LaSota
0.5 mL /ave
8 a 10 semanas

Emulsión Doble 0.5 a 1.0 mL /ave
Newcastle LaSota 16 a 18
semanas
Emulsión IAH7 GenRev Autógena u Oficial 0.5 a 1.0 mL /ave

Gallina de Postura

Newcastle LaSota 1 a 3 semanas
2 Emulsión Doble
0.5 mL /ave
Cada 8 a 10 semana
en producción

Gallina de Postura

IAH5 Autógenas u Oficial + Newcastle
LaSota 1 a 3 semanas
3 Emulsión IAH7 GenRev Autógena u Oficial

0.5 mL /ave

Cada 6 a 8 semana en
producción

Gallina de Postura

Emulsión Triple 0.5 mL /ave
LaSota + Bronquitis Mass o Arkansas
1 a 3 semanas
4 Emulsión IAH7 GenRev Autógena u Oficial 0.5 mL /ave
IAH7 GenRev Autógena u Oficial + IAH5

Emulsión Triple 0.5 mL /ave 8 a 10 semanas
Autógenas u Oficial + Newcastle LaSota

Cada 6 a 8 semana
en producción

Reproductora

Newcastle LaSota
1 a 5 semanas
1 Emulsión IAH7 GenRev Autógena u Oficial 0.5 mL /ave

Newcastle LaSota
10 a 14 semanas

Reproductora

Newcastle LaSota
1 a 5 semanas
2 Emulsión Doble
Newcastle LaSota
0.5 mL /ave
10 a 14
semanas

Newcastle LaSota 18 a 20
semanas

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IDEXX Poultry

IDEXX Livestock, PoultryDiagnostics

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El virus, aspectos clínicos y

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Virus de Influenza Aviar

✓ Genoma segmentado: 8 segmentos de RNA

✓ Dos proteínas de superficie

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El Virus de Influenza Aviar

✓ Genoma segmentado: 8 segmentos de RNA

➢ Segmento 3 Polimerasa PA Actividad endonucleasa y de replicación viral

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© 2022 IDEXX Laboratories, Inc. All rights reserved. 5

NA Neuraminidasa Degrada el ácido siálico de las

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Virulencia Secuencia de aminoácidos en sitio

A/Chicken/Puebla/437/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Aguascalientes/438/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Puebla/440/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Aguascalientes/434/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/México/426/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Querétaro/386/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Puebla/439/2015 Baja PQRKTR↓G

A/Chicken/Puebla/439/2015. 2 Baja PQRKTR↓G

Angel E. Absalón, CIBA-IPN Tlaxcala

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Angel E. Absalón, CIBA-IPN Tlaxcala

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Angel E. Absalón, CIBA-IPN Tlaxcala

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Baja y Alta Patogenicidad

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Baja y Alta Patogenicidad

✓ Son una familia diversa de monosacáridos

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Postura abdominal con peritonitis

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Brugère-P Jeanne (editor). Manual

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https://www.nadis.org.uk/disease- Brugère-P Jeanne (editor). Manual

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✓ Muerte súbita No se observan lesiones macroscópicas

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Edema severo de cresta y barbillas

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Necrosis de cresta y barbillas

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Hemorragias subcutáneas severas de

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