Laboratorio Perfil Lipidico
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Agua destilada, ml 8 8
• Reactivo A: solución conteniendo buffer Good 200 g/l Deseable: < 1,50 g/l
Se fundamenta en que a medida que los triglicéridos van siendo
(pH 6,8), clorofenol, lipoprotein lipasa (LPL), TG (g/l) = D-B x factor factor = Moderadamente elevado a
transportados por los quilomicrones, la lipoproteína lipasa va
glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa S-B elevado: 1,50 - 1,99 g/l
rompiendo los enlaces liberando ácidos grasos y al glicerol, el
(GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
glicerol que se genero en la reacción se activa con el ATP por (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF). S. Muy elevado: 5,00 g/l
medio de la glicerol kinasa, generando glicerol 1-fosfato que será
• Standard: solución de glicerol 2,26 mmol/l Conversión de unidades
oxidado por una enzima oxidasa, generando peróxido de Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos
hidrogeno, que en presencia de la 4-Aminofenasona, del fenol y (equivale a 2 g/l de trioleína).
(mg/dl) Interpretación clínica
de la enzima peroxidasa forma un compuesto de color rojo. Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 =
Procedimiento Triglicéridos (mmol/l)
Las concentraciones elevadas
de TG se asocian a tener un
mayor riesgo de desarrollar una
En tres cubetas espectrofotométricas enfermedad cardíaca.
marcadas B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido) colocar:
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando • Reactivo A: solución de sulfato
Los valores esperados de HDL
selectivamente las lipoproteínas de baja y muy baja densidad de dextrán (PM 50.000) 0,032
colesterol son los siguientes: Varones:
(LDL y VLDL) mediante el agregado de sulfato de dextrán de PM mmol/l.
30 - 70 mg/dl Mujeres: 30 - 85 mg/d
50.000 en presencia de iones Mg++. • Reactivo B: solución de cloruro
En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan las HDL de magnesio 1,5 M.
y se realiza la determinación del colesterol ligado a las mismas,
empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/Peroxidasa Interpretación clínica
con colorimetría. Procedimiento Donde:
VFE = volumen final de extracto = 0,7 ml Niveles menos de 40 mg/dL de
VM = volumen de muestra procesada = HDL es uno de los principales
En un tubo de Kahn medir 200 ul de muestra, y 0,2 ml factores de riesgo de enfermedad
VRE = volumen de reacción con extracto
agregar 500 ul de reactivo precipitante. = 2,2 ml del corazón
Homogeneizar agitando durante 20 segundos y dejar VRS = volumen de reacción con Standard =
30- 40 minutos en refrigerador. En 3 tubos marcados 2,02 ml
B, S y D colocar: VS = volumen de Standard en la reacción =
0,020 ml VE = volumen de extracto en la
B S D reacción = 0,2 ml
Si se emplean volúmenes de Reactivo
Sobrenadante - - 200 ul diferentes de 2 ml el factor 0,762 varía y debe
ser calculado nuevamente, reemplazando en
Standard - 20 ul - la fórmula VRE y VRS.
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml