UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL

CROMATOGRAFÍA DE COMPUESTOS ORGÁNICOS

GRUPO 3

- Cabrejos Barrientos, Diego Alexander

- Campos Girao, Angeley Solangh

- Duran Alca, Dany Jhoel

- Peredo Gonzales, Jhonatan Jorge Luis

ENCARGADO DEL CURSO

Dr. Mario Carhuapoma Yance

LIMA - PERÚ
2023
ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN 3

II. FUNDAMENTOS TEÓRICOS 3

III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO 3

3.1. Materiales 3

3.2. Reactivos 3

3.3 Procedimiento 4

IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS 6

4.1. Análisis de Resultados 6

4.2. Discusión 6

V. CONCLUSIONES 6

VI. CUESTIONARIO 7

VII. BIBLIOGRAFÍA 7
 I. INTRODUCCIÓN

La cromatografía es un método simple con buena resolución para la separación e

identificación de compuestos altamente polares o polifuncionales como ácidos
orgánicos, antibióticos solubles en agua, carbohidratos, aminoácidos y pigmentos
vegetales.
En la cromatografía observaremos dos fases, la estacionaria y móvil. Los
componentes menos solubles de la fase estacionaria migrarán más rápido a través
del papel, mientras que los componentes más solubles de la fase estacionaria se
retendrán selectivamente y migrarán más lentamente. Este mecanismo de
separación se puede explicar de la siguiente manera: la celulosa se compone de
más de 2000 unidades de anhidroglucosa unidas por átomos de oxígeno. Los
líquidos polares como el agua, que tienen una gran afinidad por cada uno de los
grupos hidroxilo de la glucosa, forman puentes de hidrógeno con la glucosa y la
retienen, actuando como fase estacionaria líquida; los líquidos menos polares, como
los disolventes orgánicos, son repelidos por esta estructura y se utilizan como fases
móviles.
Con ello, en este informe se detallará más a profundidad en qué consiste la
cromatografía, los materiales junto al proceso que se realizó en las instalaciones de
laboratorio y los resultados obtenidos.

II. FUNDAMENTOS TEÓRICOS

La cromatografía es un método de separación de mezclas complejas, que es

ampliamente utilizado en diversas ramas de la ciencia. Para ello emplea el principio
de la retención selectiva, que consiste en el distinto comportamiento de los
componentes de una mezcla sobre un soporte específico (como papel, gas, un
líquido neutro, etc.).
De esa manera, la cromatografía emplea diversas técnicas que aprovechan las
diferenciasen la velocidad de adsorción de cada componente, identificándolos,
además, al tomar encuenta el espectro de color que la mezcla arroja en el tiempo.
Este método permite separar cada componente en un alto estado de pureza
o bien, al identificarlos, determinar su proporción exacta.

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Para ello es clave la adsorción (diferente de la absorción), concepto que
refiere al coeficiente de adherencia que la mezcla manifiesta respecto al soporte.
Así, de acuerdo a la diferencia de velocidades de reacción de los componentes de la
mezcla, podrá medirse su porcentaje de concentración, cuando no separarse del
todo.

Fases de la cromatografía

La separación por cromatografía implica dos fases distintas:

● Fase estática. Inicia cuando se aplica la mezcla a su soporte específico y se
prepara para la aplicación del móvil.
● Fase móvil. Se procede a mover otra sustancia sobre el soporte, permitiendo así
su reacción con los componentes de la mezcla, para que la diferencia en la
velocidad de reacción sirva como criterio de separación.
Dependiendo de su naturaleza, algunas sustancias tenderán a moverse
y otras a permanecer sobre el soporte, conforme a cuántas fases estáticas y
móviles de diversa condición (líquidas, sólidas y gaseosas) se lleven a cabo.

Tipos de cromatografía

Dependiendo de la naturaleza del soporte (fase estática) y de la sustancia móvil

(fase móvil), se pueden diferenciar:
● Cromatografía sólido-líquido, en que la fase estática es sólida y la móvil es
líquida.
● Cromatografía líquido-líquido, en la que ambas fases son líquidas.
● Cromatografía líquido-gas, en que la fase estática es líquida y la móvil es
gaseosa.
● Cromatografía sólido-gas, en que la fase estática es un sólido y la móvil es
gaseosa

Ventajas de la cromatografía

● El tiempo que se necesita para conseguir las separaciones es mucho menor y la

separación es generalmente mejor.
● Pueden usarse reveladores corrosivos, que sobre papel destruirían el
Cromatograma.

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● El método es simple y los resultados son fácilmente reproducibles, lo que hace
que sea un método adecuado para fines analíticos.

La Constante Rf

La relación de flujo (Rf) es simplemente una manera de expresar la relación

existente entre la distancia alcanzada por la muestra problema (frente de soluto) y la
distancia recorrida por el solvente ( frente de solvente).

Donde el cálculo de la Rf será:

La Rf va ser constante para cada producto, siempre y cuando su determinación se

lleve a cabo bajo las mismas condiciones.

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III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

3.1. Materiales

- Placa cromatográfica
- Capilares
- Cámara de elución
- Cámara de Yodo
- Vaso de precipitado

3.2. Reactivos

- Muestra del ácido acetil salicílico obtenida en la purificación del último

laboratorio
- Acetato de Etilo
- Benceno
- Yodo

3.3 Procedimiento

a) Hacer la medición: En la cromatoplaca marcaremos desde la base hasta una

distancia de aproximadamente 0.5 cm.

Figura x: Marcado de la cromatoplaca

Fuente: Elaboración propia

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b) Sembrar la muestra: Con ayuda de un capilar tomamos un poco de nuestra
muestra y sembramos 5 puntos de nuestra muestra problema en el extremo
inferior izquierdo de la cromatoplaca. Repetimos lo mismo con nuestra muestra
estándar solo que esta vez la sembramos en el extremo inferior izquierdo.

Figura x: Sembrado de la muestra

Fuente: Elaboración Propia

c) Elución cromatográfica: Se prepara el sistema de solvencia con Acetato de Etilo

y Benceno en la proporción de 1:2.

Se coloca el sistema de solvencia en la cámara de elución y en él la

cromatoplaca. Esperamos a que el sistema de solvencia ascienda por la
cromatoplaca hasta aproximadamente 3/4 de la misma.

Figura x: Elución cromatográfica

Fuente: Elaboración propia.

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d) Retirar y dejar secar a temperatura ambiente.

Figura x: Secado de la placa cromatográfica

Fuente: Elaboración Propia

e) Coloración de la cromatoplaca: Se coloca la cromatoplaca en la cámara de Yodo

y esperamos a que el Yodo colore la cromatoplaca y nos permita ver las huellas
que dejaron las muestras que sembramos.

Figura x: Coloración de la cromatoplaca

Fuente: Elaboración propia

f) Medición de los recorridos: Una vez coloreada la placa, retiramos y medimos el

recorrido de la muestra estándar y de la muestra problema.

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Figura x: Medición de los recorridos de las muestras en la placa
cromatográfica

Fuente: Elaboración propia

g) Se realiza la comparación del R.F. y determinamos si hay similitud entre ambos

resultados, de ser así, podremos decir que la muestra problema es la misma
que la muestra estándar.

IV. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Análisis de Resultados

➔ ¿Qué precauciones debió tener en cuenta durante el desarrollo del

cromatograma?
Se debe tener cuidado en que la muestra de la columna no se llegue a secar del
todo, es decir, que la fase estacionaria del solvente esté siempre al menos a 0,5
cm de nivel de líquido.

➔ ¿Qué debe tener en cuenta para que la muestra pueda ser aplicada en la
cromatografía?
En cuanto a la manipulación de la placa, tener especial cuidado (una vez
absorbida) para evitar su contaminación. Finalmente, es importante calcular el
tiempo que la placa debe estar sumergida en la muestra, ya que esto determinará
la cantidad de absorción.

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 ➔ ¿Qué precauciones se debe tener en cuenta durante el sembrado de las
muestras en el cromatofolio?
Como prioridad se debe tomar en cuenta si la muestra es líquida, se puede
inocular directamente; si es sólido, sembrar una solución concentrada del mismo
en un solvente adecuado (baja polaridad). Para evitar la deformación de la
superficie del adsorbente durante la adición, la muestra se puede depositar en
su interior en la columna, permitiéndole deslizarse sobre la superficie del
adsorbente.
➔ El Rf de la muestra de la cromatografía en capa fina es:
● Muestra estándar: 2,3
● Muestra problema: 5,8
Podemos decir en conclusión que sabiendo que la muestra problema es aquella que
estamos analizando y donde se encuentra la sustancia que estamos buscando,
mientras que la muestra estándar es aquella que nos servirá de guía para poder
hacer el análisis en la muestra problema, la Rf en capa fina es 0.39.

V. CONCLUSIÓN

La cromatografía es una técnica de separación física utilizada para caracterizar

mezclas complejas y se puede utilizar en todas las ramas de la ciencia. Es un grupo
de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, que tienen como objetivo
separar los distintos componentes de una mezcla con el fin de identificar y
cuantificar dichos componentes.

VI. CUESTIONARIO

1. ¿Qué es una serie eluotrópica?

R = Una serie eluotrópica es una lista de diferentes compuestos ordenados por su

capacidad de elución para un absorbente en particular. Estas series se pueden
utilizar para determinar los disolventes necesarios para la cromatografía de mezclas
en compuestos químicos.

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2. Mencione las aplicaciones de la cromatografía por HPLC y la
cromatografía de gases.

R = La cromatografía por HPLC y la cromatografía de gases son técnicas de

separación ampliamente utilizadas en química analítica. A continuación se
presentan algunas de sus aplicaciones:

Cromatografía por HPLC:

● Análisis de compuestos en alimentos y bebidas, como vitaminas, aditivos,

aromas y conservantes.
● Detección de drogas y metabolitos en fluidos biológicos, como sangre, orina y
saliva.
● Separación de proteínas y otros compuestos bioquímicos en estudios de
biología molecular.
● Análisis de contaminantes en el medio ambiente, como pesticidas, herbicidas y
otros compuestos orgánicos.
● Caracterización de polímeros y otros materiales en la industria química.

Cromatografía de gases:

● Análisis de hidrocarburos y otros compuestos orgánicos en petróleo y productos

derivados del petróleo.
● Identificación de compuestos volátiles en alimentos y bebidas, como vinos y
licores.
● Análisis de drogas y metabolitos en fluidos biológicos, como sangre, orina y
saliva.
● Control de calidad en la fabricación de productos farmacéuticos y productos
químicos.
● Análisis de gases en la atmósfera y en la industria.

3. Diga que es la electroforesis y cuál es su fundamento.

R = La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente

eléctrica controlada, con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y
carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa

Fundamento:

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Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocada en un
campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el
polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las
moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo
negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el
ánodo (el polo positivo). El movimiento de las moléculas está
gobernado también por dos fuerzas adicionales; inicialmente la fricción con el
solvente dificultará este movimiento originando una fuerza que se opone, por otro
lado las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano;
debido a que poseen energía cinética propia denominado difusión. La energía
cinética de las moléculas aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura
mayor difusión. La suma de todas estas fuerzas provocan que las moléculas no
migren de una manera homogénea, de tal manera que, si las moléculas son
colocadas en un cierto lugar de solución, los iones comenzarán a moverse formando
un frente cuya anchura aumenta con el tiempo. Para reducir la anchura de este
frente podemos reducir el movimiento de las moléculas empleando un medio que
opone más resistencia a dicho movimiento. Una forma común de hacer esto es
formar un gel. El gel consiste en un polímero soluble de muy alto peso
molecular que atrapa moléculas de agua y forma un tamiz que dificulta
el movimiento de los solutos, consecuentemente, la migración electroforética
de las moléculas será más lenta, pero el ensanchamiento del frente se verá
reducido también.

VII. BIBLIOGRAFÍA

Gutiérrez Bouzán, M., & Droguet, M. (2002). La cromatografía de

gases y la espectometría de masas: identificación de compuestos causantes
de mal olor. Gutiérrez, MC; Droguet, M." La cromatografía de gases y la
espectrometría de masas: identificación de compuestos causantes de mal
olor". Boletín Intexter, juliol 2002, núm. 122, p. 35-41.

RESTREPO RIVERA, J., PINHEIRO, S., PFEIFFER, E. E., &

BAKKER, J. (2011). Cromatografía. Imágenes de vida y destrucción del suelo

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 Gutierrez, T., Hoyos, O., & Páez, M. (2007). Determinación del
contenido de Ácido Ascórbico en uchuva (Physalis peruviana L.), por
cromatografía líquida de alta resolución (CLAR). Biotecnología en el Sector
Agropecuario y Agroindustrial: BSAA, 5(1), 70-79.

Sgariglia, M. A., Soberon, J. R., Sampietro, D. A., & Vattuone, M. A.

(2010). Cromatografía: conceptos y aplicaciones.

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