EXPERIMENTO No.

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ÁCIDOS Y BASES. SISTEMAS BUFFER

OBJETIVO:
1. Comprobar que el pH de una solución cambia cuando varía la concentración de iones hidrógeno.
2. Medir el pH de una solución utilizando papel pH, indicadores.
3. Comprobar la acción amortiguadora de los sistemas buffer.
4. Valorar la importancia de los sistemas buffer en el mantenimiento del equilibrio ácido base del organismo.
5. Analizar los resultados obtenidos y correlacionarlos con la práctica médica

ESTUDIAR EL CAPÍTULO 4 AGUA, ACIDOS, BASES Y AMORTIGUADORES DE LA

BIOQUÍMICA MÉDICA BÁSICA DE MARKS 4ta EDICION
CAPITULO 1 AGUA Y pH DE BIOQUIMICA DE HARVEY 7ª EDICIÓN

INTRODUCCIÓN
El mantenimiento estable de la concentración de hidrogeniones a nivel del organismo es esencial para la vida. Generalmente el pH,
tanto a nivel intra como extracelular, es mantenido a niveles muy constantes. El pH del organismo es estabilizado gracias a la
capacidad amortiguadora que poseen los líquidos corporales.
El agua es una sustancia mineral, la más abundante en nuestro planeta y en nuestro organismo, por lo que todas las reacciones
enzimáticas, la digestión, los procesos celulares y subcelulares se efectúan en un medio acuoso. El agua es el disolvente de la
materia viva. El agua se ioniza insignificantemente en un ion hidrógeno o protón (H +), y en ion hidroxilo (OH-).

El producto de las concentraciones de H + y OH- se denomina producto iónico del agua (Kw) y su valor a 25º C es de 1 x 10 -14.
Considerando que el agua pura se disocia en cantidades iguales de iones H + y de iones OH-, la concentración de iones H + y de iones
OH- es de 10-7 M para cada uno de los iones.
[H+] = [OH-] = 1 x 10-7 M
Kw = [H+] [OH-]
= (1 x 10-7M) (1 x 10-7 M) = 1 x 10-14 M
En virtud de que estas cantidades son tan pequeñas, en 1909 Sørensen propuso representar la concentración de hidrogeniones con
su logaritmo negativo o el logaritmo inverso de la concentración de iones H +:
pH= - log [H+]
1
pH= log
log ¿ ¿
El principio de la química del ion hidrógeno pone los fundamentos para la definición de ácidos y bases según Br önsted y Lowry así:
“Un ácido es un donador de iones H+ y una base es un aceptor de iones H+ en solución acuosa”.

En base a valores de pH, las soluciones acuosas son ácidas si tienen pH menor de 7, soluciones básicas si su pH es mayor de 7 y
soluciones neutras si su pH es igual a 7.

Los líquidos biológicos de interés en clínica (suero, plasma, orina, líquido cefalorraquídeo, etc.) son soluciones que contienen algunas
sustancias en estado casi completo de ionización.

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El conocimiento de la concentración de esos iones y de la fisicoquímica que describen sus interrelaciones, es fundamental para
poder entender muchos problemas fisiológicos y patológicos en el hombre.

El pH de los líquidos corporales depende de la concentración de iones H + y es mantenido casi constante por medio de la operación
de varios mecanismos fisiológicos. Cada persona que trabaja en áreas relacionadas con la salud debe conocer las formas por las
cuales es mantenido el balance ácido - básico de los fluidos corporales, ya que una desviación de éste conlleva a un desbalance que
puede conducir a un estado patológico e incluso causar la muerte.

SOLUCIONES BUFFER, SOLUCIONES TAMPÓN O AMORTIGUADORAS

Son mezclas de un ÁCIDO débil y una sal de ese ácido. Este tipo de mezclas reaccionan tanto con ácidos como bases, por lo que la
adición de ácidos o bases fuertes a dichas mezclas casi no produce variaciones en el valor de pH.
Un ejemplo de solución buffer es la solución acuosa de ácido acético y acetato de sodio. Esta solución contiene una gran cantidad de
moléculas del ácido débil (CH3-COOH) y de su base conjugada (CH3 - COO-) que proviene de la disociación del acetato de sodio.

Mecanismo de acción de una solución buffer.

Si se añaden pequeñas cantidades de un ácido fuerte a esta solución buffer, los iones H + provenientes del ácido reaccionan con la
base conjugada del sistema buffer, como se indica en la siguiente reacción:

Por lo tanto, la mayoría de los protones agregados al medio no permanecen como tales, sino que forman el ácido débil (CH 3 –COOH)
y el pH apenas varía.
Si se agregan iones (OH-) al sistema buffer, éstos reaccionan con moléculas de ácido del buffer para formar iones acetato y agua.

El equilibrio estará desplazado a la derecha y en consecuencia la mayoría de los iones hidroxilo no se encuentran libres en la solución
y el valor de pH casi no cambia. En resumen, la adición de pequeñas cantidades de ácido fuerte o de base fuerte a una solución
buffer casi no ocasiona cambios en el valor del pH de la solución. Por el contrario, las mismas adiciones hechas al agua producen
una notable variación en el pH, de modo que la adición de pequeñas cantidades de un ácido fuerte, por ejemplo, a soluciones que no
son un buffer, produce alteraciones importantes en el valor de pH de dichas soluciones.
Sin embargo, y como se discutirá posteriormente la capacidad de una solución buffer para reaccionar con ácidos o bases sin variar el
pH es limitada.

PARTE EXPERIMENTAL
REACTIVOS
Ácido acético 0,1 M Ácido clorhídrico 0,1 N
Hidróxido de sodio 0,1 N Solución de acetato de sodio 0,1 M
Buffer Fosfato 0,05 M pH 7.4 Agua destilada
Azul de bromotimol 0,02%

MATERIAL Y EQUIPO
1 gradilla para tubos 1 perilla succionadora.
6 tubos de ensayo 3 pipetas graduadas o serológicas de 5 mL.
Pipetas graduadas de 1 mL, 5 mL y 10 mL 2 pipetas volumétricas de 1 mL
Papel pH
1 pipeta volumétrica de 5 mL
1 aparato medidor de pH.

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MATERIAL TRAIDO POR EL ALUMNO
1 sobre pequeño de bicarbonato de Sodio
1 limón
1 coca cola pequeña
¼ litro de leche por mesa
1 bolsa de lejí (hipoclorito de sodio) por MESA
1 bolsa de vinagre por MESA
1 bolsa de café instantáneo por MESA

A. DETERMINACIONES DE ÁCIDOS, BASES Y SOLUCIONES BUFFERS

PROCEDIMIENTO
1. Rotule cuatro tubos de ensayo limpios y secos, con los números 1, 2, 3 y 4 respectivamente
2. Con una pipeta graduada de 10 mL, mida 9 mL de agua destilada y viértalos en el tubo No. 1. Haga lo mismo
con el tubo No. 2
3. Utilizando diferentes pipetas graduadas de 5 mL, vierta en el tubo No. 3, 4.5 mL de una solución 0.1 M de
ácido acético y 4.5 mL de una solución 0.1 M de acetato de sodio. Mezcle bien, proceda en la misma forma
con el tubo No. 4
4. Mida el pH de los tubos No. 1 y 3 con papel pH que le proporcionará su docente. Reporte los resultados en su
manual
5. A cada uno de los tubos 1 y 3 agrégueles lentamente 1 mL de solución de Ácido Clorhídrico 0.1N luego mida
con papel pH, el pH de cada tubo
0oMediante cálculos matemáticos calcule el pH de ambos tubos. Reporte en su manual los resultados que
obtuvo y explique el porqué de las diferencias
6. A cada uno de los tubos 2 y 4 adicióneles 1 mL de solución de hidróxido de sodio 0.1N. Mida el pH con papel y
calcúlelo en cada tubo
7. Determine el pH a los tubos No. 2 y 4 utilizando papel pH
Anote en su manual los resultados, observaciones y conclusiones y anote en el cuadro
CUADRO RESUMEN
Tubos Reactivos Iniciales pH(i) Reactivos pH (F)
Papel Finales papel
1 9 mL de H2O destilada 1 mL de HCl 0,1N
2 9 mL de H2O destilada 1 mL de NaOH 0,1N
4,5 mL de Ac. Acético 0,1M+ 4,5 1 mL de HCl 0,1 N
3
mL de acetato de sodio 0,1 M
4,5 mL de Ac. Acético 0,1M + 4,5 1 mL de NaOH 0,1 N
4
mL de acetato de sodio 0,1M

A.1 DETERMIANCIÓN DE pH
1. Disuelva 1/2cucharadita de bicarbonato en 10 mL de agua en un beaker
a) tome una porción de esta solución y con papel pH mida el pH.
b) Según el pH que resulto como clasificaría esta solución
(Repita el mismo procedimiento con el café)
2. Exprima el jugo de un limón y repita el mismo procedimiento
3. Con la coca cola tome una porción de ella y repita el mismo procedimiento
4. Con una pequeña porción de leche haga el mismo procedimiento

3
 Reactivo VALOR DE pH

TUBO 1 pH= - log [H+] TUBO 2 pH= - log [H+] 14= pH-
pOH

4
 [sal] [sal]
Tubo 3 pH¿ pKa+ log Tubo 4 pH¿ pKa+ log
[acido] [acido]

Haga en su manual las reacciones que se están efectuando en cada uno de los tubos y los cálculos de los tubos 1, 2,
3y4

B. ACCIÓN AMORTIGUADORA EN LOS LÍQUIDOS CORPORALES (IN VITRO)

En esta parte reproduciremos el mecanismo que efectúa el sistema renal para mantener el equilibrio ácido - base
analizando el papel que juega la solución buffer Fosfato presente en el filtrado glomerular (pH 7.4), el cual acepta
los iones hidrógeno eliminados por el riñón durante el proceso de formación de orina (pH 6).

El fosfato monosustituido (H2PO4-) y el fosfato disustituido (HPO 42-) forman una solución buffer, o sea, un par ácido
débil-base conjugada que puede actuar como un amortiguador de pH. El riñón durante la formación de la orina
elimina H+ los cuales reaccionan así:
H+ + HP04 2- H2PO4-
En esta forma, al irse formando la orina irá variando la relación:
Con cambios correspondientes en el pH de la orina
HPO4 2-

H2PO4-
Por este mecanismo el riñón elimina H+ y reabsorbe HCO3- hacia la sangre. Por cada ion H+ que es liberado por las
células tubulares hacia la luz del túbulo, un ión Na + es liberado del Na2HPO4, el cual acompaña al ión HCO3- que
también es devuelto a la sangre como se explicó antes.

PARTE EXPERIMENTAL
1- Utilizando una pipeta serológica de 5 mL, mida 5 mL de una solución buffer fosfato pH 7,4 y transfiéralos a un
tubo de ensayo. Este buffer fosfato en esta práctica representa el buffer del filtrado glomerular.
2- Agregue al tubo 5 gotas de indicador azul de bromotimol, agitar.

5
3- Titule la solución del tubo agregando gota a gota y agitando ácido clorhídrico (HCl) 0,1N, utilizando para ello
una pipeta serológica de 5mL hasta obtener un color amarillo (esto ocurre aproximadamente a pH 6,0). Anote
en su manual el volumen gastado (mL) de HCl 0,1N en la titulación. (No contar gotas)

Los H+ que se agregan por medio del HCl 0,1N para cambiar el pH del buffer fosfato desde 7,4 hasta 6,0,
representan a los H+ que el riñón agrega al filtrado glomerular para eliminarlos en la orina intercambiándolos con
Na+ recuperarán en esta forma base.
0,1N ------- 0,1 mEq/mL

mEq
N=
Volumen Gastado
(Tomar en cuenta que en el experimento se utilizan 5mL de Buffer fosfato pH 7,4)

5 mL de buffer ---------- 2 mEq HCl X = 2 x 1000

1000mL Orina ---------- x 5
X= 400mEq/L

Realizar cálculos de la titulación:

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 UNIVERSIDAD SALVADOREÑA “ALBERTO MASFERRER”
FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA
BIOQUIMICA MEDICA I
CICLO IMPAR 2022

GUÍA DE PREGUNTAS LABORATORIO # 1 pH y BUFFERS

APELLIDOS:________________________NOMBRES :__________________________#_______
_
PREGUNTAS SOBRE pH Y BUFFERS
1. ¿Cómo son eliminados los iones H+ de las células renales a la luz del túbulo?
Este se va a producir principalmente por desaminación de la glutamina en las células del túbulo renal y
difunde fácilmente a través de la membrana hacia la luz del túbulo donde, se combina con H +formando
iones amonio, un ácido muy débil que es eliminado por la orina.
2. ¿De qué depende el pH de los líquidos corporales?
El nivel idóneo del pH en la sangre debe oscilar entre 7.35 y 7.45, pero la contaminación atmosférica,
los malos hábitos alimenticios o el estrés acidifican el cuerpo y alteran este pH, la sangre reacciona y
roba los nutrientes que necesita del resto de órganos vitales para compensar el desequilibro.
3. ¿Por qué se clasifica el CH3-COOH como ácido?

4. ¿Por qué es este un ácido débil? ¿Cuál es su nombre químico? ¿Cuál es su nombre trivial?
Ácido débil: Está parcialmente ionizado en solución. Un ejemplo es el ácido acético (CH3COOH). *Por
“completamente ionizado” entendemos que cada molécula o ión de ácido ha perdido el protón de su
átomo de hidrógeno ácido.
Su nombre químico es Ácido Etanoico
Su nombre trivial es Ácido Acético
5. La solución buffer fosfato está formada por las siguientes especies:
Es una solución acuosa y salina que contiene cloruro sódico, fosfato sódico,
cloruro de potasio y fosfato de potasio.

6. ¿Cuál es la importancia de este buffer en nuestro organismo?

Las grandes cantidades de fosfato dentro de las células corporales y en el
hueso hacen que el fosfato sea un depósito grande y eficaz para amortiguar
el pH.
7. ¿Cuándo está este buffer en su máxima acción amortiguadora?
La capacidad de un amortiguador de neutralizar el ácido o la base agregados depende de las
concentraciones de HA y A⁻ en la solución. Para una razón dada de [HA] a [A⁻], mientras más grande
sea la concentración, más alta será la capacidad amortiguadora general.

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Escriba la reacción, cuando a 5 mL de la solución buffer fosfato se le agrega 1 mL de HCl

8. Calcular el pH de un buffer que se forma al agregar 2.5 mL de Hidróxido de Sodio 0.1N en un

tubo que contiene 5.O mL de Ácido Acético 0.1 N. Utilizando la ecuación de Henderson
Hasselbach. Definir Ka y pKa. pKa del ácido acético = 4.7 y deducir dentro de cuales valores de
pH ejercería un buffer su máxima acción amortiguadora, tomando en cuenta el valor de pKa del
ácido que lo forma.

GLOSARIO: Favor completar con el significado de las siguientes palabras, recuerden que
son términos relacionados con el tema en cuestión

La acidosis ocurre cuando el ácido se acumula o cuando

1. Acidosis el bicarbonato (una base) se pierde. La acidosis se
clasifica como acidosis respiratoria y acidosis
metabólica. 

La cetosis es un estado metabólico en el que cuando no

2. Cetosis hay suficiente cantidad de glucosa (azúcar), el cuerpo
utiliza grasas y cetonas con el objetivo de producir
energía. 

Los cuerpos cetónicos son unos productos de desecho de las grasas que

3. Cuerpos
se producen cuando el organismo recurre a la utilización de las grasas
cetónicos en lugar de la glucosa para generar energía. En el tejido graso del
organismo hay unas células muy especializadas que almacenan la
energía en forma de triglicéridos.

4. Diabetes Es una enfermedad en la que se presentan concentraciones elevadas de

glucosa en sangre de manera persistente o crónica
Problema físico o mental que presenta una persona, el
5. Síntoma cual puede indicar una enfermedad o afección. Los
síntomas no se pueden observar y no se manifiestan en
exámenes médicos.

6. Signo Objeto, fenómeno o acción material que, por naturaleza

o convención, representa o sustituye a otro.

7. Alcalosis Es una afección provocada por el exceso de base (álcali)

8
 en los líquidos del cuerpo. La alcalosis es lo opuesto al
exceso de ácido (acidosis).

Trastorno que consiste en el aumento de la presión

8. Hipercarbia parcial del dióxido de carbono (CO2) en la sangre arterial,
por sobre el limite superior normal de 45 mm de
mercurio.

Hormona elaborada por las células de los islotes del

9. Insulina
páncreas. La insulina controla la cantidad de azúcar en la
sangre al almacenarla en las células, donde el cuerpo la
puede usar como fuente de energía.

10. Somnolenci
 es un trastorno del sueño, una actitud exagerada de este. Se tiene una
a
necesidad fuerte de dormir o incluso se duerme durante periodos
prolongados (hipersomnia).