Facultad de Ciencias Médicas

LABORATORIOS

INFORME DE LABORATORIO
TEMA: Determinación de glucosa en suero
FECHA: 21-02-2023.
INTEGRANTES DEL GRUPO: Myerlin Tapia; Karla Buenaño; Josue
Chicaiza; Sebastian Izurieta.
NIVEL Y PARALELO: Tercero G.

I. INTRODUCCIÓN:

La glucosa es el principal combustible metabólico de la mayoría de células. A

través de la vía de la glucólisis, se metaboliza y se convierte en piruvato. En los
tejidos aeróbicos, el piruvato se metaboliza a acetil-CoA, el cual puede entrar en
el ciclo del ácido cítrico para su completa oxidación a CO2 y H2O, generando
ATP mediante la fosforilación oxidativa. Sin embargo, la glucólisis también
puede ocurrir de manera anaeróbica en ausencia de oxígeno, lo cual resulta en la
producción de lactato como producto final.
Además de su papel en la generación de energía, la glucosa y sus metabolitos
participan en otros procesos. Por ejemplo, se utiliza para sintetizar el polímero de
almacenamiento glucógeno en el músculo y el hígado, y también está involucrada
en la vía de la pentosa fosfato, una ruta alternativa que se deriva de la glucólisis.
La glucosa actúa como fuente de equivalentes reductores (NADPH) para la
síntesis de ácidos grasos, y proporciona ribosa para la síntesis de nucleótidos y
ácidos nucleicos. Los intermediarios de la glucólisis, como los triosa-fosfatos,
contribuyen a la formación de la porción glicerol de los triacilgliceroles.
El piruvato y los intermediarios del ciclo del ácido cítrico son utilizados como
esqueletos carbonados para la síntesis de aminoácidos no esenciales. Además, el
acetil-CoA es un precursor importante en la biosíntesis de ácidos grasos,
colesterol y todas las hormonas esteroides sintetizadas en el cuerpo. Por otro lado,
la gluconeogénesis es el proceso mediante el cual se sintetiza glucosa a partir de
precursores no carbohidratos, como lactato, aminoácidos y glicerol.

Método para determinar la glucosa en suero

II. La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en
III. presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado
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IV. reacciona bajo la catálisis de peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona
V. formando un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina como
VI. indicador
VII. La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en
VIII. presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado
IX. reacciona bajo la catálisis de peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona
X. formando un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina como
XI. indicador
La glucosa en suero se determina después de la oxidación enzimática en presencia
de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis
de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona formando un complejo rojo-violeta
usando la quinoneímina como indicador.
Principio de la reacción
GOD
Glucosa + O2 + H2O →ácido glucónico + H2O2
POD
2 H2O2 + 4-aminofenazona + fenol → quinoneimina + 4 H2O
XII. OBJETIVOS:
Objetivo general:
Identificar y aprender el método preciso adecuado para la determinación
cuantitativa de la concentración de glucosa en suero mediante una práctica de
laboratorio, utilizando un equipo analítico específico y siguiendo los
procedimientos estándar de laboratorio.
Objetivos específicos:
• Establecer un método preciso y confiable para la determinación de glucosa
en suero mediante el uso de un equipo analítico específico, como un
espectrofotómetro o un glucómetro.
• Evaluar la concentración de glucosa en diferentes muestras de suero
utilizando el método establecido, y comparar los resultados obtenidos con los
valores de referencia para verificar la exactitud y la precisión del método
utilizado.

XIII. MATERIAL Y MÉTODOS:

MATERIALES
 Equipo de protección personal
Guantes
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Mascarilla
Gorro
Mandil
 Extracción sanguínea
 2 Tubos tapa roja
 1 Torniquete
 Torundas de algodón
 Alcohol antiséptico
 Sistema vacuntainer (2 agujas+ capuchón) o jeringuilla
 1 Guardián de bioseguridad

 Determinación de glucosa en suero

 1 gradilla
 3 tubos de ensayo de 6 ml
 1 micropipeta de 1000 µl
 1 micropipeta de 10 µl
 Puntas azules para micropipeta
 Puntas amarillas para micropipetas
 Celda de vidrio
 1 vaso de precipitación de 100 mL
 1 Piseta
 1 Marcador para vidrio
 Toallas Kleenex

EQUIPOS
1. Espectrofotómetro
2. Centrífuga
3. Baño termostático
4. Cronómetro

REACTIVOS
Kit para determinación de glucosa mediante método colorimétrico GOD-PAP
Reactivo (RGT) + solución Estándar (STD)
Agua destilada

MÉTODOS
1. Obtener una muestra en sangre venosa mediante venopunción
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2. Centrifugar los tubos que contienen las muestras por 3-5 minutos a
5000 rpm
Rotular los tubos: (B) - Blanco (St)- Reactivo estándar (Mp)- Muestra
problema
Rotular los tubos: (B) - Blanco (St)- Reactivo estándar (Mp)- Muestra
problemaRotular los tubos: Blanco (B), Estándar (S) y Muestra (M).
1. Con ayuda de la pipeta correctamente calibrada colocamos en los tubos:
En el
2. tubo de estándar colocamos la cantidad 10 ul de estándar indicada en el
inserto
3. y, en el tubo de muestra colocamos la cantidad de 10 ul de suero o plasma
4. respectiva de acuerdo con el inserto
3. Pipetear en cada tubo 1000 µL de reactivo (RGT)
4. Pipetear 10 µL de solución Estándar (STD) en el tubo S y mezclar
5. Pipetear 10 µL de suero de la muestra en el tubo M y mezclar.

Tabla 1. Esquema de Pipeteo

Pipetear en los Blanco (B) Estándar (S) Muestra (M)
tubos
Reactivo (RGT) 1000 µL 1000 µL 1000 µL
Solución - 10 µL -
Estándar (STD)
Suero de la - - 10 µL
muestra

5. Incubar por 5 minutos a 37oC

6. Leer en el espectrofotó metro la absorbancia de cada tubo contra el blanco, a
una longitud de onda de 500 nm.
7. Realizar el cá lculo de la concentració n de glucosa usando la fó rmula:

mg 0,276
Glucosa( )= ×100
dL 0,480

Glucosa ( mgdL )=0,575 ×100

mg
Glucosa( )=57,5 mg/dl
dL

XIV. RESULTADOS:

Paciente Concentración de glucosa en suero

mg/dL
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Sebastiá n Izurieta 57,5 mg/dL

Paciente Concentración de glucosa en Concentración de

suero mg/dL (Ayunas) glucosa en suero mg/dL
(postprandial 30
minutos)
Jimy Villareal. 77,33mg/dL 86,20 mg/dL

XV. DISCUSIÓN
Comparar resultados con valores de referencia. Explicar posibles causas del resultado
obtenido.

En el presente informe de laboratorio, se analizó la concentración de glucosa en

suero de dos pacientes, tras un período de 2 horas después de consumir alimentos.
En el primer paciente, se observó que la concentración de glucosa en suero fue de
86.20 mg/dl, lo cual se encuentra dentro de los valores referenciales considerados
normales.
Es importante destacar que los valores de glucosa en suero pueden variar
significativamente dependiendo de diferentes factores, como la ingesta de
alimentos, la actividad física y otros factores individuales. En este caso, la
medición de glucosa en suero después de consumir alimentos es una forma común
de evaluar la respuesta glucémica del organismo.
Es interesante notar que el consumo de alcohol puede tener un impacto
significativo en los niveles de glucosa en suero. En general, se ha observado que
el alcohol puede disminuir los niveles de glucosa en el organismo, lo cual puede
explicar la baja concentración de glucosa en el primer paciente.
En contraste, en el segundo paciente, se observó que los estándares de glucosa en
suero se encontraban dentro de los valores normales. Esto indica que la respuesta
glucémica del organismo a la ingesta de alimentos en este paciente fue adecuada y
se mantuvo dentro de los rangos de referencia
En conclusión, la determinación de la concentración de glucosa en suero es una
herramienta útil para evaluar la respuesta glucémica del organismo. El consumo
de alcohol puede tener un impacto en los niveles de glucosa en suero,
disminuyendo su concentración. Es importante tener en cuenta estos factores al
interpretar los resultados de las pruebas de glucosa en suero y considerar otros
factores individuales que puedan influir en los niveles de glucosa.
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XVI. CUESTIONARIO:

1. ¿Cuáles son los valores de referencia de Glucemia?

Los valores de azúcar en la sangre en ayunas de 99 mg/dl o menores son
normales, los de 100 a 125 mg/dl indican que tiene prediabetes y los de 126 mg/dl
o mayores indican que tiene diabetes.
2. Explique el mecanismo de regulación de la glucemia
Regulación de la glucemia en una persona normal la concentración de glucosa en
sangre está regulada entre límites estrechos habitualmente entre 80 y 90
miligramos por decilitro de sangre en personas en ayunas por la mañana antes del
desayuno esta concentración se eleva a 120 a 140 miligramos por decilitro
durante más o menos una hora después de la toma de alimento.
El sistema de retroacción de control de la glucemia devuelve la glucemia
rápidamente al nivel de control habitualmente dentro de las dos horas que sigan a
la última absorción de carbohidratos
 Inversa en el ayuno la función hepática de glucogénesis suministra la glucosa
para mantener el nivel de glucemia en ayunas hay cuatro mecanismos por los que
se logra este alto grado de control
1. El hígado funciona como un importante sistema amortiguador de la
glucosa sanguínea es decir cuando la glucemia se eleva mucho tras una
toma de alimento y la tasa de secreción de insulina se incrementa también
hasta 2/3 de la glucosa absorbida por el tubo digestivo donde se almacenan
de forma casi inmediata en el hígado en forma de glucógeno después en
las horas siguientes cuando desciende, la glucemia que ,la secreción de
insulina, el hígado que la secreción de insulina ,el hígado vuelve a liberar
la glucosa a la sangre de esta forma el hígado disminuye las fluctuaciones
de la glucemia 1/3 de las que se producirían .
En pacientes con hepatopatía grave se vuelve casi imposible mantener la
glucemia en unos límites estrechos.
2. La insulina y el glucagón funcionan como importantes mecanismos de
control por retracción para mantener una glucemia normal cuando la
concentración de glucosa se eleva en exceso se secreta insulina y la
insulina hace que la glucemia descienda hacia la normalidad a la inversa
una disminución de la glucosa estimula la secreción de glucagón el
glucagón funciona entonces en la dirección opuesta para aumentar la
glucemia hacia el nivel normal.
Las situaciones normales los mecanismos de retracción de la insulina son
potentes que los de glucagón, pero en casos de ayuno prolongado en la
utilización excesiva de glucosa durante el ejercicio u otras situaciones de
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estrés, el mecanismo de glucagón también se vuelve valioso en la
hipoglucemia grave 3.
3. En la hipoglucemia grave un efecto directo de la glucemia baja sobre el
hipotálamo estimula el sistema nervioso simpático a su vez la adrenalina
secretada por las glándulas suprarrenales causa todavía más liberación de
glucosa del hígado esto también ayuda a proteger contra la hipoglucemia
grave 4.
4. Finalmente, a lo largo de un periodo de horas y días se secretan en
respuesta a la hipoglucemia prolongada tanto la hormona del crecimiento
como el cortisol y ambas disminuyen la tasa de utilización de glucosa por
la mayor parte de las células del organismo promoviendo en su lugar una
mayor utilización de las grasas esto también ayuda a que el nivel, de
glucemia tiende a normalizarse.

3. Consultar causas de hipoglicemia

La hipoglucemia tiene varias causas que para su mejor análisis se agrupan en dos
tipos: postpandriales (reactivas) y del ayuno. Las formas de presentación de cada
una de esta suelen ser diferentes.
 Hipoglucemia postpandrial (reactivas).
 Por intervenciones sobre el tubo digestivo superior.
 Hiperalimentación.
 Insuficiencia suprarrenal, insulinoma, autoinmune.
 Hipoglucemia de ayuno.
 Insulinoma, Hiperplasia de las Células Beta, NEM I.
 Tumores extrapancreáticos
 Déficit de las hormonas de contrarregulación (Hipopituitarismo,
Insuficiencia Adrenal).
 Insuficiencia Hepática.
 Insuficiencia Renal.
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 Autoinmune.
 Sepsis.
 Fármacos (facticia).
 Etanol
La hipoglucemia reactiva, también conocida como postpandrial se observa con
frecuencia en individuos que se les realizo gastrectomía, piloroplastía o vagotomía
y como consecuencia de la liberación rápida de glucosa postingesta se estimula la
secreción de insulina favorecida también por sustancias insulinotropas
intestinales. Los síntomas de hipoglucemia son predominantemente autónomos,
aparecen de 30 a 120 minutos luego de consumir alimento, tiene carácter
transitorio y suelen ser controlados por las respuestas hormonales.
La hipoglucemia de ayuno incluye prácticamente a todas las etiologías orgánicas
y es consecuencia de la diferencia entre la producción y utilización de glucosa.
Los síntomas aparecen luego de 2 a 4 horas de la ingesta de alimentos. Se puede
producir por una o varias de las siguientes causas.
 Aumento de la utilización periférica de glucosa secundaria a una
concentración patológica de insulina en plasma tanto de origen endógeno
como exógeno.
 Falla en la síntesis o en la secreción de las hormonas de contrarregulación.

4. ¿Cómo se espera que se encuentre la glucemia, la insulina y el

glucagón en el estado de ayuno y postprandial?

La glucosa como lo conocemos es la principal fuente de energía por el cuerpo esto

se produce a partir de la glucogénesis proceso donde se produce en Glucosa a
partir de otros componentes no grupos hídricos como acido lactato, aminoácidos y
éstos viajan al hígado para procesar la energía
Las hormonas pancreáticas insulina y glucagón son las principales señales que
alertan a las células del estado de glucemia tomando en cuenta que el cerebro y
eritrocitos dependen exclusivamente de la glucosa, la regulación de la glucosa es
importante para el buen funcionamiento del cuerpo en la regulación de la glicemia
postprandial trabaja la insulina una
hormona producida secretada por las células beta del páncreas esto se libera como
respuesta a la presencia de altas, concentraciones de glucosa en la sangre, estimula
la actividad enzimática permitiendo así que el azúcar entre las células.
la regulación de la glicemia en el ayudo en esto trabaja el glucagón esto es una
hormona secretada por las células alfa del páncreas, está a bajas concentraciones
de glucosa en sangre disminuye la insulina y libera lactato, glicerol y aminoácidos
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almacenados para formar glucosa, si el estado de ayuno se prolonga 30 horas la
glucosa se agota y la gluconeogénesis se vuelve la fuente principal de energía.
Glucagón. Efectos metabólicos
Gurkagon es un polipéptido de 29 aminoácidos sintetizado y liberado por células
alfa en el páncreas del páncreas, a diferencia de la insulina, aumenta el nivel de
azúcar en la sangre. En otras palabras, es una hormona hiperglucémica.
 Al igual que la insulina, la vida media del plasma es de aproximadamente
6 minutos.
 La organización principal es el hígado.
 Impacto en la proteína. Gurkagon contribuye a aumentar la captura del
hígado de algunos aminoácidos y la captura del hígado de la nueva síntesis
de glucosa a partir de aminoácidos, y elevar el nivel de glucosa en plasma.
 Impacto en la grasa. Aumente la lipólisis, movilice ácidos grasos y glicerol
del tejido grasa, proporcione sustratos metabólicos y use glucosa que se
pueda usar en el cerebro. El glicerol puede actuar como un precursor de la
glucosa en la glucosa del hígado.
 Impacto en los carbohidratos. Gurkagon aumenta la descomposición del
glucógeno hepático, y más glucosa pasa a través del plasma,
obstaculizando la síntesis de glucógeno.
Insulina (Efectos metabólicos).
Las células beta de la isla Langerhans contienen gránulos de muñecas de insulina
que unen la membrana celular y liberan su contenido en la sangre. La insulina se
vierte en sangre venosa portal, de modo que la sangre que llega al hígado por esta
ruta la transporta a una alta concentración. La insulina se une a los receptores
glucoproteicos de la superficie de la célula objetivo, lo que provoca la inserción
del transportador de preforma de glucosa con lo que aumenta la recolección de
glucosa por las células diana.
 La mayoría de la circulación de la insulina está relacionada con la β-
globulina, pero la vida media de la insulina en el plasma es muy corta,
aproximadamente 5 minutos, porque es capturada inmediatamente por el
tejido, especialmente el hígado, el riñón, los músculos y el tejido adiposo.
 La insulina provoca el transporte activo de aminoácidos en las células y un
aumento de la síntesis de proteínas y disminuyó el catabolismo de
proteínas, lo que apoya el almacenamiento de proteínas en las células.
 La insulina aumenta la lipogénesis con la conversión de glucosa u otros
nutrientes en los ácidos grasos y el aumento de los depósitos de
triglicéridos en el tejido adiposo.
 La insulina se secreta en respuesta a un alto nivel de glucemia y produce
efectos hipoglucémicos (reduciendo los niveles de glucosa en plasma) que
porque facilita la entrada de glucosa en células que tienen receptores de
insulina. También acelera la conversión de glucógeno (glucogénesis) con
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un aumento en los depósitos de glucógeno en las células y reduciendo la
glucogénesis y la gluconeogénesis.

5. ¿Qué es el test de tolerancia a la glucosa? ¿Cuándo se usa?

La prueba de glucosa en la sangre mide los niveles de glucosa en la sangre. La
glucosa es un tipo de azúcar. Es la principal fuente de energía del cuerpo.
Una hormona llamada insulina ayuda a que la glucosa pase del torrente sanguíneo
a las células.
Una cantidad excesiva o insuficiente de glucosa en la sangre podría ser un signo
de un problema médico serio. Los niveles altos de glucosa en la sangre
(hiperglucemia) pueden ser un signo de diabetes, una enfermedad que puede
causar serios problemas de salud a largo plazo.
Niveles altos de glucosa en la sangre también pueden ser causados por otras
enfermedades que afectan los niveles de insulina o glucosa en la sangre, como
problemas con el páncreas y glándulas suprarrenales.
Niveles bajos de glucosa en la sangre (hipoglucemia) son comunes en personas
con diabetes tipo 1 y diabetes tipo 2 que toman ciertos medicamentos para la
diabetes. Algunas afecciones, como enfermedad del hígado, pueden causar niveles
bajos de glucosa en la sangre en personas sin diabetes, pero esto es poco común.
Sin tratamiento, niveles bajos de glucosa en la sangre demasiado severos pueden
causar problemas de salud graves, incluyendo convulsiones y daño cerebral.
Otros nombres: azúcar en la sangre, autocontrol de la glucemia, glucosa
plasmática en ayunas (GPA), glucemia en ayunas, nivel de azúcar en ayunas,
glucemia aleatoria o al azar, prueba de tolerancia a la glucosa, prueba de
tolerancia a la glucosa oral (PTGO).
¿Cuándo se usa?

El profesional de la salud podría pedir una prueba de glucosa en la sangre si se

tiene síntomas de niveles altos o bajos de glucosa. Los síntomas de niveles altos
de glucosa en la sangre incluyen:

 Aumento de la sed y orinar con más frecuencia

 Visión borrosa
 Cansancio
 Heridas que no sanan
 Pérdida de peso cuando no está tratando de perder peso
 Entumecimiento u hormigueo en los pies o las manos
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Los síntomas de niveles bajos de glucosa en la sangre incluyen:
 Sentirse tembloroso o nervioso
 Hambre
 Cansancio
 Sentir mareos, confusión o irritabilidad
 Dolor de cabeza
 Latidos cardíacos rápidos o arritmia (un problema con la frecuencia o
ritmo del corazón)
 Problemas para ver o hablar claramente
 Desmayos o convulsiones
También se puede necesitar una prueba de glucosa en la sangre si se tiene un alto
riesgo de desarrollar diabetes tipo 2. Se tiene más posibilidades de desarrollar
diabetes si:
 Tiene sobrepeso u obesidad
 Tiene más de 45 años
 Tiene historia familiar de diabetes
 Tiene presión arterial alta
 No hace suficiente ejercicio
 Tiene antecedentes de enfermedad cardíaca o accidente cerebrovascular
 Tuvo diabetes gestacional (diabetes que sólo se presenta en el embarazo)

XVII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Fauci, Wilson, & Harrison, T. R. (2000). Principios de Medicina Interna

(2 T.) (14a ed.). McGraw-Hill Professional Publishing.

2. Jorge E. Zanguitu, & Perfil, V. T. mi. (s/f). BIOLOGÍA 3o SECUNDARIA.

Blogspot.com. Recuperado el 21 de junio de 2023, de

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http://biologiaterceroiem.blogspot.com/2015/09/regulacion-de-la-

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3. Insulina y Glucagón en la regulación de la glicemia en ayuno y

postpandrial. (2020, noviembre 26). Youtube.

https://www.youtube.com/watch?v=tiddbKPESkw

4. Índice glucémico. Metabolismo y control de la glucemia. (s/f).

Unam.mx. Recuperado el 21 de junio de 2023, de

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Com.ar. Recuperado el 21 de junio de 2023, de http://www.clinica-

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7. Prueba de glucosa en la sangre. (s/f). Medlineplus.gov. Recuperado el

21 de junio de 2023, de https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-

de-laboratorio/prueba-de-glucosa-en-la-sangre/