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C A P Í T U L O

Crecimiento, supervivencia y
muerte de microorganismos 4
SUPERVIVENCIA de cultivo). Estos dos parámetros no siempre son equivalen-
tes debido a que el promedio de peso seco de una célula varía
DE MICROORGANISMOS en diferentes etapas de un cultivo. Tampoco tienen la misma
EN UN AMBIENTE NATURAL relevancia: por ejemplo, en estudios de genética e inactivación
La población de microorganismos en la biosfera se mantiene de microbios, la concentración de células es el parámetro más
casi constante debido a que la muerte de éstos equilibra su cre- relevante; en estudios de nutrición o bioquímica microbiana, la
concentración de biomasa es la medida más importante.
cimiento. La supervivencia de cualquier grupo microbiano en
un nicho ambiental es influenciada por la exitosa competencia
de nutrientes y por el mantenimiento de un acervo de todas A. Recuento de células viables
las células vivas, a menudo compuesto de células humanas y Por lo general, el recuento de células viables (cuadro 4-1) es
un conjunto de microorganismos diferentes (conocidos como la medida de la concentración de células. Para realizarlo, se
microbioma o microbiota). Es indispensable comprender la obtiene 1 ml de una suspensión de bacterias y se realizan dilu-
competencia por recursos nutritivos en un ambiente determi- ciones seriales 1:10; después se cultivan alícuotas de 0.1 ml en
nado para entender el crecimiento, la supervivencia y la muerte un medio de agar. Cada bacteria invisible individual (o acumu-
de especies bacterianas (un conjunto de conceptos conocidos lación de bacterias) crecerá para formar una colonia visible que
como fisiología). puede contarse (capítulo 5). Para propósitos estadísticos, las
Gran parte del conocimiento de la fisiología microbiana placas que contienen entre 30 y 300 colonias proporcionan los
proviene del estudio de cultivos aislados que crecen en con- datos más precisos. El conteo de la placa × la dilución × 10 dará
diciones óptimas (con exceso de nutrientes) en laboratorios. el número de unidades formadoras de colonias (CFU, colony
Sin embargo, la mayoría de los microorganismos compite en forming units)/ml en la suspensión bacteriana no diluida. Con
ambientes naturales bajo condiciones de estrés nutricional. este método, las bacterias muertas en la suspensión no contri-
Además, una microbiota diferente puede ocupar un nicho buyen al recuento bacteriano final.
microbiano ambiental libre en poco tiempo. Al final, las com-
plejas interacciones que garantizan la sobrevivencia de un B. Turbidez
microbioma específico consisten en un balance entre la dispo- Para la mayoría de los propósitos, la turbidez de un cultivo
nibilidad de nutrientes y el rendimiento fisiológico. (calculada por medios fotoeléctricos) puede relacionarse con
el recuento de células viables utilizando una curva estándar.
Como alternativa, en ocasiones es posible realizar un cálculo
visual aproximado: por ejemplo, una suspensión poco turbia
SIGNIFICADO DE CRECIMIENTO de Escherichia coli contiene cerca de 107 células/ml, mientras
El crecimiento es el incremento ordenado de la suma de todos que una suspensión muy turbia incluye cerca de 108 células/ml.
los componentes de un organismo. El aumento de tamaño La correlación entre la turbidez y el recuento de células viables
que resulta cuando una célula absorbe agua o almacena lípi- puede variar durante el crecimiento y la muerte de un cultivo;
dos o polisacáridos no es crecimiento real. La multiplicación las células pueden perder viabilidad sin disminuir la turbidez
de células es consecuencia de fisión binaria; ésta incrementa del cultivo.
el número de las bacterias individuales que conforman una
población, conocida como cultivo. C. Densidad de biomasa
En principio, es posible medir la biomasa de forma directa
determinando el peso seco de un cultivo microbiano después
Medición de concentraciones microbianas de que se ha lavado con agua destilada. En la práctica, este pro-
Las concentraciones microbianas pueden medirse en térmi- cedimiento es complejo y requiere de una curva estándar que
nos de la concentración de células (el número de células via- correlacione el peso seco con el recuento de células viables. De
bles por unidad de volumen de cultivo) o de la concentración manera alternativa, la concentración de biomasa puede calcu-
de biomasa (el peso seco de células por unidad de volumen larse de manera indirecta al medir un componente celular
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56 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología

CUADRO 41 Ejemplo de un recuento de células Cálculo de la constante de la tasa de

viables crecimiento y predicción de la magnitud
Dilución Conteo en placaa de crecimiento
Sin diluir Incontable Las bacterias se reproducen por fisión binaria; el tiempo
−1
promedio requerido para que la población, o la biomasa, se
10 Incontable
duplique se conoce como tiempo de generación o tiempo de
−2
10 510 duplicación (td). Por lo general, el td se determina graficando la
10−3 72 cantidad de crecimiento en una escala semilogarítmica como
una función del tiempo; el tiempo necesario para duplicar la
10−4 6 biomasa es el td (figura 4-1). La constante de la tasa de creci-
10 −5
1 miento puede deducirse a partir del tiempo de duplicación,
a
sustituyendo el valor 2 por B1/B 0 y td por t1 − t0 en la ecuación
Cada recuento es el promedio de tres réplicas.
3, lo cual es igual a:
ln2 = ktd
importante, como las proteínas, o al determinar el volumen ln2
ocupado por células establecidas fuera de la suspensión. k= (4)
td

Un tiempo de duplicación rápido corresponde a una

CRECIMIENTO EXPONENCIAL elevada constante de la tasa de crecimiento. Por ejemplo, un
tiempo de duplicación de 10 min (0.17 h) corresponde a valor
Constante de la tasa de crecimiento de k de 4.1 h−1. Un tiempo de duplicación de 35 h (relativa-
Las tasa de crecimiento de células ilimitado por nutriente es: la mente largo) indica una constante de la tasa de crecimiento
tasa de crecimiento (medida en gramos de biomasa producidos de 0.02 h−1.
por hora) es el producto del tiempo (t), la constante de la tasa La constante de la tasa de crecimiento resultante puede
de crecimiento (k) y la concentración de la biomasa B: utilizarse para calcular la cantidad de crecimiento que ocurrirá
en un periodo específico o para prever el tiempo necesario para
dB un crecimiento determinado.
= kB (1)
dt El crecimiento en un lapso específico se puede pronosticar
con base en el siguiente despeje de la ecuación 3:
El despeje de la ecuación 1 demuestra que la constante de
B1 k(t1 − t0 )
la tasa de crecimiento es la tasa a la cual las células producen log10 = (5)
más células: B0 2.3

Bdt
k= (2)
dB
16
Una constante de la tasa de crecimiento de 4.3 h−1, una de
las más altas registradas, indica que cada gramo de células pro-
duce 4.3 g de células por hora durante este periodo de incre-
mento. Organismos que crecen con más lentitud pueden tener 8
constantes de tasas de crecimiento tan bajas como 0.02 h−1. Con
Biomasa (B)

este valor de k, cada gramo de células en el cultivo produce 0.02

g de células por hora.
4
La integración de la ecuación 2 es igual a :

B1 B
ln = 2.3 log10 1 = k(t1 − t0) (3)
B0 B0
2

El logaritmo natural del cociente entre B1 (la biomasa en

el tiempo 1 [t1]) y B 0 (la biomasa en el tiempo cero [t0]) es igual
al producto de la constante de la tasa de crecimiento (k) y la 1
td 2td 3td 4td
diferencia de tiempo (t1 − t0). El crecimiento que obedece a la
Tiempo de duplicación (td)
ecuación (3) se denomina exponencial debido a que la biomasa
se incrementa de esta forma respecto al tiempo. Para obtener FIGURA 41 Gráfica de biomasa contra tiempo de duplicación,
correlaciones lineales de crecimiento exponencial se debe gra- que muestra el crecimiento exponencial lineal que ocurriría en un
ficar el logaritmo de la concentración de biomasa (B) como una sistema cerrado. La biomasa (B) aumenta al doble con cada tiempo de
función del tiempo (t). duplicación (td).

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 57

Es posible determinar el crecimiento que ocurriría si un Fase

cultivo con una constante de la tasa de crecimiento de 4.1 h−1

Logaritmo de la concentración
estacionaria
creciera de manera exponencial durante 5 h: Fase de muerte
o declinación

de células viables
Fase de
B1 4.1 h−1 × 5 h crecimiento logarítmica
log10 = (6)
B0 2.3 exponencial

En este ejemplo, el incremento de la biomasa es 10−9 g; una

Fase de
sola bacteria con un peso seco de 2 × 10−13 g incrementaría a
latencia
2 × 10−4 g (0.2 mg) de biomasa, una cantidad que poblaría de
forma densa un cultivo de 5 ml. Otras 5 h de crecimiento a esta
tasa producirían 200 kg de peso seco de biomasa, o cerca de
Tiempo
una tonelada de células. Esto ocurriría si los nutrientes fueran
ilimitados, lo cual no sucede en la naturaleza. FIGURA 42 Gráfica del logaritmo de la concentración de células
Otro despeje de la ecuación 3 permite calcular el tiempo viables contra el tiempo, donde se observa una curva ideal de
necesario para que ocurra una cantidad específica de creci- crecimiento bacteriano. En la figura se observan las fases de latencia,
miento. En la ecuación 7, que se muestra más adelante, N (la exponencial, estacionaria y de muerte, con las tasas aproximadas
concentración de células) se sustituye por B (la concentración de incremento o disminución que representan lo que se esperaría
observar después de inocular una sola colonia bacteriana en un
de biomasa) para poder calcular el tiempo necesario para un
sistema cerrado de cultivo discontinuo.
incremento específico del número de células.
2.3log10 ( N1 /N 0 )
t1 − t0 = (7)
k y las células humanas. Sin embargo, comprender cómo ocurre
el crecimiento en cultivos discontinuos es fundamental para el
Al utilizar la ecuación 7 es posible, por ejemplo, determi- estudio de la genética y la fisiología de la replicación bacteriana,
nar el tiempo necesario para que una sola célula de crecimiento incluyendo las fases de latencia, exponencial, estacionaria y de
lento con una constante de la tasa de crecimiento de 0.02 h−1 muerte que comprende este proceso.
forme una suspensión de células poco turbia con una concen-
tración de 107 células por mililitro.
Fase de latencia
2.3 × 7 Durante la fase de latencia, las células (que carecen de metabo-
t1 − t0 = (8)
0.02 h −1 litos y enzimas como resultado de las condiciones desfavora-
bles que existieron al final de su cultivo previo) se adaptan a su
El resultado de la ecuación 8 revela que serían necesarias nuevo ambiente. Las enzimas y sus intermediarios se forman
cerca de 800 h (un poco más de un mes) para que ocurriera y acumulan hasta que alcanzan concentraciones que permiten
un crecimiento de dicha magnitud. La supervivencia de orga- reiniciar el crecimiento.
nismos de desarrollo lento implica que la carrera por la sobre- A menudo las células que se cultivan en un medio com-
vivencia biológica no siempre la ganan los organismos que se pletamente diferente al original son genéticamente incapaces
reproducen más rápido sino que prosperan las especies que de crecer. En dichos casos puede presentarse un periodo de
compiten de forma exitosa por los nutrientes y evitan la ani- latencia prolongado, que representa el lapso en el que algunas
quilación por predadores y otros riesgos ambientales. variantes del inóculo se multiplican lo suficiente para que sea
aparente un incremento neto del número de células.

CURVA DE CRECIMIENTO Fase exponencial

EN CULTIVOS DISCONTINUOS Durante la fase exponencial, las células se encuentran en un
estado de equilibrio y crecen según las ecuaciones 5 a 7. El nuevo
Si un volumen fijo de medio líquido se inocula con célu- material celular se sintetiza a una tasa constante, pero es catalí-
las microbianas provenientes de un cultivo que ya ha crecido tico por sí mismo y la masa incrementa de manera exponencial.
hasta la saturación, y se determina y grafica de forma perió-
dica el número de células viables por mililitro, por lo general
se obtiene una curva como la que se muestra en la figura 4-2.
Las fases de la curva de crecimiento bacteriano que se mues- CUADRO 42 Fases de la curva de
tran en dicha imagen reflejan los eventos que ocurren en una crecimiento microbiano
población de organismos, no en células individuales. Este tipo Fase Tasa de crecimiento
de cultivo se conoce como cultivo discontinuo. Una curva de De latencia Cero
crecimiento típica muestra cuatro fases (cuadro 4-2). El cul- Exponencial Constante
tivo discontinuo es un sistema cerrado con recursos finitos,
Estacionaria máxima Cero
muy diferente al ambiente que se encuentra en un hospedador
De declinación Negativa (muerte)
humano donde los nutrientes se metabolizan por las bacterias

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58 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología

Esto continúa hasta que se agotan uno o más nutrientes del decantación y un mecanismo para abastecer medio fresco a un
medio o hasta que se acumulan productos metabólicos tóxi- ritmo regulado. El medio en el recipiente de cultivo es agitado
cos que inhiben el crecimiento. Para los organismos aerobios, por una corriente de aire estéril; cada gota de medio fresco que
el nutriente limitante por lo general es el oxígeno. Cuando la entra saca una gota de medio del reservorio. El medio se pre-
concentración de células excede casi 1 × 107/ml, la tasa de cre- para de tal manera que un nutriente limita el crecimiento. El
cimiento disminuye a menos que se agregue oxígeno al medio recipiente se inocula y las células crecen hasta que se termina
mediante agitación o burbujeo de aire. Cuando la concentra- el nutriente limitante; entonces se permite que el medio fresco
ción bacteriana alcanza 4 a 5 × 109/ml, la tasa de difusión de fluya al interior a un ritmo tal que permita que las células uti-
oxígeno no puede satisfacer la demanda incluso en un medio licen el nutriente limitante tan rápido como es abastecido. En
ventilado, y el crecimiento se lentifica de forma progresiva. estas condiciones, la concentración de células permanece cons-
tante y la tasa de crecimiento es directamente proporcional a
la tasa del flujo de medio. El cultivo continuo es similar a las
Fase estacionaria condiciones de los organismos que se encuentran en el mundo
Al final, el agotamiento de nutrientes o la acumulación de pro- real (p. ej., el cuerpo humano), donde los nutrientes limitantes
ductos tóxicos interrumpen por completo el crecimiento. Sin se reemplazan de forma constante.
embargo, en la mayoría de los casos el recambio celular ocurre
en la fase estacionaria. Hay una pérdida lenta de células que
mueren, la cual se balancea por la formación de células nue-
CRECIMIENTO EN BIOPELÍCULAS
vas mediante crecimiento y división. Cuando esto ocurre, la Ahora se sabe que muchas infecciones se producen por bac-
cantidad total de células incrementa con lentitud, aunque el terias que no crecen de manera individual (de forma planctó-
recuento viable permanece constante. nica) y que se desarrollan en comunidades complejas e íntimas.
Por ejemplo, es habitual desbridar los dientes todos los días
Fase de muerte para eliminar la biopelícula bacteriana que se acumula durante
el sueño. De manera similar, la formación de biopelículas está
Después de cierto tiempo en la fase estacionaria, la viabilidad relacionada con la presencia de Streptococcus viridians en las
de las células comienza a disminuir a una tasa definida. Ésta válvulas cardiacas, con infecciones pulmonares por Pseudo-
varía con el tipo de organismo y con las condiciones del cul- monas aeruginosa, con Staphylococcus aureus en catéteres o
tivo; la tasa de muerte incrementa hasta que alcanza un nivel colonización de Legionella pneumophila en sistemas de agua
equilibrado. Los aspectos matemáticos de la muerte en estado de hospitales, por mencionar algunos ejemplos. El estudio de
estable se discuten a continuación. En la mayoría de los casos la formación de biopelículas bacterianas se ha convertido en un
la tasa de muerte celular es mucho más lenta que la de creci- aspecto muy importante de la microbiología médica.
miento exponencial. Con frecuencia, después de que la mayo- Las biopelículas comienzan con una sola bacteria que se
ría de las células ha muerto, la tasa de mortalidad disminuye incuba en una superficie y que después experimenta fisión bina-
de forma drástica, de tal manera que un pequeño número de ria para formar una íntima comunidad (capítulo 10). Eventual-
supervivientes puede persistir durante meses e incluso años. mente esta entidad bacteriana se rodeará a sí misma con un
Esta persistencia puede en algunos casos reflejar el recambio glucocáliz para protegerse del ambiente y mantenerse intacta.
celular, en el que unas cuantas células crecen a expensas de los Estos organismos producen moléculas pequeñas, como homo-
nutrientes liberados de las células muertas que presentan lisis. serina-lactonas, que absorben bacterias adyacentes y que en
Se cree que un fenómeno de los cultivos bacterianos cono- términos funcionales sirven como un sistema de “telecomu-
cido como estado viable pero no cultivable (VBNC, viable but nicación” entre los integrantes de la colonia. Este sistema le
not culturable) es el resultado de una respuesta genética que se indica a bacterias individuales que activen ciertos genes en un
activa en células sin nutrientes en fase estacionaria. Justo como momento específico (percepción de quórum). Estas señales se
algunas bacterias forman esporas como un mecanismo de conocen como sensores de quórum. Con base en lo anterior, es
supervivencia, otras son capaces de permanecer inactivas sin evidente que el crecimiento bacteriano en una biopelícula no
experimentar cambios morfológicos. Cuando hay condiciones es diferente a la evolución social de animales de orden superior.
apropiadas (p. ej., al pasar a través de un animal), los microbios En términos conceptuales, la estrategia de la formación
en estado VNBC reanudan su crecimiento. de una biopelícula es lógica. Promueve una mayor diversidad
metabólica. Por ejemplo, las bacterias ubicadas en la periferia
de la biopelícula pueden tener mayor acceso a oxígeno y otros
MANTENIMIENTO DE CÉLULAS nutrientes que los organismos del centro. Por otra parte, las
EN LA FASE EXPONENCIAL células del interior están protegidas de las células inmunita-
rias o de los antibióticos. Las bacterias que están íntimamente
Quimiostato adheridas pueden transferirse genes de forma eficiente, lo cual
Las células pueden mantenerse en la fase exponencial si se genera versatilidad fenotípica en comparación con células
transfieren varias veces a medios frescos idénticos mientras planctónicas. Debido a todas estas variables es difícil calcular
continúan creciendo de forma exponencial. A esto se le conoce matemáticamente el crecimiento de una biopelícula, a diferen-
como cultivo continuo; el dispositivo más utilizado para rea- cia del crecimiento en el cultivo discontinuo. Esta es un área
lizar este tipo de cultivos es el quimiostato. Este aparato está importante de la microbiología médica que necesita conside-
formado por un recipiente de cultivo equipado con un sifón de rarse en el amplio contexto de las enfermedades infecciosas.

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 59

DEFINICIÓN la tasa de muerte exponencial cuando la fracción ln (S/S 0) se

grafica contra el tiempo.
Y CUANTIFICACIÓN DE MUERTE La cinética de la muerte de bacterias también es una fun-
Significado de muerte bacteriana ción del número de blancos que se requiere impactar con un
antibiótico particular, para eliminar a un microbio planctó-
Para una célula microbiana, morir significa perder de forma nico específico. Por ejemplo, un solo “impacto” podría tener
irreversible la capacidad de reproducción (crecimiento y divi- como objetivo el cromosoma haploide o la membrana celular
sión). Excepto por los organismos en estado VBMC , la prueba de una bacteria. En contraste, una célula que contiene muchas
empírica de muerte consiste en realizar un cultivo de células en copias del objetivo que se quiere inactivar exhibirá una curva
un medio sólido: se considera que una célula está muerta si no de múltiples impactos. Este análisis se muestra de forma grá-
logra originar una colonia en un medio apropiado. Es obvio, fica en la figura 4-3.
entonces, que la confiabilidad de la prueba depende de la elec-
ción del medio y de las condiciones. Por ejemplo, 99% de las
células de un cultivo podría aparentar estar “muerto” por su CONTROL AMBIENTAL
incapacidad para formar colonias en un medio, sin embargo DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
los mismos organismos podrían ser 100% viables si se sembra-
ran en un medio distinto. Además, en ocasiones es imposible La naturaleza robusta del crecimiento microbiano descontro-
detectar pocas células viables en una muestra clínica grande si lado está, de forma clara, en conflicto con la vida humana. Las
ésta se cultiva de forma directa, debido a que el fluido mismo especies de orden superior tienen que controlar el crecimiento
del tejido es capaz de inhibir el crecimiento microbiano. En de las bacterias para poder coexistir con ellas. El hombre logra
dichos casos es necesario diluir primero la muestra en un esto en un contexto biológico utilizando su sistema inmuni-
medio líquido, lo cual permite el crecimiento de células viables tario y la limitación de nutrientes. También aplica métodos
antes del cultivo. físicos para evitar la exposición a microorganismos. Términos
Las condiciones de incubación en la primera hora pos- como esterilización, desinfección, pasteurización y asepsia
terior al tratamiento también son cruciales para determinar deben comprenderse de forma precisa para articularlos en un
la muerte. Por ejemplo, si se irradian bacterias con luz ultra- sentido apropiado. En el cuadro 4-3 se enlistan estos términos
violeta y se colocan de inmediato en cualquier medio, podría y sus definiciones.
parecer que 99.99% de las células ha sido aniquilado. Por otra A continuación se describe un ejemplo acerca de la impor-
parte, si primero se incuban dichos organismos en un medio tancia de la comprensión de estos términos. La esterilización
adecuado durante 20 min, el cultivo puede indicar sólo la es el proceso mediante el cual se eliminan todos los organis-
muerte de 10%. En otras palabras, la irradiación determina mos, incluyendo las esporas, en una preparación determinada.
que una célula “morirá” si se coloca en una placa de inmediato, Entender este concepto es muy importante cuando se habla de
pero que vivirá si se le permite reparar el daño antes de ser instrumentos quirúrgicos debido a que no se desea introdu-
inoculada. Una célula microbiana que no está dañada física- cir esporas en incisiones quirúrgicas. En contraste, “desinfec-
mente está “muerta” sólo en términos de las condiciones utili- tar” estos instrumentos puede eliminar las bacterias pero no las
zadas para valorar su viabilidad. esporas. Por otra parte, la “limpieza” física de los instrumentos
puede no remover todas las bacterias ni las esporas, sino que
sólo disminuye la carga bacteriana biológica en el instrumento.
Cuantificación de muerte bacteriana
La comprensión de los términos utilizados en el cuadro 4-3 es
Cuando se trata con microorganismos, por lo general no se crucial para controlar el impacto ambiental de los microorga-
cuantifica la muerte de una sola célula sino la de una población nismos en el contexto de la salud humana.
entera. Este es un problema estadístico: bajo cualquier condi-
ción que pueda provocar muerte celular, la probabilidad de
que una célula muera es constante por unidad de tiempo. Por ESTRATEGIAS PARA CONTROLAR
ejemplo, si se utiliza un método que provoca la muerte de 90% LAS BACTERIAS EN EL AMBIENTE
de las células en los primeros 10 min, la probabilidad de que
cualquier célula muera en un intervalo de 10 min es 0.9. Por En la microbiología médica a menudo se considera que el
lo tanto, puede esperarse que 90% de las células supervivientes control de las bacterias con antibióticos es el tratamiento de
muera en cada intervalo sucesivo de 10 min, y es posible gene- referencia para tratar las infecciones humanas. Aunque esto
rar una curva de muerte. El número de células que mueren en es cierto, la medida principal consiste en evitar la exposición
cada inervalo de tiempo es entonces una fracción del número a agentes infecciosos. Por ejemplo, cada año ocurren cerca de
de sobrevivientes, de tal manera que la muerte de una pobla- 240 000 muertes en el mundo por tétanos neonatal. Por otra
ción ocurre como un proceso exponencial según la siguiente parte, esta enfermedad es muy rara en países desarrollados. Un
fórmula general: factor contribuyente significativo es la incapacidad de “esterili-
zar” instrumentos (además de la inmunización corriente de la
S = S0 e − kt (9) vacuna contra el tétanos) en muchos países del tercer mundo.
Si se utilizaran medidas apropiadas en regiones poco desa-
en que S0 es el número de supervivientes en el tiempo cero y S es rrolladas, esta enfermedad podría eliminarse. Por lo tanto, es
el número de supervivientes en cualquier momento posterior t. importante comprender los métodos de esterilización, desin-
Como en el caso del crecimiento exponencial, −k representa fección y pasteurización, entre otros. Se deben comprender los

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60 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología

6 mecanismos de acción de las técnicas para combatir infeccio-

nes; de esta manera se podrían aplicar en situaciones apropia-
das. El cuadro 4-4 presenta una lista no exhaustiva de biocidas
Log10 del número de células supervivientes/ml

5 que se utilizan de forma habitual. Es importante comprender

los términos bacteriostático y bactericida como se definen en
el cuadro 4-4. Los mecanismos generales mediante los cuales
4 estos biocidas logran su actividad antimicrobiana se resumen
en la siguiente sección.

3
MECANISMOS DE ACCIÓN GENERALES
DE LOS BIOCIDAS
2
Disrupción de la pared celular o de la
membrana plasmática
1 La membrana celular actúa como una barrera selectiva que
permite el paso a algunos solutos e impide el acceso a otros.
Muchos compuestos se transportan de forma activa a través de
0 la membrana y se concentran dentro de la célula. En la mem-
10 20 30 40 50 60
brana también se alojan enzimas involucradas en la biosíntesis
A Minutos
de los componentes de la envoltura celular. Las sustancias que
se concentran en la superficie de la célula pueden alterar las
propiedades físicas y químicas de su membrana, lo cual impide
7 que el organismo funcione de forma normal, lo que provoca su
muerte o inhibición.
La pared celular actúa como un corsé (o una red para pes-
6 car) que protege a la célula contra la lisis osmótica. Por lo tanto,
agentes que destruyen la pared (p. ej., la lisozima, que rompe
Log10 del número de células supervivientes/ml

los enlaces entre los azúcares de los peptidoglucanos) o impi-

5 den su síntesis normal (p. ej., la penicilina, que interrumpe los
enlaces peptídicos) pueden inducir la lisis celular.

4
Desnaturalización de las proteínas
Las proteínas existen en un estado plegado tridimensional que
3
se determina en primera instancia por interacciones intramo-
leculares no covalentes, tales como puentes iónicos, hidrófobos
y de hidrógeno o enlaces covalentes disulfuro. Esta conforma-
2
ción se denomina estructura terciaria. Dicho estado se altera
con facilidad por un número de agentes físicos (p. ej., el calor) o
químicos (p. ej., el alcohol), los cuales provocan que las proteí-
nas pierdan su función. La disrupción de la estructura terciaria
1 de una proteína se llama desnaturalización proteínica.

0 Disrupción de grupos sulfhidrilo libres

10 20 30 40 50 60
Las enzimas que contienen cisteína tienen cadenas laterales
B Minutos
que terminan en grupos sulfhidrilo. Además, coenzimas como
la coenzima A y el dihidrolipoato contienen grupos sulfhidrilo
FIGURA 43 Curva de muerte de una suspensión con 106 libres. Dichas enzimas y coenzimas no pueden funcionar a
microorganismos viables por mililitro. A: curva de un solo impacto. menos que los grupos sulfhidrilo permanezcan libres y redu-
Esta gráfica es típica de la cinética de inactivación que se observa cidos. En consecuencia, los agentes oxidantes interfieren con el
con muchos antimicrobianos. El hecho de que sea una línea recta metabolismo al formar enlaces disulfuro entre grupos sulfhi-
desde el tiempo inicial (dosis nula) significa que un solo impacto del
drilo adyacentes:
antimicrobiano es suficiente para matar a la célula (p. ej., sólo hay que
dañar un blanco para inactivar al organismo). B: curva de impactos
múltiples. Se observa cuando una célula contiene muchos blancos R — SH + HS — R −2H→ R — S — S — R
que inactivar. La línea recta se extrapola hasta 6.5, que corresponde a
4 × 106 células. El número de blancos es, en consecuencia, 4 × 106 Muchos metales, como los iones de mercurio, también
o cuatro por célula. interfieren al combinarse con los grupos sulfhidrilo. En las

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 61

CUADRO 43 Algunos biocidas comunes que se utilizan para antisepsia, desinfección, preservación y otros
propósitos
Agente Fórmula Usos

Alcoholes Antisepsia, desinfección y

Etanol CH3 CHOH preservación
Isopropanol CH3
CHOH
CH3

Aldehídos Desinfección, esterilización y

Glutaraldehído H H preservación
O CCH2CH2CH2C O

Formaldehído H
C O
H

Biguanidas Antisepsia, actividad contra la

Clorhexidina Cl N(HCN)2H(CH2)6N(HCN)2H Cl formación de placa, preservación
y desinfección
NH NH

Bisfenoles Cl OH Antisepsia y actividad contra

Triclosán la formación de placa
Cl O Cl

Hexaclorofeno OH OH Desodorizante y preservación

Cl CH2 Cl

Cl Cl
Cl Cl

Agentes liberadores de halógenos Desinfección y antisepsia

Compuestos clorados → OCI-, HOCl, Cl2

Compuestos yodados → I2
Derivados de metales pesados
Compuestos con plata Ag Preservación y antisepsia

Compuestos con mercurio Hg Desinfección

Ácidos orgánicos COOH Preservación

Ácido benzoico

Ácido propiónico CH3 CH2 COOH Sales de sodio o calcio que se

utilizan para preservación
Peroxígenos Desinfección y esterilización
Peróxido de hidrógeno H2O2

Ozono O3
Ácido peracético CH3COOOH

Fenoles y cresoles OH Desinfección y preservación

Fenol

Cresol OH

CH3

(continúa)

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62 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología

CUADRO 43 Algunos biocidas comunes que se utilizan para antisepsia, desinfección, preservación y otros
propósitos (continuación)
Agente Fórmula Usos

Compuestos de amonio + Desinfección, antisepsia y preservación

cuaternario R1 R3
N
X–
R2 R4

Cetrimida Desinfección, antisepsia y preservación

+
H3C CH3

N Br –

H3C C0H2n+1

Cloruro de benzalconio
+
CH2 CH3

N Cl –

H3C C0H2n+1

Fase de vapor Esterilización y desinfección

O
Óxido de etileno
H2C CH2

Formaldehído H

H C O

Peróxido de hidrógeno H2O2

células hay enzimas portadoras de grupos sulfhidrilo y por lo sustrato. El agonista actúa al combinarse con alguna parte de
tanto los agentes oxidantes y los metales pesados generan daño. la holoenzima (la apoenzima [región proteínica de la holoen-
zima], el activador mineral o la coenzima), con lo que se impide
la adhesión del sustrato normal. En este caso el término sus-
Daño al DNA trato se utiliza en sentido general para incluir casos en los que
Un número de agentes físicos y químicos actúan dañando el el inhibidor se combina con la apoenzima, impidiendo de esta
ácido desoxirribonucleico (DNA, deoxyribonucleic acid); entre manera la adhesión a la coenzima.
éstos se encuentran las radiaciones ionizantes, la luz ultravio- Un antagonista se combina con una enzima gracias a su
leta y las sustancias químicas que reaccionan con el DNA. En afinidad química por un sitio esencial en la última. Las enzi-
la última categoría están los agentes alquilantes y otros com- mas realizan su función catalítica por su afinidad a sus sustra-
puestos que reaccionan de manera covalente con las purinas tos naturales; por lo tanto un compuesto que se asemeja a un
y las pirimidinas para formar compuestos de DNA o enlaces sustrato en términos estructurales esenciales también puede
cruzados entre las cadenas. La radiación puede dañar al DNA tener afinidad por la enzima. Si esta afinidad es lo suficien-
de muchas maneras; la luz ultravioleta, por ejemplo, induce temente grande, el “análogo” desplazará al sustrato normal e
entrecruzamiento entre pirimidinas adyacentes que permite la impedirá que ocurra la reacción adecuada.
formación de dímeros pirimídicos, ya sea en una de las cadenas Muchas holoenzimas incluyen un ion mineral que actúa
o entre ambas; las radiaciones ionizantes producen roturas en como puente entre la enzima y la coenzima o entre la enzima
cadenas individuales o en moléculas bicatenarias. Las lesiones y el sustrato. Los agentes químicos que se combinan con facili-
del DNA inducidas por radiaciones o por medios químicos dad con estos minerales impiden la adhesión de la coenzima o
matan a las células en primera instancia al interferir con la del sustrato (p. ej., el monóxido de carbono y el cianuro se com-
replicación del DNA. En el capítulo 7 se revisan los sistemas binan con el átomo de hierro de las enzimas que contienen gru-
de reparación del DNA. pos hemo e impiden su función en el proceso de la respiración).
Los antagonistas químicos pueden dividirse en: a) anta-
gonistas de procesos generadores de energía y b) antagonistas
Antagonismo químico de procesos biosintéticos. Los primeros incluyen venenos que
El antagonismo químico ocurre cuando un agente inter- afectan a enzimas respiratorias (monóxido de carbono y cia-
fiere en la reacción normal entre una enzima específica y su nuro) y la fosforilación oxidativa (dinitrofenol). Los últimos

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 63

comprenden a análogos de aminoácidos y de ácidos nucleicos. cuadrada (psi, pounds per square inch) sobre la presión atmos-
En algunas situaciones, el análogo sólo evita la incorporación férica para obtener una temperatura de 121 °C; las autoclaves
del metabolito normal (p. ej., el 5-metiltriptófano impide la o las ollas de presión se utilizan con estos fines. En altitudes
anexión de triptófano en las proteínas) y en otros casos el aná- mayores, la presión necesitará ser mayor a 15 psi para alcanzar
logo remplaza al metabolito normal en la macromolécula y 121 °C. Para esterilizar materiales que deben permanecer secos
la inactiva. La incorporación de p-fluorofenilalanina en lugar se utilizan hornos eléctricos que hacen circular aire caliente;
de fenilalanina en las proteínas es un ejemplo del último tipo de puesto que el calor es menos efectivo en materiales secos, se
antagonismo. acostumbra aplicar una temperatura de 160 a 170 °C durante
1 h o más. Bajo estas condiciones (p. ej., temperaturas excesi-
vas aplicadas durante periodos largos), el calor desnaturaliza
ACCIONES ESPECÍFICAS proteínas y ácidos nucleicos y rompe las membranas celulares.
DE BIOCIDAS SELECTOS Este tratamiento, si se realiza de forma adecuada, es esporicida.

En las siguientes secciones se describen importantes agentes B. Radiación

físicos y químicos selectos.
La radiación ultravioleta (UV) con una longitud de onda cer-
cana a 260 nm genera dímeros de timidina que impiden la
Métodos físicos replicación del DNA bacteriano. Por lo general es bactericida
A. Calor pero no esporicida.
La radiación ionizante de 1 nm o menos (rayos X o
La aplicación de calor es el medio más simple para esterilizar
gamma) provoca la formación de radicales libres que dañan
materiales, dado que estos son resistentes. Una temperatura de
proteínas, DNA y lípidos. Estos tratamientos son bactericidas
100 °C matará a todas las eubacterias (sin incluir sus esporas)
y esporicidas.
en 2 a 3 min en cultivos de laboratorio; una temperatura de 121
°C durante 15 min matará las esporas. Por lo general, se utiliza
vapor porque las bacterias mueren con mayor rapidez cuando C. Agentes químicos
se humedecen y debido a que el vapor distribuye el calor En el cuadro 4-4 se muestran las estructuras químicas y las
en todas las áreas del material a esterilizar. A nivel del mar, aplicaciones de los biocidas; las actividades selectivas de éstos
el vapor debe conservarse a una presión de 15 lb/pulgada se describen en las siguientes secciones.

CUADRO 44 Términos comunes relacionados con el control microbiano

Término Definición
Esterilización Proceso que destruye o elimina de un objeto o ambiente todas las formas de vida microbiana, incluyendo esporas bacterianas muy
resistentes
Desinfección Proceso que elimina de un objeto o ambiente gran parte, o la totalidad, de los microorganismos patógenos (excepto esporas
bacterianas)
Pasteurización Método que consiste en aplicar calor, por lo general a productos lácteos, durante un periodo específico para matar o retrasar el
desarrollo de bacterias patógenas
Saneamiento Reducción de la presencia de patógenos a niveles inocuos en objetos inanimados para disminuir la probabilidad de infección
cruzada
Limpieza Remoción de suciedad (p. ej., material orgánico e inorgánico) de objetos y superficies, que se logra por lo general de forma manual
o mecánica utilizando agua con detergentes o productos enzimáticos
Biocida Agente químico o físico, por lo común de amplio espectro, que inactiva organismos
Bactericida Término específico que se refiere a la propiedad mediante la cual un biocida es capaz de matar bacterias. La acción
bactericida es irreversible, a diferencia del efecto bacteriostático (p. ej., los organismos que han muerto por exposición a un
bactericida ya no pueden reproducirse incluso después de interrumpir el contacto con el agente). En ocasiones la sustancia
provoca lisis (disolución) de las células; en otros casos las células permanecen intactas e incluso pueden seguir siendo
metabólicamente activas (los términos fungicida, esporicida y viricida se refieren a la capacidad que tienen los biocidas para
matar hongos, esporas y virus, respectivamente)
Bacteriostático Término específico que se refiere a la propiedad mediante la cual un biocida es capaz de inhibir la multiplicación de las bacterias; al
remover el agente, la reproducción reinicia. (Los términos fungistático y esporostático se refieren a los biocidas que inhiben el
crecimiento de hongos y esporas, en dicho orden)
Séptico Estado que se caracteriza por la presencia de microbios patógenos en tejidos vivos o en fluidos relacionados
Aséptico Material libre de microorganismos o método para evitar el crecimiento de patógenos
Antiséptico Agente que destruye o inhibe el crecimiento de microorganismos en tejidos vivos o fluidos biológicos
Preservativo Sustancia que se agrega a productos alimenticios o a soluciones orgánicas para prevenir cambios químicos o la acción de bacterias
Antibiótico Sustancia que interfiere con un paso particular del metabolismo celular; puede ser bactericida o bacteriostático

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D. Alcoholes K. Peroxígenos
Estos agentes remueven de manera efectiva el agua de los siste- El peróxido de hidrógeno (H2O2) tiene una actividad de amplio
mas biológicos. Por lo tanto, en términos funcionales, actúan espectro contra virus, bacterias, levaduras y esporas bacte-
como “desecantes líquidos”. El alcohol etílico, el alcohol iso- rianas. La actividad esporicida requiere de concentraciones
propílico y el n-propanol tienen un espectro rápido y amplio mayores (de 10 a 30%) de H2O2 y un tiempo de contacto más
de actividad antimicrobiana contra bacterias vegetativas, virus prolongado.
y hongos, pero no son esporicidas. Su actividad es óptima
cuando se diluyen con agua hasta una concentración de 60 a L. Fenoles
90%. Por lo general, esta estrategia terapéutica se considera El fenol y los compuestos fenólicos tienen propiedades anti-
bactericida pero no esporicida. sépticas, desinfectantes o preservativas. En general, no son
esporicidas.
E. Aldehídos
Compuestos como el glutaraldehído o el formaldehído se uti- M. Compuestos de amonio cuaternario
lizan para desinfectar y esterilizar instrumentos, endoscopios Estos compuestos tienen dos regiones en sus estructuras mo-
y herramientas quirúrgicas a baja temperatura. Por lo general, leculares, un grupo que repele el agua (hidrófobo) y otro que
se aplican en forma de solución al 2% para lograr una actividad es afín a ésta (hidrófilo). Los detergentes catiónicos, como los
esporicida. Estos compuestos por lo común son bactericidas compuestos de amonio cuaternario (QAC, quaternary ammo-
y esporicidas. nium compounds), son antisépticos y desinfectantes eficientes.
Los QAC se utilizan para una gran variedad de propósitos clí-
F. Biguanidas nicos (p. ej., para desinfectar la piel antes de una intervención
La clorhexidina se utiliza de forma regular en productos para quirúrgica) y para limpiar superficies duras. Son esporostáti-
higiene oral y para el lavado de manos, como desinfectante y cos; inhiben el crecimiento de esporas pero no el proceso de
preservativo. Estos compuestos son bactericidas pero no espo- germinación. Los QAC actúan sobre virus con envoltura, pero
ricidas. En general las micobacterias son muy resistentes a no afectan a los que carecen de ella. En general, estos compues-
estos compuestos, gracias a su envoltura celular cerosa única. tos no son esporicidas.

G. Bisfenoles N. Esterilizadores con fase de vapor

Los bisfenoles se utilizan en jabones antisépticos y enjuagues Los dispositivos médicos y los instrumentos quirúrgicos sensi-
para manos. En general tienen actividad microbicida de amplio bles al calor pueden esterilizarse de manera efectiva empleando
espectro pero su efecto es limitado contra Pseudomonas aeru- sistemas con fase de vapor que utilizan óxido de etileno, for-
ginosa y mohos. El triclosán y el hexaclorofeno son bactericidas maldehído, peróxido de hidrógeno o ácido peracético. Éstos
y esporostáticos (no esporicidas). son esporicidas.

H. Agentes liberadores de halógenos

Los tipos más importantes de agentes liberadores de cloro son RELACIÓN ENTRE LA CONCENTRACIÓN
el hipoclorito de sodio, el dióxido de cloro y el dicloroisocia- DE BIOCIDA Y EL TIEMPO DE
nurato sódico, los cuales son moléculas oxidantes que impiden
la actividad celular de las proteínas. El ácido hipocloroso es
EXPOSICIÓN EN LA ELIMINACIÓN
el compuesto activo responsable del efecto bactericida de estos DE MICROBIOS
compuestos. En concentraciones más altas, este grupo es espo-
Cuando se utilizan los biocidas antes descritos para eliminar
ricida. El yodo (I2) es un bactericida y esporicida de acción
poblaciones microbianas, hay que considerar las variables de
rápida. Los yodóforos (p. ej., la povidona yodada) son comple-
tiempo y concentración. A menudo se observa que la concen-
jos de yodo y un agente portador o para disolución, que actúa
tración de la sustancia utilizada está relacionada con el tiempo
como reservorio del I2 activo.
requerido para matar una fracción determinada de la pobla-
ción, lo cual corresponde a la siguiente expresión:
I. Derivados de metales pesados
La sulfadiazina de plata (Ag+) (una combinación de dos agentes C nt = K (10)
bactericidas, Ag+ y sulfadiazina) tiene un espectro de actividad
amplio. La unión a componentes celulares como el DNA es res- En esta ecuación, C es la concentración de biocida, t es el
ponsable de sus propiedades inhibitorias. Estos compuestos no tiempo necesario para matar a una fracción determinada de las
son esporicidas. células y n y K son constantes.
Con base en esta ecuación se concluye, por ejemplo, que si
J. Ácidos orgánicos un desinfectante tiene un valor de n = 6 (como en el caso del
Los ácidos orgánicos se usan como conservadores en las indus- fenol), duplicar la concentración del agente reducirá 64 veces
trias farmacéutica y alimentaria. El ácido benzoico es fungis- el tiempo necesario para lograr la misma extensión de inac-
tático, mientras que el ácido propiónico es bacteriostático y tivación. El hecho de que la eficacia de un biocida varíe con la
fungistático. Ninguno es esporicida. concentración a la sexta potencia sugiere que son necesarias

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 65

seis moléculas del agente para inactivar a una célula, aunque CUADRO 45 Ejemplos de mecanismos capaces
no hay evidencia química directa que sustente esta conclusión. de revertir la actividad de los biocidas
Para determinar el valor de n de cualquier biocida hay que
Mecanismo Ejemplo
realizar curvas de inactivación individuales para muchas con-
centraciones. De esta manera se determina el tiempo requerido Remoción Cuando se separan células inhibidas de un
para inactivar una fracción fija de la población con cada con- del agente agente bacteriostático mediante lavado o
centrifugación, éstas se vuelven a multiplicar
centración. Por ejemplo, supóngase que C1 es la primera de manera normal.
concentración y t1 es el tiempo necesario para inactivar a 99%
de las células de una población. De manera similar, asúmase Competencia Cuando un antagonista químico de tipo análogo
por los se une de forma reversible a una enzima,
que C2 y t2 son la segunda concentración y el tiempo requerido sustratos es posible desplazarlo agregando una
para lograr el mismo efecto (respectivamente). Utilizando la concentración elevada del sustrato normal.
ecuación 10, se observa que: A esto se le llama inhibición competitiva.
La proporción entre la concentración del
inhibidor y la concentración del sustrato que
C1n t1 = C2n t 2 (11) revierte la inhibición se denomina índice
microbiano; por lo general es muy alto
(100-10 000), lo cual indica una afinidad mucho
Si se despeja n se obtiene: mayor de la enzima por el análogo que por su
sustrato normal.
log t 2 − log t1
n= (12) Inactivación A menudo es posible inactivar un agente
log C1 − log C2 del agente agregando al medio una sustancia que
se combine con él, impidiendo así su
combinación con constituyentes celulares.
Por lo tanto, n puede determinarse midiendo la pendiente Por ejemplo, los iones de mercurio se pueden
de la línea que resulta cuando se grafica el logaritmo de t contra inactivar agregando al medio compuestos con
el logaritmo de C (figura 4-4). Si el valor de n se obtiene de esta grupos sulfhidrilo, como el ácido tioglicólico.
manera, K puede determinarse sustituyendo los valores obser-
vados para C t, y n en la ecuación 10.

Reversión de la actividad de los biocidas los biocidas. Éstos incluyen la remoción del agente, competi-
Además de la cinética dependiente del tiempo y de la concen- ción por el sustrato y la inactivación del biocida. La neutrali-
tración, otro aspecto importante de la actividad biocida es la zación de estas sustancias debe considerarse como parte de la
capacidad de revertir el efecto antimicrobiano. En el cuadro 4-5 estrategia de esterilización/desinfección.
se resumen los mecanismos que pueden revertir la actividad de

RESUMEN DEL CAPÍTULO

2.4
Apreciar el crecimiento y la muerte de las bacterias es funda-
mental para entender la interacción compleja que existe entre
bacterias patógenas y sus hospedadores. Si un sistema inmu-
2.0 nitario intacto y la limitación de nutrientes no restringen el
crecimiento logarítmico de las bacterias, éstas vencerán con
Log10 del tiempo (t) (en minutos)

Pendiente = n rapidez al hospedador en la lucha por el alimento. El control

1.6 ambiental del crecimiento microbiano con biocidas limita la
exposición a microorganismos potencialmente patógenos. Los
métodos de esterilización, desinfección y pasteurización, entre
1.2 otros, son fundamentales en el control de bacterias y en conse-
cuencia para preservar la salud humana. Al final, comprender
el crecimiento y la muerte microbianos es el primer paso hacia el
0.8
control efectivo de las enfermedades infecciosas.

0.4
VERIFICACIÓN DE CONCEPTOS
0 1. En los seres humanos, las bacterias se encuentran como
1.00 1.10 1.20 1.30
biosistemas complejos conocidos como microbiota.
Log10 de la concentración (C) (en partes por 1000)
2. Para cuantificar células bacterianas se utilizan el recuento
FIGURA 44 Relación entre la concentración de biocida (C) y el de células viables, la turbidez y la biomasa.
tiempo (t) necesario para matar una fracción determinada de una 3. La biomasa y el tiempo de generación están relacionados
población de células. de forma matemática.

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66 SECCIÓN I Fundamentos de microbiología

4. Inocular una sola colonia bacteriana en un volumen fijo de (D) Disminuye

medio líquido se conoce como cultivo discontinuo. En este (E) Es negativa
sistema, el crecimiento bacteriano exhibe cuatro fases (de 5. Un médico obtiene una muestra de esputo de un paciente con
latencia, exponencial, estacionaria y de muerte). tuberculosis. La muestra contiene una célula viable de Mycobac-
5. Algunas bacterias existen en un estado que se define como terium tuberculosis, un organismo con un tiempo de duplicación
viable pero no cultivable. (lento) in vitro de 48 h que corresponde a una constante de la
6. El crecimiento en cultivo continuo o en forma de biope- tasa de crecimiento in vitro (κ) de 0.04 h−1. Calculando que la bio-
masa de este único organismo es 2.3 × 10−13 g y asumiendo que
lícula se asemeja más al crecimiento bacteriano dentro de
esta célula entra de inmediato a la fase de crecimiento logarít-
un hospedador humano.
mico, ¿cuántas horas se necesitarán para que produzca 10−6 g de
7. La esterilización, la desinfección y la pasteurización, así biomasa?
como otros términos (cuadro 4-3), son esenciales para
(A) 4h
comprender y comunicar la ciencia de la microbiología.
(B) 40 h
8. Es importante entender y conocer las estructuras gene- (C) 400 h
rales y los mecanismos de acción de los biocidas (cuadro (D) 4 000 h
4-4). (E) 40 000 h
9. Dependiendo de los mecanismos de acción, biocidas dife- 6. Una muestra de leche pasteurizada de cabra se cultiva para identi-
rentes son bacteriostáticos, bactericidas o esporicidas. ficar la presencia de Brucella melitensis, un organismo que se sabe
10. La actividad biocida depende del tiempo y de la concentra- que infectó animales en una granja adyacente. Se declara que el
ción. Este efecto puede revertirse por remoción del agente, consumo de esta leche es inocuo; sin embargo, algunas de las per-
competencia por los sustratos e inactivación del biocida. sonas que la ingirieron desarrollaron brucelosis. ¿Cuál de las
siguientes opciones explica de manera más precisa la disparidad
entre los resultados del cultivo y la enfermedad de los pacientes?
(A) Las bacterias de la leche eran viables pero no cultivables
(B) Pasteurización incompleta de la leche
PREGUNTAS DE REVISIÓN (C) Los organismos de la leche se encontraban en la fase de
1. Una mujer de 23 años de edad tiene 10 bacterias Escherichia coli latencia cuando se hizo el examen
inoculadas en la vejiga por tener relaciones sexuales. El tiempo (D) La leche tenía un nivel elevado de un antibiótico bactericida
de generación de este organismo es de 20 min. Después de un cuando se analizó
periodo de latencia de 20 min, las bacterias entran a la fase loga- (E) Hubo contaminación de la leche después de la prueba
rítmica de crecimiento. Después de 3 h de crecimiento logarít- 7. Un médico misionero al trabajar en áreas rurales de India roció
mico, el número total de células es: el ombligo de un recién nacido con una solución, con la estruc-
(A) 2 560 tura química de la figura que se muestra abajo, para evitar una
(B) 5 012 infección de tétanos. ¿A qué clase de agente químico pertenece
(C) 90 esta estructura?
(D) 1 028
+
(E) 1 000 000
R1 R3
2. Una mujer de 73 años de edad está hospitalizada para tratamiento
N
intravenoso de un absceso causado por Staphylococcus aureus. X–
Después de ser tratada y dada de alta del hospital, es necesario R2 R4
desinfectar el cuarto. Mil células de S. aureus son expuestas al de-
sinfectante. Después de 10 min, 90% de las células es eliminado.
¿Cuántos organismos continúan siendo viables después de 20 min? (A) Alcohol
(A) 500 (B) Aldehído
(B) 100 (C) Bisfenol
(C) 10 (D) Peroxígeno
(D) 1 (E) Amonio cuaternario
(E) 0 8. Para esterilizar algunos instrumentos quirúrgicos ¿cuál de los
3. ¿La acción de cuál de los siguientes antibióticos o qué procesos siguientes agentes debería utilizarse?
pueden revertirse en bacterias que no forman esporas? (A) Ácido benzoico (2%)
(A) Un desinfectante (B) Alcohol isopropílico (2%)
(B) Un agente bactericida (C) Glutaraldehído (2%)
(C) Un agente bacteriostático (D) Peróxido de hidrógeno (2%)
(D) Esterilización en autoclave a 121 °C durante 15 min (E) Compuesto de amonio cuaternario (2%)
(E) Aplicación de calor seco a una temperatura de 160 a 170 °C 9. La tasa de crecimiento bacteriano durante la fase estacionaria
durante 1 h máxima de crecimiento
4. La tasa de crecimiento bacteriano durante la fase exponencial de (A) Es igual a cero
crecimiento (B) Incrementa
(A) Es igual a cero (C) Es constante
(B) Incrementa (D) Disminuye
(C) Es constante (E) Es negativa

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CAPÍTULO 4 Crecimiento, supervivencia y muerte de microorganismos 67

10. Los agentes químicos pueden interferir con la reacción normal BIBLIOGRAFÍA
entre una enzima específica y su sustrato (antagonismo químico).
¿Cuál de las siguientes moléculas inhibe los procesos celulares Barcina I, Arana I: The viable but nonculturable phenotype: a cross-
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