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    Clostridium Botulinum Agar Base

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    Manuel Gamero
    Este documento describe un medio de cultivo para la detección y enumeración selectiva de Clostridium botulinum en alimentos. Incluye la composición del medio, instrucciones de preparación, control de calidad y siembra e interpretación de resultados. El medio permite el crecimiento de C. botulinum mientras inhibe el crecimiento de E. coli.

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    Clostridium Botulinum Agar Base

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    Manuel Gamero
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    Este documento describe un medio de cultivo para la detección y enumeración selectiva de Clostridium botulinum en alimentos. Incluye la composición del medio, instrucciones de preparación, control de calidad y siembra e interpretación de resultados. El medio permite el crecimiento de C. botulinum mientras inhibe el crecimiento de E. coli.

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    CLOSTRIDIUM-BOTULINUM-AGAR-BASE

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    Apartado de Correos / P.O.

    Box 44
    28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
     (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
    E-mail: [email protected]
    Web: http://www.microkit.es
    Blog: www.medioscultivo.com
    Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
    MCC P/A COSMETIKIT® DRY PLATES® MUGPLUS
    CRIOTECA® CHROMOSALM DESINFECTEST® CCCNT
    PLAQUIS® KITPRO-PLUS CROMOKIT® MBS
    M-IDENT® SEILAGUA® SALMOQUICK AIRESANO
    NEOGRAM ENVIROCOUNT

    CLOSTRIDIUM BOTULINUM AGAR BASE


    Detección y enumeración selectiva de Clostridium botulinum en conservas,
    productos cárnicos y todo tipo de alimentos

    COMPOSICIÓN
    Hidrolizado pancreático de caseína 40,0 g
    Extracto de levadura 5,0 g
    Glucosa 2,0 g
    Sodio Fosfato Dibásico 5,0 g
    Sodio Cloruro 2,0 g
    Magnesio sulfato 0,01 g
    Agar- Agar 20,0 g
    (Fórmula por litro)
    pH final: 7,4  0,2

    MANTENGA EL BOTE BIEN CERRADO EN LUGAR SECO, FRESCO Y


    OSCURO. PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO. AGITE EL
    BOTE ANTES DE USAR.
    CONTENIDO: 500 g
    CÓDIGO: DMT038

    PREPARACIÓN

    Disolver 74,0 g de medio en 1 l de agua bidestilada. Llevar a ebullición,


    agitando hasta su total homogeneización. Autoclavar a 121 ºC durante 15
    minutos. Enfriar a 45-50 °C y añadir 50 ml de emulsión de yema de huevo
    (SBH010), así como el contenido de un vial de Cl.botulinum Supplement (125
    mg de D-Cicloserina, 2 mg de Trimetroprim y 38 mg de Sulfametoxazol,
    SBH008) reconstituido con 2,5 ml de agua destilada estéril y 2,5 ml de acetona.
    Mezclar bien y distribuir en placas de Petri estériles.

    1
    CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO

    Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio


    siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar
    laboratorio, tras conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque
    no haya llegado la fecha de caducidad teórica de la etiqueta,...)

    DESHIDRATADO: polvo beige


    PREPARADO: crema
    CONTROL DE CRECIMIENTO 48 h a 35-37°C aproximadamente, en
    ANAErobiosis:

    Clostridium botulinum, crece con colonias


    rodeadas de un borde iridiscente cuando se
    observan con luz oblicua. Al microscopio se
    observan bacilos gram positivos, esporulados.
    E.coli WDCM 00012, Inhibido

    PRESENTACIÓN: MEDIO DESHIDRATADO BASE + SUPLEMENTOS

    SIEMBRA E INTEPRETACIÓN DE RESULTADOS

    Sembrar 0'1 ml de las diluciones decimales en superficie y extender con un asa


    de Digralsky. Incubar a 37 ºC aproximadamente, durante 48h (y hasta 7 días)
    en condiciones anaerobias estrictas. Considerar como Clostridium botulinum,
    las colonias rodeadas de un precipitado iridiscente de lipasa cuando se
    observan con luz oblicua. Al microscopio se observan bacilos gram positivos,
    esporulados.

    El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos


    según la legislación medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la
    basura.
    Medio fabricado en la UE por MICROKIT desde 1999, bajo ISO 9001, ISO 11133 y GMPs, revisado en Marzo-2020

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