Efecto Analgésico, Caracterización Fitoquímica Y Análisis Toxicológico Del Extracto Etanólico DE HOJAS DE Pereskia Lychnidiflora

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Rev Peru Med Exp Salud Publica

EFECTO ANALGÉSICO, CARACTERIZACIÓN FITOQUÍMICA


Y ANÁLISIS TOXICOLÓGICO DEL EXTRACTO ETANÓLICO
DE HOJAS DE Pereskia lychnidiflora
Rocío Guerra1,a, Luis Javier Gómez2,a, Ulises G. Castillo3,b, Gonzalo Toloza4,c, Juan Pablo Sánchez-Pérez3,b,
Noel Avalos2,c, José Guillermo Mejía2,a, Marvin J. Núñez3,d, Miguel A. Moreno1,a

RESUMEN
Objetivo. Evaluar el efecto analgésico del extracto etanólico de las hojas de Pereskia lychnidiflora, la prospección de
metabolitos secundarios y el análisis toxicológico. Materiales y métodos. La actividad analgésica fue evaluada mediante
la prueba del ácido acético y la formalina en ratones NIH a una concentración de 30, 50 y 100 mg/kg de peso corporal,
utilizando como control Ibuprofeno a 200 mg/kg y agua destilada como blanco. La prospección de metabolitos secundarios
se realizó por el método de cromatografía de capa fina y la toxicidad del extracto fue evaluada in vivo según la dosis
máxima de 2000 mg/kg de peso corporal. Resultados. La prospección fitoquímica determinó la presencia de alcaloides,
taninos, triterpenos y esteroles como mayores constituyentes químicos. Se determinó que el extracto etanólico de Pereskia
lychnidiflora posee una actividad analgésica similar al Ibuprofeno. No se observaron signos de toxicidad en los ratones de
experimentación y se clasifica el extracto como no tóxico con una DL50 mayor de 2000 mg/kg. Conclusión. El extracto
etanólico de Pereskia lychnidiflora tiene un efecto analgésico antiinflamatorio que podría estar condicionado por la presencia
de alcaloides, taninos y esteroles (terpenoides) presentes en esta especie vegetal y puede ser clasificado como no tóxico.
Palabras clave: Plantas medicinales; Fitoterapia; Analgésicos; Pruebas de Toxicidad; Ratas; El Salvador (fuente: DeCS BIREME).

ANALGESIC EFFECT, PHYTOCHEMICAL CHARACTERIZATION


AND TOXICOLOGICAL ANALYSIS OF ETHANOLIC EXTRACT OF
Pereskia lychnidiflora LEAVES
ABSTRACT
Objective. To evaluate the analgesic effect of the ethanolic extract of the leaves of Pereskia lychnidiflora, the prospection
of secondary metabolites and the toxicologic analysis. Materials and Methods. Analgesic activity was evaluated by
testing acetic acid and formalin in NIH mice at a concentration of 30, 50 and 100 mg/kg body weight, using Ibuprofen
control at 200 mg/kg and distilled water as the target. Secondary metabolites were prospected using the thin layer
chromatography method and the toxicity of the extract was evaluated in vivo according to the maximum dose of 2,000
mg/kg body weight. Results. Phytochemical prospecting determined the presence of alkaloids, tannins, triterpenes, and
sterols as major chemical constituents. The ethanolic extract of Pereskia lychnidiflora was found to have an analgesic
activity similar to ibuprofen. No signs of toxicity were observed in the experimental mice and the extract is classified as
non-toxic with a DL50 greater than 2,000 mg/kg. Conclusions. The ethanolic extract of Pereskia lychnidiflora has an anti-
inflammatory analgesic effect that could be conditioned by the presence of alkaloids, tannins, and sterols (terpenoids)
present in this species and can be classified as non-toxic.
Keywords: Medicinal Plants; Phytotherapy; Analgesics; Toxicity Tests; Rats; El Salvador (source: MeSH NLM).

INTRODUCCIÓN antiinflamatorios no esteroideos (AINES) (1). Esto podría


generar un control inadecuado del dolor, aumento en los
El tratamiento del dolor es un problema médico, social y efectos adversos del tratamiento, disminución en la calidad
económico de gran magnitud. En América, más de la mitad de vida, y un aumento de los costos para el sistema
de consultas en atención primaria son por dolor moderado sanitario (1). En este sentido, el desarrollo de nuevos y
a severo, para el cual generalmente se prescriben mejores tratamiento para el dolor son una prioridad de

1
Escuela de Biología, Facultad de Ciencias Naturales y Matemáticas, Universidad de El Salvador. San Salvador, El Salvador.
2
Centro de Investigación y Desarrollo en Salud, Universidad de El Salvador. San Salvador, El Salvador.
3
Laboratorio de Investigación en Productos Naturales, Facultad de Química y Farmacia, Universidad de El Salvador. San Salvador, El Salvador.
4
Laboratorio Clínico, Hospital Nacional Rosales, Ministerio de Salud Pública. San Salvador, El Salvador.
a
Licenciada en Biología; b licenciado en Química y Farmacia; c licenciado en Laboratorio Clínico; d doctor en Química Orgánica.
Recibido: 08/03/2018 Aprobado: 28/11/2018 En línea: 21/12/2018

Citar como: Guerra R, Gómez LJ, Castillo UG, Toloza G, Sánchez-Pérez JP, Avalos N, Mejía JG, Nuñez MJ, Moreno MA. Efecto analgésico, caracterización
fitoquímica y análisis toxicológico del extracto etanólico de hojas de Pereskia lychnidiflora. Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2018;35(4):581-9. doi:10.17843/
rpmesp.2018.354.3532

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investigación (2), y cada día se presta más atención al


estudio de las plantas medicinales buscando nuevas MENSAJES CLAVE
opciones terapéuticas (3).
Motivación para realizar el estudio. El dolor crónico hace que
El género Pereskia (Cactaceae) está constituido por 17 millones de personas se encuentren en una situación de limitación
especies ampliamente distribuidas en los bosques secos física y psíquica que afecta su calidad de vida.
del Caribe, Centro y Sudamérica (4). Desde el punto de Principales hallazgos. Se encontró que la administración del extracto
vista fitoquímico este género ha sido poco estudiado etanólico de Pereskia lychnidiflora, comúnmente conocida como
y entre las especies más investigadas se encuentran «matial» reduce significativamente el dolor en ratones de laboratorio y
Pereskia aculeata, P. bleo y P. grandifolia, de las que se que además, no provoca daños a la salud de los animales.
ha reportado la presencia de fitoesteroles (5), y terpenoides Implicancias. El uso de Pereskia lychnidiflora podría ser una
únicamente en P. aculeata y P. bleo (6,7). De manera similar, alternativa accesible y asequible para el tratamiento del dolor.
se han reportado compuestos fenólicos y alcaloides en P.
grandiflora y P. bleo (6,7,8).

Algunas especies del género Pereskia han sido utilizadas en


diversas partes del mundo por sus propiedades medicinales concentrada utilizando un rotoevaporador (BUCHI R-200)
como antisifilítico, emoliente y para el tratamiento de a 40 °C, luego fue transferido a un desecador con gel de
enfermedades inflamatorias y de la piel (9). Asimismo, se sílice hasta obtener el extracto seco (3,0535 g).
han utilizado para tratar enfermedades relacionadas con
el cáncer, dolor de cabeza, dolor de estómago, úlceras PROSPECCIÓN DE LOS METABOLITOS SECUNDARIOS
gástricas, hemorroides, dermatitis, diabetes, hipertensión,
reumatismo, inflamaciones, y como un tónico para Identificación de alcaloides
revitalizar el cuerpo, trastornos gastrointestinales (10),
afecciones en la piel, dolor de oído y dolor muscular (11,12). Se llevaron a desecación 25 mL del extracto en baño maría,
Algunas investigaciones sugieren que este género presenta y se disolvió en 6 mL de HCl al 10%, posteriormente se filtró
actividad analgésica en modelos animales de dolor agudo en papel Whatman N 42 (2,5 µm), el filtrado se dividió en tres
por estímulo químico con ácido acético y formalina (6,7), y en tubos de ensayo, al primer tubo se le adicionó de cinco a diez
El Salvador, las hojas de Pereskia lychnidiflora conocidas gotas del reactivo de Wagner, al segundo tubo de cinco a diez
como «matial» son utilizadas como analgésicos (13). gotas del reactivo de Mayer y al último tubo de cinco a diez
gotas del reactivo de Dragendorff. La formación de precipitado
En el presente estudio tuvo como objetivo determinar la color crema en Wagner y un precipitado anaranjado y café
actividad analgésica, caracterización fitoquímica y análisis rojizo en la prueba de Dragendorff y Mayer, respectivamente,
toxicológico en ratones de las hojas de P. lychnidiflora. indican la presencia de alcaloides en el extracto vegetal (14).

Identificación de antraquinonas
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizó una cromatografía de capa delgada utilizando
MATERIAL VEGETAL gel de sílice G UV254 y una fase móvil de n–hexano–
acetato de etilo (1:1) como fase estacionaria y fase móvil
Las hojas de Pereskia lychnidiflora DC fueron colectadas respectivamente. Una vez secada la placa cromatográfica
en el Cantón La Laguna, Lago de Coatepeque, Municipio se asperjó con una solución al 10% de KOH en metanol.
de El Congo, (latitud 113º53’39.88’’ N; longitud 89º32’45.64’’ La aparición de manchas rojas indica la presencia de
W), Departamento de Santa Ana, El Salvador, en junio de antraquinonas (14).
2016 y fueron identificadas por la curadora del Herbario
del Museo de Historia Natural de El Salvador. Las hojas se Identificación de flavonoides
secaron a 40 °C por 48 horas en estufa de aire circulante
y posteriormente fueron fraccionadas en un molino de Se tomaron 2 mL del extracto etanólico en un vidrio reloj
cuchillas. y se agregó una pequeña tira de magnesio metálico (2x5
mm), luego, se adicionó gota a gota ácido clorhídrico
PREPARACIÓN DEL EXTRACTO concentrado. La aparición de una coloración rojiza indica la
presencia de flavonoides (15).
Las hojas secas y molidas de P. lychnidiflora (45,6 g)
fueron extraídas con alcohol etílico 95º (2x300 mL) en un Identificación de glicósidos cardiotónicos
baño ultrasonido VWR (Modelo 97043-988) a temperatura
ambiente (25 °C). Una parte del extracto (50 mL) fue Se preparó una cromatografía en capa delgada utilizando
almacenada para realizar el análisis fitoquímico y la otra fue gel de sílice G UV254 como fase estacionaria y una fase

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móvil compuesta por una mezcla acetato de etilo-metanol- utilizaron ratones machos y hembras NIH en estado juvenil
agua (8:1,5:0,5), se utilizó K-Strofantidina de testigo. Una nulíparas y no grávidas, cuyo peso osciló entre 20 y 23 g.
vez seca la cromatoplaca se asperjó con una solución Todos los animales permanecieron a una temperatura de
del reactivo de Kedde (volúmenes iguales de ácido 22 ±2 ºC y humedad relativa entre 50-60%, con un ciclo
3,5-dinitrobenzoico al 2% en metanol y de KOH al 5,7% luz-oscuridad de 12/12 horas, marcados con ácido pícrico
en agua). La aparición de manchas color violeta indican la para su identificación individual. Previamente, los animales
presencia de glicósidos cardiotónicos. fueron examinados clínicamente para certificar su estado
de salud. La alimentación consistió en una dieta a base de
Identificación de saponinas concentrado peletizado para roedores y agua a voluntad.

Se utilizó la prueba de la espuma. Se colocó 1 mL del TOXICIDAD AGUDA ORAL


extracto en un tubo de ensayo y se le adicionó 9 mL de agua
destilada, se agitó el tubo de ensayo en forma vigorosa Los animales empleados en el presente estudio fueron
(verticalmente) por 30 segundos, se dejó reposar por 15 tratados conforme lo establecido en las guías Canadian
minutos, si la espuma alcanza más de 0,5 cm de altura, es Council on Animal Care (CCAC) para el cuidado y uso
tomada como evidencia positiva (16). de animales de experimentación (17). El ensayo se llevó
a cabo según lo establecido por la Organización para la
Identificación de sesquiterpenlactonas Cooperación y el Desarrollo Económico (OECD) para
este tipo de estudio (18). Se confeccionaron cuatro grupos
Utilizando gel de sílice G UV254 como fase estacionaria y experimentales (dos grupos hembras y dos grupos machos)
una fase móvil de n-hexano-acetato de etilo (7:3) se llevó a razón de cinco animales por grupo, de los cuales un grupo
a cabo una cromatografía de capa delgada. Se utilizó la por sexo fue tratado con el extracto en estudio (grupos
2,3-epoxijuanislamina como testigo y el reactivo revelador tratamiento) y los dos restantes sirvieron de controles a los
de Baljet (volúmenes iguales de ácido pícrico al 1% en que se les administro agua destilada.
etanol 95° e hidróxido de sodio al 10%). Manchas de color
anaranjado fueron tomadas como evidencia positiva. Se procedió a realizar el ensayo límite regulado por la OECD
a la dosis máxima de 2000 mg/kg de peso corporal a un
Identificación de taninos volumen de 0,2 mL. El extracto se administró a los animales
en condiciones óptimas, todos y cada uno de los días,
Se colocaron 2 mL del extracto etanólico en tres tubos de durante un período de 28 días. Diariamente se realizó la
ensayo, al primer tubo se adicionaron cinco a diez gotas
observación y chequeo clínico de los animales procurando
de gelatina al 10%, al segundo tubo de cinco a diez gotas
determinar la aparición de síntomas compatibles con
de clorhidrato de quinina al 10% y al tubo restante se le
algunos parámetros de importancia toxicológica. Finalizados
adicionó una gota de FeCl3 al 5% en metanol. La aparición
los 28 días del experimento, se procedió a la obtención
de un precipitado en los primeros dos tubos indica la
de muestras sanguíneas del plexo ocular de cada uno
presencia de taninos y en el tercer tubo una coloración
de los animales. Posteriormente se procedió al sacrificio
azul corresponde a taninos hidrolizables o verde a taninos
de los animales por dislocación cervical para efectuar la
condensados (16).
necropsia y la extracción de órganos internos (corazón,
pulmón, hígado, estómago, bazo, intestino y riñón), los
Identificación de terpenoides
cuales fueron examinados macroscópicamente en cuanto
El extracto etanólico se sometió a cromatografía en a superficie, color, consistencia, tamaño y peso, para luego
capa delgada, empleando gel de sílice G UV254 como ser fijados en solución de formalina al 10% e incluidos
fase estacionaria y una fase móvil compuesta por una en bloques parafinados, cortadas en 5 μm y coloreados
mezcla n-hexano-acetato de etilo (1:1). La cromatografía con hematoxilina-eosina. Las muestras de sangre fueron
desarrollada se dejó secar antes de revelarla, se asperjó con utilizadas para realizar un hemograma completo y la
el reactivo de Komarowski (solución compuesta por: 50 mL determinación de algunos valores bioquímicos.
de 4-hidroxibenzaldehido al 2% en metanol y 5 mL de ácido
sulfúrico al 50%) y se sometió a calentamiento (110 ºC) PRUEBA DEL ÁCIDO ACÉTICO
durante cinco a diez minutos. Se utilizó epifriedelanol y
β-sitosterol como testigos para los núcleos triterpénicos Se utilizaron cinco grupos, de ocho animales machos
y esteroidal, respectivamente. Manchas de color morado- cada uno. Los grupos se distribuyeron de la siguiente
rosado y azul-verde evidencian la presencia de triterpenos manera y se les administraron los extractos por vía oral
y esteroides. a un volumen de 10 mL/kg: Tres grupos se trataron con
el extracto etanólico de P. lychnidiflora a concentraciones
Animales de experimentación de 30, 50 y 100 mg/kg respectivamente. A un cuarto grupo
se le administró Ibuprofreno 200 mg/kg como fármaco de
Las pruebas de analgesia se realizaron únicamente en referencia y al grupo restante agua destilada como control
ratones machos NIH, y para las pruebas de toxicidad se negativo.

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Media hora después de la administración del extracto, Tabla 1. Resultados de la prospección de metabolitos
se provocaron las contorsiones abdominales a todos los secundarios del extracto etanólico de hojas de Pereskia
ratones por inyección vía intraperitoneal de una solución de lychnidiflora.
ácido acético al 1%, en volumen de 0.1 mL a cada animal.
El número de contorsiones realizadas se registraron en un Metabolito Prueba realizada Resultado
periodo de 20 minutos. Dragendorff +
Alcaloides Mayer +
PRUEBA DE FORMALINA Wagner +
Antraquinonas CCF Bornträger -
Para esta prueba se utilizó la misma metodología descrita Flavonoides Shinoda -
anteriormente a nuevos grupos de animales machos. El Glicósidos
CCF kedde -
estímulo doloroso se indujo por la inyección subplantar cardiotónicos
de 20 μL de formalina al 1%, en la pata trasera derecha Saponinas Espuma -
del ratón. En la prueba se distinguieron dos fases: Fase 1, Sesquiterpenlactonas CCF Baljet -
Clorhidrato de
indicativa del dolor neurogénico; los primeros cinco minutos +
quinina
y Fase 2, indicativa del dolor inflamatorio; entre los 15 a 30 Gelatina +
Taninos Tricloruro de
minutos después de la administración de la formalina (19). + (V)
hierro
Para evaluar ambas fases, se midió el tiempo acumulado Terpenoides Komarowski + (MR y AV)
en segundos por medio de un cronómetro durante el cual,
+: presencia; -: ausencia; CCF: cromatografía de capa fina; V: verde, MR:
el animal se lame la pata.
moradas a rosadas, AV: azul a verdes.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO
sistema respiratorio, circulatorio, nervioso central y
Todos los datos obtenidos fueron estadísticamente autónomo, actividad motora y patrones de comportamiento.
evaluados con los programas SPSS 21.0 y Statgraphics En la Tabla 2, se observa que los grupos de hembras
Centurion XVI.I, con apoyo de Microsoft Excel 2013. aumentaron de peso, no así el grupo machos tratados con
Se utilizó la prueba de Shapiro Wilk para las pruebas de el extracto, que mostraron una disminución del 5%.
normalidad. La prueba de hipótesis incluye para los datos
generados del ensayo de toxicidad, el análisis T de Student No se encontraron alteraciones macroscópicas (superficie,
para muestras independientes; y para los datos obtenidos de color, consistencia y tamaño) de los órganos de los grupos
las pruebas de analgesia, la prueba de hipótesis incluye el experimentales. Asimismo, no se encontraron diferencias
análisis de varianza de una sola vía (ANOVA) seguido de un significativas en el peso de órganos entre los grupos
test de Tukey para comparaciones múltiples. Se consideró tratados y los controles de ambos sexos (Tabla 3); con
que la diferencia entre los grupos tratados y el grupo control excepción de una disminución estadísticamente significativa
es significativa con un valor de p<0,05. Todos los resultados de los valores promedios de peso del bazo en machos
son expresados como el promedio y la desviación estándar tratados con el extracto en estudio respecto a sus controles.
(ensayo de toxicidad) y como el promedio y error estándar Además, en el examen histopatológico de órganos no se
del promedio (pruebas de analgesia) de los grupos observaron alteraciones en ninguno de los casos (Figura 1).
experimentales.
En cuanto a los valores de bioquímica sanguínea, no
RESULTADOS existe diferencia estadísticamente significativa entre los
grupos tratados con el extracto evaluado y sus respectivos
ANÁLISIS DE LA PROSPECCIÓN DE LOS controles, a excepción del aumento de los valores de
METABOLITOS SECUNDARIOS
bilirrubina del grupo hembras tratadas con el extracto
etanólico de P. lychnidiflora (Tabla 3).
Los resultados obtenidos en la prospección de los
metabolitos secundarios son expresados en la Tabla 1.
Este estudio revelo la presencia de alcaloides, taninos PRUEBA DEL ÁCIDO ACÉTICO
(condensados), triterpenos y esteroles como metabolitos
mayoritarios. En la Tabla 4 y Figura 2A, se observa que la administración
del extracto de P. lychnidiflora disminuyó el número de
TOXICIDAD AGUDA ORAL contorsiones abdominales en todos los grupos tratados
con este extracto; con valores porcentuales de inhibición
Durante los chequeos clínicos que se realizaron diariamente de 70%, 76,88% y 82,94% para las concentraciones de 30,
a los animales tratados con el extracto etanólico de P. 50 y 100 mg/kg respectivamente; frente a un 90,55% de
lychnidiflora, no se observaron alteraciones en los diferentes inhibición observado en el grupo tratado con el fármaco de
sistemas estudiados: piel, ojos y membranas mucosas, referencia (Ibuprofeno 200 mg/kg).

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Tabla 2. Variación de los valores promedios de peso corporal en los grupos experimentales.

Peso promedio en gramos (DE)


Grupo Variación
Inicial Día 7 Día 14 Día 21 Día 28 Valor de p*
porcentual
Hembras
Control 22,70 (1,56) 21,18 (1,76) 23,27 (1,50) 23,64 (1,66) 23,76 (1,78) 4,66 0,49
Tratamiento 21,78 (0,75) 18,64 (2,04) 21,74 (0,98) 22,14 (1,17) 23,04 (0,87) 5,79
Machos
Control 26,08 (1,35) 26,22 (0,25) 20,32 (1,00) 27,46 (2,05) 27,08 (1,57) 3,86 0,01
Tratamiento 26,50 (1,10) 26,74 (1,40) 20,14 (1,21) 26,76 (1,93) 25,12 (1,24) -5,21
DE: desviación estándar.
* Prueba T de Student para muestras independientes.

PRUEBA DE LA FORMALINA la primera prospección de metabolitos secundarios de


esta especie vegetal.
De igual manera, en la Tabla 4 se aprecia una leve
reducción del dolor neurogénico (durante los primeros En cuanto al estudio toxicológico, la ausencia de eventos
cinco minutos) caracterizado por el comportamiento de mortales y acorde a la guía de la OECD (18), el extracto
«lamida de pata» inducida por la inyección subplantar de etanólico de las hojas de P. lychnidiflora se clasificaría en
formalina, con valores de inhibición entre 22 y 30 % para la categoría cinco de toxicidad que es equivalente a una
las tres concentraciones del extracto de P. lychnidiflora, DL50 mayor a 2000 mg/kg, pero menor a 5000 mg/kg de
sin representar esto una diferencia estadísticamente peso corporal, similar a lo reportado para otras especies de
significativa frente al dolor observado en el grupo de este género (20). La prueba de toxicidad aguda oral, es
animales control negativo (Figura 2). No obstante, sí se indispensable para la determinación del perfil tóxico de
observa una disminución estadísticamente significativa de sustancias y los modelos animales son una herramienta
los tiempos que los animales tratados con P. lychnidiflora para la predicción de eventos adversos a la salud
gastan lamiéndose la pata durante la segunda fase medida humana (21), en tanto que ofrecen información toxicológica
entre los 15-30 minutos post inducción de dolor (figura 2), que no puede lograrse aún por métodos alternativos (22).
con valores de inhibición muy similares al observado en el
grupo tratado con el fármaco de referencia (IBU 200 mg/kg). Los datos referentes al peso corporal poseen una gran
sensibilidad para detectar alteraciones, incluso aquellas de
DISCUSIÓN baja toxicidad. Una disminución de más del 10% del peso
corporal es considerada un indicador efectos adversos
La prospección de los metabolitos secundarios para la salud (23). En cuanto a la disminución del peso
obtenidos de P. lychnidiflora, concuerda con los corporal observado en el grupo de machos tratados con
reportados previamente en especies del género el extracto etanólico de P. lychnidiflora, este no debe ser
Pereskia, como esteroles, terpenoides, alcaloides y considerado como un signo toxicológico, al no alcanzar el
compuestos fenólicos (5,7,8), y se puede considerar como límite mencionado.

Figura 1. Cortes histológicos de órganos de animales tratados con el extracto etanólico de Pereskia lychnidiflora de 2,000 mg/kg de peso
corporal. Técnica histopatológica clásica para bloques parafinados, cortadas a 5 μm y coloreados con hematoxilina–eosina. Aumento 40x.
De izquierda a derecha: Intestino, hígado, estomago, riñón, corazón, bazo, pulmón.

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Tabla 3. Valores promedio de peso de órganos y valores de bioquímica sanguínea de los grupos experimentales.

Hembras Machos
Órgano
Grupo Peso promedio (DE) Valor de p* Peso promedio (DE) Valor de p*
Control 1,276 (0,103) 1,434 (0,202)
Hígado
Tratamiento 1,154 (0,167) 0,202 1,346 (0,153) 0,460
Control 0,426 (0,433) 0,106 (0,015)
Corazón
Tratamiento 0,092 (0,013) 0,159 0,128 (0,128) 0,210
Control 0,202 (0,259) 0,178 (0,028)
Pulmón
Tratamiento 0,192 (0,023) 0,535 3,53 (7,53) 0,376
Control 0,182 (0,019) 0,242 (0,033)
Riñón
Tratamiento 0,26 (0,191) 0,492 0,22 (0,023) 0,141
Control 0,636 (0,164) 0,668 (0,025)
Estómago
Tratamiento 0,778 (0,124) 0,413 0,498 (0,073) 0,256
Control 0,122 (0,013) 0,092 (0,004)
Bazo
Tratamiento 0,100 (0,034) 0,160 0,08 (0,016) 0,005
Control 2,008 (0,383) 1,766 (0,07)
Intestino delgado
Tratamiento 1,862 (0,197) 0,47 1,542 (0,433) 0,286
Control 0,758 (0,099) 0,776 (0,136)
Intestino grueso
Tratamiento 0,884 (0,073) 0,051 0,906 (0,138) 0,172
Control 0,12 (0,01) 0,25 (0,05)
Bilirrubina
Tratamiento 0,16 (0,02) <0,001 0,16 (0,01) 0,110

Control 229,2 (37,27) 230,83 (38,27)


Glucosa
Tratamiento 182,0 (33,56) 0,680 236,5 (33,29) 0,820
Control 30,8 (2,39) 30,16 (2,4)
Nitrógeno ureico
Tratamiento 27,6 (1,82) 0,440 28,5 (3,1) 0,370
Control 0,22 (0,01) 0,26 (0,02)
Creatinina
Tratamiento 0,23 (0,02) 0,720 0,27 (0,02) 0,610

Control 128,4 (30,57) 120,16 (23,36)


TGO
Tratamiento 126,8 (31,32) 0,940 84,25 (5,68) 0,180
Control 50,4 (8,41) 65,83 (5,67)
TGP
Tratamiento 60,6 (17,18) 0,270 62,25 (5,74) 0,370

Los valores del peso promedio se expresan en gramos.


DE: desviación estándar.
* Prueba T de Student para muestras independientes

Respecto de los órganos, los cambios en el tamaño, evaluación de los cortes histológicos en los órganos de
forma, superficie, color, consistencia y peso; determinan los animales expuestos al extracto de estudio, orientan
la presencia de daños toxicológicos (24). Además, el peso a que el uso de las hojas de esta especie vegetal tiene
relativo de los órganos es fundamental para diagnosticar un perfil de seguridad adecuado. Por otro lado, fuera de
si el órgano fue expuesto a la lesión o no (25). En este la disminución en el peso del bazo de animales tratados
sentido, la ausencia de alteraciones macroscópicas con el extracto de P. lychnidiflora, no hay otros indicios
en las necropsias, así como microscópicas durante la que enlazan los resultados a la seguridad.

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Tabla 4. Valores promedios y porcentaje de inhibición de la prueba del ácido acético y prueba de la formalina en los
grupos experimentales.

Prueba del ácido acético Prueba de la formalina


0 - 5 min 15 - 30 min
Grupo
Promedio (DE) Porcentaje de Promedio (DE) Porcentaje Promedio (DE) Porcentaje de
(valor de p*) inhibición (valor de p*) de inhibición (valor de p*) inhibición
H2Od 45,43 (6,37) - 15,43 (4,72) - 50,14 (5,84) -
4,29 (3,86) 9,29 (2,81) 19,29 (11,90)
IBU (200 mg/kg) 90,55 39,79 61,53
(<0,001) (0,130) (<0,001)
13,63 (13,95) 10,86 (5,52) 29,57 (13,04)
Pl (30 mg/kg) 70 29,62 41,03
(<0,001) (0,411) (0,014)
10,50 (7,43) 11,83 (2,93) 30,33 (7,81)
Pl (50 mg/kg) 76,88 23,33 39,51
(<0,001) (0,672) (0,026)
7,75 (9,21) 12,00 (6,73) 24,57 (14,23)
Pl (100 mg/kg) 82,94 22,23 51,00
(<0,001) (0,678) (0,002)

H2Od: grupo control negativo tratado con agua destilada; IBU: grupo control positivo tratado con ibuprofeno; Pl: grupos tratados con extracto etanólico
de P. lichnidiflora.
* Prueba de ANOVA/ Tukey.

Sobre el aumento de los valores promedio de bilirrubina en el estar acompañado por el incremento de las transaminasas
grupo de animales expuesto al extracto vegetal, esto, podría y la disminución de glucosa en sangre, ni por alteraciones
ser un indicador de daño de la función hepática, pero al no macroscópicas o microscópicas en hígado (26), dichos

60 A

50

40

30
*
20
* *
10

0
H2Od IBU 200 mg/kg Pl 30 mg/kg Pl 50 mg/kg Pl 100 mg/kg
Grupos

20 B 60 B2
1

50
15
40 *
* *
10 30

20
5
10

0 0
H2Od IBU 200 mg/kg Pl 30 mg/kg Pl 50 mg/kg Pl 100 mg/kg H2Od IBU 200 mg/kg Pl 30 mg/kg Pl 50 mg/kg Pl 100 mg/kg
Grupos Grupos

Figura 2. A. Prueba del ácido acético. B1. Prueba de formalina: Fase 1, indicativa del dolor neurogénico. B2.
Prueba de la formalina: Fase 2, indicativa del dolor inflamatorio. Comparación entre los grupos controles agua
destilada (H2Od) e Ibuprofeno 200 mg/kg (IBU 200 mg/kg) y los grupos tratados con el extracto etanólico de
las hojas de Pereskia lychnidiflora (Pl) a concentraciones de 30, 50 y 100 mg/kg. Los datos se expresan como
el promedio + error estándar del promedio. Se consideró que la diferencia entre los grupos tratados y el grupo
control negativo es significativa (*) cuando el valor de p < 0,05 (ANOVA/ Tukey).

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Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2018;35(4):581-9. Guerra R et al.

valores de bilirrubina probablemente no son evidencias del Los resultados apuntan a la actividad analgésica del
daño de la función hepática. extracto etanólico de P. lychnidiflora, actividad biológica que
es apoyada por los resultados de la evaluación fitoquímica
Respecto de la evaluación de la actividad nociceptiva, los preliminar, donde se determinó la presencia de taninos,
resultados de la prueba del ácido acético demuestran el alcaloides y esteroles (terpenoides), familias químicas que
potencial analgésico de esta especie vegetal y concuerdan
han sido reportadas como responsables de la actividad
con la actividad analgésica reportada para otras especies
analgésica de este género (6,32).
de este género (6,27). Estos resultados indican además la
actividad antiinflamatoria del extracto etanólico de hojas
de P. lychnidiflora, en tanto que la prueba del ácido acético En conclusión, el estudio de toxicidad del presente
al dañar membranas celulares del peritoneo genera trabajo, demuestra que el extracto etanólico de Pereskia
la liberación de prostaglandinas y otros mediadores de la lychnidiflora no tiene efectos graves a la salud en los
inflamación (28), por lo que, la reducción de las contorsiones animales de experimentación y puede clasificarse como de
abdominales es indicativo de la reducción en la liberación uso seguro. En cuanto a las pruebas analgésicas, el extracto
de estos mediadores. Del mismo modo, los resultados de la evaluado tiene un efecto analgésico antiinflamatorio que
segunda fase de la prueba de la formalina, son indicadores podría estar condicionado por la presencia de alcaloides,
de un efecto analgésico contra un dolor de origen taninos y esteroles (terpenoides) presentes en esta especie
inflamatorio (29), en tanto que, en esta fase, la inyección vegetal; apoyando de esta manera su uso tradicional como
de formalina está asociada a la liberación nuevamente tratamiento alternativo para el dolor en El Salvador.
de mediadores inflamatorios incluyendo prostaglandinas,
histaminas, bradiquininas y serotonina (30). Contribuciones de los autores: RG, LJG, GT, NA, UGC, JPS,
JGM, MJN y MAM han participado en la concepción del artículo,
El extracto actúa en ambas fases durante la prueba de la la recolección de datos, su redacción y aprobación de la versión
formalina; aunque con mayor efectividad en la fase del dolor final. Además, JGM realizó el análisis estadístico, y MJN y MAM
central o inflamatorio, esto concuerda con otra investigación, obtuvieron el financiamiento.
en donde afirman que este tipo de analgésicos que actúan
central y periféricamente son activos en ambas fases de Fuentes de financiamiento: Autofinanciado.
la prueba de la formalina (31); pero, son más eficaces en la
segunda fase en la que en general dosis más bajas son Conflictos de interés: Los autores declaran no tener conflictos de
suficientes para causar el efecto antinociceptivo. interés con la publicación de este artículo.

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