Pruebas Biuret, Xantoproteica

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Prueba del anillo de Héller para proteínas

(Ensayo de Xantroproteico)

• La reacción xantoproteica es un método que se utiliza para


determinar la presencia de proteínas solubles en una
solución, empleando ácido nítrico concentrado.
• La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con
aminoácidos portadores de grupos aromáticos.
• Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se
torna color amarillo oscuro. Esta reacción se debe a la
formación de un compuesto aromático nitrado de color
amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico
concentrado.
• Generalmente, se forma primero un precipitado blanco que
cambia a amarillo al calentarlo. El color se empieza a
tornarse anaranjado cuando la solución se vuelve básica.
• La prueba da resultado positivo en aquellas
proteínas con aminoácidos portadores de grupos
bencénicos: tirosina, fenilalanina y triptofano,
obteniéndose nitrocompuestos de color amarillo,
que se vuelven anaranjados en medio fuertemente
alcalino (formación del ácido pirámico o
trinitrofenol).
• En esta prueba se produce la nitración del anillo
bencénico presente en dichos aminoácidos.
Reacción de Biuret
• El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución
acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH).
• La reacción se basa en la formación de un compuesto
de color violeta, debido a la formación de un complejo
de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma
parte de los enlaces peptídicos presentando un
máximo de absorción a 540 nm (por Química Orgánica
y Biológica - Espectrofotómetro).
• Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas,
pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia
del enlace peptídico CO-NH que se destruye al
liberarse los aminoácidos.
• Nota: Preparación del Reactivo de Biuret: Se pesa
1,5 g de CuSO4·5H2O y 6,0 g de tartrato de sodio y
potasio.
• Se disuelve en 500 mL de agua destilada y se
adiciona 300 mL de una solución de NaOH al 10%.
• Se afora a 1000 mL con agua destilada. Finalmente
el reactivo de Biuret se guarda en un frasco ámbar y
se conserva en refrigeración.
Reconocimiento de aminoácidos que
poseen azufre
• Los aminoácidos sulfurados se descomponen al
tratarlos con solución de NaOH en caliente,
formando sulfuro de sodio como producto. 
• Éste  se pone en evidencia acidificando con un
ácido concentrado y colocando en la boca del tubo
un papel mojado con acetato de Pb.
• Se observa la formación de un sólido negro-
amarronado de sulfuro de plomo
• Música con serotonina
• https://www.youtube.com/watch?v=TaaJTwXae_c
• La vida es maravillosa
• https://www.youtube.com/watch?v=CZntStaipHg

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