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Electrophorese

L'électrophorèse sur gel d'agarose est une méthode utilisée pour séparer l'ADN en fonction de leur masse moléculaire. La technique sépare les acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique à travers la matrice du gel d'agarose, avec les molécules plus petites se déplaçant plus loin.

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Electrophorese

L'électrophorèse sur gel d'agarose est une méthode utilisée pour séparer l'ADN en fonction de leur masse moléculaire. La technique sépare les acides nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique à travers la matrice du gel d'agarose, avec les molécules plus petites se déplaçant plus loin.

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Le but de l'électrophorèse 

:
L'électrophorèse sur gel d'agarose : est une méthode utilisée pour séparer l'ADN,
l'ARN ou des protéines en fonction de leur masse moléculaire.
La technique de l'électrophorèse sur gel d'agarose est basée sur la séparation des acides
nucléiques chargés négativement sous l'effet d'un champ électrique. Cette séparation
s'effectue à travers la matrice du gel d'agarose : les molécules de plus petites tailles se
déplacent plus rapidement et migreront plus loin que les molécules de tailles supérieures.

Electrophorèse sur gel d’AGAROSE :

Nous allons observer l’ADN sur gel d’agarose 2% 2g/100ml

Préparation du tampon TBE :

Pour la préparation d’un tampon TBE :

10.78g (89mM) TRIS

5.50g (89mM) acide borique tampon TBE 

0.58g (2mM) EDTA disoduim salt

Le BTE est un agent intercalant qui s’intercalent entre les brins


d’ADN est permet l’observation de l’ADN sous UV grâce à la fluorescence du
BET.

On utilise un tampon de charge commercialise (bleu de bromophénol) pour


déposer l’ADN amplifie dans les puis de gel. Le tampon empêche la diffusion de
l’ADN et permet sa migration à travers le gel.

Etant donné que l’ADN est chargé négativement par la présence des
groupements phosphate, il migre du pole négatif vers le pole positif sur la
plaque d’électrophorèse.

Après migration les bandes sont observer sur plaque UV.

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