Les différentes étapes de l’analyse biochimique :

Le prélèvement (nature de l’anticoagulants,

conservation, acheminement) et les pièges à éviter
dans l’interprétation des résultats

Pr. B.ADDAD

Departement de Medecine
Faculte de Medecine d’Oran

Date 25/10/2021

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INTRODUCTION

Les analyses biochimiques sanguines sont des examens du sang qui

mesurent la quantité de certaines substances chimiques dans un
prélèvement sanguin. Elles permettent d’évaluer le potentiel du
fonctionnement de certains organes, ainsi que la detections des
anomalies métaboliques associés. Les examens biochimiques sont
regroupés dans les catégories suivantes :
Les électrolytes et les molécules minérales et organiques.
Les lipides, les hormones.
Les sucres, les protéines.
Les vitamines et les minéraux.

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Analyses biochimiques sanguines courantes

On peut avoir recours à différentes analyses pour mesurer différents

types de substances chimiques.
Le profil électrolytique mesure le sodium, le potassium, le
chlorure, le magnésium, le phosphate et le bicarbonate.
Les tests de la fonction rénale mesurent l’azote uréique du sang
et la créatinine.
Les tests de la fonction hépatique mesurent l’alanine
aminotransférase (ALT), la phosphatase alcaline (PA), l’aspartate
transaminase (AST), la bilirubine, l’albumine et les protéines
totales.
Le profil métabolique de base est constitué du profil électrolytique
et des tests de la fonction rénale et mesure également le glucose,
les protéines, le calcium et le phosphate.

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Intérêt d’une analyse biochimique sanguine

Obtenir de l’information de l’état de santé général.

Vérifier le fonctionnement d’organes comme les reins, le foie et la
glande thyroïde.
Vérifier l’équilibre des électrolytes du corps.
Aider à diagnostiquer des maladies et des affections.
Obtenir les taux des substances chimiques (valeurs de référence)
auxquels on pourra comparer les résultats d’analyses sanguines
effectuées plus tard.
Vérifier l’efficacité ou les effets indésirables d’un traitement sur
certains organes.
Déroulement d’une analyse biochimique sanguine.
surveiller le suivi d’un cancer

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Déroulement d’une analyse biochimique sanguine

L’analyse biochimique sanguine dépend du type de substance

chimique mesurée.
On peut vous demander d’être à jeûne : de ne pas manger ni
boire (sauf de l’eau) plusieurs heures avant l’analyse.
Certains médicaments risquent aussi d’affecter le résultat de
l’analyse biochimique sanguine. On peut vous demander d’arrêter
de prendre certains médicaments avant l’analyse.

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Déroulement d’une analyse biochimique sanguine

On prélève généralement le sang dans une veine du bras. On

entoure le bras d’une bande élastique (garrot) pour exercer une
pression dans la région et rendre les veines plus visibles. Il est
possible qu’on vous demande de fermer la main (poing) pour faire
saillir les veines davantage. On nettoie et désinfecte la peau. On
insère une aiguille dans une veine et on prélève une petite
quantité de sang. Vous pouvez ressentir une piqûre ou une
brûlure.

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Déroulement d’une analyse biochimique sanguine

Le sang est recueilli dans un tube dont l’étiquette porte votre nom
et d’autres renseignements qui vous identifient. Parfois plus d’un
tube est nécessaire. On enlève ensuite le garrot et on retire
l’aiguille. Il est possible que vous ressentiez un léger malaise lors
du retrait de l’aiguille. On applique une pression sur la région où
on a inséré l’aiguille jusqu’à ce que le saignement cesse.
Le sang prélevé est ensuite examiné par une spécialiste en
laboratoire (technologue de laboratoire) à l’aide de microscopes et
d’autres appareils particuliers.

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Effets secondaires du prelevement sanguin

Le prélèvement sanguin effectué pour une analyse biochimique

sanguine n’engendre habituellement aucun effet secondaire. S’ils se
produisent, ils sont généralement mineurs et apparaissent au point
d’insertion de l’aiguille.
Inconfort
Saignement
Ecchymose
Enflure
infection

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Critères de qualité du prélèvement sanguin
Le prélèvement est une étape essentielle de l’analyse : de la qualité de
l’échantillon dépend celle du résultat.
Un prélèvement effectué le matin quand le patient est à jeun est
primordial pour l’interprétation des résultats et leurs comparaisons
aux valeurs de référence.
La conformité des prélèvements biologiques répond à des
exigences réglementaires.
Il importe que l’identification du patient soit sans ambiguïté. Par
sécurité, les étiquettes doivent être Apposées sur les tubes au
chevet même du patient au moment du prélèvement.
Aucun tube non étiqueté ne peut être accepté.
La date et l’heure du prélèvement doivent également être
précisées.
Le nom de la personne ayant prélevé doit être mentionné sur la
demande d’examens ainsi que le nom du médecin prescripteur.
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Acheminement des prelevements au laboratoire

Les prélèvements sont acheminés le plus rapidement possibles au

laboratoire. Principales analyses ayant un délai et des conditions
d’acheminement très strictes :
Gaz du sang 30 min dans la glace.
Ac lactique 30 min dans la glace.
Ammoniémie 30 min dans la glace.
Procalcitonine 1 heure.
Homocystéine 1 heure.
Glycémie, LDH 2 heures.
Potassium 4 heures.
Hémostase 4 heures.

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Principaux facteurs perturbant les résultats d’analyses

La physiologie du patient (ex. : phase postprandiale, stress).

La thérapeutique suivie par le patient (à noter sur la demande).
Le délai d’acheminement trop long et les variations de
température trop importantes.
Pour les tubes avec anticoagulant, le remplissage incomplet du
tube.
Le prélèvement sur anticoagulant inadéquat.
L’ordre des prélèvements non respecté (tube vert hépariné avant
tube bleu citraté).

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Principaux facteurs perturbant les résultats d’analyses

La mauvaise homogénéisation de l’échantillon :

Trop brutale : entraîne l’hémolyse
Insuffisante : entraîne des formations de microcaillots ou
l’apparition de réseaux de fibrine.
L’excès de temps de pose du garrot (enzymologie, potassium,
hémostase. . .).
Pour les urines de 24 heures, le recueil incomplet.
Une perfusion : le bras prélevé doit être le bras opposé à la
perfusion.

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Principaux facteurs intervenant dans l’interprétation
des résultats d’analyses
L’heure du prélèvement.
L’âge.
Le sexe.
Les traitements : voie d’administration, posologie, heure de
dernière prise.
La motivation de la demande à remplir par le médecin.
Une intervention chirurgicale éventuelle (noter la date et l’heure).
Une hémodialyse.
Une transfusion.
La position du patient pour certaines analyses.
Le régime hydrique pour certaines analyses.
Pour la femme en âge de procréer : la date des dernières règles
ou la grossesse pour certaines analyses.
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Prélèvements sanguins
Le prélèvement est effectué à jeun et toujours à la même heure,
en général le matin.
Un jeûne de 8 à 12 heures est généralement suffisant ;
néanmoins, le bilan lipidique exige impérativement un jeûne de 12
heures.
Le prélèvement doit être pratiqué sur un sujet au repos : pas ou
peu d’activité musculaire, pas de stress, pas de tabagisme,
notamment avant et pendant les épreuves. . .
Le préleveur doit respecter les règles d’hygiène habituelles
(lavage de mains, port de blouse. . .).
La ponction veineuse est la plus courante. Elle doit essayer de
préserver le mieux possible le « capital veineux ».
Gaz du sang utiliser une seringue héparinée. Ce prélèvement doit
être fait en dernier. La ponction artérielle est effectuée au niveau
des artères radiale, humérale, voire fémorale. Il est essentiel de
veiller à l’étanchéité de la seringue en évitant toute contamination
par des bulles d’air, et de la purger afin d’éliminer l’excès
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Prélèvements urinaires en biochimie

En règle générale, il faut préférer le recueil des urines de 24

heures. Elles sont recueillies dans un flacon propre de 2 litres.
Le recueil doit porter sur la totalité des mictions des 24 heures,
car la concentration varie au cours du nycthémère.
À une heure déterminée, par exemple à 8 heures, il faut vider la
vessie dans les toilettes et à partir de cet instant, recueillir toutes
les mictions dans le flacon destiné à cet effet, jusqu’au lendemain,
y compris 8 heures.
Apporter au laboratoire un échantillon des urines de 24 heures
après homogénéisation dans un tube.

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Conditions particulières
Clairances de la créatinine et de l’urée.
Recueillir les urines de 24 heures comme indiqué ci-dessus dans
les généralités et à la fin du recueil urinaire, effectuer le
prélèvement sanguin (les calculs de la clairance dépendent du
volume urinaire). Au cours de ces 24 heures, il est nécessaire que
le patient boive beaucoup d’eau, pour obtenir une diurèse d’au
moins 1l 500.
Dans le cadre d’une adaptation posologique de médicaments
l’estimation de la clairance de la créatinine peut-être obtenue par
l’équation de Cockcroft et exprimée en ml/min (ne pas oublier de
renseigner le poids du patient)
Catécholamines - Dopamine : Exclure dans les 48 heures
précédant le dosage, chocolat, banane agrumes et consommer
modérément thé et café.
5 HIAA - HVA – VMA : éviter dans les 48 heures précédant le
dosage, la consommation de banane, vanille, thé, café, chocolat.
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Échantillon hémolysé

Description d’un échantillon hémolysé :

L’hémolyse est la destruction des globules rouges (érythrocytes)
présents dans le sang. L’hémolyse dans un prélèvement de sang
pour analyse colore le plasma ou le sérum, plus ou moins
fortement selon son degré,en rouge orangé. On parle de sang
hémolysé.
Origine d’un sang hémolysé :
La destruction des érythrocytes est un phénomène normal qui a
lieu dans la rate lorsque les globules rouges, en fin de vie, y sont
détruits et éliminés. L’hémolyse anormale du sang peut avoir
différentes causes.
Il peut s’agir d’une pathologie qui aboutit à la destruction des
globules rouges dans les vaisseaux sanguins(exemples :
certaines anémies, accidents transfusionnels, paludisme, etc.).

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Echantillon hémolysé après prélèvement

La manipulation inappropriée d’un échantillon.

Agitation excessif.
Ajout d’eau distillée, peuvent aboutir à une hémolyse.
L’aspiration trop rapide du sang au cours du prélèvement.
la pose prolongée d’un garrot.
L’utilisation d’aiguilles trop fines peut également contribuer à
l’obtention d’un sang hémolysé.

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Hémolyse et interférences avec les analyses de
laboratoire
L’hémolyse peut interférer avec les dosages réalisés en
laboratoire. Ces interférences sont dues à la libération dans le
sérum ou le plasma de constituants présents dans les globules
rouges.
Certains constituants présents en grande quantité dans les
globules rouges auront donc une concentration augmentée dans
le plasma ou le sérum en cas d’hémolyse. Le résultat de leur
détermination sera donc faussement augmenté. Exemples :
potassium, hémoglobine, lactate déshydrogénase (LDH),
transaminases.
De nombreux dosages exploitent les propriétés optiques de
l’échantillon. La destruction des globules rouges entraîne le
passage dans le plasma ou le sérum de composés colorés qui
interfèrent fortement avec leurs propriétés optiques. Exemples :
hémoglobine, bilirubine.
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Hémolyse et interférences avec les analyses de
laboratoire

Pour la mesure de la concentration d’un paramètre, certains

dosages utilisent des enzymes. La destruction des globules
rouges peut entraîner la libération dans le sérum ou le plasma
d’enzymes érythrocytaires qui ne devraient pas être présentes
dans l’échantillon. Ces dernières peuvent interférer fortement
avec les réactions mises en œuvre au cours du dosage et, de fait,
fausser fortement les résultats.
L’hémolyse est visible à l’œil nu, à partir d’une concentration
plasmatique en hémoglobine > 0,3 g/L. Elle se manifeste par une
coloration plus ou moins rouge du sérum et du plasma.

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Échantillon lipémique

Description d’un échantillon lipémique :

Il s’agit d’un échantillon dont le sérum ou le plasma a un aspect
trouble, translucide ou laiteux dû à l’augmentation des lipides.
Origine d’un échantillon lipémique :
L’aspect lipémique d’un échantillon peut être significatif d’une
anomalie du métabolisme des graisses et doit être signalé par le
laboratoire d’analyses médicales. Un simple examen visuel de
l’échantillon permet d’orienter grossièrement la recherche de ces
troubles. Par exemple, certaines graisses (chylomicrons) forment
une couche d’aspect crémeux qui flotte à la surface de
l’échantillon après 24h au réfrigérateur.
D’autres graisses (lipoprotéines de très basses densités ou VLDL)
génèrent une turbidité homogène du plasma. Il est à noter qu’une
prise de sang immédiatement après un repas riche en graisses
peut générer également des échantillons lipémiques.

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Échantillon lipémique et interférences avec les
analyses de laboratoire

La présence de lipides en excès dans un échantillon interfère avec de

nombreux dosages par des interférences de nature
physico-chimiques. Ce peut être :
Une inhomogénéité de l’échantillon, les lipides ayant tendance à
flotter à la surface après centrifugation. De fait, un automate qui
prélève la phase supérieure pour un dosage analysera un liquide
enrichi en lipides et dépourvu en eau, ce qui faussera le résultat.
Une interférence de nature optique. Comme cité précédemment,
les propriétés optiques du sérum et plasma sont exploités pour de
nombreuses analyses. Les propriétés optiques d’un échantillon
seront faussées par un phénomène de turbidité et/ou
d’inhomogénéité.

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Échantillon ictérique

Description d’un échantillon ictérique :

C’est un échantillon dont le plasma ou le sérum a perdu sa
couleur normale jaune paille, en virant vers le jaune foncé, brun
ou verdâtre.
Origine d’un échantillon ictérique :
Cette situation est due à une augmentation anormale de la
bilirubine, composé ayant une coloration brunâtre. La bilirubine
est le produit de dégradation normal de l’hémoglobine contenue
dans les globules rouges.

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Échantillon ictérique et interférences avec les
analyses de laboratoire

De nombreuses pathologies, en particulier celle touchant le foie

ou les globules rouges, sont associées à l’élévation anormale de
la bilirubine dans le sang, colorant ainsi la peau et les liquides
biologiques en jaune foncé ou brun. On parle d’ictère pour la peau
et d’échantillon ictérique pour un prélèvement. Un échantillon
ictérique doit être signalé par le laboratoire d’analyses médicales.
La bilirubine étant un composé coloré, il s’agit principalement
d’interférences optiques similaires à celles décrites dans les
interférences précédentes.

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CONCLUSION

Il est préférable de refaire une prise de sang lorsqu’un échantillon est

hémolysé ou lipémique. Si des résultats d’analyse sont malgré tout
rendus, il est impératif d’ajouter une remarque à l’attention du médecin.

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