Introduction BIOCHIMIE

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Fiche technique 1 : généralités Biochimie analytique

Introduction
L’étude de biomolécules (glucides, lipides, protéines, acides nucléiques) en phase
préclinique se fait sur le double plan structurel et métabolique, ainsi l’étude
structurelle a permis de connaitre l’architecture de ces biomolécules, l’agencement de
leurs éléments constitutifs, de leur mode de liaison d’où découle leurs propriétés
physicochimique.
L’étude métabolique permis d’une part de connaitre leurs modes de synthèse
(anabolisme) et leurs lieux et leurs modes de dégradation (catabolisme) ; ces deux
grandes voies métaboliques sont étroitement liées et parfaitement réguliers par un
double mécanisme hormonal et enzymatique.

Qu’est ce que la biochimie clinique


La biochimie clinique ou chimie pathologique ou chimie clinique est le domaine de
la biologie médicale qui est en général concerné par l'analyse des molécules contenues
dans les fluides corporels (sang, liquide céphalo-rachidien, urines, etc.) et
l'interprétation des résultats de ces analyses par un clinicien dans le but de caractériser
l'origine physiopathologique d'une maladie.
La biochimie clinique se cantonne à la recherche et au dosage des molécules pouvant
être impliquées dans une pathologie.
Le travail du clinicien spécialisé en biochimie clinique consiste en l'interprétation des
résultats en fonction du reste du bilan biologique et Cette interprétation prend en
compte les caractéristiques physiologiques du patient (â ge, sexe, poids...) et les
symptô mes repérés par le clinicien dans le but d'aboutir un diagnostic de la pathologie.
La biochimie clinique est donc la réalisation des explorations fonctionnelle par le biais
des dosages.

Qu’est ce que un dosage et une exploration fonctionnelle


Dosage :
Doser une substance consiste à obtenir au moyen d’une méthode adéquate, la
concentration de cette substance par unité de volume ou de masse.
Exploration fonctionnelle
Une exploration fonctionnelle consiste à réaliser des dosages biochimiques après avoir
modifié les conditions de vie des sujets, autrement dis cela consiste à pousser
l’organisme à réagir afin de faire apparaitre une éventuelle anomalie.
Fiche technique 1 : généralités Biochimie analytique

Exemple : dosage de cortisol avant et après injection de corticotropine (ACTH). Un


doublement du taux de cortisol est une bonne réponse à l'ACTH et signe une bonne
réserve cortico-surrénalienne, tandis qu'une réponse moindre signe surtout une cortico-
dépendance pour certains patients sous cortico-thérapie de longue durée.

Les prélèvements
Le prélèvement constitue la première étape d’une analyse biochimique, la bonne
réalisation d’un prélèvement conditionne en grande partie la validité d’un résultat.
Un prélèvement est réalisé pour confirmer ou infirmer un diagnostic il est de ce fait
précédé toujours d’un examen clinique, le plus complet possible.
Les analyse les plus courantes portent sur le sang et l’urine, cependant le clinicien
pourrait ramener a plusieurs d’autres liquides biologiques ( liquide céphalo- rachidien,
liquide d’ascite ainsi que des fragments tissulaires…).
Fiche technique 1 : généralités Biochimie analytique

Définitions : sang total, plasma, sérum


Le sang frais, utilisé immédiatement après prélèvement est dénommé « sang total ». Le
sang total est constitué d’un liquide biologique, le plasma, contenant toutes les cellules
sanguines. Ces cellules ou « éléments figurés du sang » sont les globules rouges, les
globules blancs et les plaquettes.
Le plasma est un liquide un peu visqueux, transparent et jaunâ tre chez le sujet sain.
Le sang total n’est pas un produit stable. En dehors des vaisseaux sanguins (par exemple
dans un tube de laboratoire), il coagule spontanément en quelques minutes, générant
une masse semi-solide ressemblant à un gel compact et appelé « coagulum ». Le
coagulum contient du plasma modifié, des cellules sanguines et de la fibrine,
responsable en partie de sa structure. Si l’on centrifuge un coagulum, il perd sa structure
et est séparé en une partie solide et une partie liquide. La partie solide est un agrégat
compact de fibrine et de cellules sanguines. Le surnageant liquide, appelé sérum, est
proche du plasma mais de composition différente car il a subi les modifications liées à la
coagulation. Obtenir du plasma est plus simple, il suffit de centrifuger du sang total pour
séparer par gravité les cellules sanguines de leur liquide biologique, après ajout d’un
anticoagulant, et de récupérer le surnageant (schéma ci-dessous).

Préparation du plasma

Cellules
sanguine

Sang total +
anticoagulant
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Préparation du sérum

Sang total sans


anticoagulant Coagulum

Sérum ou plasma au laboratoire d’analyses médicales ?


Selon les dosages, il est préférable de choisir le sérum ou le plasma. Il est important de
comprendre que le sérum n’a pas la même composition que le plasma, puisque celle-ci a
été modifiée par la coagulation. En effet :
→ Certains composés sont consommés durant la coagulation (exemples: glucose,
fibrinogène). Leur concentration est donc abaissée dans le sérum par rapport au plasma.
→ Certains composés sont produits ou libérés dans le sérum durant la coagulation
(exemples: potassium, lactate, phosphates). Leur concentration est donc augmentée
dans le sérum par rapport au plasma.
→ Le plasma contient en plus un anticoagulant.
Principales méthodes analytiques utilisées en biochimie clinique :

Méthodes de dosage et de quantification


Méthodes de séparation et d’analyse Méthodes
enzymatiques

-Dosages photométriques
-Gravimétrie et volumétrie
-La
chromatographie -Dosages fluoro-métriques
-Méthodes optiques
-L’électrophorèse -Dosages isotopiques
« Spectrophotométries »
-Dosages immunologiques

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