Autoimmunité et connectivites : de nouvelles spécificités

Autoanticorps: Techniques de détection et Intérêt clinique

Nicole Fabien
Service d’Immunologie
UF Autoimmunité
Lyon

51ème JBP Décembre 2017

 Nouveaux Autoanticorps et Maladies systémiques auto-immunes
Neurologiques Anticorps Oculaires Différents anticorps
Neuropathies sensitives
Gammapathies monoclonales IgM Anti-myéline
Neuropathies motrices Anti-gangliosides
Syndrome paranéoplasiques
Encéphalites limbiques
Anti-neurones intracellulaires
Anti-neurones membranaire
Endocriniennes Anticorps
Thyroidite de Hashimoto Anti-TPO
Troubles de la Jonction Graves Basedow Anti-récepteurs de la TSH
Neuromusculaire
Myasthénie Anti-R de l’acétylcholine Diabete insulino-dépendant Anti-Pancréas: ICA (ilots de Langerhans)
Maladie du Stiff-man Anti-GAD Glutamate Decarboxylase (GAD), IA2
Maladie Lambert-Eaton Anti-canaux calciques Maladie d’Addison Anti-cortico-surrénale (P450c21)
Maladie de Cushing Anti-cellule ACTH
Amenorrhée primitive Anti-cellules à Prolactine
Ménopause précoce Anti-cellules stéroïdes
Stérilité Anti-zone pellucide
Nanisme hypophysaire Anti-hormone de croissance
Oreille Anticorps
Polychrondrite atrophiante Anti-cartilage(collagène II)
Syndrome de Meniere Anti-cochlée
Surdite fluctuante (collagène II)

Rénales Anticorps
Hépatiques Anticorps Syndrome de Goopasture Anti-membrane basale
Hépatite autoimmune I Anti-Actine Glomérulaire (collagène IV)
Hépatite autoimmune II Anti-LKM – Anti-cytosol GNP Microangiopathique pANCA (MPO)
(cytochrome P450, LC1) Maladie de Berger Complexes IgA-Fibronectine
Cirrhose biliaire primitive Anti-mitochondrie M2 Nephrite intersticielle Anti-membrane basale tubulaire
(Pyruvate-déshydrogénase)
Cholangite sclérosante pANCA (NANA)

Gastriques Anticorps
Systémiques Anticorps
Polyarthrite rhumatoïde Facteurs rhumatoïde, anti-CCP
Gastrite Atrophique A Anti-cellules pariétales
Anémie de Biermer Anti-facteur intrinsèque Lupus systémique Anti-ADNdb, Anti-Sm
Lupus cutané subaigu Anti-SSA
Syndrome de Sharp Anti-U1RNP
Intestinales Anticorps Gougerot Sjögren Anti-SS-A/SS-B
Sclérodermies Anti-centromères, anti-Scl 70,
Maladie de Crohn Anti-pancréas exocrine Anti-nucléolaire (diverses spécifictés)
ASCA Myosites Myopathies Anti-synthétases + ac rares
Rectocolite Hémorragique ANCA (NANA) Syndrome des APL, Anti-2 glycoprotéine 1
Maladie coeliaque Anti-Endomysium, anti-phospholipides
Anti-transglutaminase

Vascularites Anticorps
Granulomatose avec polyangéite Anti-cytoplasme des polynucléaires Dermatologiques Différents anticorps
(cANCA, Protéinase 3)
Granulome avec polyangéïte (pANCA, Myéloperoxidase) (MPO)
Polyangéïte Microscopique (pANCA, Myéloperoxidase) (MPO)

D’après un schéma du Pr R.L Humbel (Biorad)

 Polyarthrite rhumatoïde
Ac anti‐protéines citrullinées
ACPA ou APPC
anti‐CCP

FILAGRINE
FIBRINOGENE
VIMENTINE
VIMENTINE MUTEE Ac anti‐protéine carbamylée (anti‐CarP)
FIBRONECTINE
COLLAGENE I 45‐51% PR adultes
16‐20% PR adultes CCP‐
COLLAGENE II
α ENOLASE 16.7% AJI CarP +
PROTEINE EBV1 53% CCP + CarP +
MBP 58% CarP+ CCP ‐ : progression radiologique +sévère
BiP
7.5% sujets sains
 Nouveaux Autoanticorps et Maladies systémiques auto-immunes

Ac anti-ADNdb, Sm, SSA-60, U1RNP, Ku

LUPUS SYSTEMIQUE

Ac anti-t-RNA synthétases, SRP, Mi2, Ku

SYNDROME DE GOUGEROT-SJOGREN MAI systémiques MYOPATHIES AUTO-IMMUNES

Ac anti-SS-A (60 kDa) ±SS-B

SCLERODERMIES SYSTEMIQUES

Ac anti-centromères, Scl-70
fibrillarine, ARNpol3
 LES COMPARTIMENTS
Compartiments NUCLEAIRES
du noyau et antigènes cibles des Ac antinucléaires (ANA
Spector

PORE NUCLEAIRE

DOTS Sp100 NXP2

DOMAINE OPT Antigènes chromatiniens

ADNdb nucleosomes
DOMAINE DE
TRANSCRIPTION

MULTIPLE DOTS

Antigènes nucléaires solubles

Antigènes membranaires
Antigènes nucléaires
GP210 solubles
ENA
Extractable Nuclear Antigen
SS-A, SS-B, Sm,
U1 RNP, Scl 70

Antigènes nucléolaires HETEROCHROMATINE

biotech‐btk.wifeo.com et D’après

NUCLEOLE
Pr.R.L Humbel , LLIP, Luxembourg
Fibrillarine Dr J.Goetz, CHU Strasbourg
 ANA = antigènes nucléaires ET cytoplasmiques

615 protéines

271 protéines
136 protéines

ARNt-Synthétases
MDA

http://www.google.fr/imgres?imgurl=http%3A%2F%2Fwww.afblum.be%2Fbioafb%2Fintrcyto%2Fcellule2.JPG&imgrefurl=http%3A%2F%2Fwww.afblum.be%2Fbioafb%2Fintrcyto%2Fintrcyto.htm&h=307&w=393&tbnid=L23BoHoYwmBXtM%3A&zoom=1&docid=9dEPsNjn4XfC8M&ei=
81F5Vba7M8vbU8vogOgI&tbm=isch&iact=rc&uact=3&dur=416&page=1&start=0&ndsp=25&ved=0CEoQrQMwDmoVChMI9oD8laeHxgIVy‐0UCh1LNACN
 Recherche des anticorps antinucléaires : ANA
au laboratoire
DEPISTAGE: IMMUNOFLUORESCENCE INDIRECTE sur cellules HEp2/HeLa
B40: 11 €

HEp2

Fluorescence Fluorescence
Fluorescence Fluorescence
mouchetée cytoplasmique
homogène nucléolaire
 Autoimmunité et connectivites :
de nouvelles spécificités

•ANA ou anticorps associés •ANA non significatifs

utiles au diagnostic ou pronostic
Sclérodermies et Myopathies
 Nouveaux anticorps
Ac anti‐DFS70 (dense fine speckled, 70 kDa)
Lens epithelium derived growth factor p75 (LEDGF/p75)

Aspect de type « moucheté dense »

Marquage granulaire dense des noyaux en interphase
+ chromosomes condensés /Cellules en mitose

Identification en dot ou luminescence

= maladie non auto‐immune/ sujets sains >>> maladie auto‐immune

Étude GEAI en cours

ANA positifs en IFI: Prudence dans l’interprétation

 Fibrose Atteintes vasculaires Pathologies rares
Peau
Phénomène de raynaud 10/100.000 France
Poumon
Appareil Digestif Crise rénale 4/1 femme
Cœur 4ème décennie
HTAP
Facteurs de risque professionnels:

silice, résines, solvants

3 principaux phénotypes:
*Sclérodermie systémique sine scleroderma en
l’absence de sclérose cutanée
*Sclérodermie systémique cutanée limitée, si la
sclérose cutanée ne remonte pas au‐dessus des
coudes et des genoux
*Sclérodermie systémique cutanée diffuse, si la
sclérose cutanée remonte au‐dessus des coudes
et/ou des genoux

• Atteintes Systémiques diffuses

parfois rapidement évolutives
pulmonaire, rénale,

digestive, rhumatologique
 Nouveaux Autoanticorps et Maladies systémiques auto-immunes

Suspicion clinique d’une sclérodermie

• Capillaroscopie
• Radiographie des mains à la recherche des calcifications
• Examens œsophagiens et pulmonaires
• Recherche des autoanticorps antinucléaires (ANA)

•Autoanticorps anti-centromère
•Autoanticorps anti-Scl-70
•Autoanticorps anti-antigènes nucléolaires
• anti-fibrillarine
• anti-PM-Scl
•Autres autoanticorps:
• anti-ARN polymerase III
• anti-Th/To
 The American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism
criteria for the classification of systemic sclerosis 2013
Patients with a total score of >9 are classified as having definite systemic sclerosis

Item Weight/
Sub-item(s)
Scoret

Skin thickening of the fingers of both hands extending proximal 9

to the metacarpophalangeal joints (sufficient criterion)

2
Skin thickening of the fingers (only count the higher score) Puffy fingers

Sderodactyly of the fingers (distal to the 4

metacarpophalangeal joints but proximal to the
proximal interphalangeal joints)

Fingertip lesions (only count the higher score) Digital tip ulcers 2

Fingertip pitting scars 3

Telangiectasia - 2

Abnormal nailfold capillaries - 2

Pulmonary arterial hypertension and/or interstitial lung disease Pulmonary arterial hypertension 2

(maximum score is 2) Interstitial lung disease 2

Raynaud's phenomenon - 3

SSc-related autoantibodies (anti-centromere, anti-topoisomerase 1 Anti-centromere 3

[anti-Sd-70], anti-RNA polymerase III) (maximum score is 3) Anti-topoisomerase 1, Anti-RNA polymerase III

van den Hoogen F, et al. Ann Rheum Dis 2013;72:1747-1755

protocoles nationaux de diagnostic et de soins: Sclérodermie 2017

13
 DEPISTAGE des ANA par IFI sur cellules HEp2/HeLa
B40: 11 €

Mouchetée : Centromères Homogène + Nucléole : Scl‐70 Nucléole « clumpy »: fibrillarine

pas d’identification nécessaire fluorimétrie en

Wblot, dot, EliA
flux/luminex
ELISA, Dot, Wblot

Mouchetée + nucléole: PM/Scl Mouchetée: ARNP3 Nucléolaire: Th/To

ELISA, Dot, EliA ELISA,dot Dot

 Ac anti‐Fibrillarine Ac anti‐ARN Polymerase 3
U3‐RNP

Technique identification: si nucléole compatible

EliA ou Western Blot
! Dot: en 2017 1 dot performant + 1 dot non performant Technique identification: ELISA ou dot

SSc limitée: 2‐6%

SSc limitée : 10% SSc diffuse : 13‐23%
SSc diffuse : 5‐18% Spécificité: 98% (LS)
Spécificité: 95‐97% (LS, PR,Sharp,Sjögren)
Pronostic sévère >> anti‐Scl‐ 70
Pronostic sévère Crise rénale sclérodermique
PID/HTAP Cancers associés: 3‐ 11%
Calcinose/Lésions cutanées RR: 1,2 ‐2,1 (6,4) /population générale
Myosite Evolution de la SS depuis 5 à 13 ans
22‐40% Pulmonaire>
mammaire, gynécologique ,digestif
Cohortes de Lyon ( Dr C.Grange) + Paris (C Johanet)
Prévalence de 7 à 10%
Cohorte de Lyon (Dr A.Hot; J.C Lega ) : 228 patients
Prévalence myosite ++
Prévalence de 11.4%
Manifestations cutanées sévères
4 HTAP (1 décès) 2 Fibroses pulmonaires
Pas association SScd > SScl Crise rénale sclérodermique?
Pas association PID HTAP Cancer
Métanalyse Dr JC LEGA Clothilde Leroy, Publication en cours
 Autoanticorps anti‐PM/Scl
complexe macromoléculaire nucléolaire: 11 Protéines de 20 à 110 kDa
Principaux antigènes cibles de 75 kDa et 100 kDa Fonction exoribonucléase, dégradation de l’ARN dans le noyau

Marqueur de faible évolutivité

Sclérodermie systémique/myosite: 5‐55%
survie à 5 ans(2000) 92%
Sclérodermie systémique diffuse: 2‐3%
Atteinte cutanée limitée,
calcinose, ulcères digitaux
Polymyosites isolées: 7‐8%
PID: 38%, Mortalité/PID faible 0‐11%
Hypertension artérielle pulmonaire
Dermatomyosites isolées: 6‐11%
Cancers?
Dr JC LEGA, J Rheumatol. 2010;37
Spécificité 90‐98%
LES, S. Gougerot‐Sjögren

Identification : Dot/ELISA/Immunodiffusion
Uniquement si marquage nucléolaire
Association avec les Ac anti-SCl-70 (9-35%)
 Autres autoanticorps

Formes Formes
Anticorps Antigène cible limitées diffuses Aspect nucléolaire
Th/To
survie à 5 ans(2000) 65%
HTAP/ PID fréquente
crise rénale Protéines nucléolaires et cytoplasmiques 8‐ 19% 1‐11% homogène
Manif. intestinales 40 kDa ARN 7‐2 Th et 8‐2 To RNA

U11/U12 RNP
Raynaud, manif gastro‐intestinales,
fibrose pulmonaire sévère Protéines nucléaires: ribonucléopotéines
pronostic sévère ? 3.2%
ARN polymérase I Protéines nucléolaires
associés aux ARN pol III 4% moucheté fin
Protéines nucléolaires de 90 kDa associées
NOR‐90 à l'organisateur nucléolaire
sclérodermie, lupus, PR, Gougerot, Augmente l’activité transcriptionnelle de l’
CBP, hépatocarcinome, mélanome ARN polymérase I 2% ponctué
RuvBL1 et BL2 Protéines nucléaires de 50 kDa 1‐2%

THEX 1 Three prime histone mRNA EXOnucléase 1 62%?

Nucléolaire

Th/To NOR90

Identification: dot
 Myopathies ou myosites inflammatoires

Dermatomyosites/ »polymyosite »
Myopathies nécrosantes auto‐immunes
Syndromes de chevauchement : myosites
associées à PR, LES, Gougerot, …
Myosites à inclusions

Épidémiologie

‐ rare (6‐7/ 100 000)

‐ tout âge, 2 pics:

enfant de 5 à 15 ans (DM)

adulte 40 ans

‐ 2 femmes /1 homme
 Myopathies ou myosites inflammatoires: Clinique

Déficit moteur myogène:

Atteinte proximale++

Déficit bilatéral, symétrique et non sélectif

Myalgies 50%

Déficit distal et amyotrophie + tardifs

Atteinte du carrefour pharyngé dans 20‐30% : signe de gravité

Atteinte cutanée (DM)/ lésions vasculaires

Papules de Gottron (non spécifique), fissures pulpaires
Signe de la manucure (érythème douloureux de la
sertissure des ongles: spécifique) avec des mégacapillaires
Atteinte cutanée du syndrome des anti‐synthétases : les
mains de mécanicien
érythème liliacé des paupières

Vasculite ou thombose surtout dans les formes associées à une néoplasie ou à une autre
connectivite
 Myopathies ou myosites inflammatoires: Autres atteintes

Atteinte pulmonaire+++:
*15‐45%
*PID
*trouble ventilatoire restrictif

Atteinte cardiaque:
*5%
*troubles du rythme ou de la conduction

Atteinte rhumatologique
Raynaud, arthralgies inflammatoires
 Caractéristiques communes des myopathies/myosites inflammatoires

Mortalité 4 X +/ population générale

1ere année:
cancers, vasculaires, pulmonaires, maladies systémiques

Association aux cancers

• Démontrée dans de nombreuses cohortes
• Risque plus élevée dans les dermatomyosites
surtout dans les 5 années suivant le DG chez les sujets âgés de plus de 40 ans
• Association fréquente avec cancers pulmonaires, gynécologiques, digestif
Signes fonctionnels musculaires Élévation isolée des enzymes musculaires (CK)
Myalgie
Fatigabilité musculaire à l’effort
Faiblesse musculaire

Myopathie génétique ou acquise: toxique, infectieuse, endocrinienne ou auto-immune?

Myosite ou myopathie nécrosante

avec ou sans atteinte extramusculaire?
119th European Neuromuscular Centre (ENMC) International Workshop 2003, Hoogendijk et al. 2004; Troyanov Y and Targoff, 2005

• Dermatomyosite: DM + DM amyopathique+ DM Juvénile

• Myopathies nécrosantes à médiation immune
• Myosites de « chevauchement »: Myosite + signes extra‐musculaires et/ou anticorps

Electromyogramme
Imagerie
Histologie: biopsie musculaire
Recherche d’autoanticorps
 Autoanticorps spécifiques: Diagnostic et Pronostic
Atteinte pulmonaire
Marqueur de pronostic sévère
Myosites de
Cancers associés
« chevauchement »
Ac spécifiques
PL7
SRP 3-5%
PL12 EJ
13-54%
3-5%
U1-RNP
<1%

SYNDROME des PM-Scl Ac non spécifiques

MYOPATHIES ANTI‐SYNTHETASES OJ 7% LES/Sclérodermie
Jo-1 <1%
NECROSANTES 20%
Arthrite SS-A
Raynaud, PID
Mains de mécaniciens
HMGCR Zo
6-25% KS <1%
Ku
<1%
Ha
STATINES +/- <1%

Pneumopathie interstitielle diffuse DM paranéoplasique

MDA5 NXP2
7-30% 2-50% TF1γ
11-20%
Myosite
inclusion
FHL1 Mi-2 CALCINOSE
5% Cortactine

cN-1A NUP EIF3 KJ Fer Wa Mas

DERMATOMYOSITES SAE
Mup 44 2-10%
30%

Adapté D’après Betteridge et al. J Inter Med 2016 online

Lega et al. Eur Resp Rev 2015;24:216
 METHODE de DETECTION
Immunofluorescence indirecte (IFI) sur cellules HEp‐2
 METHODES d’identification

• Technique de dot
• Techniques immunoenzymatiques
*de type ELISA
*de type ALBIA (adressable laser bead immunoassay)

• Technique de radioimmunoprécipitation
•
•

Autoantibodies to a 140‐kd polypeptide, CADM‐140, in Japanese patients with clinically amyopathic dermatomyositis.
Sato S et coll.Arthritis Rheum 2005;52:1571‐6.
 Anticorps anti-CADM-140 / MDA- 5
C-ADM: clinically amyopathic dermatomyositis/ dermatomyosites amyopathiques
MDA-5 : melanoma differentiation-associated protein 5 /gène associé à la différenciation du mélanome
IFIH1 : IFN induced with helicase C domain protein 1

Localisation cytoplasmique

Réponse immunitaire innée antivirale:

reconnaissance ARN viraux
. apoptose / régulation croissance cellulaire
. via synthèse IFN: signature IFN type I des DM

The RIG‐I‐like receptor IFIH1/MDA‐5 is a

infection virale? dermatomyositis‐specific autoantigen identified by the

anti‐CADM‐140 antibody R. Nakashima et al,
Rheumatology, 2010
expression MDA5 +++ derme
/ IFNs type 1
•Dermatomyosite 13‐35%
Production d’autoanticorps
•Dermatomyosite amyopathique 53‐73%
•Dermatomyosite juvénile 7‐31%

*Risque +++ Pneumopathie interstitielle diffuse rapidement progressive et réfractaire (50%) / Adulte

*Lésions cutanées sévères: ulcérations et papules palmaires

* Ulcérations buccales
*Arthralgies, arthrites

*Association cancer? Quelques rares cas de cancer pulmonaire

 Anticorps anti‐MDA5
IFI sur HEp2 +

René-Louis Humbel, Luxembourg

méthode d’identification:
*Technique de dot
* Technique ELISA (Pascale Nicaise, Bichat, PARIS; technique commercialisée)

•Taux: marqueur d’activité et prédictif réponse thérapeutique

Clinical Utility of an Enzyme‐Linked Immunosorbent Assay for Detecting Anti‐Melanoma Differentiation‐Associated Gene 5 Autoantibodies. Sato et al,Plos One 2016;11
 Anticorps anti‐TIF1= Transcriptional Intermediary Factor 1
Localisation nucléaire
régulation transcription et prolifération cellulaire *maintien homéostasie tissulaire
*apoptose, régulation de p53 et carcinogénèse*Régulées / IFN
Expression +++ /cellules musculaires en régénération et certains cancers

•Dermatomyosite adulte 17‐30%

•Dermatomyosite amyopathique 32%
•Dermatomyosite juvénile (IgG4) 17‐40%
•Myosite de chevauchement 33%

*Atteintes musculaires sévères Cancer (adulte) : 42‐100%

RR: 5.5/pop.gle RR : 20/ autres myosites
* Manifestations cutanées sévères et étendues poumon > digestif > ovaire ou sein
Ulcérations et anomalies périunguéales: 88% 58‐71 % aAc + vs 9‐11% aAc ‐ (P < 0.001)
Sensibilité: 78% Spécificité: 89%
*Atteintes vasculaires LR+ : 6.8 LR‐ : 0.3
VPP: 58% VPN: 95%
*Arthrites

*Peu de PID Cancer associé /cohorte lyonnaise : 88%

poumon (32%)/sein (26%),ORL (16%)
Diag concomitant : 45%
Diag postérieur à la myosite : 30%, délai médian : 10 mois (1‐34)
3 décès (cancer)
Anticorps anti‐TIF1γ
IFI sur HEp2 : 100% +

Photo Pr René‐Louis Humbel

méthode d’identification:
Technique de dot
Technique ALBIA (Fabienne Jouen, Olivier Boyer, CHU Rouen)
 Anticorps anti-p140/MJ (NXP2)

Protéine nucléaire de 140 kDa différente des protéines CADM‐140 et TIF1!

Gène KIAA0136 / : MORC 3 de la famille MORC (microrchidia)
Localisation nucléaire: dans les corps PML (promyelocytic leukemia nuclear bodies) associés à la matrice nucléaire
Maintien structure des corps nucléaires, Phosphorylation adressage compartiment intracellulaire/localisation cellulaire
Substrat des protéines SUMO (small ubiquitin‐like modifier) « sumoylations » = modifications post‐traductionnelles de protéines /fonction ou stabilité

Dermatomyosite juvénile: 18‐50*%

Marqueur de sévérité
Calcinose : (54% NXP2 + vs 15% NXP2 ‐) cohortes
Ulcérations cutanées
Atteintes musculaires sévères avec amyotrophie et contracture
Vascularites digestives, tbes de la déglutition, dysphagie
Tansley et al. Rheumatology 2014, Bodoki et al. Autoimmunity Reviews 2014, Shah et al. Medicine 2013, Gunawardena et al. Arthritis Rheum. 2009, Espada et al. J Rheumatol. 2009
*Etude multicentrique Dr M. Guarella: 60 DJM Lyon/Marseille/Paris

Dermatomyosite de l’adulte: 2‐30%

Marqueur de sévérité
Atteintes musculaires
Atteinte pulmonaire?
Cancers associés: 22‐38% / suivi 3 ans
Ac anti‐NXP‐2 ou TIF‐1γ + identifient 83% des patients avec un cancer‐associé/DM
Ceribelli et al. Arthritis Research & Therapy 2012, 14:R97 et Fiorentino, et al,Arthritis & Rheumatism 2013 Volume 65, 2954–2962
 Anticorps anti‐NXP2
IFI sur HEp2 : 80% + 20% ‐

• méthode d’identification: Technique de dot

 Anticorps anti‐small ubiquitin‐like modifier (SUMO) activating enzyme (SAE)
Antigènes cibles 40 et 90 kDa, localisation nucléaire
2 hétérodimères SAE1 et SAE2
enzymes/mécanismes de sumoylations: liaison SUMO à une lysine de la protéine cible

Dermatomyosite : 2‐8%

Dermatomyosite amyopathique: 8‐10%

Dermatomyosite juvénile : 0.6%

Atteinte cutanée
évolution secondaire vers une atteinte musculaire +/‐ systémique
Peu de PID
Dysphagie
Quelques cas cancer pulmonaire
 Autoanticorps spécifiques: Diagnostic et Pronostic
Atteinte pulmonaire
Marqueur de pronostic sévère
Myosites de
Cancers associés
« chevauchement »
Ac spécifiques
PL7
SRP 3-5%
PL12 EJ
13-54%
3-5%
U1-RNP
<1%

SYNDROME des PM-Scl Ac non spécifiques

MYOPATHIES ANTI‐SYNTHETASES OJ 7% LES/Sclérodermie
Jo-1 <1%
NECROSANTES 20%
Arthrite SS-A
Raynaud, PID
Mains de mécaniciens
HMGCR Zo
6-25% KS <1%
Ku
<1%
Ha
STATINES +/- <1%

Pneumopathie interstitielle diffuse DM paranéoplasique

MDA5 NXP2
7-30% 2-50% TF1γ
11-20%
Myosite
inclusion FHL1 Mi-2 CALCINOSE
5% Cortactine

cN-1A NUP EIF3 KJ Fer Wa Mas DERMATOMYOSITES SAE

Mup 44 2-5%
30%

Adapté D’après Betteridge et al. J Inter Med 2016 online

Lega et al. Eur Resp Rev 2015;24:216
 Anticorps anti‐Signal Recognition Particle (SRP)
ARN7S+ 6 protéines (SRP9,14,19,54,68,72) : localisation cytoplasmique
passage des protéines synthétisées par les ribosomes à travers la membrane du RE
épitopes localisés au niveau de l'extrémité N‐terminale et du domaine central G de la sous‐unité SRP54

HEp2 Foie Estomac

Cytoplasmique Cytoplasme des hépatocytes Cytoplasme cellules principales
finement granulaire grosses inclusions irrégulières fluorescence homogène

Technique de dot
Technique ALBIA (F. Jouen, CHU Rouen)
Technique ELISA (non commercialisée)
Anti-signal recognition particle autoantibody ELISA validation and clinical associations.ggarwal R, et al.Rheumatology 2015;54:1194-9

Myopathie nécrosante à médiation immune: 5‐17%

Myopathie nécrosante à anticorps anti‐SRP
Rares cas de DM / DJM
Heterogeneous clinical spectrum of anti‐SRP myositis and importance of the methods of detection of anti‐SRP autoantibodies: a multicentric study.
Picard C, Vincent T, Lega JC, Hue S, Fortenfant F, Lakomy D, Humbel RL, Goetz J, Molinari N, Bardin N, Bertin D, Johanet C, Chretien P, Dubucquoi S, Streichenberger N,
Desplat‐Jégo S, Bossuyt X, Sibilia J, Abreu I, Chevailler A, Fabien N. Immunol Res. 2016;64:677‐86

MAI
LES et lupus‐Sharp
Sclérodermie
Diagnostic de 27 patients Wegener
IFI sur HEp2 non compatible avec des ac anti‐SRP dot+ Sd de Gougerot‐Sjögren

Non MAI
Élévation isolée des CPK
Myalgies diffuses
6 myosites 21 autres non myosites 2 sarcoidoses
IDM et péricardite récidivante
2 PID isolées
CPK: 2559 (207*‐8000) CPK: <140 (37‐780) Tétraparésie carentielle
dysplasie fibromusculaire
MDH
Papulose lymphomatoïde
embolie pulmonaire
éruption erythémato‐maculeuse
dysphagie « obsessionnelle »
maladie de Horton
SEP

Présence d’Ac anti-SRP et intérêt diagnostique

Dot positif

ET

Fluorescence cytoplasmique sur HEp2 compatible

 Signes cliniques: données de la littérature et cohorte étude du GEAI

• Myopathie : Forme subaiguë mais aussi chronique

• Déficit musculaire sévère

• CPK ++++: > autres myosites, > 5 000 UI/L voire > 25 000 UI/L

• Atteinte extra‐musculaire controversée : Fréquence différente en fonction des cohortes

Atteinte cardiaque
Manifestations pulmonaires (PID)

• Résistance aux corticoïdes

• Corticodépendance fréquente + association d’immunosuppresseur souvent nécessaire

• Pronostic sévère ?: variable selon les cohortes

Mortalité
Rechute
Perte de la marche
Pas de lien avec cancers

• Histologie typique
 Anticorps anti‐HMG‐CoAR
Découverte: myopathies persistantes après arrêt des statines

*Statines:
Inhibiteurs compétitifs de l’enzyme clef synthèse cholestérol:
3‐Hydroxy‐3‐Methylglutaryl‐Coenzyme A réductase (HMG‐CoA Réductase)

*Prévalence dans les myopathies nécrosantes 6‐25% 40‐60% statine / 60‐40% sans statine

*Spécificité > 99%

Mammen A.L et col. Arthritis Rheum 2011 ; Drouot L et al. Arthritis Res Ther 2014; Musset L, et al. J Immunol Res 2014

*Corrélation taux d’anti‐HMGCR / CPK +++ (7000 voire > 15000)

Werner J.L et al. Arthritis Rheum 2012; Allenbach Y et al. Medecine 2014

* Lien cancers ++ : tout type

Allenbach Y et al. Brain 2016;

Techniques d’identification
*Technique de dot
*Technique ELISA
*Technique ALBIA et ALBIA-NAM (HMGCR + SRP) (Fabienne Jouen, Olivier Boyer, CHU ROUEN )
*Technique de chimioluminescence
 Nouveaux Autoanticorps et Maladies systémiques auto-immunes: myosite à inclusion

• Patients > 50 ans, myopathie acquise la plus fréquente à cet âge

• Prédominance masculine : 2 ‐3:1
• prévalence pop.générale entre 1/1 000 000 et 1/14 000, x3/population > 50 ans.
• Formes sporadiques : les plus fréquentes
• très rares cas familiaux (myosite à inclusions familiale) /jumeaux, mode d'hérédité inconnu.
• 20‐33% des patients présentent une maladie auto‐immune ou neurologique systémique
concomitante, des infections chroniques virales (HIV, HTLV‐I, hépatite C)

Clinique
• Déficit et atrophie musculaire d’installation progressive
• Aréflexie
• Asymétrique, proximal et distal d’emblée
• Membres inférieurs : atteinte caractéristique précoce du tibial
antérieur (steppage) et quadriceps
• Membres supérieurs : fléchisseurs du poignet et des doigts,
palmaires, biceps et triceps
• Dysphagie avec risque de pneumopathie d’inhalation
• Diagnostic différentiel
– ‘ polymyosite ‘
– arthrite ou maladie du motoneurone aux stades précoces de la maladie
 Nouveaux Autoanticorps et Maladies systémiques auto-immunes: myosite à inclusion

Auto‐anticorps anti‐cN‐1A:
Biopsie musculaire

Protéine cible de 43‐44 kDa/patients avec IBM cN1A : 5’ nucléotidase aspect histologique spécifique/IBM

*Inclusions éosinophiles:
accumulation de protéines (défaut d’autophagie)
Enzyme cytosolique abondante dans les cellules musculaires squelettiques *Vacuoles « bordées »
Hydrolyse groupes phosphate en position 5’ des nucléotides= nucléosides *Dystrophie
régulation des réserves de désoxynucléotides formés /dégradation des acides nucléiques *Endomysium fibrotique
Métabolisme et Réparation de l’ADN

Technique ELISA

Prévalence IBM: 33‐73%

Spécificité: 74‐100%
PM: 95%
DM: 85%
Lupus: 80‐86%
G.Sjögren: 74‐77%
PR: 95%
Sclérodermie: 90%
Sujets sains: 95%
 Maladies inflammatoires chroniques du muscle squelettique
Physiopathologie?

*Origine mal identifiée mais rôle du système immunitaire ++

Présence d’infiltrats inflammatoires dans les tissus musculaires
Lymphocytes CD4+/CD8+ / + Lymphocytes B / Plasmocytes
Autoanticorps

* Cytotoxicité musculaire locale médiée par les lymphocytes T

*Surexpression musculaire des antigènes HLA I

* Susceptibilité génétique: et présentation antigénique CD4

HLA DR3/ HLA DRB1*0301, HLA DRB1*0701, HLA DQA1*0301, TNFa‐308A

* Facteurs environnementaux
UV
Streptocoques groupe A, echovirus, coxsackie,
Hormone de croissance, IFN

* Rôle direct des anticorps? Ou via cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC)
 Rôle pathogène des autoanticorps?

Expression +++ HMG‐CoAR dans les cellules musculaires en régénération (NCAM+)

Rôle d’HMG‐CoAR dans la différentiation/régération musculaire
Lésions initiales des cellules musculaires? Entrainant une surexpression d’HMG
Autoantibodies against 3‐hydroxy‐3‐methylglutaryl‐coenzymeA reductase in patients with statin‐associated autoimmune myopathy.Mammen A.L et
coll Arthritis Rheum2011

Rôle des anticorps démontré in vitro:

Atrophie des fibres musculaires (idem anti‐SRP)
Inhibition de la fusion des myoblastes: inhibitation de la régénération musculaire
Pathogenic role of anti‐SRP and HMGCR antibodies in necrotizing autoimmune myopathies. Arouche‐Delaperche et coll Ann Neurol 2017

Biopsies musculaires patients

NCAM FITC ac anti‐HMGCR positifs (ABC)
HMGCR PE ac anti‐HMGCR négatifs (DEF)

Expression +++ Jo1 et Mi2 /cellules musculaires en régénération :

expression à la surface des cellules?
Rôle non démontré
*Enhanced autoantigen expression in regenerating muscle cells in idiopathic inflammatory myopathy. Casciola‐Rosen L et coll, J Exp Med 2005; 21591‐601
 Hypothèse production d’autoanticorps et lien avec les cancers

Surexpression des Ag cibles (JO1, Mi2, TIF1, HMGCR…) dans les muscles et/ou cellules tumorales

Rôle de certaines de ces protéines TIF1, SAE, NXP2 :

‐régulation de la transcription (co‐répresseur) et régulation de la prolifération cellulaire
‐apoptose et carcinogénèse

Expression +++ Jo1 et Mi2 : cellules musculaires en régénération et cellules tumorales (cancer sein poumon)
*Enhanced autoantigen expression in regenerating muscle cells in idiopathic inflammatory myopathy. Casciola‐Rosen L et coll, J Exp Med 2005

Expression +++ TIF1: cellules musculaires en régénération/peau et cellules tumorales des patients avec ac anti‐TIF
et cancer

Mutation des gènes dans les cellules cancéreuses

codant pour

TIF :
Tumour TIF1 mutations and loss of heterozygosity related to cancer‐associated myositis: Pinal‐fernandez et al. Rheumatology; 2017

ARN polymérase 3 :
Association of the autoimmune scleroderma with an immunologic response to cancer: Joseph et al, Science 2014Association of the
autoimmune disease scleroderma with an immunologic response to cancer.
 Hypothèse production d’autoanticorps et lien avec les cancers

1. Cellules néoplasiques : mutation des gènes codant / « auto »‐antigènes

ARN Polymérase III/ TIF.

2.Expression par la tumeur des protéines « mutées »

Liaison +++ molécules HLA I
Réaction cellulaire T CD4+ (LT CD8+)
Elimination des cellules cancéreuses
Libération massive de protéines « mutées » autoantigènes
3.Réaction humorale (LB)/ production d’ac anti‐ARN Polymérase III/ TIF

Phénomène d’auto‐immunité induit par un auto‐antigène tumoral

génétiquement modifié

Réponse anti‐tumorale contre les « auto »antigènes tumoraux

Rôle d’élimination de la tumeur
Manifestation auto‐immune…: Sclérodermie /Myosite
Conclusion: Intérêts diagnostique et pronostique des « nouveaux autoanticorps »

• Ac anti‐fibrillarine : Manifestations pulmonaires, cutanées sévères, Myosite

• Ac anti‐ARN polymerase III: Cancer associé / crise rénale

• Ac anti‐PM‐Scl: bon pronostic

• Ac anti‐MDA5 : Manifestation pulmonaire

• Ac anti‐TIF1γ / NXP2 : Cancer associé / Atteintes musculaires DJM

• Ac anti‐HMGCR: Cancer associé

• Ac anti‐SRP: Corticodépendance fréquente + association d’immunosuppresseur

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Lorna, Annick, Florence, Geneviève, Gilles, Marie‐Agnès
Huffington.post
Sophie, Sophie , Christine, Anne‐Marie