Compte rendu

TP 2 : Observation des cellules végétales et animales sous

microscope optique

Niveau scolaire : Unité : Chapitre : Activité :

1ère année Les relations entre les êtres vivants Observation d’un milieu La cellule : Unité
secondaire collégial. et leur interaction avec le milieu de naturel. structurale de l'être vivant.
vie.

Objectif de TP :
- Objectifs de connaissances :
 Déterminer et savoir reconnaître les attributs structuraux des différentes cellules ;
 Savoir reconnaître les différents types de cellules ;
 Différencier entre une cellule végétale et une cellule animale ;
- Objectifs méthodologiques, techniques :
 Savoir utiliser et se familiariser avec le microscope ;
 Savoir réaliser une préparation microscopique et l’observer ;
- Objectifs de savoir-être :
 Respecter les consignes d’utilisation du matériel ;
 Ranger son matériel et sa paillasse avant de partir.

Compétence visée :
Au niveau microscopique, les organismes vivants sont constitués de cellules ; et que les cellules animales et
végétales présentent une unité de structure.

Matériels utilisés :
Matériel demandé Risques Mesures de prévention
1- Microscope optique.  Appareil défectueux. L’élève vérifie l’état du microscope
 Accident (piqûre, blessure, ...). (oculaires, objectifs, câble
 Accidents électriques par contact électrique, valets, interrupteur, vis
direct et indirect. macrométriques et
micrométriques).
2- Lames et lamelles en verre. Coupures, blessures par des éclats de La manipulation est réalisée avec
verre. précaution (en suivant les consignes
du protocole).
3- Scalpel ou lame de rasoir et Outil tranchant, provoque des blessures
pince fine. par ses bords minces.

4- Papier absorbant ou kleenex. - -

5- Eau distillée. - -
6- Bulbe d’oignon rouge. - -
7- Eau iodée (Lugol). Solution allergique.  Les élèves sont informés de la
présence d’iode.
8- Eosine ou rouge neutre.  Les fiches de données de sécurité
9- Bleu de bromothymol (BBT). Effets aigus, irritation possible (peau, sont disponibles.
yeux, voies respiratoires).

Module : Biologie
Activité 1 : Observation des cellules végétales (Ex. Cellules de l’épiderme d’oignon rouge).
Protocole expérimental :
a) Sans coloration :
 A l’aide d’une lame de rasoir ou d’un scalpel, réalisez quatre entailles en carré de manière à dessiner un carré
d’environ 0,5 cm de côté ;
 A l’aide d’une pince fine, prélevez l’épiderme rouge de l’oignon à l’intérieur de ce carré ;
 Mettez une goutte d’eau sur une lame de verre (1) et placez-y le carré d’épiderme (2),
 Disposez une lamelle contre la préparation, de manière oblique, puis posez-la délicatement sur la lame pour chasser
d’éventuelles bulles d’air (3).
 Épongez l’excédent d’eau si nécessaire à l’aide de papier absorbant.
 Placez la préparation sous le microscope à la platine et observer, à différents grossissements tout en allant de faible à
fort grossissement (procéder le protocole d’utilisation du microscope optique).

b) Avec coloration (Bleu de bromothymol, eau iodée et l’éosine) :

 Procédez de même façon le protocole ci-dessus en subissant l’étape suivante ;
 Mettez une goutte du colorant (BBT, Lugol ou eau iodée) sur une lame de verre (1) et placez-y le carré d’épiderme
(2),
 Déposez une lamelle contre la préparation, de manière oblique, puis posez-la délicatement sur la lame pour chasser
d’éventuelles bulles d’air (3).
 Rincez la préparation sous le robinet prudemment de façon d’éliminer l’excès du colorant et épongez après si
nécessaire à l’aide de papier absorbant (4).
 Placez la préparation sous le microscope à la platine et observer, à différents grossissements tout en allant de faible à
fort grossissement (procéder le protocole d’utilisation
du microscope optique).

Coloration Déposer
Une goutte d’eau ou Epiderme d’oignon
colorant

Lame
Lamelle

Couvrir
Rincer

Préparation est prête à observer

C
N V

Résultat :

Module : Biologie
 Exploitation :

Membrane + Paroi

Cytoplasme

Noyaux

Figure 1 : Schéma d'interprétation de cellules d'épiderme d'oignon rouge observées au microscope

optique

 Le fragment de l’épiderme est formé d’un ensemble de cellules de forme géométrique.

 Chaque cellule est entourée d’une membrane cellulosique doublée d’une membrane cytoplasmique.
 On distingue à l’intérieur le cytoplasme hétérogène (les inclusions plus visibles à l’eau iodée, on remarque des
inclusions huileuses réfringentes) et un noyau contenu dans le cytoplasme (le noyau est lui-même hétérogène
contenant un ou plusieurs nucléoles réfringents). Dans le cytoplasme, on observe une zone homogène colorée en
éosine, c’est la vacuole.
 La vacuole occupe toute la cellule, elle présente un aspect homogène.
 Le cytoplasme fondamental est périphérique et pressé entre la vacuole et la membrane pecto-cellulosique qui
oppose une résistance qui empêche l’éclatement de la vacuole.

- Coloration à Lugol (Coloration post-vitale) :

L’eau iodée tue la cellule en provoquant la coagulation du cytoplasme, la paroi et du noyau tout en dénaturant
des protéines (c’est un fixateur) et en teintant en jaune certains éléments. On voit la membrane, paroi cellulosique,
cytoplasme et noyau.
- Coloration à l’éosine (Coloration vitale) :
L’éosine est utilisée comme un colorant vital, il pénètre dans la cellule sans la tuer, cette coloration est
conseillée pour visualiser le système vacuolaire des cellules végétales mais son emploi permet également de bien
repérer le cytoplasme, la paroi et le noyau.

Activité 2 : Observation des cellules animales (Ex. Cellules de l’épithélium buccal).

Protocole expérimental : suivre le même mode opératoire que celui décrit ci-dessus.
Avant de commencer à prendre les cellules de l’épithélium buccales, il est obligatoirement de laver les mains avec le
savon afin d’éviter toute sorte de contamination ;
 Racler doucement la face interne de la joue à l’aide du bout de doigt sans fla frotter (1) ;
 Délayer le doigt sur la surface de la lame ;
 Mettre une goutte du colorant (BBT ou éosine) sur la préparation ;
 Recouvrir délicatement la préparation d’une lamelle ;
 Rincer si nécessaire et éponger après avec le papier absorbant ;
 Observer sous le microscope ;
 Rassembler, en fin d’observation, lames et lamelles pour être nettoyées

Module : Biologie
 Rincer Couvrir

Préparation est prête à observer

Observer Cellules d’épithélium buccales Cellules d’épithélium buccales Cellules d’épithélium buccales
Résultat : colorées au BBT observées x40 colorées au BBT observées x4 colorées par éosine observées x10

* NB : Pour la coloration en éosine, l’utilisation de ce composé dans le laboratoire est considérée comme un colorant qui remplace le rouge neutre.

Exploitation :
Les cellules de la cavité buccale récupérées, forment des éléments groupés, superposés, parfois isolés. Ce sont
des cellules épithéliales qui tapissent la cavité buccale et forment une muqueuse. A la surface de ces cellules on peut
observer des bactéries et/ou des bacilles en forme de bâtonnet et des coques de forme ronde.

Membrane plasmique
Cytoplasme

Noyau

Figure 2 : Schéma d'interprétation de cellules d'épithélium buccal observées au microscope optique

Voici un schéma tout simple qui montre les trois structures de base de la cellule animale : la membrane qui est
sa limite, son contenu liquide, le cytoplasme et le noyau avec l'information génétique. On notera, comme dans toute
cellule animale, l'absence de toute paroi, contrairement aux cellules végétales.
A ces grossissements on distingue de petites inclusions granuleuses à l’intérieur du cytoplasme ; elles
correspondent aux divers organites cellulaires, ils sont observables que par le microscope électronique.

Module : Biologie
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Module : Biologie