STERILISASI

MAKALAH
Untuk memenuhi tugas matakuliah
Manajemen Patient Safety
Yang dibina oleh Ibu Ns. Nurul Hidayah, S.Kep. M.Kep.

Oleh:

1. Putri Nayla Z (P17220191003)

2. Anggun Rury P (P17220191006)
3. Nina Fitria Arima S (P17220191011)
4. Nadilah Nur Y (P17220191018)
5. Dinda Meifani (P17220191019)

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES MALANG

JURUSAN KEPERAWATAN
D-III KEPERAWATAN LAWANG
Januari 2020
 KATA PENGANTAR

Puji syukur Alhamdulillah atas karunia tuhan yang Maha Esa yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat meyelesaikan makalah
ini yang berjudul “Sterilisasi” yang ditujukan untuk memenuhi tugas matakuliah
Manajemen Patient Safety.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada semua pihak yang terlibat dalam
pembuatan makalah ini. Namun tidak lepas dari itu semua, penulis menyadari bahwa
makalah ini masih jauh dari kata sempurna. Penulis mengharapkan kritikan dan saran
untuk penyempurnaan makalah ini.
Penulis sangat berharap semoga makalah yang sederhana ini dapat
memberikan manfaat bagi para pembacanya.

Lawang, 24 Januari 2020

Penulis

i
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................. i

DAFTAR ISI ............................................................................................................ ii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang..................................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................................................... 1
1.3 Tujuan .................................................................................................................. 1
BAB II PEMBAHASAN
2.1 Pengertian dari sterilisasi ..................................................................................... 2
2.2 Klasifikasi dan penggolongan sterilisasi ............................................................. 2
2.3 Penggunaan sterilisasi ......................................................................................... 11
2.4 Syarat syarat tindakan aseptis .............................................................................. 11
2.5 Cara dan metode sterilasas .................................................................................. 16
BAB III PENUTUP
3.1 Kesimpulan .......................................................................................................... 20
3.2 Saran .................................................................................................................... 20
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 21

ii
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tahapan penting yang mutlak harus dilakukan selama bekerja di ruang praktikum
mikrobiologi adalah prinsip sterilisasi. Bahan atau peralatan yang digunakan harus
dalam keadaan steril. Steril artinya tidak didapatkan mikroba yang tidak diharapkan
kehadirannya, baik yang menganggu kehidupan dan proses yang sedang dikerjakan.
Setiap proses baik fisika, kimia dan mekanik yang membunuh semua bentuk
kehidupan terutama mikrooranisme disebut dengan sterilisasi. Adanya pertumbuhan
mikroorganisme menunjukkan bahwa pertumbuhan bakteri masih berlangsung dan
tidak sempurnanya proses sterilisasi. Jika sterilisasi berlangsung sempurna, maka
spora bakteri yang merupakan bentuk paling resisten dari kehidupan mikroba, akan
diluluhkan (Cappuccino, 1983)
Pembiakan mikroba dalam laboratorium memerlukan medium yang berisi zat hara
serta lingkungan pertumbuhan yang sesuai dengan mikroorganisme. Zat hara
digunakan oleh mikroorganisme untuk pertumbuhan, sintesis sel, keperluan energi
dalam metabolisme, dan pergerakan. Lazimnya, medium biakan berisi air, sumber
energi, zat hara sebagai sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfat, oksigen, hidrogen,
serta unsur-unsur lainnya. Dalam bahan dasar medium dapat pula ditambahkan faktor
pertumbuhan berupa asam amino, vitamin, atau nukleotida (Lim, 1998).

1.2 Rumusan Masalah

1. Apakah pengertian dari sterilisasi?
2. Apa saja klasifikasi dan penggolongan sterilisasi?
3. Bagaimana penggunaan sterilisasi?
4. Bagaimana syarat tindakan aseptis?
5. Bagaimana cara dan metode sterilisasi?
1.3 Tujuan
1. Untuk mengetahui pengertian dari sterilisasi.
2. Untuk mengetahui klasifikasi dan penggolongan sterilisasi.
3. Untuk mengetahui penggunaan sterilisasi.
4. Untuk mengetahui syarat tindakan aseptis.
5. Untuk mengetahui cara dan metode sterilasasi.

1
 BAB II
PEMBAHASAN
2.1 Pengertian Sterilisasi
Sterilisasi adalah proses penghilangan semua jenis organisme hidup, dalam
hal ini adalah mikroorganisme (protozoa, fungi, bakteri, mycoplasma, virus) yang
terdapat dalam suatu benda. Prosesini melibatkan aplikasi biocidal agent atau proses
fisik dengan tujuan untuk membunuh atau menghilangkan mikroorganisme.
Sterilisasi di desain untuk membunuh atau menghilangkan mikroorganisme. Target
suatumetode inaktivasi tergantung dari metode dan tipe mikroorganisme yaitu
tergantung dari asam nukleat, protein atau membran mikroorganisme tersebut. Agen
kimia untuk sterilisasi disebut sterilant (Pratiwi, 2006).
Sterilisasi merupakan setiap proses (kimia maupun fisika) yang membunuh
semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme (Anonim, 1994). Sterilisasi
adalah suatu proses penghancuran atau penghilangan semua bentuk kehidupan
mikroorganisme dan sporanya (Lawrence and May, 2003). Sterilisasi adalah proses
penghilangan seluruh mikroorganisme dari alat kesehatan termasuk endospora bakteri
(Nursalam, dan Kurniawati, 2007).

2.2 Klasifikasi dan Penggolongan Sterilisasi

Berikut adalah penjabaran klasifikasi sterilisasi yang umum dipakai di
laboratorium.:
1. Pemanasan
Dampak pemanasan terhadap kematian mikroorganisme sangat tergantung
kepada suhu dan lama waktu sterilisasi. Panas menyebabkan enzim-enzim berhenti
bekerja dan sel dapat kekurangan air. Menurut Barrow dan Feltham (1993:12-13)
endospora bakteri lebih tahan panas daripada sel vegetatif, tetapi semua bentuk
endospora tidak memiliki ketahanan yang sama persis terhadap panas. Misalnya
endospora B.subtilis dapat dimatikan dengan pemanasan 100°C dalam waktu pendek,
sedangkan endospora B.stearothermophilus dapat bertahan dalam air mendidih
berjam-jam.
a) Dengan api langsung
Pemijaran dapat langsung membunuh mikroorganisme (termasuk endospora)
yang disterilkan dengan cara membakar mikroorganisme sehingga cara ini adalah
cara paling cepat. Namun kekurangannya adalah sangat terbatasnya cakupan alat
yang disterilisasi menggunakan pemijaran dan ketidakpraktisan dalam mensterilisasi
alat berukuran besar. Alat yang dipakai untuk sterilisasi dengan api yaitu:

2
1.) Bunsen burner, loop incinerator dan pembakar spirtus
Bunsen burner dan pembakar spirtus digunakan untuk sterilisasi alat inokulasi
dengan pembakaran seperti sterilisasi jarum inokulum atau spreader. Untuk
memastikan kesterilannya jarum inokulum dibakar sampai membara dan spreader
dapat dicelupkan alkohol lalu dibakar. Bunsen burner berbahan bakar gas yang
disalurkan melalui pipa sedangkan pembakar spirtus berbahan bakar spirtus
(methanol). Namun pembakar spirtus lebih mudah ditemukan di banyak laboratorium
karena efisien dan portable. Tersedia juga alat loop incinerator / electric bunsen
burner / electric incinerator untuk membakar jarum inokulum. Ujung jarum
inokulum dapat dimasukkan ke dalam tabung keramik panas (815oC) selama 6 detik
untuk mensterilisasinya.
Pembakar spirtus dapat menciptakan sirkulasi udara dari bawah ke atas
melewati api karena proses pembakaran. Seringkali hal ini dianggap mampu
menciptakan lingkungan udara yang aseptis disekitar pembakar spirtus, tetapi jika
memang load kontaminasi besar dan banyak gangguan aliran udara maka hal ini juga
tidak sepenuhnya benar. Oleh karena itu sebaiknya tetap menggunakan LAF jika
menginginkan kerja pada udara yang steril.Bunsen burner dapat menimbulkan api dan
aliran udara yang besar. Penggunaan pembakar spirtus atau bunsen burner tidak
disarankan dalam protective cabinet. Namun jika terpaksa diperlukan maka api diatur
menjadi kecil sehingga tidak mengganggu aliran udara (ISO7128 2007:8).
2.) Gas torch
Gas torch atau pembakar api portabel berbahan bakar gas sangat berguna saat
dilakukan pengambilan sampel diluar laboratorium. Fungsinya adalah untuk
mensterilisasi sample point yang dapat berupa kran, pipa atau yang lainnya sebelum
pengambilan sampel dilakukan. Selain itu dapat digunakan untuk sterilsasi dengan
api pada berbagai alat karena gas torch lebih nyaman digenggam dibandingkan
pembakar bunsen atau pembakar spirtus.
 Panas kering
Mikroorganisme akan mengalami kekeringan jika dipaparkan pada suhu tinggi
dan akibatnya sel akan lisis dan mati. Kekurangan sterilisasi panas kering yaitu masih
bertahannya endospora bakteri. Alat yang dipakai untuk sterilisasi panas kering yaitu:

1. Oven
Oven adalah suatu wadah yang mampu menjaga suhu pada 160-170°C.
Umumnya alat-alat yang disterilisasi dengan oven adalah alat gelas seperti cawan
atau pipet ukur dan bukan untuk alat plastik atau karet. Sterilisasi dapat dilakukan
pada suhu 170oC selama 1 jam. Waktu sterilisasi dihitung setelah oven mencapai
suhu yang diinginkan. Oven yang baik memiliki termostat dan termometer atau alat
perekam temperatur, dan juga dilengkapi indikator waktu dan pemprograman waktu.

3
Setelah disterilisasi peralatan gelas sebaiknya didinginkan pada oven untuk mencegah
keretakan karena penurunan suhu mendadak. Untuk pengecekan kinerja oven
(verifikasi) dapat dilakukan dengan pengujian kehomogenan temperatur di seluruh
sudut oven pada pemakaian pertama atau setelah adanya perbaikan.
Verifikasi ini dilakukan dengan termometer terkalibrasi (ISO7128 2007:17-
18). Berbeda sedikit dengan peraturan ISO, Collins et al. (2004:46) menyatakan
bahwa sterilisasi panas kering dilakukan pada suhu 160oC selama 2 jam atau 180oC
selama 30 menit dengan waktu pemanasan (heating-up) selama 1 jam dan waktu
penurunan suhu (cooling down) selama 2 jam. Oven dan inkubator memiliki
perbedaan mendasar yaitu oven dilengkapi dengan lubang pengeluaran uap air dan
umumnya tidak memiliki tutup kaca.
Oleh karena itu penggunaan oven sebagai inkubator (walaupun oven dapat
menjaga suhu yang diinginkan) akan mempercepat kehilangan air pada media.
Peletakan alat-alat pada oven sebaiknya memperhatikan distribusi panas yang
dihasilkan elemen. Disarankan untuk menghindari loading yang terlalu banyak dan
penempatan tanpa jeda sehingga mampu mengurangi penetrasi panas. Semua alat
sebaiknya dibungkus dengan bahan yang tidak mudah meleleh terkena panas seperti
kertas sampul (kraft paper) bukan dengan plastik.

2. Microwave oven
Microwave oven adalah alat yang mampu memanaskan dengan gelombang mikro
pada tekanan atmosfer. Penggunaan alat ini selain untuk sterilisasi peralatan gelas
dapat juga untuk memanaskan bahan cair atau mencairkan agar. Distribusi gelombang
mikro sebaiknya harus homogen untuk mencegah adanya area overheating.
Pemanasan dengan waktu lebih lama dengan pengaturan power rating yang rendah
atau alat yang dilengkapi pemutar otomatis akan menghasilkan distribusi panas yang
lebih baik.
Jangan menggunakan peralatan metal (termasuk tutup yang terbuat dari besi),
jika terdapat bahan ini maka dilepaskan terlebih dahulu sebelum disterilisasi. Media
yang mengandung bahan tidak tahan panas sebaiknya jangan dipanaskan
menggunakan alat ini kecuali jika telah terverifikasi dan terbukti dengan baik.
Sebaiknya microwave oven tidak untuk sterilisasi media, sterilisasi media tetap
menggunakan autoklaf. Stelah pemanasan menggunakan alat ini disarankan juga
untuk didiamkan selama 5 menit sebelum dikeluarkan (ISO7128 2007:17-18)

3. Uap air panas

Cara uap air panas membunuh mikroorganisme adalah bukan dengan
mengeringkannya tetapi dengan menonaktifkan enzim-enzimnya sehingga

4
metabolisme berhenti bekerja. alat-alat yang menggunakan cara ini untuk sterilisasi
antara lain:
 Steamers dan boiling water baths
Steamers dan boiling water baths adalah semua alat yang terdiri dari suatu
wadah untuk menampung air yang memiliki elemen pemanas dan bertutup
(closefitting lid). Uap air yang dihasilkan alat ini berada pada tekanan atmosfer.
Boiling waterbath mampu memanaskan air sampai atau hamper mendekati titik didih
dengan atau tanpa menghasilkan uap air. Penggunaan umum alat ini adalah untuk
mencairkan media agar atau membuat media tidak tahan panas dan tekanan. Hal yang
perlu dipastikan saat pengoperasiannya adalah penjagaan batas air minimal sesuai
manual sehingga menutupi elemen pemanas (ISO7128 2007:16). Menurut ISO
11133-1 (2009:8) pencairan kembali media agar steril dapat dilakukan pada
waterbath suhu 47-50 °C.
Media di angkat segera setelah semuanya mencair dan digunakan tidak
melebihi waktu simpan 4 jam. Steaming (tyndallization) yang dikembangkan oleh
John Tyndall adalah istilah untuk cara sterilisasi dengan uap air panas yang dapat
mencapai suhu 100°C pada wadah tanpa tekanan. Sterilisasi menggunakan uap air
panas dapat dilakukan sekali atau tiga kali (tahap) dengan hari yang berlainan dengan
memanaskannya pada 80 °C selama satu jam (Barrow dan Feltham 1993:14).
Sedangkan menurut Hogg (2005:341) tindalisasi dilakukan pada suhu 90-100 °C
selama 30 menit secara bertahap 3 kali. Selama jeda tahapan media diinkubasi pada
37°C semalam. Pemanasan tiga tahap dimaksudkan untuk memberi kesempatan
endospora untuk berkecambah sehingga akan mati pada tahap pemanasan
selanjutnya.
Pasteurisasi adalah proses yang hampir sama namun lebih tepat digunakan untuk
susu dan produk susu. Pasteurisasi tidak membunuh semua mikroba yang terdapat
pada susu namun menguranginya sehingga akan lebih tahan lama
disimpan. Bakteri thermoduric memiliki kemungkinan bertahan hidup lebih besar
saat pasteurisasi. Pasteurisasi terdapat dua cara yaitu metode lama (yang
dikembangkan oleh Louis Pasteur), dengan memanaskan susu pada 63 C selama 30
menit atau dengan flash pasteurisasi (HTST-High Temperature Short-Term) yaitu
pemanasan cepat pada 72oC selama 15 detik kemudian didinginkan dengan cepat
(Prescot et al. 2002:142). Berikut merupakan tabel perkiraan ketahanan
mikroorganisme terhadap sterilisasi dengan uap air panas:

5
 Organisme Sel vegetatif Spora

Ragi 5 menit pada 50-60 oC 5 menit pada 70-80 oC

Kapang 30 menit pada 62 oC 3 menit pada 80 oC

Bakteri (mesofilik) 10 menit pada 60-70 oC 2 - >800 menit pada 100 oC

Virus 30 menit pada 60 oC 0,5-12 menit pada 121 oC

(Prescott et al.
2002:140)

4. Uap air panas bertekanan

Uap air panas bertekanan lebih efisien dan penetratif dalam membunuh
mikroorganisme. Tekanan yang paling efisien yaitu 103 kpa (15 psi) selama 15 menit
yang dapat dilakukan oleh autoklaf.
 Autoklaf (Autoclave)
Menurut Morello et al. (2003:81) tekanan yang digunakan untuk sterilisasi
pada umumnya 15 Psi atau sekitar 1 atm dan dengan suhu 121oC (250oF). Jadi
tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi2 (15 Psi =
15 pounds per square inch). Lama sterilisasi yang dilakukan adalah 15 menit pada
suhu 121oC. Dengan syarat suhu, tekanan dan waktu tersebut maka segala bentuk
mikroorganisme dapat dimatikan. Autoklaf menggunakan uap air murni (lebih ringan
dan lebih panas dari udara) untuk sterilisasi sehingga udara yang terdapat dalam
wadah harus dikeluarkan.
Cara menggunakan Autoklaf:
a. Isi air dalam autoklaf kurang lebih 2 cm dibawah keranjang atau 3-5 liter air.
b. Pastikan alat yang akan disterilkan dapat terkena uap dalam autoklaf.
c. Tutup rapat autoklaf dan atur lama waktunya, sekitar 20 menit dan tekanan 1
atm.
d. Pastikan tabung exhaust terbuka sedangkan tabung drainnya tertutup.
e. Setelah uapnya keluar atau terdengar bunyi mendesis, segera tutup tabung
exhaustnya.
f. Saat alarm berbunyi yang menandakan bahwa sterilisasi telah selesai, jangan
langsung membuka tutup autoklaf, tetapi tunggu hingga jarum tekanan
menunjukkan angka 0.
Hal yang sering keliru adalah dengan menutup semua katup rapat-rapat sebelum
udara dalam wadah digantikan oleh uap air.Adanya udara dalam wadah saat sterilisasi

6
dapat mengakibatkan kurang efisiennya sterilisasi. Autoklaf hanya dapat mencapai
suhu maksimal pada kondisi uap air murni. Grafik berikut menggambarkan
penurunan suhu jika terdapat campuran udara pada wadah autoklaf saat sterilisasi.
(Hardy, S.P. 2002 Human Microbiology, Taylor and Francis dalam Hogg, 2005:341).
Autoklaf sebaiknya dilengkapi dengan:
1. Paling tidak memiliki satu katup pengaman
2. Alat pengatur yang mampu menjaga suhu dengan kisaran ± 3 °C dari
temperatur yang diinginkan.
3. Probe suhu.
4. Alat pencatat waktu dan suhu dan
5. Saluran pembuang
Sebagian besar media sangat terpengaruh oleh pemanasan yang berlebihan,
tetapi sterilisasi menggunakan autoklaf adalah cara yang paling memuaskan untuk
sterilisasi media atau bahan yang tahan panas lebih dari 100oC. Kombinasi waktu
dan tekanan untuk sterilisasi media umumnya menggunakan suhu 115 °C (0.69
kg/cm2) selama 20 menit atau 121 °C (1.06 kg/cm2) selama 15 menit. Penetrasi suhu
dan tekanan akan semakin menurun pada volume yang besar. Oleh karena itu jika
mensterilisasi cairan melebihi 1L disarankan untuk melebihkan waktu sterilisasi.
Wadah seperti tabung, erlenmeyer, botol sebaiknya diberi ruang kosong (head space)
antara mulut wadah dengan batas cairan. Setelah selesai sterilisasi sebaiknya alat dan
bahan dibiarkan dingin sampai 80oC di dalam autoklaf sebelum diangkat (Barrow
dan Feltham, 1993:14).
Autoklaf juga digunakan untuk dekontaminasi. Dekontaminasi adalah
sterilisasi terhadap semua biakan hasil analisa atau yang telah tumbuh pada media.
ISO7128 (2007:29) menyatakan bahwa untuk tujuan ini proses sterilisasi
diperpanjang waktunya menjadi minimal 30 menit pada 121°C. Sedangkan menurut
Barrow dan Feltham (1993:13) dekontaminasi dapat dilakukan selama 20 menit pada
121 °C (1.06 kgf/cm2) atau 10 menit pada 126 °C (1.41 kgf/cm2).Lebih baik
dekontaminasi menggunakan autoklaf yang berlainan dengan yang digunakan untuk
sterilisasi. Sebaiknya proses penataan dan penyusunan tidak overpacking dan semua
tutup harus dilonggarkan. Setiap selesai dekontaminasi autoklaf harus dibersihkan
dari sisa media dan bahan lain secara menyeluruh.
Collins et al. (2004:46-48) berpendapat bahwa secara umum terdapat dua
jenis autoklaf yaitu :
 Pressure cooker autoclave
Alat ini memiliki wadah dan tutup (terbuat dari metal yang dapat disatukan
dan dikunci dengan perantara bahan karet), katup pengeluaran udara/uap air,
pengukur tekanan, elemen pemanas (atau api) pada bagian bawah dan katup
pengaman. Perbedaan mendasar antara alat ini dengan autoklaf modern adalah tidak

7
adanya pengatur otomatis sehingga perhitungan waktu sterilisasi atau pengeluaran
udara dilakukan secara manual. Katup pengaman secara permanen diatur pada
tekanan yang diinginkan sehingga jika tekanan melebihi target, maka akan dibuang
melewati katup ini.
 Gravity displacement autoclave
Autoklaf ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan tekanan otomatis dan
seluruh proses sterilisasi telah diprogram. Jaket yang terdapat melingkupi seluruh
wadah dapat diisi uap air untuk menjaga dan mendistribusikan panas ke semua
permukaan wadah. Uap air memasuki jaket dari pipa suplai uap bertekanan tinggi.
Tekanan uap air ini kemudian dikurangi kedalam kisaran tekanan yang diinginkan.
Setelah melewati jaket uap air bertekanan memasuki wadah autoklaf yang berisi alat
dan bahan yang akan disterilisasi.
Uap air bertekanan ini memasuki wadah dengan aliran dari atas ke bawah
sehingga menggantikan udara yang ada didalamnya. Udara tergantikan dengan
bantuan gravitasi (uap air lebih ringan dari udara) kemudian dibuang meleati pipa di
bagian bawah wadah menuju pipa pembuangan. Pada pipa ini terdapat alat pengatur
uap air yang secara otomatis aka tertutup jika udara telah dikeluarkan seluruhnya.
Untuk mendeteksi bahwa autoklaf bekerja dengan sempurna dapat digunakan
mikroba penguji yang bersifat thermofilik dan memiliki endospora yaitu Bacillus
stearothermophillus, lazimnya mikroba ini tersedia secara komersial dalam bentuk
spore strip.
Penggunaan bakteri thermofilik ditujukan untuk memperbesar kemungkinan
resistennya terhadap sterilisasi karena bakteri tersebut mengandung enzim yang tetap
bekerja pada suhu tinggi. Untuk mengujinya spore strip ini dimasukkan dalam
autoklaf dan mengalami proses sterilisasi. Setelah proses selesai lalu ditumbuhkan
pada inkubator (56oC) bersamaan dengan spore strip yang tidak disterilisasi. Jika
media tetap bening maka menunjukkan autoklaf telah bekerja dengan baik. Selain
memakai biological indikator diatas monitoring autoklaf dapat juga menggunakan
Bowie-Dick autoclave tape, yaitu tape yang dilapisi suatu bahan kimia untuk
mendeteksi penetrasi uap air bertekanan. Perubahan warna terjadi jika sterilisasi
berlangsung sesuai target.
Uap air bertekanan yang dipaksakan masuk kedalam botol yang tertutup rapat
(tapi terdapat celah kecil dan tekanan masih dapat masuk) dapat menjadi musibah.
Pada waktu sterilisasi sudah berlangsung dan suhu wadah autoklaf turun menjadi
80oC dan tekanan telah turun menjadi sama dengan tekanan atmosfer, di dalam botol
yang tertutup rapat masih memiliki tekanan diatas tekanan luar dan juga suhu cairan
lebih tinggi dari pada suhu wadah autoklaf. Jika botol dipaksakan keluar wadah
(tanpa adanya waktu cooling down) dan terjadi perbedaan tekanan yang signifikan,
botol dimungkinkan dapat meledak dan menumpahkan cairan panas ke operator.

8
Sangat disarankan operator memakai sarung tangan dan pelindung muka (full-face
visor) demi keamanan.
Sterilisasi dengan autoklaf memiliki keuntungan sebagai berikut, efektif untuk
sebagian besar mikroorganisme. Cepat sterilisasinya, panas dan tekanan menghemat
waktu sterilisasi. Tidak menyebabkan kekeringan atau gosong untuk media cair atau
gel, lebih efisien dari pada oven. Sedang kelemahannya adalah bahan atau alat harus
dibungkus dengan kertas agar tidak basah, karena kertas yang digunakan akan cepat
mongering pada suhu kamar. Harus memperhatikan tekanan agar tidak “over
pressure” sehingga bida meledak. Tidak dapat mensterilkan bahan yang harus selalu
kering, dimana mikrobia yang ada didalamnya tidak dapat ditembus oleh uap dan
tetap bertahan hidup. Bahan hasil sterilisasi harus dikeringkan lagi sebelum
digunakan agar tidak basah dan mudah terkontaminasi
.
5. Sterilisasi dengan penyaringan
1.) Sinar ultra violet (UV)
Sinar UV dapat membunuh mikroba patogen, spora, virus, jamur, serta ragi.
Sinar UV dapat bekerja efektif jika langsung disinari pada bahan yang akan
disterilkan.
2.) Dengan sinar gamma
Digunakan isotop radioaktif, misalnya Co (kobalt 60). Keuntungan yang akan
di sterilkan adalah dapat disterilkan oleh wadah/kemasan.
3.) Dengan sinar X dan sinar katoda
Sinar X dan elektron – elektronnya dengan intensitas tinggi mempunyai sifat
mematikan bakteri.
Bahan yang tidak panas seperti serum, darah, toksin, dll disterilkan dengan
menggunakan penyaring bakteri seperti:
 Berkefeld filter à penyaringan bakteri yang terbuat dari tanah diatome
 Chamderland filter à penyaringan bakteri porseli
 Gertz filter à penyaringan bakteri dari bahan asbes

6. Sterilisasi dengan penambahan zat-zat kimia

Cara ini tidak begitu efektif bila dibandingkan dengan cara pemanasan
keringdan dipergunakan pada bahan-bahan yang tidak tahan pemanasan atau cara lain
tidak bisa dilaksanakan karena keadaan, yaitu:
a. Gas : Ozon, formaldehyde, ethylene oxide gas
b. Larutan : deterjen, yodium, alcohol, peroksida fenol, formalin, AgNO3 dan
merkuroklorid

9
 Sterilisasi dengan cara kimia antara lain dengan disenfektan. Daya kerja
antimikroba disenfektan ditentukan oleh konsenntrasi, waktu dan suhu. Beberapa
contoh desinfektan yang digunakan antara lain : Desinfektan lingkungan misalnya:
a. Untuk permukaan meja : lisol 5%, formalin 4% dan alcohol.
b. Untuk di udara : natrium hipoklorit 1%, lisol 5% atau senyawa fenol lain
c. Desinfektan kulit atau luka : dicuci denngan air sabun, providon yodium dan etil
alkohol 70%.

7. Sterilisasi dengan filtrasi

Cara ini digunakan untuk udara atau bahan-bahan berbentuk cairan. Filtrasi
udara disebut HEPA (Hight Efficiency Paticulate Air). Tujuannya adalah untuk
filtrasi cairan secara luas hanya digunakan dalam produksi obat-obatan atau pada
sistem irigasi dalam ruang operasi, maupun dalam perawatan medik lainnya yang
membutuhkan adanya cairan steril. Jenis filternya yang penting ialah pori-porinya
harus lebih kecil dari jenis kuman. Pori-pori filter ukurannya minimal 0,22 micron
.
8. Tyndallisasi
Metode ini berupa mendidihkan medium dengan uap beberapa menit saja.
Karena metode ini untuk mensterilkan medium atau alat yang tidak tahan dengan
suhu tinggi. Dengan suhu 100o C selama 30 menit dalam 3 hari berturut-turut.
Sehingga dapat dihasilkan medium yang steril dan zat-zat organik yang terkandung di
dalamnya tidak mengalami banyak perubahan.

9. Pasteurisasi
Pasteurisasi bukan suatu bentuk sterilisasi, tetapi metode untuk
membinasakan organisme penyebab penyakit. Kita dapat membinasakan organisme
tersebut dengan cara dipanaskan dengan suhu tinggi sekitar 60-80oC selama satu jam
dan 3 hari berturut-turut.

10. Pembakaran
Metode pembakaran digunakan untuk memusnahkan bangkai, hewan-hewan
penelitian yang terinfeksi, dan bahan terinfeksi lainnya yang perlu dibuang.
Pemusnahan mikroorganisme dengan pembakaran juga dilakukan secara rutin di
laboratorium terhadap jarum pindah, yang dipijarkan di atas pembakar bunsen.
Pembakaran sangat efektif untuk metode sterilisasi.

11. Sterilisasi panas lembab

Uap di bawah tekanan adalah agen sterilisasi yang paling efisien dan cara
utama yang digunakan untuk mensterilkan pembalut peralatan, media dan barang-

10
barang terkontaminasi untuk pembedahan. Suhu sterilisasi bergantung kepada
tekanan uap. Biasanya suhu uap adalah 121oC, pada tekanan 15 pon setiap inchi
persegi ( 1,05 Kg/cm2 ), selama 20 menit, atmosfer harus bebas udara dan hanya
mengandung uap. Kondisi demikian ini dipenuhi dalam autoklaf. Penggunaan
autoklaf yang tidak benar biasanya disebabkan oleh satu dari dua kesalahan.yaitu :
kelalaian untuk mengeluarkan semua udara sebelum menutup katup buangan dan
membebani autoklaf secara berlebihan atau pengemasan yang tidak benar.

2.3. Penggunaan Sterilisasi

Proses sterilisasi dipergunakan pada bidang mikrobiologi untuk mencegah
pencernaan organisme luar, pada bidang bedah untuk mempertahankan aseptis, pada
pembuatan makanan dan obat obatan untuk menjamin keamanan terhadap
pencemaran oleh mikroorganisme dan di dalam bidang lain sterilisasi ini penting
Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3 macam, yaitu penggunaan panas
(pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan bahan kimia (etilena oksida,
asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida alkalin) (Hadioetomo, 1993).

2.4 Syarat Tindakan Aseptis

Aseptik berarti 'tanpa mikro-organisme'. Teknik aseptik mengacu pada praktek
yang digunakan untuk menghindari kontaminasi organisme patogen. Tujuan utama
dari teknik aseptik adalah untuk melindungi pengguna dari kontaminasi oleh
organisme patogen selama prosedur medis dan keperawatan dan untuk melindungi
dari hal-hal yang berpotensi menular dari mikroorganisme tersebut. Hal ini dapat
dicapai dengan memastikan bahwa hanya peralatan steril (Wilson 2006).
Bekerja secara aseptik yang dilakukan dapat mencegah kontaminasi mikroba
selama prosedur invasif atau perawatan dalam integritas kulit. Dua jenis asepsis dapat
dilakukan pada mikrobiologi klinis ialah asepsis medis dan bedah. Aseptik medis
digunakan untuk menekan jumlah organisme dan mencegah penyebaran mereka dan
terutama digunakan di daerah lingkungan dan beberapa daerah perawatan lainnya,
misalnya rawat jalan klinik. Asepsisis Bedah proses yang ketat dan termasuk
prosedur untuk menghilangkan mikro-organisme dari suatu daerah dan dipraktekkan
oleh perawat dan petugas kesehatan lainnya (Ayliffe 2000).
Teknik aseptik harus digunakan selama prosedur invasif yang pertahanan alami
tubuh, misalnya kulit atau selaput lendir. Asepsis harus selalu dilakukan pada kondisi
apapun. Mempertahankan sterilitas bisa sulit tetapi penting untuk mencegah
kontaminasi pada peralatan yang digunakan (Dawe 2011).

1. Aseptik medis
Aseptik medis adalah teknik atau prosedur yang dilakukan untuk mengurangi
jumlah mikroorganisme disuatu objek, serta menurunkan kemungkinan penyebaran

11
dari mikro organisme tersebut.. Aseptik medis sangat penting untuk diterapkan saat
merawat individu yang rentan terhadap infeksi baik karena penyakitnya, pembedahan
atau karena immonosupresi. Selama proses keperawatan, perawat melakukan kontak
dengan banyak pasien dirumah sakit, oleh karena itu perawat harus menyadari dan
mengetahui akan prinsip-prinsip aseptik medis sebagai upaya untuk menghindari
transfer kuman dari pasien ke perawat, dari perawat ke pasien, dari perawat ke
perawat lain atau petugas kesehatan lain, serta dari satu pasien ke pasien lainnya.
Suatu objek dikatakan terkontaminasi bila objek tersebut menjadi tidak steril atau
bersih.
Dalam aseptik medik suatu area atau objek dikatakan terkontaminasi bila
terdapat atau objek dicurigai mengandung kuman pathogen, misalnya tempat tidur
(badpan) yang telah dipakai, lantai dan kasa basah yang telah dipakai. Mata rantai
infeksi yang paling mudah untuk di putus adalah cara penularannya. Dalam
lingkungan perawatan kesehatan lingkungan, mencuci tangan adalah merupakan
teknik dasar yang paling penting dalam pencegahan dan pengontrolan penularan
infeksi nosokomia. Menurut Larson dalam Dwi Handayani (2003), Mencuci tangan
adalah menggosok dengan sabun secara bersama seluruh kulit permukaan tangan
dengan kuat dan ringkas yang kemudian di bilas dibawah air mengalir. Oleh karena
itu, mencuci tangan menjadi metode pencegahan dan pengendalian infeksi yang
paling penting.
Tujuan mencuci tangan adalah menurunkan Bioburden(jumlah
mikroorgsnisme) pada tangan dan untuk mencegah penyebaranya ke area yamg tidak
terkontaminasi. Mencuci tangan yang kurang tepat menempatkan baik pasien dan
tenaga perawatan kesehatan pada resiko terhadap infeksi atau penyakit. Tenaga
perawatan kesehatan yang mencuci tangan kurang adekuat dapat memindahkan
organisme-organisme sepertistaphylococcus, escheria coli, pseudomonas dan
klebisellasecara langsung ke pada hospes yang rentan, yang menyebabkan infeksi
nasokomial dan endemik disemua jenis lingkungan pasien.

Adapun teknik cuci tangan yang efektif sesuai prosedur cuci tangan menurut WHO
(2007) yaitu sebagai berikut :
 Dimulai cuci tangan dengan menggunakan air mengalir dan bersih.
 Menggunakan sabun cair atau sabun batangan, menggosokan sabun tersebut
sampai berbusa banyak.
 Menggosokan ke bagian punggung tangan dengan jari tangan menjalin secara
bergantian, sebanyak 3 (tiga) kali.
 Mengepalkan salah satu tangan dan menggosokan ke permukaan tangan lainnya
dimulai dengan menggosokan buku-buku jari tangan, kuku tangan, dan ujung-
ujung jari tangan secara bergantian, sebanyak 3 (tiga) kali.

12
 Memutar-mutar ibu jari tangan dengan salah satu tangan yang dilakukan secara
bergantian, sebanyak 3 (tiga) kali.
 Membilas tangan dengan air mengalir mulai dari permukaan tangan sampai
dengan sikut tangan.
 Mengeringkan tangan
.
2. Aseptik bedah
Aseptik bedah atau teknik steril termasuk prosedur yang digunakan untuk
membunuh mikroorganisme. Setelah objek menjadi tidak steril maka objek tersebut
telah terkontaminasi, misalnya alat-alat perawatan luka yang telah dipakai atau
tersentuh objek yang tidak steril. Pada aseptik bedah, suatu area atau objek
dinyatakan terkontaminasi jika disentuh oleh setiap objek yang tidak steril. Teknik
steril sering dilakukan dalam berbagai tindakan keperawatan di ruang keperawatan,
seperti dalam perawatan luka operasi (mengganti balutan).
Keefektifan tindakan pencegahan luka operasi bergantung pada motivasi
perawat dalam menggunakan teknik aseptik. Perawat yang bekerja dengan
lingkungan yang steril atau dengan peralatan yang seteril harus mengerti bahwa
kegagalan sekecil apapun dalam teknik ini mengakibatkan kontaminasi yang akan
membuat pasien beresiko terkena infeksi luka operasi yang dapat menghambat proses
penyembuhan ( Schaffer dkk, 2004).
Kulit yang sehat dan utuh serta memberan mukosa dapat memberikan suatu
barier yang efektif terhadap mikroorganisme, tetapi jaringan yang di bawahnya
merupakan media yang sangat baik untuk pertumbuhan mikroorganisme. Oleh karena
itu saat jaringan bawah kulit terbuka akibat luka karena prosedur operasi, maka untuk
melindungi daerah tersebut dari mikroorganisme harus digunakan teknik steril.
Adapun prosedur-prosedur steril perawatan luka menurut Ellis, et al (1999) adalah
sebagai berikut:
 Menata area steril
a) Mencuci tangan.
b) Pililah permukaan yang datar, kuat dan kering untuk menyiapkan alat steril,
dengan luas kurang lebih 12x12 inci.
c) Sebelum dilakukan sterilisasi, alat-alat dibungkus rapat agar tidak terkontaminasi
, sehingga saat dibuka alat-alat yang sudah steril tersebut tidak akan
terkontaminasi.
d) Apabila ingin menambah alat - alat yang steril, tempatkan ke sisi area yang steril.

Membuka bungkusan steril.

a) Mencuci tangan.
b) Ketika membuka bungkusan steril, jangan sampai menyentuh objek yang steril
atau areah yang steril.

13
c) Peganglah hanya pada sisi luar pembungkusnya.
d) Jangan membiyarkan sesuatu yang tidak steril menyentuh isi bungkusan steril.

 Menambahkan alat-alat ke dalam area steril

Ketika menambahkan alat-alat steril ke area steril, hal yang harus diperhatikan
adalah menjaga agar tidak terjadi kontaminasi.
a) Mencuci tangan.
b) Membuka pembungkus tanpa menyentu area steril.
c) Tempatkan alat-alat tersebut pada bidang yang steril dan jaga agar tangan tidak
menyentu bidang steril. Bila alat-alat tersebut besar atau berat atau secara hati-
hati pada bidang steril atau bisa menggunakan korentang steril.
d) Jaga agar tangan tidak menyentu bidang steril.

 Menambahkan cairan ke dalam area steril

a) Mencuci tangan.
b) Tuangkan sedikit cairan, misalnya betadin kedalam tempat pembuangan sebelum
menuangkannya kedalam wadah steril.
c) Tuangkan cairan ke dalam wadah steril, tuangkan kira-kira 6-8 inchi di atasnya.
d) Tuangkan secara perlahan-lahan untuk mencegah terjadinya percikan.
e) Jagalah agar tidak bersentuhan langsung dengan area steril.

 Menggunakan sarung tangan steril

a) Cuci tangan secara menyeluruh.
b) Buka pembungkus kemasan bagian luar dengan hati-hati menyibakkannya ke
samping.
c) Pegang kemasan bagian dalam dan letak pada permukaan yang datar dan bersih
tepat diatas ketinggian pergelangan tangan. Buka kemasan, pertahankan sarung
tangan pada permukaan dalam pembungkus.
d) Identifikasi tangan kanan dan kiri. Setiap sarung tangan mempunyai manset
kurang lebih 5 cm, kenakan sarung tangan pada tangan dominan terlebih dahulu.
e) Dengan ibu jari dan 2 jari lainnya dari tangan non dominan, pegang tepi manset
sarung tangan untuk tangan dominan. Sentuh hanya pada permukaan dalam
sarung tangan.
f) Dengan hati-hati tarik sarung tangan pada tangan dominan, lebarkan manset dan
pastikan bahwa manset tidak menggulung pada pergelangan tangan. Pastikan juga
bahwa ibu jari dan jari-jari pada posisi yang tepat.
g) Dengan tangan dominan yang telah menggunakan sarung tangan, masukan jari-
jari tangan manset sarung tangan kedua.
h) Dengan hati-hati tarik sarung tangan kedua pada tangan non dominan. Jangan
biyarkan jari-jari dan ibu jari sarung tangan dominan menyentuh bagian tangan

14
 non dominan yang terbuka. Pertahankan ibujari tangan non dominan abduksi ke
belakang.
i) Manakala sarung tangan kedua telah terpasang, cakupkan kedua tangan anda.
Manset biasanya terlepas setelah pemasangan. Pastikan untuk hanya menyentuh
bagian yang steril.

 Merawat luka
Menurut David dalam Dwi Handayani (2003), perawatan luka paska bedah adalah
tanggung jawab perawat bangsal. Adapun tujuan perawatan luka menurut Smith,
et al dalam Wina Jivika P (2007). adalah sebagai berikut :
a) Mengangkat jaringan mati, sehingga mendukung proses penyembuhan luka.
b) Mencegah terjadinya infeksi pada luka
c) Absorbsi cairan eksudat
d) Mempertahankan kelembaban daerah sekitar luka
e) Melindungi luka dari kerusakan lebih lanjut
f) Melindungi daerah sekitar luka dari infeksi dan trauma

Menurut Ignatavicius, et al dalam Dwi Handayani (2003), perawatan luka paska

bedah terdiri dari mengganti balutan, merawat balutan, membersihkan luka dan
perawatan drain.Perawatan luka paska bedah yang baik memberikan penyembuhan
luka yang baik. Dalam hal ini yang terpenting adalah penggunaan pembalut.
Pembalutan pada luka paska bedah berfungsi untuk memberikan lingkungan
yang sesuai untuk penyembuhan luka, untuk menyerap drainase, untuk membebat dan
mengimobilisasi luka, untuk melindungi luka dan jaringan epitel baru dari cedera
mekanik, untuk melindungi luka dari kontaminasi bakteri dan pengotoran oleh faeses,
muntahan dan urine, untuk meningkatkan hemostatis, seperti pada balutan tekanan
dan untuk memberikan kenyamanan mental dan fisik bagi pasien.

c. Teknik aseptik dalam perawatan luka operasi

Menurut David dalam Dwi Handayani (2003) dalam pelayanan keperawatan,
perawatan luka operasi adalah tanggung jawab perawat. Berikut adalah tatacara
perawatan luka operasi dengan teknik aseptik.
 Siapkan peralatan
 Cek pembalut pasien
 Pasang peralatan
 Jelaskan prosedur tindakan pada pasien
 Cuci tangan dengan efektif, sesuai prosedur cuci tangan menurut WHO
 Pakai sarung tangan steril
Cara pakai sarung tangan steril:
1. Ambil sarung tangan secara hati-hati dari wadahnya dengan menggunakan
korentang.

15
 2. Pegang sarung tangan pertama pada bagian dalam.
3. Masukan tangan yang tidak memegang sarung tangan dengan hati-hati
tanpa menyentuh bagian luar sarung tangan.
4. Ambil sarung tangan kedua dengan tangan yang sudah terpasang sarung
tangan pada bagian luar pada lipatan.
5. Masukan tangan yang kedua tanpa terkontaminasi
6. Atur sarung tangan yang sudah terpasang agar pas ditangan
7. Menjaga tangan yang sudah terpasang sarung tangan steril agar tidak
terkontaminasi, dan selalu berada di atas pinggang.
 Lepaskan plester menggunakan pinset
 Buang pembalut kotor pada tempat yang telah disediakan
 Perhatikan luka dengan teliti untuk menandai terhadap infeksi dan penyembuhan
 Buka bak instrumen
 Siapkan larutan pembersih
 Jika bekerja sendiri, letakan sarung tangan steril pada tangan yang dominan,
biarkan tangan yang lain bebas untuk bekerja dengan peralatan yang tidak steril
 Bersihkan luka. Ketika membersihkan area, selalu mulai pada daerah terbersih
dan kerjakan menjauh dari area tersebut
 Jika ada drain, bersihkan dibawah saluran dan sekitar lokasi dengan lapisan kasa 4
x 4 Cm dan larutan pembersih
 Letakan beberapa kain kasa di bawah drain
 Letakan beberapa kasa betadin 4 x 4 Cm di atas luka dan plester
 Buang sarung tangan
 Tutup kantong plastik dan buang pada kantong isolasi bahan
 Cuci tangan dengan efektif.

2.5 Cara Dan Metode Sterilisasi

Pada prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu secara
mekanik, fisik dan kimiawi.

1. Sterilisai secara mekanik (filtrasi)

Di dalam sterilisasi secara mekanik (filtrasi), menggunakan suatu saringan yang

berpori sangat kecil (0.22 mikron atau 0.45 mikron) sehingga mikroba tertahan pada
saringan tersebut. Proses ini ditujukan untuk sterilisasi bahan yang peka panas, misal
nya larutan enzim dan antibiotik.

Jika terdapat beberapa bahan yang akibat pemanasan tinggi atau tekanan
tinggi akan mengalami perubahan atau penguraian, maka sterlisasi yang digunakan
adalah dengan cara mekanik, misalnya dengan saringan. Didalam mikrobiologi

16
penyaringan secara fisik paling banyak digunakan adalah dalam penggunaan filter
khusus misalntya filter berkefeld, filter chamberland, dan filter seitz. Jenis filter
yang dipakai tergantung pada tujuan penyaringan dan benda yang akan disaring.

Penyaringan dapat dilakukan dengan mengalirkan gas atau cairan melalui

suatu bahan penyaring yang memilki pori-pori cukup kecil untuk menahan
mikroorganisme dengan ukuran tertentu. Saringan akan tercemar sedangkan cairan
atau gas yang melaluinya akan steril. Alat saring tertentu juga mempergunakan bahan
yang dapat mengabsorbsi mikroorganisme. Saringan yang umum dipakai tidak dapat
menahan virus. Oleh karena itu, sehabis penyaringan medium masih harus dipanasi
dalam otoklaf. Penyaringan dilakukan untuk mensterilkan substansi yang peka
tehadap panas seperti serum,enzim,toksin kuman,ekstrak sel,dsb.

 Menyaring cairan

Hal dapat dilakukan dengan berbagai filter seperti saringan Seitz, yang
menggunakan saringan asbestos sebagai alat penyaringannya; saringan berkefeld,
yang mempergunakan filter yang terbuat dari tanah diatom; saringan chamberland,
yang mempergunakan filter yang terbuat dari porselen; dan fritted glass filter, yang
mempergunakan filter yang terbuat dari serbuk gelas. Saringan asbes lebih mudah
dan lebih murah daripada saringan porselen. Saringan asbes dapat dibuang setelah
dipakai, sedangkan saringan porselen terlalu mahal bila dibuang, tetapi terlalu sulit
untuk dibersihkan.

 Menyaring udara

Untuk menjaga suatu alat yang sudah steril agar tidak tercemar oleh mikroba
atau untuk menjaga agar suatu biakan kuman tidak tercemar oleh kuman yang lain,
maka alat-alat tersebut harus ditutup denagn kapas, karena kapas mudah ditembus
udara tetapi dapat menahan mikroorganisme. Harus dijaga agar kapas tidak menjadi
basah, oleh karena kapas yang basah memungkinkan kuman menembus kedalam.
Untuk mencegah pencemaran oleh kuman-kuman udara pada waktu menuang
perbenihan, dapat dipergunakan suatu alat yang disebut laminar flow bench dimana
udara yang masuk kedalamnya disaring terlebih dahulu dengan suatu saringan
khusus. Saringan ini ada batas waktu pemakaiannya dan harus diganti dengan yang
baru apabila sudah tidak berfungsi lagi.

2. Sterilisasi secara fisik

17
Sterilisasi secara fisik dipakai apabila selama sterilisasi dengan bahan kimia tidak
akan berubah akibat temperature tinggi dan tekanan tinggi. Cara membunuh
mikroorganisme tersebut adalah dengan panas. Dimana proses sterilisasi
menggunakan hukum fisika yaitu dengan :

a) Pemanasan kering

Prinsipnya adalah protein mikroba pertama tama akan mengalami

dehidrasi sampai kering dan selanjutnya teroksidasi oleh oksigen dari udara
sehingga menyebabkan mikrobanya mati. Digunakan pada benda atau bahan
yang tidak mudah menjadi rusak, tidak menyala, tidak hangus, dan tidak
menguap pada suhu tinggi. Metode ini sangat efektif untuk mensterilkan alat
alat gelas. Contohnya Erlenmeyer, tabung reaksi, pipet, dan lain lain Pada
umumnya temperature yang digunakan 170°C - 180°C selama kurang lebih 2
jam.

b) Uap panas air panas

Sterilisasi dengan metode ini digunakan suhu 100°C selama 30 menit.

Metode ini mempunyai keterbatasan penggunaan uap mengalir dilakukan
dengan proses sterilisasi bertingkat untuk mensterilkan media kultur. Metode
ini jarang memuaskan untuk sterilisasi larutan, karena spora sering gagal
tumbuh dibawah kondisi ini seperti vegetative kebanyakan bakteri yang
membentuk spora. Temperatur suhu titik mati bervariasi, tetapi tidak ada
bentuk non spora yang bertahan

c) Uap air panas bertekanan

Sterilisasi uap dilakukan dengan autoklaf menggunakan uap air dalam

tekanan sebagai pensterilnya. Mekanisme penghancuran bakteri oleh uap air
panas adalah karena terjadinya denaturasi dan koogulasi beberapa protein
esensial dari organisme tersebut.

Alat yang digunakan adalah Autoclave. Cara kerja alat ini adalah
menggunakan uap panas dengan suhu 121°C selama 15 menit pada tekanan 1
atm. Sterilisasi uap tergantung pada :

 Alat dan bahan harus dapat ditembus uap panas secara merata tanpa
mengalami kesurakan
 Kondisi steril harus bebas (Vacum)

18
  Suhu yang terukur harus mencapai 121°C dan dipertahankan selama
15 menit.

Prosedur dalam penggunaan Autoclave :

 Pelajari bagian bagian Autoclave dan fungsinya masing masing

 Tuang air suling ke dalam Autoclave hingga batas yang dianjurkan
 Masukkan alat atau bahan yang akan disterilkan, ditata sedemikian
rupa hingga uap air merata dapat menembus alat atau bahan yang akan
disterilkan tersebut
 Tutup Autoclave dan hidupkan alat. Erhatikan tahap kenaikan suhu
dan tekanan pada Autoclave. Tunggu hingga alat mencapai suhu
121°C selama 15 menit. Autoclave akan otomatis menyembunyikan
alarm jika proses sterilisasi sudah selesai.
 Hindari membuka tutup Autoclave begitu proses sterilisasi selesai,
tunggu sampai tekanan dan suhunya turun

d) Penyinaran dengan UV

Sinar Ultra Violet juga dapat digunakan untuk proses sterilisasi, misalnya
untuk membunuh mikroba yang menempel pada permukaan interior Safety
Cabinet dengan disinari lampu UV

3. Sterilisasi secara kimiawi

Biasanya sterilisasi secara kimiawi menggunakan senyawa desinfektan antara

lain alkohol. Antiseptik kimia biasanya dipergunakan dan dibiarkan menguap seperti
halnya alkohol. Umumnya isopropil alkohol 70-90% adalah yang termurah namun
merupakan antiseptik yang sangat efisien dan efektif. Penambahan yodium pada
alkohol akan meningkatkan daya disinfeksinya. Dengan atau iodium, isopropil tidak
efektif terhadap spora. Solusi terbaik untuk membunuh spora adalah campuran
formaldehid dengan alkohol, tetapi solusi ini terlalu toksik untuk dipakai sebagai
antiseptik.

Pemilihan antiseptik terutama tergantung pada kebutuhan daripada tujuan

tertentu serta efek yang dikehendaki. Perlu juga diperhatikan bahwa beberapa
senyawa bersifat iritatif, dan kepekaan kulit sangat bervariasi. Zat-zat kimia yang
dapat dipakai untuk sterilisasi antara lain yaitu halogen (senyawa klorin, iodium),
alkohol,fenol,hidrogen feroksida,zat warna ungu kristal, derivat akridin, rosanalin,
detergen, logam berat (hg,Ag,As,Zn), aldehida, dll.

19
 BAB III
PENUTUP

3.1 Kesimpulan
Steralisasi adalah suatu cara untuk membebaskan sesuatu (alat,bahan,media, dan
lain-lain) dari mikroorganisme yang tidak diharapkan kehadirannya baik yang
patogen maupun yang apatogen. Atau bisa juga dikatakan sebagai proses untuk
membebaskan suatu benda dari semua mikroorganisme, baik bentuk vegetative
maupun bentuk spora. Pada prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu
secara mekanik, fisik dan kimiawi
Kesalahan dalam melaksanakan proses sterilisaasi dapat berakibat fatal,karena
akan terjadi penularan penyakit dari satu individu ke individu yang lain atau bahkan
terjadi infeksi yang akut terhadap pejamu rentan.

3.2 Saran
Sebelum melakukan sterilisasi dengan kimiawi perlu dikaji terlebih dahulu benda
yang akan di sterilisasi. Setelah itu pilih bahan yang efektif sesuai dengan tujuan
sterilisasi. Saat memegang alat sebaiknya menggunakan handscound, agar dipastikan
alat benar-benar steril.

20
 DAFTAR PUSTAKA

Dr. jan Tambayong; Mikrobiologi untuk keperawatan

Mikrobiologi kedokteran, Bina Rupa Aksara, Jakarta, FKUI 1994
Jawetz, J. Melnick, EA, Adeberg (1986), Mikrobiologi Untuk Profesi Kesehatan,
EGC, Jakarta.
Azis, alimul H.2006.Pengantar Kebutuhan Dasar Manusia.Jakarta:Salemba Medika
Ester, Monica.2005.Pedoman Perawatan Pasien.Jakarta:EGC
Pelczar,M.J, E.C.S. Chan. 1988. “Dasar-Dasar Mikrobiologi”. Jilid 2. Jakarta :
Universitas Indonesia (UI- Press).
Anonim, 1995 Farmakope Indonesia, IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Jakarta.
Fardiaz, Srikandi. 1992. ikrobiologi Pangan. Departemen Pendidikan dan
Kebudayaan. PAU Pangan dan Gizi. Institut Pertanian Bogor.
Lay, B. W. dan Hastowo. 1982.Mikrobiologi. Rajawali Press Jakarta.
Hadioetomo, R.S. 1985. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek. PT.Gramedia.Jakarta.
Volk, W.A. dan Wheeler, M.F. 1988. Mikrobiologi Dasar. Penerbit Erlangga. Jakarta

21