Atividade Enzimática
Atividade Enzimática
Atividade Enzimática
CENTRO DE TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA QUÍMICA
LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA III
Acadêmicos:
Andressa C. dos Santos RA: 52566
Flávio s. Ramos :52738
Pedro H. F. Rossi :54442
Vinícius Lipori Lemos :54457
2. RESUMO
3. INTRODUÇÃO
4. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA
4.1. ENZIMAS
Enzimas são catalisadores biológicos, formados por proteínas, que participam nas
reações metabólicas de todos os organismos vivos. Atuam de forma a acelerar uma reação
bioquímica, reduzindo a energia de ativação, sem, no entanto alterar a constante de
equilíbrio ou a energia livre da reação. Estão presentes no metabolismo dos organismos
vivos e são responsáveis pela biossíntese de inúmeros compostos, sob condições de
temperatura e pressão semelhantes ao do ambiente.
Algumas reações não só são aceleradas, como também não ocorreriam em
determinadas situações, ou então exigiram uma quantidade de energia inviável para o
organismo. As enzimas, como os catalisadores orgânicos, saem inalteradas após sua
aplicação nos processos. Cada enzima é responsável por um único tipo de reação química,
ou seja, ela tem alta especificidade em se tratando de substrato. Seu uso industrialmente é
muito grande, onde se destacam na preparação de alimentos, remédios e um enorme
número de compostos químicos.
As fontes de enzimas industriais são de origem animal, vegetal, bacteriana e fúngica,
sendo essas duas últimas as quais irão se falar nesse trabalho.
As enzimas, como as outras proteínas, têm peso molecular variando de perto de 12000
até acima de um milhão. Elas são, portanto, muito grandes quando comparadas com os
substratos ou com os grupos funcionais sobre os quais elas agem.
Apesar das várias vantagens das enzimas como catalisadores, o uso das mesmas em
aplicações industriais tem sido limitado, porque a maioria das enzimas é relativamente
instáveis, seu custo é alto e é difícil recuperar a enzima ativa no final do processo. Isso
restringe o uso de enzimas solúveis a processo em batelada, seguido de procedimentos para
separar o produto da mistura reacional, levando à desnaturação da enzima e tornando o
processo, na maioria das vezes, antieconômico.
A sacarose é o dissacarídeo mais importante, tanto pela quantidade e freqüência
com que é encontrado na natureza, como pela sua importância na alimentação humana.
Apesar de suas principais fontes serem a cana-de-açúcar e a beterraba, a sacarose é
encontrada em todas as plantas que sofrem o processo de fotossíntese.
Sendo um dissacarídeo não redutor, a sacarose não reage com solução de Fehling ou
solução amoniacal de íons de prata, nem sofre muta-rotação. É facilmente hidrolisada por
soluções diluídas de ácidos minerais ou por enzimas (invertase) com formação de D-glicose
e D-frutose.
Invertase ou frutofuranosidade é uma enzima que catalisa a hidrólise da sacarose,
produzindo o que comumente se denomina açúcar invertido, que consiste numa mistura
equimolar de glicose e frutose. A enzima possui a capacidade de dividir a molécula de
sacarose em glicose e frutose.
Onde:
y = a b.t é dada nos gráficos de µmols de glicose + frutose versus tempo.
a = coeficiente linear da reta ajustada.
b = coeficiente angular da reta ajustada.
t = tempo de reação (min).
y = µmoles de glicose + frutose.
Para o calculo da energia de ativação (Ea), utiliza-se o gráfico de ln da atividade
versus o inverso da temperatura, a equação para a determinação é:
−Ea
=b
R
Ea =−b . R( J ) ( 3 )
Onde:
y = a b.t é dada nos gráficos de ln da atividade versus o inverso da temperatura.
a = coeficiente linear da reta ajustada.
b = coeficiente angular da reta ajustada.
1/T = inverso da temperatura (1/K).
y = ln da atividade.
R= constante universal dos gases perfeitos.
6. MATERIAIS E MÉTODOS
6.1. MATERIAIS
6.2. MÉTODOS
7. RESULTADOS
Sendo:
Gr = glicose+frutose formada
Vr = Volume de reação
PM = peso molecular da glicose+frutose (0,360 mg/mol)
45 ºC
µmols de glicose + frutose
6000000
5000000 f(x) = 253967.39 x + 193564.92
4000000 R² = 0.99
3000000
2000000
1000000
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
t (min)
55 ºC
µmols de glicose + frutose
10000000
8000000 f(x) = 323417.6 x + 1897360.38
6000000 R² = 0.99
4000000
2000000
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
t (min)
60 ºC
µmols de glicose + frutose
8000000
7000000
f(x) = 332297.99 x + 324991.69
6000000 R² = 0.99
5000000
4000000
3000000
2000000
1000000
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
t (min)
A = b/ ml de enzima utilizada
A partir dos dados de atividade específica e temperatura, pode ser obtido o valor da
energia de ativação na hidrólise da sacarose em xarope de glicose e frutose, partindo da
equação abaixo:
Ea 1
ln ( A )=ln ( A0 )−
R T() (6)
Logo, construindo o gráfico lnAe versus 1/T, obtemos o coeficiente angular -Ea/R.
Ea
7.6
ln atividade específica
Logo,
-Ea/R = -1785,5
Sendo:
R=8,314 J.K-1. mol-1
Ea = 14,86 kJ/mol
9. CONCLUSÃO.
Este é um importante experimento para se adquirir uma consciência da cinética de
uma reação enzimática, sua dependência com a temperatura e uma estimativa da energia de
ativação para a reação. Para uma melhor determinação da energia de ativação seriam
necessários mais pontos com um intervalo de temperatura menores.
10. BIBLIOGRAFIA.
Bergamasco, R. “Cinética da hidrólise da sacarose pela invertase”. Dissertação de
mestrado. Universidade estadual de Londrina, 1989.