O documento descreve as etapas básicas da engenharia genética, incluindo a digestão do DNA de interesse com enzimas de restrição, a inserção deste DNA em um vetor como um plasmídeo, e a introdução do DNA recombinante em células hospedeiras para replicação e expressão do gene de interesse.
O documento descreve as etapas básicas da engenharia genética, incluindo a digestão do DNA de interesse com enzimas de restrição, a inserção deste DNA em um vetor como um plasmídeo, e a introdução do DNA recombinante em células hospedeiras para replicação e expressão do gene de interesse.
O documento descreve as etapas básicas da engenharia genética, incluindo a digestão do DNA de interesse com enzimas de restrição, a inserção deste DNA em um vetor como um plasmídeo, e a introdução do DNA recombinante em células hospedeiras para replicação e expressão do gene de interesse.
O documento descreve as etapas básicas da engenharia genética, incluindo a digestão do DNA de interesse com enzimas de restrição, a inserção deste DNA em um vetor como um plasmídeo, e a introdução do DNA recombinante em células hospedeiras para replicação e expressão do gene de interesse.
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01.
Antes de 1970, o DNA era a molécula mais difícil para um bioquímico
analisar. Hoje a situação mudou, a tecnologia do DNA recombinante revolucionou a pesquisa permitindo inserir um pedaço de DNA de interesse em um plasmídeo. Para isto é necessário que ocorra: I. A digestão do DNA de interesse por uma endonuclease (enzima de restrição) e inserção no genoma do organismo hospedeiro. II. A digestão do DNA de interesse e do vetor por uma endonuclease (enzima de restrição) e depois ligação do DNA de interesse e do vetor através da enzima DNA ligase. III. A inserção do DNA genômico no vetor utilizando DNA ligase. A) As afirmativas I e II estão incorretas. B) As afirmativas I e III estão incorretas. C) Todas as afirmativas estão incorretas. D) Somente a afirmativa I está incorreta. E) Somente a afirmativa II está incorreta.
02. A manipulação dos ácidos nucleicos in vitro depende, inicialmente, da
disponibilidade de enzimas que possam cortar, ligar e replicar o DNA. Analise as afirmativas a seguir. I. As endonucleases de restrição reconhecem, geralmente, sequências idênticas a fita molde do DNA. II. Dependendo da endonuclease de restrição utilizada, o DNA é clivado em extremidades cegas ou coesivas. III. Enzimas de restrição são ferramentas essenciais na construção de moléculas de DNA recombinante. IV. Uma endonuclease de restrição sempre reconhece vários sítios de restrição diferentes, permanecendo assim a variedade de sítios que uma mesma enzima poderá clivar. Considerando V (verdadeira) e F (falsa), pode-se afirmar que as afirmações são respectivamente: A) V, V, V, F B) F, V, V, F C) F, F, V, V D) V, V, F, F E) F, V, V, V 03. Os plasmídeos geneticamente modificados foram os primeiros vetores desenvolvidos, sendo muito utilizados para a clonagem. Para que um plasmídeo seja considerado um bom vetor de clonagem ou de expressão é necessário que o mesmo tenha algumas características básicas. Avalie as afirmativas a respeito dessas características básicas e assinale a alternativa correta. I. O plasmídeo deve ser capaz de replicar dentro da célula hospedeira, de maneira que muitas cópias da molécula de DNA recombinante possam ser produzidas. II. Somente os vetores de clonagem possuem o gene de resistência a antibiótico enquanto os vetores de expressão não precisam deste gene pois não são selecionados. III. Os vetores de expressão podem ser usados para induzir a síntese de proteínas funcionais. A) As afirmativas I e II estão incorretas. B) As afirmativas I e III estão incorretas. C) Todas as afirmativas estão incorretas. D) Somente a afirmativa I está incorreta. E) Somente a afirmativa II está incorreta.
04. Após a ligação de um gene de interesse em um vetor, a molécula de DNA
recombinante (inserto e vetor unidos) deve ser introduzida dentro de uma célula hospedeira apropriada. Qual a importância desse procedimento? I. É somente um procedimento que se faz para estocar o DNA recombinante recém-sintetizado. II. Podem ser produzidas algumas linhagens celulares para a superexpressão do gene, permitindo assim a purificação do seu produto (proteína). III. O DNA de interesse será replicado dentro da célula hospedeira. A) As afirmativas I e II estão incorretas. B) As afirmativas I e III estão incorretas. C) Todas as afirmativas estão incorretas. D) Somente a afirmativa I está incorreta. E) Somente a afirmativa II está incorreta.
05. Nas bactérias, os genes que conferem resistência aos antibióticos
encontram-se geralmente nos plasmídeos transferidos de um organismo para o outro durante o processo de conjugação. A partir desta observação, aplicou-se esse conceito no processo de transformação bacteriana. O processo de transformação é a absorção de um DNA estranho por células bacterianas. Em 1970, foi desenvolvido um processo de aumentar a capacidade das células de E. coli de serem transformadas. Quando se trabalha com DNA recombinante, normalmente utilizam-se plasmídeos que carregam genes de seleção. Analise as afirmações a seguir a respeito desses genes. I. Uma marca de seleção pode ser um gene que confira à célula transformada uma nova característica, ausente na célula não transformada. II. Uma marca de seleção pode conferir a resistência a um antibiótico específico, como, por exemplo, a resistência a ampicilina (ampR). III. Após a transformação bacteriana, as células que foram transformadas, serão sensíveis ao antibiótico e, portanto, não produzirão colônias no meio contendo antibiótico. IV. As células que possuem o gene de resistência ao antibiótico, quando expostas à presença do antibiótico, sintetizam as enzimas que conferem resistência a ele, sobrevivendo à ação seletiva. Considerando V (verdadeira) e F (falsa), pode-se afirmar que I, II, III, IV são respectivamente: A) V, V, V, F B) F, V, V, F C) F, F, V, V D) V, V, F, V E) F, V, V, V
06. A tecnologia básica envolvida no processo de engenharia genética difere
em muitos pontos do cruzamento seletivo feito pela genética clássica. Avalie as afirmativas abaixo sobre engenharia genética. I. A possibilidade de transferência de genes é bastante limitada entre organismos de diferentes espécies. II. Na transfecção ou na transformação faz-se a transferência de um gene conhecido, enquanto que no cruzamento seletivo, essa transferência ocorre ao acaso. III. Há barreiras taxonômicas à transferência de genes, ou seja, só pode ocorrer se limitada à troca entre organismos da mesma espécie. IV. A transferência do gene de um organismo para outro ocorre através de um pequeno fragmento de DNA chamado vetor, que pode ser um vírus ou um plasmídeo. Indique a alternativa em que todas as afirmativas são falsas. A) II, III e IV. B) II e III. C) I, II e IV. D) I e III. E) Todas as afirmativas são falsas.
07. O ciclo térmico básico da PCR inicia-se a uma certa temperatura,
prossegue para outra e finalmente vai para uma terceira, quando então recomeça, em média por 30 vezes. Quais são essas temperaturas (na ordem descrita acima) e o que ocorre nelas? A) 56oC – pareamento dos primers; 96oC – extensão de fita pela Taq; 72oC – desnaturação da fita dupla. B) 96oC - desnaturação da fita dupla; 56oC – pareamento dos primers; 72oC – extensão de fita pela Taq. C) 96oC - desnaturação da fita dupla; 72oC – pareamento dos primers; 56oC – extensão de fita pela Taq D) 72oC – pareamento dos primers; 56oC – extensão de fita pela Taq; 96oC - desnaturação da fita dupla. E) 96oC - desnaturação da fita dupla; 72oC – extensão de fita pela Taq; 56oC – pareamento dos primers.
08. Trabalhar com 3 bilhões de pares de nucleotídeos do genoma humano
completo não é uma tarefa fácil. Para se analisar o genoma a primeira etapa é clivar o genoma humano, através da digestão com enzimas de restrição, em fragmentos menores. Os fragmentos de DNA obtidos serão: I. ligados a um plasmídeo (vetor) sob condições que favoreçam a inserção do fragmento de DNA obtido a um vetor de clonagem, esta técnica é chamada de biblioteca genômica. II. introduzidos diretamente na bactéria E. coli que servirá como vetor da biblioteca genômica. III. ligados a vetores de expressão, já que são genes funcionais em potencial, permitindo assim a expressão do gene. A) Somente a afirmativa I está correta. B) Somente a afirmativa II está correta. C) Somente a afirmativa III está correta. D) As afirmativas I e II estão corretas. E) As afirmativas II e III estão corretas.
09. Que características tornam o homem humano? A resposta a esta pergunta,
tão buscada pelos cientistas, pode estar começando a tomar forma. Através de uma comparação entre genomas de humanos, chimpanzés e neandertais, uma equipe internacional formada por 56 pesquisadores constatou que o homem moderno possui genes únicos que o diferenciam de outras espécies hominídeas. A descoberta pode ser a chave para a compreensão da identidade humana. O estudo foi possível graças ao pioneirismo da equipe em iniciar o sequenciamento do genoma dos neandertais, espécie mais próxima dos homens modernos na escala evolutiva. O sequenciamento ainda permitiu à equipe identificar heranças genéticas dos neandertais nos humanos. Os pesquisadores calculam que entre 1% e 4% do DNA dos homens deriva do genoma desses seus parentes mais próximos. O achado sugere que houve reprodução entre as duas espécies há aproximadamente 80 mil anos. Trecho adaptado de Muniz, C. Brecha para o Neandertal. Revista Ciência Hoje 05, 2010 Para o sequenciamento de um genoma, qual biblioteca deve ser escolhida? A) Biblioteca de cDNA, devido ao fato de ser exclusiva para estudo dos genes funcionais. B) Biblioteca de DNA genômico, essa biblioteca contêm importantes sequências funcionais para a expressão gênica. C) Biblioteca de DNA genômico, a qual representa uma amostra de todas as sequências de DNA encontradas em um determinado genoma. D) Uma biblioteca de mRNA que representaria uma amostra de todo o genoma de um determinado organismo. E) Uma biblioteca genômica, que representa todas as proteínas expressas antes de sua morte.
10. A bactéria de solo, Agrobacterium tumefaciens, agente causador de uma
doença na planta que se manifesta na forma de tumores. e que é conhecida como galha de coroa é utilizada na tecnologia de plantas transgênicas devido a: I. serem específicas de solo, introduzindo o RNA viral. II. capacidade de transferir o DNA da bactéria para a célula vegetal. III. capacidade de ser um vetor para a técnica de formação da planta transgênicas. A) Somente a afirmativa I está correta. B) Somente a afirmativa II está correta. C) Somente a afirmativa III está correta. D) As afirmativas I e II estão corretas. E) As afirmativas II e III estão corretas.
11. A agricultura está sofrendo alterações através da introdução de plantas
transgênicas. Atualmente, estas plantas têm sido testadas para a produção de produtos industriais, como óleos, proteínas e produtos farmacêuticos. I. Plantas são hospedeiros favoráveis a este tipo de produção, pois trazem os benefícios de um sistema estável. II. As plantas são consideradas de custo baixo com relação ao crescimento e à manutenção, e como as células animais, geram proteínas complexas capazes de realizar a maioria das modificações exigidas para a obtenção de proteínas funcionais humanas. III. O uso de plantas transgênicas para a produção de produtos industriais ainda não é possível devido ao alto custo para a agricultura. A) Somente a afirmativa I está incorreta. B) Somente a afirmativa II está incorreta. C) Somente a alfirmativa III está incorreta. D) As afirmativas I e II estão incorretas. E) As afirmativas II e III estão incorretas.
12. A possibilidade de manipulação genética do homem tem sido discutida em
todos os meios, desde o científico até a mídia. Em 1990, foi realizado nos Estados Unidos o primeiro ensaio de terapia gênica em humanos, em duas crianças portadoras da Imunodeficiência Combinada Severa ou SCID. A partir deste momento, muitos protocolos pré-clinicos tem sido desenvolvidos, usando diferentes estratégias de transferência gênica. A respeito dessa técnica analise as afirmativas a seguir. I. Primeiro utiliza-se a tecnologia do DNA recombinante. O protocolo envolve a introdução do gene de interesse no organismo alvo. II. O vetor pode se integrar ou não no genoma da célula hospedeira. III. O vetor pode-se apresentar de uma única forma, os plasmídeos, pois são os únicos usados nessa técnica Podemos afirmar que: A) As afirmativas I e II estão incorretas. B) As afirmativas I e III estão incorretas. C) Todas as afirmativas estão incorretas. D) Somente a afirmativa I está incorreta. E) Somente a afirmativa III está incorreta.
13. Com o aumento de informações geradas pelos diversos sequenciamentos
de muitos genomas de organismos diferentes, houve a necessidade de armazenar, analisar e consequentemente divulgar esse grande número de informações. Como os cientistas resolveram este problema? I. Pararam de investir temporariamente em novos avanços biotecnológicos já que não tinham como armazenar tais informações. II. Para a análise houve a necessidade de se criar uma metodologia para a investigação da função gênica em grande escala. III. Foram gerados bancos privados, somente com acesso a comunidade científica. A) Somente a afirmativa I está incorreta. B) Somente a afirmativa II está incorreta. C) As afirmativas I e III estão incorretas. D) As afirmativas I e II estão incorretas. E) As afirmativas II e III estão incorretas.
14. Na técnica da terapia gênica, os vetores usados podem ou não se integrar
ao genoma da célula hospedeira, apresentando maior ou menor estabilidade. Os vetores são mais comumente encontrados em duas formas: na forma viral e na forma de plasmídeo. A respeito dos vetores analise as afirmações e assinale a alternativa correta. I. Na forma de plasmídeo, o gene de interesse é inserido em um plasmídeo de expressão eucariótica, promovendo assim a síntese da proteína desejada nas células ou tecido alvo. II. Na forma viral, o gene substitui regiões gênicas de certos vírus. Essas sequências virais, são geralmente regiões responsáveis pela patogenicidade nos hospedeiros. III. Todos os vetores virais se integram ao genoma humano, expressando assim somente proteínas estáveis. A) As afirmativas I e II estão corretas. B) As afirmativas I e III estão corretas. C) Todas as afirmativas estão corretas. D) Somente a afirmativa I está correta. E) Somente a afirmativa III está correta.
15. Atualmente, grandes avanços biotecnológicos tem gerado grandes
discussões sobre a ética e a biossegurança desses processos. A Biotecnologia é uma das áreas mais promissoras que envolve a biologia molecular. Analise as afirmativas a seguir e assinale a alternativa correta. I. Até os dias atuais não foi realizado o sequenciamento de um genoma por completo. II. Há um aumento da quantidade de informações disponíveis sobre as sequências de DNA obtidas através do sequenciamento de muitos organismos. III. Muitas informações são depositadas diariamente nos banco de dados gerando a necessidade de técnicas para análise em larga escala. A) Somente a afirmativa I está correta. B) Somente a afirmativa II está correta C) Somente a afirmativa III está correta. D) As afirmativas I e II estão corretas. E) As afirmativas II e III estão corretas.