Introdução Biologia Molecular
Introdução Biologia Molecular
Introdução Biologia Molecular
Molecular
Conhecimentos prvios
DNA
estrutura e funo
RNA e protenas
Reao em Cadeia pela Polimerase
Enzimas
de restrio
Mutaes
Gentica Mendeliana
Herana ligada ao sexo
Eletroforese
Qumica
Material gentico
Qumica dos cidos nucleicos
Estrutura do DNA e RNA
Sntese de DNA
Cromossomo eucariotos
Transcrio
Processamento do RNA
Traduo
Enzimas de restrio
Eletroforese
PCR
RT-PCR (Transcriptase reversa)
qPCR ou PCR em Tempo Real
O material gentico
Fluxo
de informao
bases
Podem ser:
Pirimdicas
Pricas
Ribose RNA
Desoxirribose - DNA
dos nucleotdeos
Muito
Estrutura do DNA
Entre 1940 e 1953 vrios
pesquisadores saber: Como o
DNA funciona como a base
gentica da vida?
Em 1953, Watson e Crick,
utilizando a foto produzida por
Rosalind Franklin, propuseram
o modelo da dupla hlice
Quem produziu a foto foi RF,
mas quem levou foi W e C.
Estrutura do DNA
O
modelo Watson-Crick
Utilizando a foto de RF propuseram o modelo
com as seguinte caractersticas:
Estrutura do DNA
O
modelo Watson-Crick
As bases das cadeias
opostas esto pareadas
Pontes
de Hidrognio
ocorrem entre AT e CG
Estrutura do DNA
O
modelo Watson-Crick
A estabilidade da dupla
hlice ocorre pelas pontes
de hidrognio entre as
hlices
As bases nitrogenadas
so hidrofbicas
Os acares e fosfatos
so hidroflicos
Estrutura do DNA
Modelo
de WeC
para a estrutura do
DNA
Estrutura do RNA
A
Alguns
Estrutura do RNA
H
Mas
tambm temos
A sntese do DNA
Replicao
as cadeias
complementares so
sintetizadas.
Aps as fitas novas so
unidas entre si e as
moldes se reassociariam
Replicao
conservativa
dispersiva
A sntese do DNA
A
sntese biderecional
Na
A sntese do DNA
A sntese do DNA
Cromossomos eucariotos
No ncleo
Cromossomos eucariotos
Meninas
Meninos
Cromossomos eucariotos
Alelos
Cromossomos eucariotos
Aos conceitos
Cromossomos eucariotos
continuao
Transcrio
Componentes
RNA
da transcrio:
polimerase
DNA
Nucleotdeos
Transcrio
O
sntese do RNA
complementar a uma
das fitas de DNA
A fita de DNA que
codifica chamada
de fita molde
A outra chamanda
de fita complementar
Transcrio
Na
Transcrio
Observe
Transcrio
Fita senso
Fita anti-senso
Processamento do RNA
O gene transcrito de um
eucarioto:
Eucarioto
Processamento do RNA
Capeamento
5 (quepe)
Processamento do RNA
Poliadenilao
Processamento do RNA
Splicing
Processamento do RNA
Protenas
contendo snRNPs
(pequenas
ribonucleoprotenas
nucleares) reconhecem estes
locais de clivagem
Processamento do RNA
No
local que
ocorre o splicing
h uma sequncia
que indica onde
as snRNP devem
se ligar
H diferentes
snRNPs
Processamento do RNA
Splicing
alternativo
Introns de um mesmo
gene so processados
de formas diferentes
(alternativa)
Produz diferentes
mRNAs semelhantes,
mas no idnticos
Aumenta a diversidade
de enzima (so as
isoformas)
Atualidades
Traduo
RNA mensageiro
Cdon de iniciao
AUG
Cdon de terminao
UAA UGA UAG
CAP
Poli (A)
Protena
Traduo
Construindo
Iniciao
uma protena
Traduo
Construindo
Elongao
uma protena
Traduo
Construindo
Terminao
uma protena
Enzima de Restrio
A enzima reconhece o
stio (normalmente um
PALINDROMO)
AMOR = ROMA
Forma extremidades
Eletroforese
Mtodo
que permite
separar molculas pelo
tamanho
Est
baseada na carga do
DNA (negativa)
Eletroforese
Mutaes um exemplo
Mutagnese
PCR
VIDEO
rtPCR
Transcrio
Reversa PCR
Rt-PCR
Gene alvo
(DNA)
Extrao
de mRNA
Transcriptase
reversa
RNA - DNA
Dupla fita de
RNA/DNA
Rt-PCR
Remoo do RNA
com RNAase
Sntese da fita
complementar
de DNA
PCR - DNA
Rt-PCR
PCR
Baseado na PCR
Contm os mesmos elementos bsicos, mas neste caso
adicionado uma sonda fluorescente
Constante deteco e monitoramento dos produtos durante
toda a reao de amplificao (emisso de fluorescncia)
green
FIM