Protocolo de Necropsia Ballena Franca Austral Versión Preliminar 2014
Protocolo de Necropsia Ballena Franca Austral Versión Preliminar 2014
Protocolo de Necropsia Ballena Franca Austral Versión Preliminar 2014
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Prevalence and magnitude of plastic exposure (macro and microplastics and select chemical compounds) in albatrosses and petrels off the shores of Argentina and
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Versión preliminar
4 Wildlife Health & Health Policy Program, Wildlife Conservation Society, Argentina
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
2
ÍNDICE
Páginas
1. Prefacio y agradecimientos…………………………………………………………......... 3
2. Características generales de los cetáceos y de la ballena franca austral…………........ 4
3. Programa Monitoreo Sanitario Ballena Franca Austral……………………………....... 7
4. Salud Humana y protección personal………………………………………………........ 8
5. Equipo de necropsia…………………………………………………………………..…… 10
6. Metodología de campo………………………………………………………………....... 14
7. Protocolo de necropsia:
Introducción…………………………………………………………………………..... 16
i. Información general………………………………………………………………... 17
ii. Fotografías………………………………………………………………………….. 23
iii. Morfometría………………………………………………………………………… 23
iv. Examen: consideraciones generales………………………………………………. 24
v. Examen externo……………………………………………………………………. 25
vi. Toma de muestras externas……………………………………………………….. 35
vii. Medidas del grosor de grasa………………………………………………………. 39
viii. Examen interno…………………………………………………………………….. 40
ix. Toma de muestras internas………………………………………………………... 57
8. Almacenamiento de muestras en el campo…………………………………………….. 60
9. Resumen de análisis que se realizan con las muestras según la condición corporal… 65
10. Envío de muestras y permisos……………………………………………………………. 66
11. Bibliografía consultada……………………………………………………………………. 71
12. ANEXOS…………………………………………………………………………………… 76
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
3
PREFACIO
El presente protocolo se basa en la experiencia adquirida dentro del marco del “Programa
Monitoreo Sanitario Ballena Franca Austral” (PMSBFA) que se desarrolla desde el año 2003
en Península Valdés, provincia de Chubut, Argentina. Las técnicas de necropsia y toma de
muestras que se describen están dirigidas principalmente al estudio de crías de ballena franca
austral, ya que esta categoría etaria compone cerca del 90% de las muertes registradas en la
zona.
Este protocolo se desarrolló con la intención de establecer una guía práctica de campo que
permita brindar una respuesta inmediata y coordinada a uno o varios varamientos
simultáneos, así como para asegurarse de que se realiza una adecuada y completa colecta
de información, una correcta preparación, toma y almacenaje de muestras, y una adecuada
preparación de las mismas para su envío a laboratorios de diagnóstico.
Todas las fotografías del presente manual fueron tomadas dentro del marco del Programa y
las Figuras son obra de la autora.
AGRADECIMIENTOS
La colaboración y la información aportada por William McLlean, Michael Moore, Darlene
Ketten, Matías Di Martino, Carina Marón, Javier Millán y Lucas Beltramino fueron cruciales
para el armado de este protocolo.
La información recogida durante los 10 años del PMSBFA no hubiese sido posible sin el
inestimable apoyo de un sin número de voluntarios y el financiamiento aportado por
diversas organizaciones y personas.
Personas.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
4
CETÁCEOS
El nombre Cetacea proviene del
griego κήτος (ketos), "gran animal
marino" y del latín -aceum, "relación
o la naturaleza de algo". Los cetáceos
(Cetacea) son un orden de mamíferos
que viven exclusivamente en
ambientes acuáticos, no necesitando
de tierra firme para parir. Se divide
en dos grandes grupos o subórdenes:
Mysticeti (deriva del griego
mystax=bigote y cetus=cetáceo, es
decir, cetáceos barbados) que se
alimentan filtrando el alimento del
agua y Odontoceti (deriva del griego
odonto=diente) que se alimentan
cazando.
CONSERVACIÓN
Muchas especies de cetáceos han sido sobre-explotadas, y hoy se encuentran en peligro de
extinción. Durante siglos, los cetáceos fueron cazados para obtener diferentes productos,
como aceite de ballena, grasa, espermaceti, barbas, ámbar gris y carne, entre otros.
La Convención Internacional para la Regulación de la Caza de Ballenas, en vigencia
desde 1948, regula la explotación de cetáceos, y es administrada por la Comisión Ballenera
Internacional (CBI, http://iwc.int/convention.htm). A causa del descenso en sus poblaciones,
en 1986 se estableció una moratoria que prohíbe su caza comercial. No obstante, se permite
a ciertas comunidades continuar con la cacería de subsistencia y caza de ciertas especies de
ballenas con fines científicos.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
5
PROGRAMA DE MONITOREO
SANITARIO DE LA BALLENA FRANCA
AUSTRAL
En el año 2003, las ONGs Wildlife Conservation Society (WCS) y
el Instituto de Conservación de Ballenas (ICB) / Whale
Conservation Institute (WCI) fundaron el Programa de
Monitoreo Sanitario de la Ballena Franca Austral (PMSBFA) en la
Península Valdés (PV), provincia Chubut, Argentina (Figura 2). Posteriormente se sumaron
las organizaciones locales Fundación Patagonia Natural (FPN) y Fundación Ecocentro.
Actualmente lo llevan a delante la WCS, ICB/WCI, FPN, y las Universidades de California,
Davis y Utah.
La población de ballenas francas que visita anualmente PV es una de las más grandes del
mundo (unos 3400 individuos, IWC 2012) y utiliza estas zonas como área de cría y
reproducción durante los meses de mayo a diciembre. Debido a las características
topográficas y oceanográficas de las playas de PV, como son sus pendientes leves y sus
grandes amplitudes de marea, es frecuente el hallazgo de ballenas muertas varadas en las
costas de ambos golfos, el Golfo Nuevo y el Golfo San José. Esto hace de PV un lugar
excepcional y único en el mundo para la evaluación del estado sanitario de la especie.
Área de estudio:
Península Valdés
1
PVPV
2
Causas de varamientos
Cuando una ballena muerta o viva nada o flota hacia la costa y se encalla y es incapaz de
regresar al mar, el evento se denomina “varamiento” (Geraci et al. 1999). Se han descripto
varias causas por las que uno o más cetáceos se varan en las costas. Entre las reportadas con
mayor frecuencia se encuentran las enfermedades infecciosas (causadas por virus, bacterias y
hongos), malnutrición, intoxicación por biotoxinas producidas por floraciones de algas
nocivas, contaminantes ambientales y traumatismos (impacto con embarcaciones, ataques
por depredadores, etc.). Una mortalidad inusual se considera según el "Marine Mammal
Protection Act” (http://www.nmfs.noaa.gov/pr/laws/mmpa/) como al varamiento inesperado,
que implica una significativa mortandad de cualquier población de mamíferos marinos, y
que exige una respuesta inmediata. Las causas de mortalidades inusuales en cetáceos, sus
factores predisponentes y los efectos en la población afectada sólo han sido estudiadas en
una pequeña fracción de casos (Geraci & Lounsbury 2005, Dierauf & Gulland 2001).
Durante sus 11 años de trabajo continuo el Programa ha ido adquiriendo importancia y
reconocimiento tanto a nivel local como internacional, convirtiéndose en una herramienta
esencial para monitorear el estado de la población de BFA de PV. Mientras que el número
de ballenas muertas registradas anualmente en PV ha sido muy variable, la mortalidad
registrada desde el 2007 es inusualmente elevada y preocupante (Rowntree et al., 2013). En
particular, en el año 2012 murieron 116 ballenas, lo cual representa el número de ballenas
muertas en una temporada más alto jamás registrado para esta especie en el mundo. Hasta
el momento se desconocen las causas específicas de dicha mortalidad, aunque se trabaja
sobre cuatro hipótesis principales: 1- Enfermedades infecciosas; 2- Biotoxinas; 3-
Malnutrición; 4- Lesiones y acoso por gaviotas, siendo las hipótesis 3 y 4 sobre las que
actualmente se focalizan muchos análisis.
Permisos de investigación
El PMSBFA opera cada año durante el tiempo que las BFA permanecen en PV, entre el 15
de junio y el 15 de diciembre. Se requiere de permisos de entidades gubernamentales
provinciales para poder realizar actividades de investigación que involucren a especies de la
fauna en la provincia de Chubut. Por lo tanto, para poder realizar la necropsia y toma de
muestras de ballenas francas varadas muertas en PV, el proyecto debe ser primero aprobado
por la Dirección de Fauna y Flora Silvestres (DFyFs, http://organismos.chubut.gov.ar/fauna/,
[email protected]) y Dirección General de Conservación de Áreas Protegidas,
Subsecretaría de Turismo y Áreas Protegidas (http://www.chubutpatagonia.gob.ar). Los
documentos necesarios para la gestión de los permisos de investigación se encuentran en el
ANEXO 1. Se requiere de un mínimo de 3 meses para gestionar los permisos previos a cada
temporada de ballenas y es necesario renovarlos cada año. Antes de enviar la solicitud se
debe seleccionar a los voluntarios que van a participar en el PMSBFA para incluirlos en los
permisos de investigación. Los voluntarios son generalmente estudiantes de biología o
veterinaria, y se seleccionan preferentemente aquellos con experiencia previa.
por motivos logísticos y al propio tamaño de las ballenas francas, el cuerpo del animal
diseccionado se deja en el lugar del varamiento, ya que no se pueden mover o enterrar. En
caso de vararse en playas públicas (playa de Puerto Madryn y Pirámides y otras ubicadas
sobre el Golfo Nuevo), se debe coordinar con la Dirección de Fauna y Flora de la provincia
y los municipios respectivos para que Prefectura Naval Argentina traslade al individuo
intacto a una playa alejada para poder realizar el estudio forense. En estos casos, para
realizar el traslado del cadáver por agua es necesario atar el pedúnculo caudal de la ballena
a una soga y asegurarla a una embarcación adecuada para el remolque del individuo hasta
el lugar indicado. Es indispensable realizar esta maniobra con marea alta.
Riesgos químicos. Se debe manipular con extremo cuidado la formalina (conservante
tóxico y potencialmente cancerígeno). Se debe trasportar siempre en envases herméticos y
dentro de una bolsa hermética tipo ziploc. Usar siempre guantes y mascarillas de protección
y trabajar en áreas ventiladas. En la página 63 se describe el método apropiado para
descartar la formalina.
Riesgos físicos. Se recomienda usar muñequeras y faja lumbar para la propia salud personal
(Figura 4). Con respecto al vehículo utilizado por el PMSBFA, antes de iniciar la temporada
de ballenas debe ser llevado al mecánico para una revisión completa. Antes de cada salida
al campo se debe comprobar los niveles de aceite, la presión de los neumáticos (inclusive la
de auxilio) y que el tanque de combustible esté lleno. Toda persona que se suba al vehículo
del Programa debe estar asegurada.
EQUIPO DE NECROPSIA
1) MATERIAL DE NECROPSIA
Cuando se trabaja en condiciones de campo, en donde la mayoría de las veces para llegar
al lugar de varamiento hay que recorrer distancias muy largas caminando, lo recomendable
es llevar el menor peso posible (Fotos 1 y 2). El material de necropsia consta de 2 mochilas
grandes de 60-80 litros cada una. Una se destina a los materiales de toma de muestras y la
otra a los waders, botas y elementos de limpieza (“mochila sucia”); una mochila chica (para
las planillas, útiles, GPS y cámaras de fotos); el instrumental (cuchillos, ganchos, gubias,
etc.), que se lleva dentro de una caja o, lo que es más práctico, en el interior de uno o dos
tubos de PVC con tapas; y las conservadoras. En caso de que el varamiento se encuentre
cerca de la camioneta se puede disponer de más materiales, como baldes, varillas para la
cinta de peligro, serrucho, repuesto de material y vestimenta, caja de herramientas, mantas,
bidones de agua, malacate, cabos, trajes de neopreno, centrífuga, tanque de nitrógeno
pequeño, etc. (Ver listado completo en ANEXO 3).
LISTADO:
METODOLOGÍA DE CAMPO
Se describen a continuación todos los pasos a seguir cuando se reporta o encuentra una
ballena varada muerta en la playa.
La red de IVs está integrada por guardafaunas, pescadores, pobladores locales, personal de
empresas de avistamiento de ballenas, de buceo y de turismo, guías, navegantes, aviadores,
marisqueros, investigadores, ONGs y autoridades locales como la Prefectura Naval Argentina
que se encuentran distribuidos alrededor de la península (ver Figura 5). Esta red es un
elemento esencial para el éxito del PMSBFA, ya que una gran proporción de los animales
encontrados en la playa son reportados por algún miembro de la misma.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
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Los relevamientos pueden ser terrestres (con camioneta, a pie o en cuatriciclo) o aéreos. Los
vuelos presentan la ventaja de recorrer en poco tiempo la totalidad del perímetro costero
(497 km), mientras que con los terrestres muchas zonas quedan sin relevar debido a que
dentro de la Península Valdés hay lugares inaccesibles por tierra. Desde 2006 el Aeroclub de
Puerto Madryn colabora con el PMSBFA para los relevamientos aéreos, los cuales se han
sistematizado desde 2009, realizándose cada 15 días en función de las condiciones climáticas.
6. Almacenar las muestras tomadas al regresar del campo (reemplazar formol usado en las
muestras con formol “limpio”). Revisar los rótulos nuevamente y que los envases estén
bien cerrados.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
INTRODUCCIÓN
El principal objeto de las necropsias es determinar la causa de muerte. El examen forense de
un cadáver genera una serie de observaciones generales macroscópicas que permiten
establecer un diagnóstico diferencial de posibles procesos patológicos asociados al deceso del
animal. Investigaciones posteriores, como los análisis histopatológicos o microbiológicos,
ayudan a descartar o confirmar posibles agentes causales y aproximarse a un diagnóstico
definitivo. Frecuentemente, esto no es posible debido a que una gran parte de las ballenas
encontradas muertas en las costas de Península Valdés y sus alrededores se encuentra en
avanzado estado de descomposición y el valor diagnóstico de las muestras colectadas en
estos casos es limitado. De todos modos, el examen de los animales muertos y la colecta de
muestras deben ser siempre exhaustivos y detallados. Aun cuando la causa de muerte no sea
fácil de identificar, el valor de la información colectada de los animales muertos no debe de
ser minimizado. El estudio sistemático de las ballenas varadas permite entre otras cosas,
realizar un seguimiento de las tendencias poblacionales de la especie, aprender sobre
nutrición, genética, biología, salud, etc.
El protocolo de necropsia se divide en 9 secciones:
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
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I. Información general
II. Fotografías
III. Morfometría
IV. Consideraciones generales sobre el examen
V. Examen externo
VI. Toma de muestras externas
VII. Medidas del grosor de grasa
VIII. Examen interno
IX. Toma de muestras internas
X. Almacenamiento de muestras en el campo
I. INFORMACIÓN GENERAL
Una vez llegado al lugar del varamiento, lo primero que debe hacerse es vestirse con la ropa
apropiada y descargar todo el equipo, dejándolo listo para efectuar la necropsia.
Antes de empezar con el examen externo el “planillero” registra toda la información general
en la planilla de necropsia (ver planilla de INFORMACIÓN GENERAL utilizada por el
PMSBFA en ANEXO 4). Esta información incluye:
Fecha: es importante escribir el mes con letras para evitar confusiones del día y mes con
los sistemas estadounidenses
Hora de inicio y finalización de la necropsia
Si el animal se encuentra vivo o muerto al llegar a la zona del evento
El sexo. En ocasiones la disposición del cuerpo puede impedir definirlo mediante
observación externa, siendo en estos casos necesarios esperar al examen interno para
poder sexar al individuo mediante observación directa de las gónadas.
La clase de edad: Se establecen 3 clases en función de las siguientes características:
Tamaño Características
Crías Menos de 9 La distancia entre hocico y espiráculo representa el 15-16% del largo
metros total. Desde el nacimiento hasta el destete junto a la madre.
Juveniles Entre 9-12 La distancia entre hocico y espiráculo representa el 17-19% del largo
metros total. Se considera juvenil desde el destete y separación de la madre
hasta la edad reproductiva (5 años).
Adultos Más de 12 La distancia entre hocico y espiráculo representa más del 20% del
metros largo total. A partir de los 5 años y comienzo de la actividad
reproductiva.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
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El tamaño de la cabeza de las ballenas francas aumenta en relación con el largo total del
cuerpo a medida que los individuos crecen. A modo de guía, el largo exterior de la cabeza
(medido desde el extremo anterior del rostro hasta el centro de los espiráculos) representa
aproximadamente el 15-16% del largo total del cuerpo (medido desde el extremo anterior
del rostro hasta la escotadura de la aleta caudal) en las crías, el 17-19 % en los juveniles y el
20% o más en los adultos (Sironi, 2004, Sironi et al., 2005).
Dentro de la clase “crías” se establecen cuatro categorías en función a las siguientes
características:
metros en esa época se debe considerar como cría del año anterior. En cambio, si nos
encontramos a fin de temporada (noviembre a diciembre) con una cría de 9 metros,
deberíamos considerarla nacida en la temporada. Por otra parte, se debe tener en cuenta
que las crías de madres grandes nacen con una longitud mayor respecto a aquellas que nacen
de madres pequeñas.
lo que el calor producido por el cuerpo no puede escapar, acelerando la autólisis de los
órganos y tejidos internos. De este modo, los animales con menor grosor de grasa y sin piel
tardan más en descomponerse que aquellos con mayor grosor de la capa de grasa.
Foto 14. Posición LATERAL DERECHA Foto 15. Posición LATERAL IZQUIERDA
Figura 7: Mapa de Península Valdés que muestra en color verde las playas y lugares donde se varan con
mayor frecuencia las ballenas y en amarillo las puntas geográficas.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
23
II. FOTOGRAFÍAS
Las fotografías sirven como complemento visual a los registros
escritos de cada parte examinada y son de suma importancia
para los patólogos, ya que representan la evaluación
macroscópica de una lesión que luego se complementa con la
observación microscópica para su diagnóstico final. Por lo tanto,
el rol del fotógrafo es fundamental. Su función comienza a la
hora de arribar al varamiento, fotografiando de forma Foto 18. Moneda como
panorámica todos los lados del animal varado y todos sus unidad de medida.
partes externas de forma individual (espiráculo, globo ocular,
boca, área umbilical, hendidura genital y ano) prestando
especial atención a la posible presencia de lesiones debidas a
interacción humana como marcas de enmalles, colisión con
embarcaciones o algún otro evento traumáticos como también
las lesiones causadas por gaviotas en la línea media dorsal del
animal. Continúa luego tomando fotografías a medida que se
van colectando las muestras externas e internas. Tiene que
registrar todos los órganos y tejidos, tanto aquellos con Foto 19. Regla como unidad
apariencia anormal como normal. Debe tomar todas las fotos de medida.
posibles, ya que muchas veces quedan mal encuadradas o el
flash y las sombras pueden enmascarar lo que se trata de mostrar. Por lo tanto el trabajo de
un fotógrafo no cesa hasta que se termine la necropsia. Siempre se debe usar una unidad de
medida o regla en cada fotografía en la que se muestra un detalle (Foto 18 y 19). Se
recomienda usar una hoja plastificada que incluya una medida de referencia y en la que
además se pueda escribir con rotulador indeleble el órgano o tejido que está fotografiando.
III. MORFOMETRÍA
Los datos morfométricos brindan información que
permite estimar la edad, las tasas de crecimiento,
estado reproductivo y los procesos de enfermedad
en las poblaciones de ballenas. Todas las medidas
corporales se toman de forma rectilínea (no tomar
contornos) y en metros, excepto las mediciones de
grasa que se toma en centímetros. Para el caso de
medidas que van de trompa inferior hacia caudal
V. EXAMEN EXTERNO
El examen externo completo de una ballena debe incluir una descripción detallada del
estado de los ojos, cavidad bucal, espiráculo, piel, callos, ombligo o cordón umbilical, área
genital y ano.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
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La Figura 8 muestra la localización de las partes externas de una ballena, vista lateral. (Ver
planilla usada por el PMSBFA en ANEXO 7).
Primero se realiza un minucioso examen externo en busca de cicatrices o heridas debidas a
interacción humana (hélices, red de pesca, embarcaciones) y posteriormente se procede a la
evaluación de cada una de las partes externas del animal, en busca de cualquier otro indicio
que sugiera la causa de muerte.
a) EVALUACIÓN DE
INTERACCIÓN HUMANA
Para llevar a cabo la evaluación de
interacción humana (IH) hay que
desarrollar una rutina y seguirla en cada
varamiento (ver planilla usada por el EXAMEN EXTERNO:
PMSBFA en ANEXO 8). En estos casos
hay que ser conservador y objetivo al
tratarse de un tema delicado y una
especie emblemática. Hay que a) Evaluación de interacción
humana
documentar absolutamente TODO, b) Evaluación de condición
tanto en las planillas como con corporal
fotografías (no olvidar en ellas la unidad c) Evaluación de la piel
de medida y tomarlas desde todos los d) Evaluación de ectoparásitos
ángulos y de forma oblicua). Es mejor e) Evaluación de los cayos
descartar muestras y fotos en exceso, que f) Evaluación del espiráculo
lamentar no haberlas tomado. Medir g) Evaluación de la cavidad
bucal
cada marca/lesión encontrada (todas sus
h) Evaluación de los ojos
dimensiones) y tomar muestras para i) Evaluación del ombligo o
histopatología de secciones marcadas y cordón umbilical
vecinas para determinar si las marcas o j) Evaluación de la hendidura
lesiones fueron ocasionadas antes o genital y glándulas mamarias
después de la muerte del animal. k) Sexado de la ballena
Siempre consultar con especialistas en el
tema (tanto veterinarios como
pescadores, etc.).
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
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Evidencia de IH:
1) Marcas o líneas de pesca: la
interacción con artes de pesca
es la forma más sutil y variada
de interacción humana. Su
detección en cetáceos es fácil
en comparación con otros
mamíferos marinos debido a las
marcas que dejan en su piel.
Ocurren principalmente en los
bordes de la cabeza, aletas
pectorales y pedúnculo. Las líneas de pesca están hechas de varios filamentos de un
material como nylon, polipropileno, cáñamo, o algodón, que se entrelazan para formar
un cabo. Por otra parte, también están los hilos que forman las mallas de las redes. Estos
pueden ser de un filamento o de varios (monofilamento
o multifilamento, ver Figura 10, 11 y 12) y se entrelazan
formando nudos. Hay de
varios materiales y las
mallas de las redes
pueden tener a su vez
varias combinaciones
(redes sencillas flotantes,
de fondo, redes mixtas,
con armazones o redes Figura 11. Red monofilamento.
de batir). Las ballenas se
pueden enredar con las
líneas de pesca (cabos) o
las mallas de las redes.
Figura 10. Hilo de malla Por otra parte está la
mono y multifilamento. pesca con palangre
(palangre de fondo,
semi-pelágico y pelágico), que no posee red pero sí un
cabo, ganchos y boyas. La ballena se puede enganchar
con cualquiera de estas partes.
Figura 12. Red multifilamento
MULTIFILAMENTO.
Características generales de las lesiones por líneas o redes de
pesca:
Las impresiones causadas por las líneas o redes de pesca
desaparecen rápidamente a medida que el cadáver se seca o
se quema la piel con el sol. Las abrasiones se dan con líneas
o hilos con mayor diámetro y las laceraciones con líneas o
hilos de menor diámetro (monofilamentos especialmente).
Las marcas en la piel causada por las redes son variadas, Figura 13. Marcas en la piel
pero las formas en “X” sobre la piel son características. Si el causadas por hilo:
A) monofilamento; B) hilo
multifilamento y C) línea de pesca
multifilamento.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
29
Foto 21. Hematoma en la región dorso- Foto 22. Fractura de cráneo de una cría
lateral de la cabeza y alrededor del ojo de ballena.
izquierdo de una cría de ballena.
Interacciones indeterminadas:
Marcas naturales o desconocidas, predación por orcas o tiburones, carroñeros
como los armadillos, gaviotas y petreles que destruyen todo tipo de evidencia (ver
Foto 23), y cadáveres en descomposición causan confusión al momento de evaluar
el integumento. Debido a que la piel en los cetáceos es muy sensible, cualquier
contacto con la misma deja marca, por lo que cuesta distinguir entre lo natural o
lo causado por actividades antrópicas. Además, cuando la muerte se produce en el
agua, la piel se degrada en poco tiempo y se desprende, mientras que si la ballena
queda varada al sol, la piel se seca rápidamente y se cuartea. El efecto de las
mareas y las olas hace que la piel de la ballena varada muerta se lesione con las
restingas, causando lesiones post-mortem. Por otra parte, cuando una lesión causa
la muerte inmediata, no se produce una reacción tisular, y en tal caso no se puede
saber si ocurrió pre-mortem o post-mortem. Por otro lado, en muchos casos no se
puede realizar un examen externo completo porque el peso de las ballenas
(excepto cuando se trata de individuos muy chicos) no permite darle la vuelta.
En general, y debido al gran número de factores que pueden llevar a confusión, se
debe tener en cuenta todas las variables explicadas anteriormente. Aun así, en la
mayoría de los casos se evalúa la IH como “indeterminada”.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
31
c) EVALUACIÓN DE LA PIEL
Se describe si está presente, si se ve normal, anormal (si presenta lesiones, engrosamientos,
cicatrices, etc.), descompuesta debido a cambios post-mortem o carroñeada. Si presenta
lesiones, basarse en las descripciones detalladas en la Pág. 24 en el sector “Tipo de Lesiones
externas dentro de Examen externo”. Se debe describir también la apariencia de la piel; si se
encuentra muy elástica, elástica, cuarteada o si le falta piel, en cuyo caso se debe anotar el
porcentaje de piel ausente (Foto 24).
Foto 24. Tipos de apariencia de piel encontradas en necropsia: a) piel normal; b) piel
carroñeada y c) sin piel
Foto 25. Izquierda: sección de piel Foto 26. Sección de una lesión tipo
carroñeada normal. Derecha: sección de “cráter” ocasionado por los picotazos de
piel con lesión ante-mortem por gaviota. gaviota ante-mortem.
La coloración rojiza se debe a la
congestión hipostática.
d) EVALUACIÓN DE ECTOPARÁSITOS
Las ballenas francas poseen ectoparásitos de 2 tipos desde
poco tiempo después de nacer. Los que vulgarmente la gente
llama “piojos”, se denominan ciámidos (Foto 27), y son
crustáceos anfípodos de la familia Cyamidae que se alimentan
de la piel de la ballena y permanecen toda su vida en su
superficie. Prefieren las zonas de los cayos, bordes de los
labios, espiráculo, ombligo, abertura genital, alrededor de los Foto 27. ciámidos sobre la piel
ojos y en los pliegues de la piel. Son específicos de especie y en de una ballena muerta.
la BFA existen tres especies: Cyamus erraticus, C. gracilis y C.
ovalis. Por otro lado las BFA pueden presentar cirripedios
(Tubicinella major) que son crustáceos pertenecientes a la
familia Balanidae, y son endémicos en las ballenas francas
australes. Durante la evaluación externa, se debe anotar si
están vivos, muertos o ausentes en el cadáver, así como
describir color, cantidad, y ubicación de los mismos. La
j) SEXADO DE LA BALLENA
El sexo se define por la distancia entre ombligo, hendidura genital y ano (ver Figura 17 y
Foto 34 y 35),
Foto 34. Abertura genital junto al ombligo Foto 35. Hendidura genital junto al ano y
y ano separado en una cría macho. separada del ombligo de una cría hembra.
a -20 C. También se puede usar la porción de barba unida a la encía para análisis
genéticos, colectando una pequeña parte de la misma en criovial con RNAlater y
conservarlo en freezer a -20º C.
Recomendación de cómo extraer barbas en crías de ballena: Muchas veces la boca del
animal se encuentra abierta debido a que la lengua se edematiza (cambio post-mortem)
exponiendo las barbas (Foto 37). Otras veces sucede lo contrario, encontrándose la boca
cerrada, ocultando las barbas (Foto 38). En este último caso lo ideal es cortar el labio inferior
para dejar las barbas visibles (Foto 39 y 40). Luego se procede a la extracción de una o dos
barbas de las más largas que
Ventral de la cabeza Ventral de la cabeza suelen ser las centrales.
Primero se coloca el cuchillo
entre 2 barbas y se corta
hasta llegar al hueso del
maxilar superior. Se repite el
procedimiento en la cara
opuesta de la barba (Foto
41). Luego se hacen
Foto 39. Cortando labio inferior Foto 40. Sección total del labio
movimientos hacia delante y
de una cría varada muerta para inferior para exponer las barbas,
exponer barbas, posición del posición del cadáver en lateral atrás (Foto 42 y 43) y la
cadáver en lateral derecho. derecho. barba debe salir con facilidad
(Foto 44).
Dorsal Dorsal
Foto 41. Cortando con el cuchillo en la Foto 42. Moviendo la barba hacia arriba
profundidad del labio superior hasta para sacarla de su lugar. Posición del
llegar al maxilar. Posición del cadáver en cadáver en ventro-dorsal.
ventro-dorsal.
Dorsal Dorsal
Foto 43. Moviendo la barba hacia arriba Foto 44. Extracción total de barba.
para sacarla de su lugar. Posición del Posición del cadáver en ventro-dorsal.
cadáver en ventro-dorsal.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
37
Figura 18. Esquema de extracción del globo ocular en una ballena muerta.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
38
Foto 46. Extracción del globo ocular en una cría varada muerta.
Sangre. Los principales puntos donde intentar extraer sangre en una ballena muerta son:
el paladar duro, el pedúnculo o de los vasos del ojo al extraerlo. Si no es posible,
directamente del corazón durante el examen interno (ver Fotos 47, 48 y 49). Si la sangre
se extrae del pedúnculo, se debe hacer un corte en “V” para que la sangre salga en
cantidad y así poder recolectarla en un frasco. Del paladar, hacer un corte transversal y
recolectar la sangre en un frasco. Sacar del frasco inmediatamente la sangre con jeringa
para realizar los siguientes procedimientos:
Foto 47. Sección total del Foto 48. Vasos sanguíneos en la Foto 49. Paladar duro
pedúnculo para mostrar vasos zona ventral del pedúnculo de sangrando. Área muy
sanguíneos en la zona ventral una cría varada muerta. vascularizada para extracción de
del pedúnculo. sangre.
-Realizar extendidos en
portaobjetos con sangre
fresca, dejar secar al aire en
un lugar protegido del
viento y la arena, y luego se
deben fijar con metanol para
su posterior tinción. Sólo se
deben realizar extendidos de
Foto 51. Aplicando gotas de Foto 50. Aplicando gotas de
sangre de animales en sangre entera en tarjeta
sangre entera en tarjetas FTA
Whatman Card. Whatman para estudios de
biotoxinas.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
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Correcto Incorrecto
TÉCNICAS DE NECROPSIA:
Extracción de piel, grasa y músculos axiales: Independientemente de la posición en que
se encuentre el cadáver, se hace un corte longitudinal dorsal de la piel junto a la grasa y 2
cortes laterales lo más próximos al suelo posible (ayuda a que las vísceras caigan hacia fuera
y no queden retenidas en la cavidad abdominal, y a su vez en cadáveres muy descompuestos
en donde todo el contenido se encuentra licuado, este corte ayudará a que salga todo el
líquido al exterior). A continuación, realizar cortes transversales cada 50 cm o menores para
formar paneles rectangulares (Foto 55). Posteriormente se empieza por un panel, separando
con un cuchillo el tejido subcutáneo del músculo (Foto 56). Repetir el procedimiento hasta
dejar expuesta sólo la capa muscular de un lado (Foto 57, 58 y Figura 20, apartado A) para
luego repetir la maniobra del lado opuesto. Independientemente de la posición del animal,
en la región de las aletas pectorales, separar la cabeza del húmero de la escápula,
diseccionando la cápsula articular, para poder extraer el panel de piel junto a la aleta y así
dejar la escápula para su disección posterior. Una región dificultosa es la genital y anal. Aquí
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
41
se debe evitar cortar sobre la hendidura y ano por la gran cantidad de tejido conectivo y su
grosor, debiendo hacerse siempre el panel alrededor de la hendidura. Mientras se van
separando los paneles se va inspeccionando simultáneamente la grasa y músculo en
búsqueda de posibles hematomas u otras lesiones. Es recomendable dejar los paneles con la
piel tocando la arena y la grasa y el tejido subcutáneo hacia arriba para poder utilizarlos
como mesa para apoyar órganos y evitar que se contaminen. Una vez documentada la
inspección de la grasa y músculo proceder a la extracción de la escápula para inspeccionar
ganglios axilares (Foto 59,60, 61, 62 y Figura 21).
Foto 55. Primeros cortes de piel y grasa Foto 56. Primer panel separado.
en una ballena muerta.
Foto 57. Separando el tejido subcutáneo Foto 58. Disección de piel y grasa de un
del músculo. lado.
Figura 20: Disección de piel, grasa y musculatura en una cría de ballena cuando se encuentra en
posición lateral izquierda.
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Foto 59. Levantando borde superior de Foto 60. Sección de ganglio axilar.
escápula. Circulo en rojo delimitando área
de ganglios axilares.
Foto 61. Disección de escapula en una cría Foto 62. Aleta exponiendo cabeza humeral
de ballena varada muerta en posición y escapula mostrando inserción de la
lateral derecha. cabeza.
GRASA: la grasa de los cadáveres frescos debe ser de consistencia firme, lisa y color
blanquecino y levemente aceitosa (Foto 63). Hay grasas frescas pero con color de rosado a
rojo por la lividez hipostática. A medida que la grasa se descompone se va ablandando, su
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coloración se torna más rosada (Foto 64) o amarillenta y es muy aceitosa. A medida que va
perdiendo todo el contenido graso, va quedando el tejido conectivo en forma de hebras.
Evaluar grasas con condición 2 y 3 para determinar la presencia de hematomas u otras
anormalidades. Las mediciones sistemáticas del grosor de la capa de grasa a lo largo de los
años de estudio se efectúan para evaluar el estado nutricional de los animales.
Foto 63. Grasa firme y de color Foto 64. Grasa blanda, de color rosada,
blanquecino: condición 2. aceitosa: condición 3.
LINFONÓDULOS TRAQUEOBRONQUIALES:
Se localizan a lo largo de la superficie ventral del
pulmón, en la parte craneal del mismo, cerca de la
bifurcación de la tráquea (ver Figura 23).
Identificar los linfonódulos/ganglios antes de sacar el
pulmón. Examinar externamente e internamente,
evaluar color de médula y corteza. Describir
tamaño, color, textura y forma.
CORAZÓN: observar primero presencia y cantidad
de líquido pericárdico y su estado para luego pasar
a examinar el corazón. Notar presencia o ausencia Foto 69. Corazón de cría de ballena varada
de grasa coronaria. Examinar la vasculatura muerta, vista ventral.
coronaria en busca de anormalidades (Foto 69).
Examinar el corazón en sentido de la circulación,
comenzando por la aurícula derecha hacia el
ventrículo derecho para luego entrar por la arteria
pulmonar que va hacia los pulmones. Regresa de los
mismos por la vena pulmonar entrando por la
aurícula izquierda y luego pasa por el ventrículo
izquierdo, para salir por la aorta para distribuirse
por el resto del cuerpo. Notar el grosor del músculo
cardíaco, sus válvulas, y, en caso de crías, buscar
anormalidades congénitas como el fallo en el cierre
del foramen o agujero oval que se encuentra en el
tabique interauricular o la comunicación
interventricular. Buscar también evidencia de Foto 70. Timo: A) lóbulo izquierdo; B)
inflamación del endocardio (tejido engrosado, duro lóbulo derecho.
y de color pálido) y de las válvulas del corazón,
causado por una infección sistémica bacteriana.
TIMO: es un órgano linfoide ubicado en la entrada
de la cavidad torácica craneal al corazón. Posee 2
lóbulos, siendo el izquierdo más grande que el
derecho (Foto 70). Se encuentra en crías y algunos
juveniles y desaparece a medida que el animal
madura. Se debe evaluar su forma, color y textura,
tanto externa como internamente (ver Figura 23).
TIROIDES: Se encuentra ventral a la tráquea en la
parte más craneal de la misma, caudal a la glotis. Es
difícil de localizar e identificar, pero su color es un
rojizo oscuro, parecido al del músculo. La
paratiroides es más clara y se encuentra unida a la
tiroides en la parte más craneal. Notar tamaño, Figura 23: Ubicación de los ganglios
traqueobronquiales y del timo.
forma, color y textura, (ver Figura 24).
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INSPECCIÓN DE LA CAVIDAD
ABDOMINAL: Como se mencionó
anteriormente, si el animal se encuentra
con el vientre hacia abajo se
recomienda extraer las vértebras
lumbares, ya que por el peso de las
mismas, estas presionan la cavidad
(Foto 71, 72, 73 y Figura 25). Una vez
que se despejaron los músculos axiales
como se mencionó más arriba (Pág. 40,
Figura 20 y Foto 71) y el peritoneo,
podemos acceder al abdomen (Foto 74
y Figura 25). Se debe evitar incidir los
intestinos, ya que, si eso sucediese,
todos los órganos quedarían cubiertos
de contenido intestinal, limitando la
inspección debido a la poca visibilidad
y contaminando las muestras que
deseamos tomar.
Evaluaremos primero toda la cavidad
en busca de líquidos anormales, como
sangre, exudados o trasudados,
adherencias, u otra lesión.
Posteriormente, se deben explorar los
omentos y el mesenterio. Tomar
muestra en caso de detectar algo
anormal. Proceder a la inspección
individual de órganos, comenzando
por el sistema uro-genital (extrayendo
Figura 25: Disección de vertebras lumbares y peritoneo para
llegar a cavidad abdominal.
PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
48
Foto 71. Cortando entre vertebras lumbares Foto 72. Cortando entre vertebras lumbares
para sacarlas de lugar. Se puede ver la zona y tirando hacia arriba con los ganchos de
de musculo axial ausente. pesca, posición del cadáver ventro-dorsal.
SISTEMA URINARIO:
RIÑON: El riñón izquierdo se
encuentra más craneal que el derecho. Foto 74. Cavidad abdominal en una cría hembra varada
Evaluar primero la cápsula (Foto 74 y muerta, posición ventro-dorsal del cadáver.
75) para luego describir forma,
tamaño, textura y color del riñón. El riñón en la BFA está compuesto por aglomeraciones de
renículos y cada uno funciona como un riñón individual. Incidir varias veces de forma
transversal (Foto 76) o longitudinal para evaluar apariencia de la corteza y médula de los
renículos (Foto 77) y comparar las médulas entre renículos.
VEJIGA y URÉTERES: Evaluar el grado de distención de la vejiga (Foto 80) y luego sacar lo
más asépticamente posible la orina (ver mas adelante en la sección de “toma de muestras
internas” la manera de extraer orina, página 54). Evaluar color, consistencia y cantidad de
orina. Luego proceder a la inspección externa e interna de la vejiga y uréteres en busca de
anormalidades (decoloraciones en la mucosa, tumoraciones, piedras, etc.).(Ver Foto 81).
Foto 75. Riñón de una cría de ballena con Foto 76. Cortes transversales en riñón de
su cápsula renal. una cría de ballena.
Foto 79. Adrenal derecha de una cría Foto 80. Vejiga contraída ubicada debajo
varada muerta. del recto.
Foto 82. Cérvix conservado en un cadáver Foto 83. Tejido conectivo y pene
con órganos y tejidos licuados. conservado en un cadáver descompuesto.
________________________________________________________________________________________________
1
Hasta el momento, solo se ha observado una cría con sus ovarios ovalados con superficie lisa (Foto 81).
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Foto 86. Cérvix, útero, cuernos uterinos y Foto 87. Ovario de una cría hembra varada
ovarios de una cría hembra varada muerta. muerta.
SISTEMA HEMATOPOYÉTICO
BAZO: El bazo en las crías que miden menos de 6 metros de longitud es pequeño,
rondando los 25 cm de largo, de superficie lisa, bordes redondeados y forma de “maní”
(Foto 88). Se encuentra debajo del estómago del lado izquierdo del animal. Extraer el bazo y
examinarlo externamente e internamente. Notar tamaño, textura y color. Algunas crías
presentan bazos accesorios, que se hallan a lo largo del omento y pleura visceral del bazo
dándole al bazo una forma irregular, con proyecciones tipo “dedos” (Foto 89 y 90).
Cumplen la misma función que el bazo, y se desconoce por qué solo lo presentan algunas
crías.
Foto 88. Bazo de una cría de ballena menor Foto 89. Bazo de una cría mayor a 6 metros
a 6 metros de longitud. de longitud. Nótese los bazos accesorios en
la cápsula.
SISTEMA GASTROINTESTINAL
Antes de inspeccionar el tracto intestinal, es
recomendable inspeccionar y diseccionar primero el
páncreas y el hígado y finalizar con el tracto
gastrointestinal ya que, una vez que se abren los
intestinos, todo el contenido invadirá la cavidad.
pequeño corte en cada cámara para tomar muestras del contenido. Una vez aseguradas las
muestras del contenido estomacal proceder a la disección completa para examinar
internamente la mucosa de cada compartimiento, en busca de úlceras, nódulos,
decoloraciones u otras anormalidades. Anotar la presencia o ausencia de contenido y
describir consistencia, color y cantidad del mismo.
Foto 98. Intestino delgado y grueso de una Foto 99. Ganglios mesentéricos agrandados
cría de ballena varada muerta. en una cría de ballena.
Foto 100. Hemisferios cerebrales dentro de Foto 101. Cerebro y cerebelo de una cría de
cráneo de cría, una vez retirada la ballena, vista ventral.
duramadre.
OÍDO: Las ballenas francas no tienen orejas y el conducto auditivo externo no tiene
abertura externa visible (ver Foto 102 y 103). Empieza su recorrido en la piel (entre 17-20
cm caudal al ojo en las crías, Foto 104) y se dirige de manera medial y craneal hasta finalizar
en forma de embudo en la membrana timpánica o “glove finger” (denominada así por su
forma de punta de dedo, ver Foto 105) y es ahí donde se deposita la cera que se acumula en
forma de anillos (la cera se utiliza para estimar la edad). La cera se derrite rápidamente una
vez muerto el animal por el calor interno producido por la descomposición. Su hallazgo
sería posible en animales recién muertos. El oído está formado por 2 huesos o bullas
redondeadas, el timpánico y el periótico localizados lateralmente a los cóndilos occipitales
en una cavidad formada por el hueso escamoso (borde dorsal y lateral) y el hueso
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exoccipital (borde posterior), Figura 27 y 28 y Foto 106 y 107. El hueso timpánico aloja los
huesos del oído medio, cuerpo cavernoso y la membrana timpánica. La membrana
timpánica está formada por dos porciones: una de estructura fibrosa y de forma triangular
(Foto 107), el ligamento timpánico, y otra en forma de saco o embudo, la membrana
timpánica sensu stricto ("glove finger", Foto 105) ubicada en el borde lateral de la bulla
timpánica. El hueso periótico, ubicado dorsalmente al timpánico contiene el oído interno.
Foto 102. Conducto auditivo externo. Foto 103. Disección del conducto auditivo
externo. Nótese el epitelio oscuro que
recubre el interior del canal.
Figura 28. Huesos del cráneo una ballena franca y la ubicación del oído.
Foto 107. Bulla timpánica separada del Periótico en una cria de ballena franca.
ganchos (de pesca) en la serosa, en los extremos de este órgano, otra persona realiza un
corte con un cuchillo limpio o bisturí hasta llegar a la mucosa. Inmediatamente, se extrae la
orina con una jeringa estéril para introducirla en un vial estéril (ver Foto 112 y 113).
Recomendación de cómo extraer cerebro: Primero se debe despejar el área del cráneo,
diseccionando piel y grasa y posteriormente todos los músculos adyacentes hasta llegar al
cráneo (Figura 29). Para abrir una ventana en este hueso se usan gubias de diferente ancho
de hoja y una maza. No usar maza de goma ya que rebota contra el hueso (Figura 30). En
las crías, el área del cráneo en donde se debe realizar la apertura es sobre el hueso
supraoccipital (ver Figura 28) y se distingue de los huesos del maxilar por su delgado
grosor. Se encuentra a la altura de los ojos. Además, al golpear el área del cráneo, resuena a
hueco. Una vez abierto el cráneo se disecciona la duramadre con una tijera con punta roma
o cuidadosamente con el cuchillo para poder ver el cerebro. Una vez extraído todo el
cerebro, valorar la duramadre que queda adherida al cráneo y el resto de las meninges que
se encuentran sobre el cerebro extraído y tomar muestras correspondientes para
histopatología. Se toman muestras de cerebro y cerebelo si la condición de necropsia de la
ballena muerta es 3. Si el encéfalo se encuentra en condición 2, se introduce todo el encéfalo
dentro de una bolsa zip-loc, procurando mantener sus estructuras. La bolsa se rellena con
formol al 40% y se cierra con un nudo o precinto. Para evitar pérdidas de formol se debe
usar preferentemente 3 bolsas y luego al regresar del campo se recomienda introducir dichas
bolsas dentro de un recipiente hermético.
X. ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS EN EL
CAMPO
La toma de muestras, su almacenaje y registro en las planillas es una tarea que requiere
buena coordinación del equipo de trabajo. Al tomar una gran cantidad de muestras de un
animal fresco para distintos fines hay que ser metódico y ordenado, y se debe consultar
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61
d) Tamaño de la muestra con y sin lesión: las muestras deben ser delgadas (de 0,5 a 1 cm de
espesor). Introducir las muestra en frasco con formol. Se debe manipular lo menos
posible la muestra, ejerciendo poca presión con los cuchillos, fórceps, manos, etc.
e) Comprobar que esté bien cerrado.
f) Se debe cambiar formol una hora después o al regreso para garantizar la correcta fijación.
Si en los días subsiguientes se observa que el formol continúa turbio, cambiar el formol
por completo las veces que sea necesario hasta que quede traslúcido.
g) Es importante ir anotando en la planilla cada muestra y su cantidad según se va tomando
para evitar confusiones. Se recomienda utilizar clips con papel para identificar cada
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muestra individual para facilitar la tarea del patólogo, especialmente para diferenciar si
un tejido pertenece al órgano derecho o izquierdo. Otra opción es usar cassettes
individuales.
h) Al regresar, almacenar frasco dentro de una bolsa hermética dentro de una caja cerrada,
(ver Foto 114).
i) Como el formol se evapora, revisar periódicamente los frascos almacenados para rellenar
aquellos que lo necesiten.
Idealmente, para los tejidos se debe usar doble bolsa ya que existe el riesgo de que exploten
al tomar contacto con el nitrógeno o al tomar contacto con la temperatura ambiente al sacar
las muestras del tanque. El método de envolver la muestra en bolsa whirlpack se explica en
la Figura 32. En el campo, guardar las muestras que requieren de frío en las conservadoras
que tienen geles refrigerantes y colocar a la sombra. En caso de no tener sombra, hacerla con
las mochilas. Al regresar del campo, estas muestras se deben guardar inmediatamente en el
tanque de nitrógeno, corroborando de nuevo los rótulos con la planilla de necropsia antes
de meterlos al tanque.
Tanque de nitrógeno
Cuando se necesita maximizar el espacio dentro de un
tanque de nitrógeno resulta práctico sacar las canastillas de
acero para aprovechar mejor el espacio. En este caso, se
recomienda el uso de medias de lycra de buena calidad, en
las cuales se introducen las muestras. Se pone una cantidad
de 4 ó 5 whirlpack ó 4 ó 5 crioviales (dependiendo del
ancho de la boca del tanque) en la media. Sobre estas
muestras, se anuda la media con hilo de nylon
multifilamento grueso (no muy fuerte), dejando en los
cabos unos 4 cm (esto ayudará a la extracción de la media).
Sobre el nudo realizado se colocan nuevas muestras,
repitiendo el procedimiento unas 5 veces o más
dependiendo del largo de la media, como si fuese un
chorizo (ver Foto 115 y Figura 33). Al realizar el último
Foto 115: Sacando media con
nudo, se deja unos 60 cm. de hilo que sobresalga fuera del muestras en crioviales del tanque.
tanque atado a las manijas del tanque. Para que el termo se
mantenga hermético hay que ubicar los hilos de las medias
en las canaletas de la boca y tapa del termo. Para líquidos,
recordar de dejar 0,5 ml libres en el vial o hasta la marca
indicada, ya que el líquido se expande y, de lo contrario,
explotaría el vial. Ajustar bien la tapa a rosca. Rotular las
muestras doble y además rotular con una cinta americana
el extremo del hilo que sostiene la media con las muestras
en forma de ¨chorizo¨ con el ID del animal para encontrar
fácilmente las muestras en el momento del envío.
El nivel del nitrógeno puede medirse con la regla especial que viene con el termo de
nitrógeno o con un palo de madera. Se introducen hasta que hagan tope con el fondo, se
deja un instante y luego se retira y se deja unos segundos en contacto con el aire. La parte
que estuvo en contacto con el nitrógeno quedará blanca.
Figura 32: Esquema de cómo envolver muestra dentro de una bolsa tipo whirlpack.
Morfometría x x x x
Historia de vida x x x x
Genética x x x x
Medidas grasa x x x -
Histología y citología x L L -
Parasitología x x - -
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66
Biotoxinas x x x -
L: limitado.
b) PERMISOS DE EXPORTACIÓN:
Para exportar muestras se requieren los siguientes permisos: a) guía de tránsito otorgado por
la Dirección de Fauna provincial; b) certificados otorgados por la Dirección de Fauna
Silvestre de la Nación y la Dirección de Ordenamiento Ambiental y Conservación de la
Biodiversidad; c) permiso de exportación CITES; d) certificado sanitario del SENASA (Servicio
Nacional de Sanidad animal) y e) trámites de Aduana. A continuación se detalla un
resumen de los mismos:
Ti: tiempo en días que se requiere, como mínimo, para obtener los distintos permisos;
Td: tiempo en días de vigencia del permiso una vez aprobado;
Otras cartas: otros documentos generalmente necesarios, como por ejemplo avales. Consultar a la entidad.
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69
temperaturas cálidas la evaporación se acelera mucho más), por lo que se debe calcular la
cantidad del hielo seco en base al volumen de las muestras y el tiempo de tránsito. Se sugiere
un mínimo de 1 kg de hielo seco por cada kg de muestras. Recuerde que siempre es mejor
pecar por mucho! El hielo seco en escamas o en polvo dura muchísimo menos (menos que la
mitad del tiempo del hielo en bloque), por lo que no se recomienda utilizarlos a menos que
la distancia a transportar las muestras sea ultra corta y se suplemente con geles congelantes y
buen aislamiento.
Preparación de la conservadora:
Los viales y frascos deben mantenerse en posición vertical
(pueden usarse botellas plásticas de 1.5 lt cortadas, bien
apretadas entre sí) y deben colocarse dentro de 2 o 3 bolsas
ziploc, por si se descongelan y pierden contenido durante el
envío. Las muestras de otros tipos (ej. tejidos), que se
encuentran en bolsas ziploc o whirlpack, deben ir también
dentro de 2 ó 3 bolsas herméticas tipo ziploc para evitar
derrames.
Todas las muestras deben ir con doble rótulo como mínimo
y con letra legible (usar marcador indeleble y lápiz). Lo Figura 35: Manera de sellar
recomendable es usar conservadoras de telgopor de pared conservadora con cinta americana
ancha o, mejor aún, de plástico rígido (no corre el riesgo de para muestras que viajan con hielo
seco.
que lo atraviese un material punzante y pierda frío como
puede suceder con las de telgopor). El interior de la conservadora se debe recubrir (todos los
laterales) con papel y geles congelantes y, una vez introducidas las muestras dentro, se debe
rellenar todo espacio muerto con bollos de papel. En la parte superior (sobre las muestras) e
inferior, se sitúa el bloque de hielo seco (Figura 34). Sellar la tapa de la conservadora con
cinta de embalaje para evitar que se abra durante el transporte pero sin sellar
completamente todos los bordes para permitir que salga el gas liberado del hielo seco y
evitar que explote si esta herméticamente cerrado (ver Figura 35).
Incluya en el envío los permisos apropiados y la identificación de las muestras remitidas en
un folio pegado a la tapa.
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PROTOCOLO DE NECROPSIA
BALLENA FRANCA AUSTRAL
74
A NEXO 1
Listado de documentación necesaria para pedir el permiso de
renovación en DFyFS:
- Anexo II de Disposición N°48 DFyFS: Formulario de solicitud para realizar trabajos de investigación
científica con fauna silvestre completo y firmado (enlace).
- Proyecto de investigación
- Currículum vitae de Director y co-director del proyecto (máximo 4 páginas)
- Nota solicitando la renovación
- Notal aval de una Institución (ONG, Universidad, CONICET)
ANEXO 2
Listado de kit de primeros auxilios
La mayoría de los elementos son suministros básicos y se
pueden conseguir en la farmacia o en el supermercado:
Teléfonos de emergencia:
100-Bomberos
101-Policía
103-Defensa civil
106-Prefectura
107-Hospital
_______________________________________________________________
ANEXO 3
Listado completo de Equipo de necropsia
COLECTA DE MUESTRAS
• Frascos de 40 y 250 ml OTROS
ANEXO 4
Planilla de información general utilizada por el PMSBFA en el 2013
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ANEXO 5
Planilla de morfometría utilizada por el PMSBFA en el 2013
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ANEXO 6
Planilla de medición del espesor de piel y grasa utilizada por el PMSBFA en el 2013
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83
ANEXO 7
Planilla de examen externo utilizada por el PMSBFA en el 2013
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ANEXO 8
Planilla de evaluación de interacción humana utilizada por el PMSBFA en el 2013
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ANEXO 9
Planilla de examen interno utilizada por el PMSBFA en el 2013
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ANEXO 10
Planilla de muestras para histopatología utilizada por el PMSBFA en el 2013
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93
ANEXO 11
Planilla de listado de muestras utilizada por el PMSBFA en el 2013
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PROTOCOLO DE NECROPSIA
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ANEXO 12
Formulario 3-177 del US Fish & Wildlife Service
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100
ANEXO 13
Ejemplo de inventario de muestras transportadas
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101
ANEXO 14
Formulario EXPO-IMPO de la Dirección Nacional de Fauna y de
acceso a recursos genéticos
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PROTOCOLO DE NECROPSIA
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103
ANEXO 15
CITES de exportación con la firma en el casillero 13 de Aduana Argentina