ANLISIS DE LABORATORIO BIOMETRA HEMTICA VALORES DE REFERENCIA ERITROCITOS HEMOGLOBINA (Hb) HEMATOCRITO ( Hto) CMHG VCM VSG LEUCOCITOS

NEUTRFILOS EOSINFILOS BASFILOS LINFOCITOS MONOCITOS SEGMENTADOS BANDAS PLAQUETAS 5.4 x 10 /mm 17.0 g/dL 52 % 34 % 100 m3 21 mm/h 9 200/mm3 60 % 3% 1% 27 % 6% 50 % 3% 200 000/mm3
6 3

(5.4 0.9) x 106/mm3 hombre (4.8 0.6) x 106/mm3 mujer 12.5-16.8 g/dL hombre 13.5-18.0 g/dL mujer 40 - 54 % hombre 33 - 47 % mujer 30 34 % 83 100 m3 menor de 20 mm/h 5 000 10 000/mm3 50 - 70 % 14% 01% 20 30 % 49% 45 65 % 03% (150 000 400 000/mm3)

La Biometra Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno delos estudios de rutina de mayor importancia, ya que la informacinque de aqu se deriva nos proporciona una idea muy confiable delestado general de la salud del paciente. Consta de los siguientes estudios: Hematocrito: Las cifras normales de hematocrito en personas oscilan entre:hombres, de 36,0% a 45,0%; mujeres, de 36,1% a 44,3%,dependiendo de diversos factores fisiolgicos, como la edad y lacondicin fsica del sujeto. Hemoglobina: Son valores de referencia: Para Hombres: 18,0 2,0 g/dl. Para Mujeres: 16,0 2,0 g/dl. Conteo Eritrocitico: Valores Normales: Hombres 40.7 - 50.3%, Mujeres 36.1 44.3% Recuento de Reticulocitos: Valores Normales: 1.1 2.1% (25000 75000 x 106 / litro) Recuento de Plaquetas: Valores Normales: 150.000 a 400.000/mm3 Volumen Plasmtico: Valores Normales: 3 4 litros

ndices Eritrocitarios: -Volumen Globular Medio (VGM): Valores Normales 83 - 97 fl -Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): Valores Normales 32 - 36 g/dl -Hemoglobina Globular Media (HGM): Valores Normales 27 - 31 pg Morfologa Eritrocitaria Velocidad de Sedimentacin Globular Media (VSG): Valores Normales: -Hombres: hasta 15 mm/h. -Mujeres: hasta 20 mm/h. -Nios: hasta 10 mm/h. -Recin nacidos: 0-2 mm/h. Biometra Hemtica
Biometra Hemtica Completa (BHC) Este estudio mide el nmero de diferentes tipos de clulas, su tamao y apariencia. En general se miden tres principales componentes de la sangre: Clulas Rojas. Mide el nmero, el tamao, apariencia y la cantidad de hemoglobina en ellas. La parte del estudio llamado hematocritos mide el porcentaje de tu sangre que est en las clulas rojas. Clulas Blancas. Tambin llamadas Leucocitos. Se cuentan el total de clulas blancas y los tipos que hay en la sangre. Plaquetas. Las plaquetas no son en realidad clulas de la sangre. Son fragmentos de grandes clulas formadoras de sangre. Estos fragmentos son esenciales para la coagulacin normal de la sangre. Este estudio se realiza para encontrar: anemia, infeccin, y ciertas enfermedades. Para que puedan realizarte tus estudios: Se requiere una muestra de sangre de tu vena. Por lo general este estudio no requiere que ests en ayunas o limitar o alterar tus actividades antes del estudio, sin embargo, te sugerimos pedirle a tu mdico que te de sus indicaciones. Comntale a tu mdico de todo tipo de medicamentos que ests tomando en ese momento, para ver si es necesario que los interrumpas antes del estudio. Valores normales Clulas rojas: 4 a 6 millones de clulas por microlitro Clulas blancas: 5,000 a 10,000 clulas por microlitro Hematocritos: en mujeres, 36% a 45%; en hombres 41% a 47% Hemoglobina: en mujeres, 12 a 15 gramos por decilitro; en hombres, 14 a 16 gramos por decilitro. Plaquetas: 150,000 a 450,000 por microlitro. Los resultados varan de laboratorio a laboratorio, por lo que, te sugerimos siempre realizar tus anlisis en el mismo laboratorio, a menos que tu mdico diga lo contrario.
Introduccin

La Biometria Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina de mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva nos proporciona una idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques: Formula Roja: Determina los parmetros relacionados con el eritrocito. Formula Blanca: Determina los parmetros relacionados con los leucocitos. Formula Roja:La determinacin de la frmula roja se compone de los siguientes parmetros: A. Hematocrito (Ht): Es el porcentaje de la sangre que est compuesta por eritrocitos. B. Hemoglobina(Hb): Es determinada la cantidad de esta protena expresada en g./dl. C. Conteo eritroctico(Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por microlitro de sangre. Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritroctico son: 1. Cambios que inciden directamente en la circulacin de eritrocitos: Valor disminuido: Se denomina anemia, los tres parmetros disminuyen aunque este decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamao eritroctico y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos, por lo que el clculo e interpretacin de los ndices de la formula roja son de ayuda en estos casos. Valor aumentado: Denominado policitemia, donde aumente el nmero de eritrocitos circulantes denominadopolicitemia absoluta, tambin puede darse un aumento transitorio en los eritrocitos circulantes denominadopolicitemia relativa (descritos posteriormente). 2. Cambios en el volumen plasmtico: Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratacin. Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratacin con fluidos administrados parenteralmente dando una lectura que simula anemia. D. Indices eritrocticos: Determinados mediante clculos matemticos. 1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht. x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico expresado en femtolitros y se comporta de la siguiente forma: Valor aumentado: Se presenta en anemia macroctica en la que la interferencia en la sntesis del ADN causa inhibicin de la divisin celular y la resultante es la aparicin de eritrocitos de gran tamao (como ocurre en los casos de deficiencia de vitamina B12 y cido flico). Tambin aumenta transitoriamente en los casos de reticulocitosis (anemia regenerativa). Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro 2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb. x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de hemoglobina depositada en el eritrocitos expresada en picogramos. Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro; la hemoglobina extracelular tambin est implcita, aunque el ndice asume que toda la hemoglobina es intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis permanece normal o ligeramente elevado.

 Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro. 3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el ndice ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes. Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro, as mismo puede incrementarse en los casos de esferocitosis marcada. Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro. E. Morfologa eritroctica: Es determinada en el frotis sanguneo. 1. Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es debido a una tendencia de sedimentacin en forma paralela, trastorno que se relaciona con el incremento en la concentracin de fibringeno y/o el cambio en las concentraciones de globulinas. En caninos y felinos puede presentarse en condiciones normales en un grado moderado y es muy marcada en casos de enfermedad inflamatoria y neoplasias. En equinos sanos es comn desapareciendo en casos de anemia. 2. Aglutinacin eritroctica: Cuando se forma un acumulo de eritrocitos, ocurre generalmente en los casos deanemias inmunomediadas, puede ser observada en las paredes del tubo colector como pequeos grumos. 3. Anisocitosis: Es la variacin en el tamao de los eritrocitos donde aparecen macrocitos y/o microcitos a lado de clulas de tamao normale, se presenta como respuesta en anemias de tipo regenerativo. Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamao que provocan incremento en el VGM, (reticulocitos) aparecen generalmente en anemias regenerativas. Microcitos: Son pequeos eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en casos de anemias dadas por deficiencia de hierro y piridoxina generalmente. 4. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular reducida, lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, son casi exclusivos de caninos y se presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y en anemias hemolticas isoinmunes as como despus de una transfusin. Son removidas rpidamente de la circulacin por los macrfagos esplnicos, debido a su falta de elasticidad y a que no estn habilitadas para traspasar los poros capilares esplnicos. 5. Policromasia: Es una variacin en la afinidad eritroctica hacia el colorante, donde existe un tono azuloso en las clulas que contienen residuos de ARN, eritrocitos que generalmente son grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de policromasia est asociada con el incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a unaanemia, catalogada como regenerativa cuando esta presente. 6. Hipocromia: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la regin central del eritrocito dado por la disminucin en la concentracin de hemoglobina dentro de la clula, la causa ms comn en la que se presenta es la deficiencia de hierro. 7. Poiquilocitosis: Son clulas anormales en su forma comnmente encontradas en anemias debidas a la prdida crnica de sangre o a enfermedades caracterizadas por fragmentacin eritroctica, clulas que son retiradas prematuramente de la circulacin agudizando el estado anmico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis. 8. Leptocitos: Son clulas delgadas que cuentan con una membrana celular grande observadas en enfermedades crnicas debilitantes que producen anemia. 9. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en la estomatocitosis hereditaria del Alaska malamut y en enfermedades hepticas.

10. Clulas en diana: Son clulas con forma de tiro al blanco que se presentan en anemias de tipo regenerativo junto con policromasia, aunque cuando se presentan y no existe policromasia se pueden relacionar con enfermedad renal, heptica o esplnica. 11. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente como consecuencia de un estado anmico en procesos regenerativos, no obstante si son numerosos pueden indicar hipoesplenismo.. 12. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica producto de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de ciertas drogas o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se asocian con hemolisis intravascular. 13. Cuerpos eritrocticos refrctiles: Se localizan en estados normales en aproximadamente el 10% de los eritrocitos del gato, se incrementan en la presencia de diversas enfermedades, en muchas ocasiones juegan un papel importante en el desarrollo de la anemia. 14. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberacin de clulas eritroides inmaduras hacia la circulacin sangunea en los casos de anemia, aunque pueden ser observadas en casos de enfermedad de la mdula sea donde existe dao en el parnquima que afecta la barrera capilar, as como en casos de leucemia. F. Determinacin de Reticulocitos (Ret): Los reticulocitos son clulas eritroides inmaduras que en su citoplasma cuentan con remanentes nucleares de ARN, en el canino, felino y suino, representan aproximadamente el 1% en la circulacin sangunea en condiciones normales, presentan un incremento en los casos de anemias de tipo regenerativo. En algunos laboratorios el conteo de reticulocitos se hace por medio del uso de tinciones como Giemsa en un frotis sanguneo ordinario, aunque la determinacin ms exacta se realiza por medio de tinciones supravitales especificas como la de azul de cresil o la de nuevo azul de metileno, su valoracin se realiza en base a los siguientes parmetros: 1. Porcentaje relativo de reticulocitos (PRR): Se obtiene al realizar varios conteos de 100 clulas eritroides, obteniendo el porcentaje correspondiente a aqullas que son compatibles con reticulocitos, en la mayora de las ocasiones expresa un valor que no es real, dando una falsa impresin diagnstica debido a lo siguiente: En la sangre de animales anmicos existe menor nmero de eritrocitos maduros circulantes que se mezclan con reticulocitos recin liberados de la mdula sea y una relativa reticulocitosis es observada. Dentro de los mismos reticulocitos existen varios estadios de maduracin y en respuesta a un estado anmico los reticulocitos ms inmaduros son liberados, clulas que persisten como reticulocitos por periodos ms prolongados en la sangre antes de convertirse en eritrocitos maduros. Para lograr una correccin del porcentaje relativo de reticulocitos cuando se presentan los problemas descritos anteriormente se determina lo siguiente: 2. Conteo absoluto de reticulocitos (CAR): (PRR x Eri). Este parmetro corrige la falsa impresin de reticulocitosis expresada en el inciso anterior (1,a) debido a que se determina la cantidad total de reticulocitos circulantes. 3. Porcentaje corregido de reticulocitos (PCR): [(Ht obtenido / Ht normal) x PRR] Con la ayuda de este calculo se obtiene un porcentaje ms adecuado a la realidad en los casos donde no se conoce el conteo de eritrocitos circulantes, ya que se ajusta el porcentaje de reticulocitos observados en la muestra problema con respecto a un parmetro normal (considerado de 45%), sirve para determinar el IPR. 4. Indice de produccin de reticulocitos (IPR): (PCR / Tiempo de maduracin) Este ndice de correccin ha sido adaptado en el canino especficamente para corregir el problema descrito en el inciso (1,b), ya que se utilizan diferentes tiempos de maduracin del reticulocito basndose en el hematocrito observado, algunos de estos tiempos son:

Hematocrito 45% 35% 25% 15%

Tiempo de maduracin 1 da 1.5 das 2 das 2.5 das

5. Interpretacin de los parmetros reticulocitarios: En el gato solamente son utilizados el PAR y el PCR debido a que la respuesta reticulocitaria de esta especie es menor a la del canino. Un incremento absoluto de reticulocitos indica una respuesta de la mdula sea, es comn en anemiashemorrgicas o hemolticas, aunque la reticulocitosis es ms marcada en la anemia de tipo hemoltico debido a que en esta no hay prdida de hierro y es fcilmente reciclable durante el proceso eritropoyetico. La reticulocitosis no se hace evidente hasta despus de 72 horas de que ocurre la anemia y puede alcanzar su mximo hasta los 7 das posteriores a su presentacin. Un ndice de produccin de reticulocitos mayor de 1 sugiere una anemia de tipo regenerativo. Indices entre 1 y 3 sugieren prdida sangunea. Indices mayores de 3 son indicativo de un proceso hemoltico.

G. Determinacin de plaquetas: Son estructuras producidas por los megacarioicitos en la mdula sea mediante el proceso de fragmentacin citoplasmtica, juegan un papel muy importante en la hemostasis, su variacin puede ser: 1. Trombocitopenia: Disminucin en el nmero de plaquetas circulantes, es el trastorno ms comn en los animales, generalmente acompaada con severos problemas de coagulacin, se puede deber a: Destruccin plaquetaria que excede la produccin ocurrida en trombocitopenias inmunomediadas (autoinmunes, isoinmunes o inducidas por drogas), Lupus Eritematoso, hiperestrogenismo, Afecciones por Ehrlichia, enfermedad causada por Riketsia, o secuestro esplnico, as como neoplasias como hemangiosarcoma. Fallas en la produccin plaquetaria que ocurre en anemias aplsticas, enfermedad de la mdula sea y quimioterapia citotxica. Adems la trombocitopenia puede dar un cuadro de coagulacin intravascular diseminada, un sndrome que casi siempre acompaa a una enfermedad sistmica. 2. Trombocitosis: Incremento del nmero plaquetario. En el felino puede estar acompaando un proceso viral asociado a leucocitos con sndromes mieloproliferativos. Ocurre en procesos parasitarios donde intervienen parsitos succionadores de sangre y en casos de neoplasia.

 Usualmente acompaa a anemias por deficiencias de hierro. Siempre que existan trastornos en la cuenta plaquetaria se debe considerar la determinacin de parmetros que intervienen en la coagulacin sangunea. Enfermedades hemorrgicas en los animales estn asociadas con la disminucin en el nmero plaquetario, as mismo las alteraciones en la morfologa del trombocito se observa en anemias regenmerativas, desordenes mieloproliferativos en el felino y en otros trastornos en la mdula sea. H. Velocidad de Sedimentacin globular media (Wintrobe): Es la precipitacin de los eritrocitos en un lapso de tiempo estandarizado (1 hora), se relaciona directamente con la tendencia eritroctica hacia la formacin de rouleau as como a la concentracin plasmtica de globulinas y fibringeno. OBJETIVOS: - Saber realizar las pruebas correspondientes a la sangre para saber el estado de salud de un paciente. - Conocer los trastornos y complicaciones que puede traer una deficiencia en la sangre MATERIAL:

o o o o o o o o o o o o o o o o

5 ml de sangre venosa 1 Spectronic 1 microscopio 1 ligadura 1 microcentrfuga 1 boquilla 1 frasco con torundas alcoholadas 1 jeringa desechable de 5 ml 1 pipeta de Thoma para glbulos rojos 1 pipeta de Shalli 80.02 ml 1 tubo de ensaye o frasco con anticoagulante 1 cmara de Neubauer 1 tubo de Wintrobe 4 portaobjetos 2 tubos capilares 1 pipeta Pasteur con bulbo

o o o o o o
MTODO:

1 gradilla para tubos de Wintrobe Solucin salina isotnica Reactivo de Drabkin Solucin buffer Colorante de Wright Aceite de inmersin

o o o o o o o o o o o o o o o o
RESULTADOS:

Obtuvimos sangre de un voluntario Se coloco en el tubo de ensaye con anticoagulante Despus se tomo una parte y se coloco en el tubo de Wintrobe y se llevo a la gradilla Se obtuvo con esto la velocidad de sedimentacin eritrocitaria Despus para obtener el recuento total de eritrocitos se tomo otro poco de sangre y se aspiro con una boquilla en la pipeta de Thoma Se le agrego solucin salina isotrpica. Se agito y se depositaron 2 gotas en la cmara de Neubauer Se llevo a microscopio y se cont por cuadrantes el nmero de eritrocitos. Se toma la muestra en capilares para obtener el nivel de hematrocitos Por decantacin se coloca en los capilares y se lleva a la microcentrfuga Con la pipeta de Shalli se obtiene la determinacin de hemoglobina Se lee en el Spectronic El estudio morfolgico se realiz por medio de un frotis Se toma una o dos gotas de sangre y se colocan en un extremo del portaobjetos y con otro se extiende Se lleva al microscopio y se observa, en los objetivos ms pequeos primero y por ltimo en el de 100x, colocando previamente aceite de inmersin Se lleva la cuenta de los tipos de clulas en la sangre hasta alcanzar un total de 100

Velocidad eritrocitaria (sedimentacin): 12ml/hr

Hematocrito: 5.5 = 100% 2.5 roja, 3.0 blanca Hemogloina: 16.9 - 17.0 g/100 ml Cmara de Neubauer: A - 75 B - 90 + C - 86 D - 69 E - 115 Total: 435 Estudio morfolgico (frotis): Leucocitos: 33 Neutrofilos: 18 Basolfilos: 14 Eritrocitos: 7 Monocitos: 7 Volumen Globular Medio (VGM) = Hemoglobina Globular Media (HGM)= Concentracin de Hemoglobina Globular Media (C. Hb. G. M.)= 37. 4% ANLISIS DE RESULTADOS: Velocidad eritrocitaria: En este caso la velocidad eritrocitaria est debajo de lo normal. Hematocrito: 45.45 % roja 54.54 % blanca (dentro de lo normal) Spectronic: Niveles dentro de lo normal Recuento total de eritrocitos: 4,350,000 millones/mm3 (dentro de lo normal) CONCLUSIONES: El paciente se encuentra bien dentro de los niveles a medir en esta prctica. BNeutrfilos:

Valor normal entre 2.000 y 7.500/mL. Son los ms numerosos. Se encargan de atacar a las sustancias extraas (bsicamente bacterias, agentes externos) que entran en el organismo. En situaciones de infeccin o inflamacin su nmero aumenta en la sangre. En estos casos se observan algunos que son inmaduros' y se denominan cayados. En la analtica se indica en forma de porcentaje slo cuando hay infeccin porque en condiciones normales su cifra es cero.

Linfocitos: Valor normal entre 1000 y 4500/mL. Aumentan sobre todo en infecciones por virus o parsitos. Tambin en algunos tumores o leucemias.

Monocitos: Valor normal entre 200 y 800/mL. Esta cifra se eleva casi siempre por infecciones originadas por virus o parsitos. Tambin en algunos tumores o leucemias.

Eosinfilos: - Aumentan: Sobre todo en enfermedades producidas por parsitos, en las alergias y en el asma. - Disminuyen: En situaciones en las que la mdula sea no puede producir clulas, por estar ocupado su espacio e inhabilitada su funcin debido a agentes infecciosos, tejido tumoral u otro tipo de agentes. En infecciones graves. Aunque en un primer momento el nmero de estas clulas aumenta debido a una invasin externa, la cifra puede llegar a disminuir si el agente agresor es ms fuerte y produce la muerte de los leucocitos. Por algunos medicamentos que producen toxicidad sobre la mdula sea como los quimioterpicos (para el tratamiento del cncer). Tambin algunos antibiticos (cloranfenicol) o analgsicos (nolotil) pueden producir como efecto no deseado una reduccin de su nmero.

Nmero de hemates (RBC) Valor normal entre 4.300.000 y 5.900.000/mL Los glbulos rojos o hemates se encargan del transporte de la hemoglobina y del oxgeno. Gracias a ellos el O2 que entra en los pulmones llega al resto del cuerpo. Una cifra por encima de lo normal puede indicarnos: Tabaquismo: Las personas que fuman suelen tener ms globulos rojos de lo normal. Esto es debido a que el tabaco disminuye el oxgeno que hay en la sangre y esa reduccin estimula la produccin de glbulos rojos. Insuficiencia respiratoria : Los pacientes que tienen poco oxgeno por otros motivos, por ejemplo por tener una bronquitis crnica, tambin pueden tener ms globulos rojos de lo normal. En ocasiones hasta puede ser neceraria la realizacin de una sangra para que disminuyan.

Vivir en zonas muy elevadas : Los individuos que habitan en reas montaosas o en ciudades como La Paz (Bolivia), a una altitud muy elevada, el nmero de glbulos rojos puede ser mayor sin que esto signifique ninguna enfermedad para estas personas. El incremento est relacionado con la presin atmosfrica y la falta de oxgeno, factores a los que el cuerpo responde fabricando ms hemates. Una cifra por debajo de lo normal nos indica: Anemia: Las causas pueden ser muy variadas como la falta de hierro, de vitamina B12 o de cido flico. Un sangrado excesivo (por ejemplo reglas abundantes, o despus de una intervencin quirrgica) o una enfermedad de la mdula sea, encargada de fabricarlos, puede dar lugar a un descenso del nmero de hemates. Otras causas de la anemia son la destruccin acelerada de glbulos rojos (debido a diversas patologas) o algunas enfermedades crnicas.

Hemoglobina(HGB) Valor normal entre 12,5 y 17gr/L Es una protena que existe en el interior de los glbulos rojos y que transporta el oxgeno en su interior. Por lo general la cantidad de hemoglobina que tenemos es proporcional al nmero de hemates. Una cifra superior a la normal indica lo mismo que el aumento en el nmero de glbulos rojos. Una cifra por debajo de lo normal indica tambin lo mismo que el descenso de hemates. Existe una situacin en la que la cantidad de hemoglobina es discrepante con el nmero de glbulos rojos: la talasemia. En este caso el individuo tiene muchos glbulos rojos pero de menor tamao que lo habitual y poca hemoglobina en comparacin.

Volumen corpuscular medio(VCM) Valor entre 78 y 100 fL Indica el tamao de los glbulos rojos. El VCM alto indica que los glbulos rojos son grandes. Esto se produce en enfermedades como el dficit de vitamina B12 o de cido flico, en patologas del hgado, o cuando hay un consumo elevado de alcohol. Algunos individuos tienen los hemates un poco ms grandes de lo normal sin que esto sea una enfermedad. El VCM bajo indica que los glbulos rojos son pequeos. Se produce en la talasemia (alteracin de la hemoglobina que conlleva una reduccin del tamao de los hemates) y en el dficit de hierro.

Hemoglobina corpuscular media (HCM) Valor normal entre 27 y 32pg Indica la cantidad de hemoglobina que hay en cada glbulo rojo. En cierto modo nos est diciendo lo 'rojos' que son los hemates. Est aumentado en el dficit de vitamina B12, cido flico. Est disminuido en el dficit de hierro o en la talasemia.

Plaquetas

Valor normal entre 130.000 y 450.000/mL Son las clulas de la sangre encargadas de la hemostasia, es decir, de cerrar los vasos sanguneos cuando se produce una herida formando parte del cogulo. Aumentan: En ocasiones las plaquetas aumentan como reaccin a una enfermedad transitoria o crnica o en casos de hemorragia aguda. Existen patologas de la sangre que se caracterizan por un nmero de plaquetas por encima de lo habitual (entre dos y tres veces). En ocasiones es necesario un tratamiento quimioterpico para reducir dichas cifras y evitar que aparezcan trombos en la sangre. Disminuyen Algunas infecciones muy graves pueden reducir el nmero de clulas que se producen en la mdula sea, por ello los pacientes tienen anemia, pocas plaquetas y pocos leucocitos. Algunos individuos tienen unas sustancias (anticuerpos) en su sangre que destruyen sus propias plaquetas, como si no las reconocieran como propias. Es ms frecuente en mujeres jvenes. El nombre de esta enfermedad es 'prpura trombocitopnica idioptica'. Si las cifras bajan por debajo de 10.000/mL existe riesgo de sangrado espontneo. Cuando existe una actividad excesiva del bazo, un rgano situado en la parte izquierda de nuestro abdomen cuya funcin es ayudar en la defensa frente a las infecciones. En algunas situaciones crece de tamao (por ejemplo cuando hay una enfermedad heptica crnica y evolucionada) y trabaja ms de la cuenta, produciendo una disminucin en las clulas de la sangre.

Velocidad de Sedimentacin (VSG) Valor normal por debajo de 20mL/h Se relaciona directamente con la tendencia que tienen los glbulos rojos a formar acmulos y con la cantidad de protenas que hay en el plasma. Aumenta: En infecciones. En enfermedades inflamatorias crnicas como el lupus, la artritis reumatoide, la polimialgia reumtica En anemia. Es una prueba inespecfica, es decir, no sirve para detectar el lugar de la infeccin o inflamacin en caso de que las hubiera, ni diferencia unas de otras. Sin embargo, su alteracin indica que existe algn trastorno que hay que intentar diagnosticar. Tambin es til en el seguimiento de pacientes: la eficacia del tratamiento se evala mediante la reduccin de la velocidad.

er mejor las tcnicas ms importantes del laboratorio de hematologa, as como sus beneficios y la importancia de stas a la hora de detectar enfermedades * BIOMETRA HEMATICA Incluye: Hemograma

- cuenta plaquetaria

cuenta leucocitaria cuenta eritrocitaria hematocrito (HT) ndices eritrocitarios cuenta diferencial leucocitaria

Fundamentacin Terica: Es una prueba de deteccin bsica y constituye la tcnica de laboratorio que se pide con ms frecuencia. Los datos que proporciona constituyen informacin diagnstica muy valiosa sobre el sistema hematolgico y otros aparatos del cuerpo, pronstico, respuesta al tratamiento y recuperacin. Consta de una serie de pruebas que determinan el nmero, variedad, porcentaje, concentracin y calidad de las clulas sanguneas. Preparacin del paciente: 1.- Evitar la tensin todo lo posible debido a que las alteraciones fisiolgicas cambian los valores. 2.- Tanto la deshidratacin como la sobre hidratacin alteran en forma considerable los valores. 3.- No es necesario el ayuno, sin embargo los alimentos con un alto contenido en grasas alteran los resultados. *PUNCIN CAPILAR Fundamento terico: Para tomar una muestra en forma adecuada se necesita la tcnica correcta y el momento preciso en caso necesario. Cuando se necesita un frotis de sangre perifrica, se prefiere la sangre capilar. Metodologa: 1.- Tome la muestra de las yemas de los dedos o lbulo de la oreja (adultos); del dedo pulgar del pie o del tobillo (en lactantes). 2.- Desinfecte el sitio de la puncin, squelo y puncione la piel con una lanceta estril que no debe penetrar ms de 2 mm; si se utiliza isodine, permita que se seque completamente. 3.- Deseche la primera gota de sangre. Tome las gotas subsecuentes en un microtubo y prepare las laminillas con esa muestra. Recomendaciones:

No oprima el sitio de la puncin para obtener sangre porque se altera la composicin hemtica o invalida los resultados. Muchas veces se facilita la toma e muestra si se calienta la extremidad o se coloca en postura colgante. Preparacin del cliente: Instruya al paciente sobre el propsito y la tcnica de su prueba. Cuidado del paciente despus de la prueba: Aplique una pequea curacin o cinta adhesiva sobre el sitio de la puncin, si bien hay que verificar presencia de hemorragia. De haberla, presione; en caso de que persista el sangrado , busque en los antecedentes del paciente si ha sido sometido a un tratamiento con anticoagulantes (aspirina). *PUNCION VENOSA Fundamento terico: La puncin venosa permite extraer una mayor cantidad de sangre para las pruebas necesarias. Las venas de eleccin suelen ser las de la cara anterior del antebrazo porque resulta fcil acceder a ellas. Las cifras hemticas permanecen constantes no obstante el sitio seleccionado para obtener la puncin venosa. Metodologa: 1.- Coloque un torniquete en la parte superior del brazo para producir congestin venosa. 2.- Pida al paciente que abra y cierre el brazo y cierre el puo varias veces. Escoja una vena accesible. 3.- Limpie el sitio de puncin y squelo con una gasa estril. El isodine debe secarse. 4.- Puncione la vena segn la tcnica explicada por la maestra. En el adulto, las agujas de calibre 21 mas o menos dificultan la extraccin de sangre. 5.- Una vez que penetra en la vena, la sangre llena los tubos aspiradores automticamente por la presin negativa dentro del tubo. 6.- Retire el torniquete antes de extraer la aguja o se producir una hemorragia. 7.- Extraiga la aguja y aplique presin y una cinta adhesiva estril en el sitio de la puncin. 8.- El conservador o anticoagulante que se aade al tubo depende de la prueba. Importante: Para la mayora de las pruebas hematolgicos se utiliza como anticoagulante el cido etilendiaminotetractico (EDTA) o edtico. Es necesario colocar la cantidad adecuada del anticoagulante, ya que la mayora de las pruebas se invalidan con sangre muy poco coagulada. Preparacin del paciente: 1.- Instruya al paciente sobre la tcnica para tomar la muestra. Valore la existencia de problemas hemorrgicos o de circulacin o alergias en ltex. 2.- Avisar al paciente que al introducir la aguja sentir dolor.

3.- Extienda completamente el brazo con la superficie palmar hacia arriba. 4.- Si existen dificultades para extraer la muestra, se entibia la extremidad con toallas hmedas y calientes o con cobijas, adems se debe permitir que la extremidad permanezca inclinada durante varios minutos antes de realizar la puncin. Cuidados despus de la prueba: No extraiga sangre de la misma extremidad utilizada para la administracin intravenosa de medicamentos ,lquidos o transfusiones. La puncin venosa causa infeccin, alteraciones, o retraso en la cicatrizacin. El torniquete prolongado provoca xtasis y hemoconcentracon. *Anticoagulantes Fundamento terico: Los anticoagulantes son medios que actan como bloqueantes de la coagulacin o bien de la agregacin de plaquetas. Se utilizan para romper el trombo o bien para prevenir que los trombos se repitan. La heparina alarga el tiempo de coagulacin. S e administra mediante inyeccin subcutnea, pero tambin hay otros grupos que se toman por va oral. En stos grupos de medicamentos debe hacerse un control de tiempo de coagulacin para evitar un exceso de actividad y como consecuencia la aparicin de hemorragias. Hay dos sales: clcica y sdica. La clcica se usan va subcutnea, pero los dos se pueden usas endovenosas. La heparina se utiliza cuando es preciso. La accin de anticoagulantes es rpida y de poco tiempo. En el manejo de la accin anticoagulante prolongada se utiliza acecumorol. Se han utilizado diversas medicaciones como anticoagulantes plaquetarias, la aspirina y medicamentos vasodilatadores, como el dipridamol, ambos tienen un mecanismo diferente de accin y pueden asociarse para obtener una sinergia de accin. Tabla de anticoagulantes:

TIPOS Precipitantes: Oxalatos de amonio y potasio. Ionizantes:

Forma de usarse 3 partes de amonio y 2 partes de potasio. Usar 2 mg/ml de sangre.

Secuestreno EDTA al 10 %

Ventajas Barato, fcil de preparar. No afecta el volumen regular medio. No altera la morfologa an 1-2 mg/ml de sangre. despus de 3 hrs.

Desventajas Degeneracin de los granulocitos. Utilidad limitada a los primeros minutos en extensiones.

---------------------------

9 partes de sangre por Evita aglutinaciones --------------------------1 de anticoagulante de plaquetas, Citrato de sodio preserva ms tiempo al 3.8% la sangre.

Antitrombinicos: Heparina Carbohidrato cido Mecnico: desfibrinizacin

Seco evita las la Caro. Frotis teidos con 0.1 -0.2 % mg/ml de hemlisis. til para Wright toman sangre estudios de anemias coloracin azul difusa. hemolticas. Con perlas de vidrio y til para clulas L.E. --------------------------agitacin mecnica.

*Determinacin de hemoglobina (Hb) Fundamento: Es una protena conjugada de color rojo integrantes de los eritrocitos entre un 31-34%. Existen varios mtodos para determinacin como hematina cida, hematina alcalina, oxihemoglobina, carboxihemoglobina y cianometahemoglobina; ste ltimo es el de eleccin por que es estable en soluciones diluidas, porque existen en el mercado estndares de cianometahemoglobina y porque las lecturas se pueden hacer en espectrofotmetro de uso comn y corriente. La sangre se hemoliza por agregado de un agente densoactivo, con el ferrocianuro de potasio se oxidan el tomo de fierro de ferroso a frrico para producir metahemoglobina. El cianuro de potasio estabiliza la metahemoglobina pasando de cianometahemoglobina. La cloracin producida es directamente proporcional a la concentracin de hemoglobina presente. Material:

Tubos de ensayo de 13 x 100 ml Pipetas de 1ml Pipetas de Sal Boquillas Gradillas Gasa Celdas para espectrofotmetro Sangre capilar o venosa con anticoagulante.

Reactivos:

EDTA al 10 % (.07 ml por .5 ml de sangre) Reactivo DE Drabkin:

-ferrocianuro de potasio

-cianuro de potasio -bicarbonato de potasio

Solucin estndar de cianometahemoglobina.

Procedimiento: 1.- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de reactivo de Drabkin 2.- Homogeneizar bien la sangre 3.- Llenar en sangre hasta la marca de la pipeta de Sahli 4.-Mezclar la sangre con el disolvente 5.- Dejar Reposar 10 min. Para la formacin de cianometahemoglobina 6.- leer a 540 nanmetros en el espectrofotmetro contra un blanco de reactivo. 7.- comparar con la curva calibrada de estndares. Valores de referencia: Mujeres: 12 -14 gr/dl Mujeres embarazadas: 11-14 gr/dl Hombres: 13-19gr/dl Recin nacidos: 13.19gr/dl * DETERMINACIN del hematocrito Es sencillo y exacto y es importante para determinar los ndices eritrocitarios Fundamento: El hematocrito mide el porcentaje del volumen de sangre total pero ocupado solamente por los eritrocitos Material (macrohematocrito)

Tubo de Wintrobe que tiene 11.5 cm de largo x 3 mm de luz (hueco). Para el micro se usa el tubo capilar) Pipeta Pasteur larga o pipeta para llenado de hematocrito Centrfuga Sangre capilar (micro) o venosa (macro) con anticoagulante

Reactivos

Procedimiento: 1.- Homogeneizar perfectamente la sangre haciendo girar el tubo 2.- Utilizando la pipeta Pasteur se llena de sangre el tubo de Wintrobe exactamente hasta 10, no deben quedar burbujas de aire en el tubo 3.-Centrfuga a 3600 rev x min. Durante 30 min. 4.- Leer en la lnea de separacin de la columna de glbulos rojos sabiendo que cada raya tiene 1% Valores de referencia: H= 47 +- 2.5 M= 42+- 2.5 *CUENTA ERITROCITARIA Introduccin: Cuando la eritropoysis tiene lugar normalmente, su resultado final es la produccin de una clula-eritrocito perfectamente diferenciada y apta para su funcin principal que es la de transportar oxgeno y CO2 . La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear el oxgeno sin consumir prcticamente nada de el; su forma bicncava es la que mejor se presta para afrontar la hemlisis; su membrana no admite la salida de hemoglobina. Fundamento terico: Consiste en diluir la sangre con el lquido de Hayem en una proporcin exacta y luego examinar al microscopio una pequea cantidad de la muestra colocada en la cmara de Neubauer, contando el nmero de elementos que se encuentran en el retculo de la cmara y mediante una operacin matemtica se obtiene la cifra total. Material:

Tubos de ensayo de 13x100mm pipetas de Thomas para glbulos rojos cmara de Neubauer boquillas microscopio gasa gradilla sangre capilar o venosa con anticoagulante

Cmara de Neubauer

La que ms se utiliza es la de Neubauer que presenta un retculo con una superficie total de 9mm2 dividida en 9 cuadros de 1mm2 los cuatro cuadros grandes de los extremos son los que usualmente se emplean para contar leucocitos. De los 9 cuadros centrales grandes el central es el nico dividido en 25 cuadros. Reactivos:

EDTA (sal di sdica) al 10% Lquido de Hayem:

Cloruro de mercurio 0.5 g Cloruro de sodio 1.0g Sulfato de sodio 5.0g Agua destilada 100ml Procedimiento: Las pipetas estn constituidas por dos porciones capilares y un bulbo central. El tubo capilar inferior est dividido en 10 partes iguales con marcos de0.5 y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plstico (roja), para favorecer la mezcla de la sangre con el lquido y en el capilar superior hay una marca 101. 1.- llenar con sangre bien mezclada la pipeta de Thoma, hasta la marca 0.5. 2.- se limpia cuidadosamente con gasa la parte externa de la pipeta. 3.- completar con lquido de Hayem hasta la marca 101. 4.- agitar durante 3 minutos para mezclar perfectamente. 5.- colocar el cubre hematmetro sobre la cmara. 6.- desechar las primeras 4-5 gotas de la pipeta y llenar la cmara por uno de los bordes del cubre hematmetro. 7.- se deja que el lquidos penetre lentamente entre la cuadrcula y el cubre hematmetro hasta que la plataforma de recuento este completamente cubierto. 8.- dejar reposar de 3.5 minutos sobre la platina del microscopio. 9.- con objetivo de 40x se encuentra los eritrocitos contenidos en 80 cuadros pequeos; uno central y cuatro de los extremos. Clculos: Si se considera que el retculo central tiene 400 cuadritos se realizar el siguiente clculo. N x 200 x 10 x 400 = N x 10,000

80 N= nmero de eritrocitos contados 200= factor de dilucin 10= correccin x altura de la cmara Valores de referencia: Hombres 4.5 x 106 - 5.5 x 106 mm3 Mujeres 4.3 x 106 - 5.0 x 106 mm3

*ndices eritrocitarios Sirven para clasificar a los eritrocitos de acuerdo a su tamao y contenido de hemoglobina Se utiliza el hematocrito y la cuenta de eritrocitos para calcular los ndices: -VCM (Volumen Corpuscular Medio) -CMHC (Concentracin Media de la Hemoglobina Corpuscular) -HCM (Hemoglobina Corpuscular Media) Es posible medir de manera directa los ndices eritrocitarios en contadores celulares automticos. Por ejemplo: el coulter; al pasar los eritrocitos a travs de un orificio en el cual fluye una corriente elctrica. *Cuenta leucocitaria Introduccin: La leucopoysis es un proceso que se lleva a cabo con gran actividad, ya que si el nmero de granulocitos circulantes de ninguna manera es comparable al de los eritrocitos, en cambio se estima que la sobrevida de los neutrfilos no excede de 5 das, de las cuales solo pasan 10 hrs. en la sangre circulante. Fundamento: La sangre se diluye 1:2 con una solucin hipotnica de cido actico que destruye a los eritrocitos.

El azul de metileno permite reconocer fcilmente el lquido y observar mejor los glbulos blancos, a los que tie ligeramente Los normoblastos no se destruyen, por lo que se deben tomar en cuenta para corregir los resultados Material:

Tubos de ensayo de 13 x 100mm Pipeta de Thoma para glbulos blancos Cmara de Neubauer Microscopio Boquillas Gasa Sangre capilar o venosa con anticoagulante

Reactivos:

EDTA (sal disdica) al 10 % Liquido de Turk:

cido actico glacial 3.0 ml Agua destilada c.b.p. 100 ml Adicionar 1 o 2 gotas de azul de metileno Procedimiento 1.- Llenar la pipeta con sangre bien mezclados hasta la marca de .5 2.- Limpiar cuidadosamente la pipeta por fuera 3.- Aforar con solucin de Turk hasta la marca de II 4.- Agitar la pipeta durante 3 min. 5.- Se desechan las primeras 4 o 5 gotas de la pipeta y se carga la cmara de Neubauer 6.-Dejar reposar la cmara durante 3 min. 7.- En el microscopio con el objetivo de 10x, se cuentan los leucocitos presentes en los cuatro cuadros grandes de los extremos 8.- Multiplicar por 50 el promedio de los leucocitos con la siguiente frmula

Clulas contadas x 20 (dilucin) x 10 (correccin de altura) / 4 (nm. De cuadro de 1mm contados) Este factor vara si se cambia la dilucin y o el nmero de cuadros contados *En caso de existir normoblastos (eritrocitos nucleados) deber hacer la cuenta diferencial leucocitaria Valores de referencia: Leucocitos: -Adultos: 5000 - 10 000 / mm3 - Recin nacidos: 10 000 - 25 000 / mm3 -Nios: 8000 - 15 000 *Cuenta diferencial leucocitaria Fundamento: Se realizar este proceso en caso de existir normoblastos (eritrocitos nucleados) en la cuenta leucocitaria Por este proceso se podr decir cuantos normoblastos hay por cada 100 leucocitos. Ejemplo: Si hay 28 normoblastos por cada 100 leucocitos se aplica la siguiente relacin: 128 - 100 12000 -- x x = 9375 leucocitos La cuenta leucocitaria diferencial es el conteo del nmero de los distintos tipos de leucocitos. Identifica a los individuos con una mayor susceptibilidad a la infeccin Tcnica: La cuenta leucocitaria total circulante se divide en 5 tipos de leucocitos: -neutrfilos (en banda y segmentados). Su citoplasma es incoloro y tiene mltiples granos color gris; o puede ser multilobulado, que posee cuatro lbulos nucleares. -eosinfilos: es redondo u ovalado, el ncleo posee no ms de tres lbulos y en el citoplasma se observa no mas de 20 granos color naranja. -basfilos: se caracterizan por sus grandes granulaciones azul oscuro. Estos grnulos son hidrosolubles. -linfocitos: Su citoplasma es azul plido y la cromatina nuclear color prpura azulado oscuro; casi no posee citoplasma. -monocitos: su ncleo suele ser arrionado. Contiene una red de cromatina. El citoplasma se tie de un color azul grisceo y contiene finas granulaciones color rosa.

Valores de referencia: Neutrfilos: -en banda 0-11% -segmentados 25-62% Eosinfilos: 0-2% Basfilos: 0-1% Linfocitos: 25-40% Monocitos: 3-12% *Tincin de Wright Fundamento: La tincin de Wright es una tincin de tipo Romanowsky. Es extremadamente importante en el laboratorio de hematologa este tipo de tincin, ya que puede obtenerse una cantidad abundante de informacin a partir del examen de un frotis de sangre perifrica bien teido Una tincin de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidacin, as como eosina Y o eosina B La accin combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky y da una coloracin prpura a los ncleos de los leucocitos y a los grnulos neutroflicos y de color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y Las propiedades de tincin de Romanowsky dependen del enlace de los colorantes a las estructuras qumicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de cidos nucleicos, las protenas de los ncleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B, colorante bsico La eosina Y, colorante cido, se fija a los agrupamientos bsicos de las molculas de hemoglobina y a las protenas bsicas. Material:

Frotis sanguneo Agua destilada Eosina B Eosina Y Azul de metileno Alcohol metlico

Procedimiento: 1.- Hacer un frotis sanguneo, ni demasiado delgado, ni que llegue al extremo del portaobjetos 2.- Fijar el frotis con alcohol metlico y dejar secar 3.- Sumergir el portaobjetos en el hemoclorante 1, durante 5 o 6 segundos 4.- Lavar con Buffer 7.2 y sacudir para eliminar exceso 5.- Sumergir por 6-8 segundos en el hemoclorante 2 6.- Lavar con buffer 7.2 y dejar secar 7.- Observar al microscopio *Cuenta plaquetaria Fundamento: Las plaquetas son fragmentos de una clula llamada megacariocito, se encuentran unas 250 mil x mm3 , su vida media es de 9.5 das, sus funciones principales son: coagulacin y mantener la integridad de las paredes de los vasos. Miden de 3-4 micras de dimetro, son redondeadas, se pueden observar con una tincin azul de crisil brillante, no tienen ncleo; el nmero de plaquetas es el resultado el equilibrio entre el numero de plaquetas producidas en la mdula sea y las utilizadas, tambin de la prdida o destruccin de la sangre perifrica. Material:

sangre venosa con EDTA al 10% tubo de ensayo de 13 x 100ml pipeta de Thoma para glbulos rojos cmara de Neubauer caja de petri gradilla

Reactivos:

Colorante de azul de cresil brillante EDTA al 10 %

Procedimiento: 1.- Asepsia y obtencin de la muestra Adultos o nios: La sangre se extrae de una vena (puncin venosa), usualmente de la parte interior del codo o del dorso de la mano. El sitio de puncin se limpia con un antisptico y luego se coloca un torniquete.

-Bebs o nios pequeos: En los bebs o nios pequeos, el rea se limpia con un antisptico y se punza con una aguja o lanceta para luego recoger la sangre en una pipeta. 2.-Descargar la pipeta en el lquido diluyente 3.-Enjuagar y llenar hasta la marca 1 y con la , muestra de sangre hasta 1.1 4.-Mezclar de 3-5 minutos 5.-Tirar las primeras 3-5 gotas 6.-cargar la cmara cuenta glbulos 7.- dejar reposar 5 minutos, en una caja petri con un papel filtro hmedo 8.- Dejar reposar la cmara 9.- observar por le objetivo 10x 10.- las plaquetas aparecen como cuerpos coloreados en todo el cuadro central. Clculo: Numero de plaquetas contadas x 1000 Valores de referencia: 150 mil- 450 mil /mm3 Cuidados durante el examen: Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Despus, puede haber una sensacin pulstil. El conteo plaquetario se puede ver afectado por muchos estados patolgicos. Igualmente, se puede medir para evaluar la causa de un sangrado excesivo. Entre los medicamentos que pueden disminuir el conteo de plaquetas estn: agentes quimioteraputicos, cloranfenicol, colchicina, agentes bloqueadores H2, heparina, hidralacina, indometacina, isoniacida, quinidina, estreptomicina, sulfonamida, diurticos tiazdicos y tolbutamina. *CONCLUSIONES: Pudimos repasar y conocer mejor estas tcnicas y sobre todo la importancia de conocer bien los procedimientos y de estudiarlos y comprenderlos correctamente, no solo a la hora de calificar la materia, sino para poder ponerlos en prctica y tener un conocimiento general acerca de la sangre, lo cual es la finalidad de la capacitacin de laboratorista clnico-hematologa, formar ntegramente alumnos capaces de realizar este tipo de anlisis.