Estudio hinmunohistoquimico de la matriz extracelular

ESTUDIO INMUNOHISTOQUIMICO DE LA MATRIZ EXTRACELULAR ENDOMETRIAL HUMANO DURANTE EL CICLO MENSTRUAL Y EL EMBARAZO
1. ESTUDIO INMUNOHISTOQUMICO
Es un mtodo extraordinariamente til, ya que establece la naturaleza del proceso patolgico identificando el tipo de clula que causa la determinada infeccin Se realiza mediante un complejo aparato llamado inmunoteidor. Usamos anticuerpos contra diversos complejos protenicos intracelulares o de la membrana citoplsmica (llamados marcadores) y dependiendo de la reaccin resultante, estamos ante una determinada clula o germen patgeno. Su fiabilidad es grande, porque es una reaccin inmunolgica.

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2. QUE ES HISTOQUIMICA?
Conjunto de tcnicas que permiten la identificacin, localizacin y cuantificacin de una sustancia en un tejido o en una clula La histoqumica realmente es una ciencia intermedia entre la histologa, la qumica analtica, la bioqumica y la biofsica.

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CONDICIONES PROPIAS QUE LA LIMITAN

1. Deben de preservarse las estructuras ,limitando el empleo de subsustancias capaces de destruir el tejido 2. El compuesto final que se absorbe despus de una reaccin histoqumica debe ser estable coloreado e insoluble 3. La reaccin histoqumica debe ser lo suficientemente especfica y sensible para demostrar un solo compuesto qumico ,en cantidades tan pequeas ,que se encuentran dentro de la clula

MTODOS FSICOS
I. Fijacin por congelacin y desecacin: consiste en congelar el tejido lo ms rpidamente posible Fijacin por congelacin y Substitucion :congelar el tejido y luego deshidratarlo a baja temperatura Fijacin por congelacin y criostato: congelar el tejido, generalmente con nieve carbnica y mantener durante el proceso del corte, el ambiente, el micrtomo, la cuchilla y el tejido a una misma baja temperatura.

II.
III.

IMPORTANCIA DE LA HISTOQUIMICA EN LA MEDICINA Proporciona informaciones valiosas para la patologa, diagnostico, evolucin y tratamiento de las diferentes enfermedades Este mtodo ha sido ampliamente utilizado para la localizacin de virus y antgenos bacterianos de anticuerpos en el sitio de su formacin dentro de las clulas plasmticas IMPORTANCIA DE LA HISTOQUIMICA EN BIOLOGIA Ha explicado algunos fenmenos de respiracin celular, ha dilucidado la composicin qumica de las diversas estructuras celulares Es importante para la fisiologa porque el conocimiento de la estructura qumica celular y tisular, es fundamental para poder describir los mecanismos en que se basan las funciones de las clulas y tejidos

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3.MATRIZ EXTRACELULAR
Es el conjunto de materiales extracelulares que forman parte de un tejido Es un invento de los organismos pluricelulares, es esencial para mantener a las clulas unidas, pero con el tiempo ha adquirido muchas ms funciones La cantidad, la composicin y la disposicin de la matriz extracelular dependen del tipo de tejido considerado. Hay algunos como el epitelial y el nervioso que carecen o tienen muy poca matriz extracelular, mientras que en otros como el tejido conectivo es el elemento ms importante en volumen En los tejidos vegetales la pared celular se puede considerar, aunque no siempre hay acuerdo, como una matriz extracelular especializada con unas caractersticas muy diferentes a la de los tejidos animales

En esta imagen se presentan ejemplos de distintos tipos de matrices extracelulares teidas con diferentes colorantes. Los asteriscos sealan la matriz extracelular: A) Cartlago hialino B) Matriz sea compacta

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C) Conectivo denso regular (tendn) D) Conectivo gelatinoso del cordn umbilical E) Paredes celulares del sistema vascular de un tallo de una planta F) Clulas epiteliales. Obsrvese que prcticamente no hay sustancia intercelular G) Imagen de microscopa electrnica del tejido nervioso donde prcticamente no existe matriz extracelular

Esquema de las principales molculas que aparecen en la matriz extracelular de un tejido conectivo

Las principales macromolculas que componen la matriz extracelular son: colgeno, elastina, glucosaminoglucanos, proteoglucanos y glucoprotenas. Todas ellas se encuentran en un medio acuoso junto con otras molculas de menor tamao, adems de los iones.

El anlisis microscpico de la estructura del material intercelular muestra Elementos fibrilares bien estructurados llamados fibras conjuntivas, que pueden ser colgenas, reticulares o elsticas Un material poco estructurado al que se denomina sustancia fundamental amorfa

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En los sitios en que la matriz extracelular conjuntiva se asocia a clulas de otros tejidos se observan las lminas basales

a). Funciones

Aporta propiedades mecnicas a los tejidos (tanto en animales como en vegetales). Mantiene la forma celular. Permite la adhesin de las clulas para formar tejidos. Sirve para la comunicacin intercelular. Forma sendas por las que se mueven las clulas.. Secuestra factores de crecimiento.
Cohesin y resistencia de los tejidos.

Modulan la fisiologa y diferenciacin celular Rellenar los espacios entre las clulas Permitir la compresin y estiramiento de las clulas. Degradar los desechos txicos que no necesita nuestro cuerpo para as purificarnos.

b). Generalidades La cantidad, la composicin y la disposicin de la matriz extracelular dependen del tipo de tejido considerado. Hay algunos como el epitelial y el nervioso que carecen o tienen muy poca matriz extracelular, mientras que en otros como el tejido conectivo es el elemento ms importante en volumen. C). Principales macromolculas que componen la matriz extracelular 1. COLGENO: familia de protenas muy abundante en el organismo de los animales Su principal misin en los tejidos es formar un armazn que hace de sostn a los tejidos y que resiste las fuerzas de tensin mecnica 2. ELASTINA: Las molculas de elastina estn unidas entre s mediante enlaces entre las regiones ricas en el aminocido lisina La elasticidad de los tejidos depende de las fibras elsticas. Se encuentran sobre todo en la dermis, en las paredes de las arterias, en el cartlago elstico y en el tejido conectivo de los pulmones 3. GLUCOSAMINOGLUCANOS: Son polmeros no ramificados de azcares que pueden formar cadenas muy largas Estn formados por repeticiones de parejas de monosacridos donde uno de los azcares tiene un grupo amino (N-acetilgalactosamina o N-acetilglucosamina) y el otro es normalmente la galactosa o el cido glucurnico
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4. PROTEOGLUCANOS: es una molcula compuesta por la unin covalente entre una cadena de aminocidos y uno o varios glucosaminoglucanos sulfatados. La funcin de los proteoglucanos depende de sus molculas de glucosaminoglucanos: hidratacin, resistencia a presiones mecnicas, lubricantes, afectan a la diferenciacin, la movilidad y la fisiologa celular, etctera. Su accin mecnica es esencial en los cartlagos y en las articulaciones 5. GLUCOPROTEINAS: Las distintas molculas que forman la matriz extracelular estn unidas entre s para formar un entramado cohesionado Hay tres tipos de uniones que dan cohesin a los tejidos: entre molculas de la matriz extracelular, entre las clulas y la matriz extracelular y entre clulas contiguas. d). Complejo de unin Los complejos de unin se clasifican segn su forma, las molculas de adhesin que los componen, los elementos a los que se unen y sus interacciones con el citoesqueleto.

Las uniones estrechas :se encuentran en las partes apicales de los epitelios y en el tejido muscular cardiaco Las uniones adherentes :son complejos de unin que se forman en las clulas epiteliales y que se sitan prximas y basales a las uniones estrechas Los desmosomas .al contrario que los dos complejos de unin anteriores, establecen conexiones puntuales en forma de disco entre clulas vecinas, como si fuesen remaches. Son muy abundantes entre las clulas epiteliales y entre las musculares, pero tambin en otros tejidos como el nervioso Los hemidesmosomas y las uniones focales: establecen uniones fuertes entre las clulas y la matriz extracelular. Los hemidesmosomas unen las clulas epiteliales a la lmina basal gracias al dominio extracelular de la integrina, mientras que el dominio intracelular contacta con los filamentos intermedios citoslicos

e). TIPOS

La pared celular: contiene muchos azcares, sobre todo glucosa formando celulosa. La lmina basal: contiene colgeno y laminina formando una malla. El cartlago: contiene una gran cantidad de glucosaminoglucanos para resistir presiones y fuerzas mecnicas. El hueso: posee colgeno tipo I que aporta elasticidad y precipitados de calcio que aporta dureza
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4. ENDOMETRIO
Es la mucosa que recubre el interior del tero y consiste en un epitelio simple prismtico con o sin cilios, glndulas y un estroma Es la cuna que el tero prepara cada mes para la llegada de un posible embrin.

a). FUNCIN Es la de alojar al cigoto o blastocito despus de la fecundacin, permitiendo su implantacin. Es el lugar donde se desarrolla la placenta y presenta alteraciones cclicas en sus glndulas y vasos sanguneos durante el ciclo menstrual en preparacin para la implantacin del embrin humano. El endometrio es la capa ms interna glandular y funciona como un forro para el tero, la prevencin de adherencias entre las paredes opuestas del miometrio, manteniendo de este modo la permeabilidad de la cavidad uterina Durante el ciclo menstrual o ciclo estral, el endometrio crece a una, capa de tejido grueso de los vasos sanguneos-rico, glandular b).EL CICLO MENSTRUAL Perodo o regla es el desprendimiento del endometrio y sangre por la vagina desde el tero, y representa el inicio del ciclo sexual femenino o ciclo menstrual, que es un ritmo de aproximadamente 28 das de duracin y suele aparecer a partir de los 10 15 aos de edad y dura hasta la menopausia.

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El endometrio presenta una serie de cambios que podemos agrupar en 3 fases: la fase menstrual, cuando se desprende para ser sustituido por uno nuevo, la fase folicular o preovulatoria en la cual prolifera y la fase ltea o postovulatoria en la que alcanza el estado adecuado para permitir y acoger la anidacin. Estas fases del ciclo menstrual son fcilmente distinguibles por ecografa. Durante la fase menstrual observamos el endometrio como una fina lnea blanca (hiperecognica), en el que, en algunas ocasiones podemos ver entremezclada con la sangre de la menstruacin (reas hipoecicas) junto con contracciones uterinas que le dan el movimiento de salida a la menstruacin. Durante esta fase el endometrio mide entre 13 mm. Cuando avanzamos por el ciclo menstrual, entramos en la fase folicular y como respuesta al estmulo producido en el ovario, presenta un patrn trilaminar, es decir, la aparicin de tres lneas paralelas entre s, que va aumentando de tamao a razn de 0,5 mm por da alcanzando en fase periovulatoria un tamao entre 9 a 14 mm, normalmente. En fase periovulatoria, se han diferenciado tres patrones ecogrficos: o Tipo A. No se observa la triple lnea o Tipo B. Se observa la triple lnea pero sin una mayor ecogenicidad en la lnea interior, por lo que, es difcilmente distinguible. o Tipo C. Triple lnea. Durante la fase ltea, tras la ovulacin, la progesterona producida en esta fase induce que las lneas exteriores de la triple lnea se engruesen hasta que, finalmente se unan con la lnea interior, transformndose en una nica lnea homognea al inicio de la menstruacin.

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ANEXOS
INMUNOHISTOQUIMICO

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MATRIS EXTRACELULAR

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ENDOMETRIO

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BIBLIOGRAFIA
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